缺氧及外源一氧化氮对肺动脉内皮细胞 PDGF-A 链和-B 链基因表达的影响

目的观察肺动脉内皮细胞血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）旁分泌及其调节在缺氧性肺动脉高压中所起的作用。方法采用核酸分子杂交技术，分析缺氧时小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）表达ＰＤＧＦ－Ａ链、－Ｂ链ｍＲＮＡ的变化及外源一氧化氮（ＮＯ）对其表达的调节作用。结果缺氧（２．５％Ｏ２和０％Ｏ２）早期（１．５，３ｈ）能非常显著地增加肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ－Ａ，ＰＤＧＦ－Ｂ链ｍＲＮＡ的表达（Ｐ＜０．００１，ｖｓ常氧组）；缺氧６～４８ｈ与常氧组相比ＰＤＧＦ－Ａ链无明显差别，ＰＤＧＦ－Ｂ链ｍＲＮＡ表达增加（Ｐ＜０．０５）。外源ＮＯ能非常显著地降低常氧肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ－Ａ链（Ｐ＜０．０１）和常氧ＰＤＧＦ－Ｂ链（Ｐ＜０．００１）ｍＲＮＡ的表达水平，而不能明显地抑制缺氧ＰＤＧＦ－Ａ，－Ｂ链的表达。结论缺氧可能一方面通过刺激肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ基因表达加强，一方面减弱ＮＯ对ＰＤＧＦ基因表达的抑制作用，从而参与缺氧性肺动脉高压的肺血管收缩反应加强和肺血管结构改建的发生过程。     

缺氧及外源一氧化碳对肺动脉内皮细胞PDGF—A链和—B链基因表达…

目的 观察肺动脉内皮细胞血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）旁分泌及其调节在缺氧性肺动脉高压中所起的作用。方法 采用核酸分子杂交技术，分析缺氧时小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）表达ＰＤＧＦ－Ａ链、－Ｂ链ｍＲＮ的变化及外源一氧化氮（ＮＯ）对其表达的调节作用。结果缺氧（２．５％Ｏ２和０％Ｏ２）早期（１．５，３ｈ）能寺增加肺动脉 细胞ＰＤＧＦ－Ａ，ＰＤＧＦ－Ｂ锭ｍＲＮＡ的表达的，缺氧６－４８ｈ与常氧级相比ＰＤＧ     

低氧大鼠肺组织中血小板源生长因子A、B链基因表达的变化(摘要)

低氧大鼠肺组织中血小板源生长因子Ａ、Ｂ链基因表达的变化（摘要）黄群华孙仁宇本研究旨在探讨大鼠低氧性肺动脉高压形成过程中，肺组织血小板源生长因子Ａ、Ｂ链（ＰＤＧＦ－Ａ、Ｂ）基因表达的分布及量的变化，阐明调控间质细胞增殖的ＰＤＧＦ在肺血管壁构型重建中的...     

血小板源生长因子诱导血管平滑肌细胞迁移及机构

为探讨血小板源生长因子诱导血管平滑肌细胞迁移和细胞内信号传递机制。以体外培养的平滑肌细胞为对象，用血小板源生长因子ＢＢ二聚体作诱导刺激物，采用改良的Ｂｏｙｄｅｎ微孔膜双槽法进行细胞迁移实验，荧光染料Ｆｕｒａ－２法测定细胞内游离钙离子浓度。结果发现，血小板源生长因子ＢＢ二聚体能明显诱导体外培养的平滑肌细胞迁移，使细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）明显升高（Ｐ＜０．０１），峰值浓度位于５ｇ／Ｌ。１００ｍｏｌ／Ｌ钙离子螯合剂ＢＡＰＴＡ和酪氨酸激酶抑制剂５０ｍｏｌ／Ｌ　Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ既能抑制血小板源生长因子－ＢＢ诱发的升高，也能抑制血小板源生长因子对平滑肌细胞的诱导趋化迁移作用。实验结果提示，血小板源生长因子是诱导平滑肌细胞迁移的趋化物；升高是平滑肌细胞对血小板源生长因子反应的早期细胞内信号传递通路之一；血小板源生长因子诱发的平滑肌细胞迁移既依赖于升高，又依赖于酪氨酸蛋白激酶活性。     

槲皮素对肺动脉平滑肌细胞酪氨酸磷酸化蛋白表达及大鼠低氧性肺动脉高压的影响

肺血管构型重建是慢性缺氧性肺动脉高压的病理学基础,主要表现为中膜平滑肌细胞增殖及迁移,而平滑肌细胞的增殖依赖于多种生长因子的作用,尤其是血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）。我们通过酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）抑制剂槲皮素（Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）来观察ＰＤＧＦ诱导的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）酪氨酸磷酸化蛋白的表达及其对大鼠低氧性肺动脉高压的影响。材料与方法　（１）材料：ＰＤＧＦＢＢ,Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ,抗磷酸化酪氨酸（均购自美国Ｓｉｇｍａ公司）,ＡＳＭ６８Ｋ图象分析仪（德国Ｌｅｉｔｅ公司）;流式细胞仪…     

川崎病血清对血管内皮细胞表达血小板源生长因子及对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察川崎病血清对血管内皮细胞表达血小板源生长因子Ｂ链蛋白（ＰＤＧＦ－Ｂ）的影响，以及川崎病血清作用后的内皮细胞条件培养基对血管平滑肌细胞表达ＰＤＧＦ受体信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）和对细胞周期的影响。方法：采用免疫细胞化学、核酸杂交和流式细胞分析方法。结果：川崎病血清能够强烈诱导内皮细胞表达ＰＤＧＦ－Ｂ；川崎病血清作用后的内皮细胞条件培养基能够显著促进平滑肌细胞表达ＰＤＧＦ受体ｍＲＮＡ，并强烈诱导平滑肌细胞增殖。结论：ＰＤＧＦ—ＰＤＧＦ受体途径的激活可能参与了川崎病冠状动脉并发症的形成。     

内源性一氧化碳对缺氧大鼠肺组织血小板源性生长因子-B基因表达的影响

血小板源性生长因子 (ＰＤＧＦ)能促进肺动脉平滑肌细胞增殖 ,肺动脉平滑肌细胞的过度增殖是造成慢性阻塞性肺疾病缺氧性肺动脉高压肺血管重构的主要原因。我们以往的实验发现 ,氯血红素可以促进内源性ＣＯ的产生 ,抑制大鼠缺氧性肺动脉高压的形成。本研究观察了氯血红素对缺氧大鼠肺组织ＰＤＧＦ Ｂ基因表达的影响。一、材料和方法1 模型复制与分组 :常压缺氧 15ｄ复制缺氧性肺动脉高压动物模型。雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 2 4只 ,体重 2 0 0～ 30 0ｇ ,随机分为 3组 ,每组 8只。Ａ组 :正常对照组 ,不做任何处理 ;Ｂ组 :单纯缺氧组 ,在每次缺氧…     

对肺动脉平滑肌细胞趋化反应和DNA合成的研究

探讨肺血管平滑肌细胞（ＰＶＳＭＣ）迁移在缺氧性肺血管结构重组中的作用以及缺氧本身对ＰＶＳＭＣ增殖和迁移的影响。方法利用细胞趋化研究方法和３Ｈ－胸腺嘧啶掺入法研究了血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）对培养的新生小牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）趋化反应和ＤＮＡ合成的作用，以及缺氧和心钠素（ＡＮＰ）对ＰＤＧＦ这种作用的影响。结果表明缺氧可促进ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ的趋化反应和ＤＮＡ合成，ＡＮＰ可抑制ＰＡＳＭＣ对ＰＤＧＦ的趋化作用，并抑制ＰＡＳＭＣ的ＤＮＡ合成，鸟苷酸环化酶抑制剂美蓝（ＭＢ）可抑制ＡＮＰ的这种抑制作用。结论研究提示ＰＤＧＦ、ＡＮＰ和缺氧本身对ＰＡＳＭＣ的增殖和迁移有重要作用，这可能对缺氧性肺血管结构重组具有重要意义     

左向右分流型先天性心脏病肺动脉高压患者血小板活化状态及其意义

目的：了解左向右分流型先天性心脏病（先心病）肺动脉高压患者血小板活化状态及其意义。方法：选择左向右分流型先心病患者３０例，其中２０例合并肺动脉高压（Ａ组）；１０例肺动脉压正常（Ｂ组）；选择１０名正常人作对照（Ｃ组）。取外周静脉血，采用放射免疫法测定凝血烷Ｂ２、α－颗粒膜蛋白－１４０和６－酮－前列腺素Ｆ１α（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α）的浓度，采用高效薄层层析法测定血小板激活因子（ＰＡＦ）的浓度。结果：Ａ、Ｂ、Ｃ３组间，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α浓度无显著性差异；Ｂ、Ｃ两组间，凝血烷Ｂ２、α－颗粒膜蛋白－１４０和ＰＡＦ浓度均无显著性差异；Ａ组血浆中凝血烷Ｂ２、α－颗粒膜蛋白－１４０和ＰＡＦ浓度均显著高于Ｂ、Ｃ两组（Ｐ＜０．０５～Ｐ＜０．０１），而且α－颗粒膜蛋白－１４０与肺动脉平均压呈显著正相关（ｒ＝０．５１，Ｐ＜０．０５）。结论：左向右分流型先心病合并肺动脉高压时，存在血小板活化，血浆中凝血烷Ａ２与ＰＡＦ浓度升高以及血小板活化均对左向右分流型先心病肺动脉高压的发展有促进作用。因此，对这些患者给予血小板聚集抑制剂治疗可能是适宜的。     

动脉壁正常区与脂斑区血小板源性生长因子及其受体基因表达的比较

应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析技术测定了正常人主动脉平滑肌细胞血小板源性生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＰＤＧＦ）及其受体ｍＲＮＡ的表达，以探讨其与动脉粥样硬化（ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ａｓ）发生的关系。结果显示，正常动脉壁及有脂纹脂斑动脉的正常区ＰＤＧＦ链ｍＲＮＡ仅有微量表达，未检出ＰＤＧＦ受体ｍＲＮＡ的表达；而脂纹脂斑区的ＰＤＧＦＡ链ｍＲＮＡ及ＰＤＧＦβ－受体ｍＲＮＡ表达则显著增高。提示动脉壁ＰＤＧＦＡ链及ＰＤＧＦ受体ｍＲＮＡ表达增高与Ａｓ的发生有关。     

缺氧时肺动脉内皮细胞与肺动脉平滑肌细胞增殖的相互调节

缺氧时肺动脉内皮细胞与肺动脉平滑肌细胞增殖的相互调节王培勇刘健于中和许蜀闽王俊元孙秉庸采用３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入和流式细胞技术，观察在常氧及缺氧条件下，肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）与肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）混合培养、共同培养时增殖的...     

凝血酶对大鼠血管平滑肌细胞血小板源性生长因子基因表达的影响

为了研究凝血酶对血管平滑肌细胞血小板源性生长因子基因表达的影响 ,探讨凝血酶刺激血管平滑肌细胞增殖的机制 ,通过培养SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞 ,以3 H -TdR掺入率作为评价凝血酶促血管平滑肌细胞增殖的指标 ;用反转录聚合酶链反应检测凝血酶对血管平滑肌细胞血小板源性生长因子A链mRNA表达的影响 ;用Dotblot检测凝血酶对血管平滑肌细胞血小板源性生长因子B链mRNA表达的影响。结果表明 ,凝血酶促血管平滑肌细胞增殖呈浓度依赖性和时间依赖性 ,血管平滑肌细胞在基础状态下可检测到血小板源性生长因子A和B链mRNA表达 ,凝血酶刺激血管平滑肌细胞后 2h血小板源性生长因子A链mRNA表达开始增加 ,4～ 6h达高峰 ,持续 12h ,2 4～ 48h恢复正常。提示凝血酶对血管平滑肌细胞具有较强的促增殖作用 ,凝血酶促血管平滑肌细胞的增殖作用部分可能是通过诱导血管平滑肌细胞血小板源性生长因子A链mRNA的表达来实现的。     

氧化低密度和极低密度脂蛋白对单核细胞血小板源性生长因子B链表达的影响

在单核细胞的培养基中分别加入２５ｍｇ·Ｌ￣（－１）低密度脂蛋白（ｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＬＤＬ）、氧化ＬＤＬ（ｏｘｉｄｉｚｅｄＬＤＬ，ＯＬＤＬ）、极低密度脂蛋白（ｖｅｒｙｌｏｗｄｅｎｓｉｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＶＬＤＬ）和氧化极低密度脂蛋白（ｏｘｉｄｉｚｅｄＶＬＤＬ，ＯＶＬＤＬ），培养２４ｈ后再用无血浆脂蛋白培养基收集条件培养基，并观察此条件培养基对￣３Ｈ－ＴｄＲ投入血管壁平滑肌细胞ＤＮＡ的影响。用抗血小板源性生长因子Ｂ链抗体（抗ＰＤＧＦ－Ｂ抗体）作疫组织化学染色。结果表明，单核细胞能表达ＰＤＧＦＢ，ＯＬＤＬ和ＯＶＬＤＬ能明显地促进单核细胞ＰＤＧＦ－Ｂ的表达，其条件培养基亦能促进￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入平滑肌细胞ＤＮＡ内。上述结果提示，ＯＬＤＬ和ＯＶＬＤＬ通过加强单核细胞分泌ＰＤＧＦ－Ｂ并促进平滑肌细胞增殖而在动脉粥样硬化的发病过程中起作用。     

肺动脉血管紧张素转换酶在缺氧性肺动脉高压演进过程中的…

目的 探讨肺动脉局部肾素血管紧张素系统对缺氧性肺动脉高压（ＰＡＨ）的影响。方法 采用常压缺氧ＰＡＨ动物模型，观察缺氧后肺动脉收缩压（ＰＡＰｓ）、肺动脉血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性、胶原蛋白含量（Ｈｐ）及血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）超微结构的变化，以及ＡＣＥ抑制剂－西拉普利对以上变化的影响。结果 缺氧期间ＰＡＰｓ、ＡＣＥ活性、Ｈｐ显著增高，ＳＭＣ较为分泌型。西拉普利组ＡＣＥ活性下降，ＰＡＰｓ、Ｈｐ降至     

低氧致大鼠肺中血小板－衍化生长因子－β受体基因表达增强

观察血小板。衍化生长因子－β（ＰＤＧＦ－β）受体在低氧大鼠肺中基因表达的变化。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交显示正常大鼠肺中可表达ＰＤＧＦ－β受体的信使ＲＮＡ（ｍＲＮＡ）。随低氧时间的延长ｍＲＮＡ水平迅速增加，至低氧第４日时达高峰，为正常的１．３倍（Ｐ＜０．０５）。免疫组化显示ＰＤＧＦ－β受体主要分布在肺的中、小动脉的平滑肌细胞及内皮细胞。随低氧时间的延长，其分布无变化，但密度显著增加，至低氧第７日时达高峰，为正常的２．４倍（Ｐ＜０．０５）。提示ＰＤＧＦ－β受体基因表达增强在低氧性肺血管重建中起一定作用。     

API0134对血管平滑肌细胞增殖和血小板源生长因子B链、碱性纤维母细胞生长因子及相关癌基因表达的影响

为探讨ＡＰＩ０１３４防治冠状动脉继样硬化和腔内成形术后再狭窄的作用机制，采用内皮素诱导建立培养的血管平滑肌细胞增殖模型，用氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法，流式细胞术、免疫细胞化学检测及Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法，观察了ＡＰＩ０１３４对血管平滑肌细胞增殖的作用及对血小板源生长因子Ｂ链、碱性纤维母细胞生长因子及其相关癌基因ｃ－ｓｉｓ和ｃ－ｍｙｃ表达的影响。结果发现，ＡＰＩ０１３４能逆转内皮素所致的氚标胸     

肺动脉血管紧张素转换酶在缺氧性肺动脉高压演进过程中的作用

目的探讨肺动脉局部肾素－血管紧张素系统对缺氧性肺动脉高压（ＰＡＨ）的影响。方法采用常压缺氧ＰＡＨ动物模型，观察缺氧后肺动脉收缩压（ＰＡＰｓ）、肺动脉血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性、胶原蛋白含量（Ｈｐ）及血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）超微结构的变化，以及ＡＣＥ抑制剂－西拉普利对以上变化的影响。结果缺氧期间ＰＡＰｓ、ＡＣＥ活性、Ｈｐ显著增高，ＳＭＣ转为分泌型。西拉普利组ＡＣＥ活性下降，ＰＡＰｓ、Ｈｐ降至正常，ＳＭＣ恢复收缩表型。结论肺动脉ＡＣＥ参与缺氧性ＰＡＨ形成、转归过程中肺动脉胶原代谢、ＳＭＣ表型变化的调节。     

动脉壁正常区与脂斑区血小板源性生长因子及其受体基因表达的比较

应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析技术测定了正常人主动脉平滑肌细胞血小板源性生长因子及其受体ｍＲＮＡ的表达，以探其与动脉样硬化发生的关系，结果显示，正常动脉壁及有脂纹脂斑动脉的正常区ＰＤＧＦ链ｍＲＮＡ仅有微量表达，未检出ＰＤＧＦ受体ｍＲＮＡ的表达；而脂纹脂斑区的ＰＤＧＦＡ链ｍＲＮＡ及ＰＤＧＦβ－受体ｍＲＮＡ表达则显著增高，提示动脉壁ＰＤＧＦＡ链及受体ｍＲＮＡ表达增高与Ａｓ的发生有关。     

血小板源生长因子对动脉平滑肌细胞增殖,Ⅰ、Ⅲ型前胶原信使核糖核酸的表达及胶原蛋白合成的调节作用

目的：研究血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）对培养的人主动脉平滑肌细胞增殖、胶原蛋白合成、分泌及Ⅰ、Ⅲ型前胶原信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）表达和转移生长因子βｍＲＮＡ表达的调节作用。方法：氚胸腺嘧啶脱氧核苷（３ＨＴｄＲ），氚脯氨酸参入及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析。３ＨＴｄＲ，氚脯氨酸参入的比较采用ｔ检验。结果：ＰＤＧＦ能促进人主动脉平滑肌细胞脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）合成和胶原蛋白合成、分泌；ＰＤＧＦ能上调Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和转移生长因子βｍＲＮＡ表达。结论：血小板源生长因子能通过上调Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和转移生长因子βｍＲＮＡ表达促进平滑肌细胞胶原蛋白的合成、分泌。     

三种细胞因子表达在特发性肺纤维化中的作用

目的 观察血小板衍生的生长因子（ＰＤＧＦ）、ＡＡ、ＢＢ及转化生长因子（ＴＧＦ）β在特发性肺间质纤维化（ＩＰＦ）支气管灌洗细胞及开胞肺活检标本的蛋白及基因表达，探索其在ＩＰＦ发病中的作用。方法 用免疫组化方法检测７例ＩＰＦ患支气管灌洗细胞ＰＤＧＦ，ＴＧＦ－β蛋白和基因的表达。结果 在肺间质纤维化患支气管灌洗细胞中，ＰＤＧＦ－ＡＡ，ＰＤＧＦ－ＢＢ〉ＴＧＦ－β均定位于肺泡巨噬细胞。三种不同的细胞因子