Fas/FasL与肿瘤关系研究的进展

Fas抗原(APO-1／CD95)与Fas配体(FasL)组成的Fas系统，在将凋亡信号转导入细胞内发挥重要作用。效应细胞FasL结合靶细胞Fas抗原后，在数小时内通过细胞凋亡途径使靶细胞死亡。近年来很多研究发现Fas在多种细胞表面均有表达，而FasL表达只限于少量细胞类型，诸如淋巴细胞、免     

颗粒外排与Fas/Fas配体途径在人yδT细胞的肿瘤细胞毒活性中的作用

目的探讨结核杆菌抗原(Mtb-Ag)特异性活化的γδT细胞杀伤肿瘤细胞的细胞毒活性机制.方法用Mtb-Ag刺激正常人PBMC以诱导γδT细胞扩增并用磁珠阳性分选法获得高纯度γδT细胞;用RT-PCR法检测γδT细胞穿孔素、颗粒酶B和FasL mRNA的表达;用流式细胞仪检测γδT细胞表面Fas配体(FasL)分子以及几种肿瘤细胞表面Fas分子的表达;用MTT法测定γδT细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性,观察穿孔素/颗粒酶途径的阻断剂concanamycin A(CMA)和Fas/FasL途径的抑制剂brefeldin A(BFA)对γδT细胞细胞毒活性的影响.结果经Mtb-Ag激活和扩增的γδT细胞高表达穿孔素、颗粒酶B和FasL mRNA;Mtb-Ag活化的γδT细胞中22.4%表达FasL分子;CMA能明显抑制YδT细胞对肿瘤细胞(尤其对Fas低表达的K562和PG)的杀伤,BFA能强烈抑制γδT细胞杀伤Fas高表达的Raji和A375.结论Mtb-Ag活化的γδT细胞杀伤Fas低表达的靶细胞时主要通过颗粒外排途径,杀伤Fas高表达的靶细胞时,颗粒外排和FasL均起作用.     

放射治疗对可溶性Fas配体在肺癌和食管癌中表达影响的初步分析

肿瘤的发生、发展及转归过程中机体的免疫防御起着至关重要的作用.Fas/Apol-1,又名CD95分子,是属于肿瘤坏死因子受体(TNFR)及神经生长因子(NGFR)家族成员,是一种I型细胞膜蛋白.Fas配体(FasL)是TNF相关的Ⅱ型跨膜蛋白,主要表达于活性T淋巴细胞.Fas是细胞表面的一种凋亡信号受体,具有诱导凋亡的能力.分别表达Fas和FasL的细胞相结合时,可导致表达Fas的细胞凋亡.T淋巴细胞表达的FasL可使表达Fas的肿瘤细胞凋亡.而Fas和FasL均可以产生可溶性分子,即可溶性Fas和FasL(sFas,sFasL).它们在细胞凋亡中发挥调节作用.本文通过肺癌和食管癌患者进行放射治疗前后的sFasL的变化,观察放射治疗导致细胞凋亡的现象,探讨放射治疗的作用和机制.     

微酸法提取肿瘤抗原肽体外冲击树突状细胞后回输体内的抗肿瘤效应

肿瘤抗原可以由肿瘤细胞的MHCⅠ类分子提呈于细胞表面,经微酸法可以从肿瘤细胞表面洗脱下被MHCⅠ类分子所提呈的抗原多肽,进一步纯化富集后可获得高纯度的肿瘤抗原多既.从癌性腹水分离FBL3白血病细胞,以微酸提取液洗脱瘤细胞表面1类肽,洗脱液经Separk C18柱吸附,乙酸洗脱后,可获得分子量小于5,000D的多肽分子,冻干后即可用作肿瘤抗原多肽富集产物.骨髓诱生的树突状细胞,加人FBL3酸提抗原可有效激发FBL3特异性T细胞株的增殖,表明可以被酸提抗原多肽树突状细胞提呈给T细胞.将酸提抗原冲击后的树突状细胞回输小鼠体内,2天后,皮下接种FBL3细胞(3×10~6),而另设FBL3冻融抗原冲击DC治疗组及未处理组.酸提抗原致敏DC治疗组小鼠可诱导较     

颗粒外排与Fas/Fas配体途径在人γδT细胞的肿瘤细胞毒活性中的作用

目的：探讨结核杆菌抗原（Mtb-Ag)特异性活化的γδT细胞杀伤肿瘤细胞的细胞毒活性机制。方法：用Mtb-Ag刺激正常人PBMC以诱导γδT细胞扩增并用磁珠阳性分选法获得高纯度γδT细胞;用RT－PCR法检测γδT细胞穿孔素,颗粒酶B和FasL mRNA的表达;用流式细胞仪检测γδT细胞表面Fas配体（FasL）分子以及几种肿瘤细胞表面Fas分子的表达;用MTT法测定γδT细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性,观察穿孔素／颗粒酶途径的阻断剂concanamycin A(CMA)和Fas/FasL途径的抑制剂berfeldinA(BFA)对γδT细胞细胞毒活性的影响,结果：经Mtb-Ag激活和扩增的γδT细胞高表达穿孔素,颗粒酶B和K562和PG）的杀伤,BFA能强烈抑制γδT细胞杀伤Fas高表面的Raji和A375,结论：Mtb-Ag活化的γδT细胞杀伤Fas低表达的靶细胞时主要通过颗粒外排途径,杀伤Fas高表达的靶细胞时,颗粒外排和FasL均起作用。     

Fas,FasL在表皮肿瘤中的表达及其意义

目的：探讨由Fas,FasL介导的免疫调节作用与某些表皮肿瘤良、恶性分级间的关系。方法：应用免疫组化技术对Bowen氏病，鳞状细胞癌（SCC），基底细胞癌（BCC）皮损组织中Fas,FasL的表达情况进行检测。结果：Fas,FasL在Bowen氏病SCC上均有表达，且随着肿瘤恶性程度的升高，Fas表达逐渐减弱而FasL表达逐渐增强；同Bowen氏病和SCC相比，BCC表达Fas,FasL较弱。结论：Fas,FasL介导的免疫调节作用能参于某些表皮肿瘤的免疫逃避机制，并与肿瘤的良，恶性分级及预后有关。     

72例膀胱移行细胞癌中Fas和FasL的表达

目的:探讨细胞凋亡基因Fas和FasL在膀胱癌发病中作用及与肿瘤生物学行为和预后之间关系.方法:应用免疫组化方法检测16例正常膀胱粘膜和72例膀胱移行细胞癌标本中Fas和FasL表达.结果:膀胱癌中Fas和FasL表达均显著低于正常膀胱粘膜中表达;Fas表达与肿瘤分级、分期和复发之间均密切相关,但FasL表达与三者之间均无相关性.结论:Fas和FasL系统异常可能是膀胱癌发生发展过程中免疫逃避的重要因素;Fas可作为膀胱癌生物学行为和预后的标记物.     

Fas、FasL和Caspase-3在肺癌中的表达及其临床意义

目的: 研究Fas、FasL和Caspase-3在肺癌组织中的表达及其临床意义,并探讨其在肺癌细胞免疫逃逸中的作用.方法: 采用免疫组化法检测52例肺癌组织,18例正常支气管黏膜上皮组织Fas、FasL和Caspase-3蛋白表达情况.结果: Fas、FasL与Caspase-3在肺癌组织中的表达率显著低于正常支气管黏膜上皮(JP<0.01),在肺鳞癌与肺腺癌中无显著性差异(P>0.05),非小细胞肺癌Fas与Caspase-3的阳性表达率高于小细胞肺癌,差异有显著性(P<0.05),但FasL在非小细胞肺癌与小细胞肺癌中的阳性表达率无显著差异(P>0.05);随肿瘤病理分级增高,Fas、FasL和Caspase-3阳性表达率均逐渐减低(P<0.05),但Fas、FasL和Caspase-3的表达与淋巴结转移、TNM分期无关(P>0.05).肺癌组织中Fas、FasL与Caspase-3的表达相互间并无关联性.结论: 肺癌能通过Fas、FasL与Caspase-3的表达下调,逃避机体免疫监视以促使肿瘤发生发展.     

Fas／FasL在肝癌中的表达及意义

目的 探讨Fas、FasL在肝癌中的表达及意义。方法 应用免疫组织化学法,对41例肝癌组织中Fas及其配体FasL表达进行观察和比较。结果 肝癌中Fas阳性率为31.7％,癌旁肝硬化Fas阳性率80.0％,癌细胞Fas表达较癌旁显著减少,肝癌及癌旁肝硬化,FasL阳性率分别为41.5％和65.0％;FasL表达在二者间差异无显著性。肝癌组织Fas、FasL表达与性别、肿瘤大小、组织分级无关。Fas表达与门静脉癌栓发生率呈负相关,FasL表达则与其无关。结论 Fas/FasL系统在原发性肝癌肿瘤免疫逃避中起重要作用,Fas抗原表达在原发性肝癌门静脉癌栓形成中的作用值得进一步研究。     

鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系

目的：探讨鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系。方法： 用免疫组化及TUNEL方法检测45例鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系。结果： 鳞癌Fas/FasL表达高于基底细胞癌;Fas/FasL阳性细胞凋亡率高于阴性细胞。　结论： Fas/FasL系统与细胞凋亡密切相关,并在肿瘤侵袭中可能起重要作用。     

DFMO通过Fas/FasL通路诱导人肺癌细胞凋亡的研究

背景与目的:Fas/FasL系统是细胞凋亡的重要通路。为了解Fas/FasL系统在肿瘤多胺生物合成抑制导致恶性表型逆转中的作用,本研究拟探讨多胺生物合成抑制剂α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)对人肺癌A549细胞生长、凋亡的影响及其与人肺癌相关抗原、rasP21蛋白及Fas/FasL表达的相关性。方法:用MTT法观察细胞生长,流式细胞仪分析细胞周期,DNAladder电泳法观察细胞凋亡,SP免疫组化法及RT-PCR法检测细胞蛋白及基因表达。结果:DFMO可抑制A549细胞生长并诱导凋亡,使G1期细胞增多(61.0±2.08)%,S期细胞减少(21.2±0.88)%,出现DNAladder;同时下调A549细胞人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达,上调Fas基因mRNA及蛋白表达。结论:DFMO通过Fas/FasL通路诱导肺癌A549细胞的凋亡,并可能与人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达调控有关。     

Fas/FasL在肺癌中的表达及意义

目的探讨Fas/FasL在肺癌中的表达及意义.方法采用免疫组化方法检测42例非小细胞肺癌组织的Fas/FasL表达.结果22例Fas表达阳性,表达率52.3%(22/42),24例FasL表达阳性,表达率57.1%(24/42),二者表达无相关性;鳞癌和腺癌的Fas/FasL表达无差异;TNM分期与FasL表达显著正相关(P<0.05),而与Fas表达无显著性相关(P>0.05).结论Fas/FasL在肺癌细胞逃避机体免疫方面起重要作用,FasL在肺癌转移机制中的作用值得进一步研究.     

人淋巴瘤细胞Jurkat通过Fas/FasL途径抑制人肺癌细胞A549的免疫逃逸

背景与目的 当机体发生肿瘤时,肿瘤细胞可以多种方式逃避免疫系统的监控而分裂生长,这就是肿瘤的免疫逃逸.研究表明,肿瘤细胞自身凋亡减少以及机体免疫细胞凋亡增加是肿瘤免疫逃逸的重要机制.Fas/FasL系统是介导凋亡的重要分子体系,本研究旨在通过观察人淋巴瘤细胞株Jurkat诱导人肺癌细胞株A549凋亡过程中凋亡信号分子Fas、FasL及casPase-8表达的改变,从而探讨Fas/FasL途径在肺癌细胞免疫逃逸中的作用.方法 人肺癌细胞株A549与人淋巴瘤细胞株Jurkat以不同比例分别进行共同培养,采用台盼蓝拒染法检测两种细胞存活率;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测两种细胞的凋亡率;Western blot技术检测A549细胞中Fas、FasL及caspase-8蛋白表达水平.结果 随着Jurkat/A549细胞比例逐渐增大,A549细胞的凋亡率明显增加,Jurkat细胞凋亡率显著减少;同时A549细胞中Fas及casPase-8蛋白的表达水平明显上调,而对FasL蛋白的表达水平无明显影响.结论 Jurkat细胞可能通过Fas/FasL途径介导了人肺癌细胞株A549的凋亡,从而抑制了A549细胞的免疫逃逸.     

大肠癌中Fas、FasL、FAP-1的表达及意义

目的:研究大肠癌组织中Fas、FasL及FAP-1的表达状况及临床意义。方法:用Fas、FasL多克隆抗体及FAP-1单克隆抗体对42例大肠癌组织标本进行免疫组化染色,检测其Fas、FasL及FAP-1的蛋白表达,并以相应的切缘正常大肠组织作对照。结果:大肠癌组织中Fas表达(36％)显著低于正常大肠黏膜上皮(60％)(P<0.05),且粘液腺癌及印戒细胞癌Fas表达率显著低于管状、乳头状腺癌(P<0.05),另外,正常大肠粘膜固有层的淋巴细胞及浸润肿瘤的淋巴细胞可见Fas表达;正常的大肠粘膜上皮表达FasL(40％),恶变后的大肠粘膜FasL表达上调(71％),两者表达率有显著性差异(P<0.05),且溃疡型及浸润型大肠癌较隆起型表达率高(P<0.05),浸润至正常大肠粘膜及肿瘤的淋巴细胞未见或偶见FasL表达;大肠癌细胞无论其Fas表达高低都未见FAP-1表达。结论:大肠癌细胞通过Fas表达下调和(或)FasL表达上调以实现其免疫逃避,Fas、FasL的表达状况与肿瘤病理类型有关,粘液腺癌及印戒细胞癌、溃疡型及浸润型大肠癌的恶性程度高、预后差可能与其Fas、FasL的表达异常有关;FAP-1在大肠癌免疫逃避中可能不起重要作用。     

Fas及Fas配体与恶性淋巴瘤

Fas与FasL结合后可启动细胞凋亡,近年来研究发现其与许多恶性肿瘤的发生、发展有关.现就Fas和FasL的分子特征、表达、诱导细胞凋亡的分子机制及其与恶性淋巴瘤的关系作一综述.     

作为免疫相关性疾病靶点的DcR3的研究进展

诱骗受体3（decoy receptor3，DcR3）是肿瘤坏死因子受体超家族的新成员。它通过拮抗Fas／FasL系统及LIGHT／LTβR、LIGHT／HVEM／TR2系统的作用，在肿瘤及免疫性疾病中发挥重要作用。DcR3的基因位于20q13．3，在人肿瘤细胞中会发生基因扩增和重排；在多种肿瘤、自身免疫疾病中高表达；作用机制有LIGHT和配体FasL途径等；促肿瘤发生；可下凋宿主免疫功能，能降低T细胞对同种抗原应答，有重大开发潜能。     

3种化疗药物诱导HL-60细胞凋亡及Fas FasL的表达

目的:观察阿糖胞苷(Ara-c)、柔红霉素(DNR)及长春新碱(VCR)诱导HL-60细胞株凋亡的规律及细胞凋亡中Fas、FasL抗原的变化,探讨凋亡基因在细胞凋亡中的作用。方法:应用流式细胞仪及吖啶橙染色荧光显微镜观察3种化疗药物对HL-60细胞凋亡的影响,及细胞Fas、FasL的表达情况。结果:DNR和Ara-C能诱导HL-60细胞发生凋亡,荧光显微镜观察HL-60细胞可见凋亡小体、核染色质聚集、胞体出芽改变。流式细胞仪检测在G1期前出现sub-G1峰,随着化疗药物浓度的增加及共培养作用时间的延长,HL-60细胞凋亡率逐渐增加。每个实验组细胞凋亡率与对照组相比差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。VCR每个实验组细胞凋亡率与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。DNR作用HL-60细胞可使Fas、FasL表达增加;Ara-C可使FasL表达增加,而Fas表达无变化;VCR作用后Fas表达增加,而对FasL表达无影响。结论:DNR和Ara-C可诱导HL-60细胞凋亡,VCR诱导调亡作用不明显。DNR可上调HL-60细胞Fas/FasL表达,Fas/FasL系统参与DNR诱导的细胞凋亡过程。     

肿瘤免疫逃逸机制的研究进展

从肿瘤产生的免疫抑制性细胞因子、肿瘤细胞表面MHC抗原表达缺陷及肿瘤Fas/FasL表达等方面讨论肿瘤发生免疫逃逸的机制 ,对探讨肿瘤发生发展机制并针对性地提出肿瘤治疗方案具有重要意义。     

不同部位胃组织Fas／FasL表达的研究

目的：研究Fas／FasL在同一胃癌患者不同部位胃组织中的表达，并探讨其与临床病理学特征的关系。方法：利用免疫组化法对50例同一患者胃癌组织、癌旁交界组织、距肿瘤边缘5cm处、正常组织的Fas／FasL表达进行检测，检验上述组织中Fas／FasL表达的差异。结果：比较肿瘤组织、癌旁交界组织与正常组织Fas的阳性表达率(100％)和FasL的阳性表达率(0)差异均有统计学意义，P＜0．05。距肿瘤边缘5cm处(96％)与正常组织(100％)的Fas阳性表达率和FasL的阳性表达率差异无统计学意义，P＞0．05。而不同分化的肿瘤组织中Fas／FasL表达差异无统计学意义，P＞0．05。结论：胃癌中存在Fas表达的下调和FasL表达的上调，Fas／FasL系统可能泰与了胃癌细胞的免疫逃避机制.     

肺癌组织中Fas、FasL表达与凋亡的关系及其意义

研究表明,肿瘤的发生及发展不但与细胞增殖过度有关,而且与凋亡异常有关 [1]. Fas为细胞膜上的受体,当与其配体 FasL结合时可引导该细胞凋亡 [2]. 文献报道 [3],肿瘤细胞存在 Fas及 FasL的表达异常,但肺癌中 Fas及 FasL的表达异常及其与肺癌细胞凋亡的关系和意义尚不明确.本文检测了 96例手术切除肺癌标本中 Fas、 FasL的表达及细胞凋亡水平,并探讨其与肺癌发生发展之间的关系. 1 材料与方法