CD45蛋白酪氨酸磷酸酶与小表皮γδT细胞发育的关系

探讨ＣＤ４５分子在γδＴ细胞发育过程中的作用。方法采用ＣＤ４５基因敲除变种鼠，观察其Ｖγ３树突状表皮Ｔ细胞，这类唯一居住于鼠类表皮组织的γδＴ细胞的变化。结论ＣＤ４５分子虽在αβＴ细胞发育中起重要作用，但对包括Ｖγ３ＤＥＴＣ及Ｖγ２Ｔ细胞在内的γδＴ细胞之成熟过程可能并非必需。     

CD45 MOLECULE AND GENERATION OF EPIDERMAL γδ T CELLS FROM MICE

为探讨ＣＤ４５蛋白酪氨酸磷酸酶在γδＴ细胞发育过程中的作用，观察ＣＤ４５基因敲除变种鼠体内树突状表皮Ｔ细胞（ＤＥＴＣ）等γδＴ细胞。以原位免疫标记法检查小鼠表皮内ＤＥＴＣ的形状、数量及免疫表型；以ＲＴ－ＰＣＲ测定表皮细胞中Ｖγ３ＴＣＲｍＲＮＡ之表达水平；ＦＣＭ检测ＤＥＴＣ在表皮细胞中以及另一组γδＴ细胞、Ｖγ２Ｔ细胞在淋巴结细胞中所占比例。结果显示，ＣＤ４５缺失鼠与野生型鼠相比，上述各项指标仍无明显差异。提示ＣＤ４５分子虽在αβＴ细胞发育过程中起重要作用，但对包括ＤＥＴＣ及Ｖγ２Ｔ细胞在内的γδＴ细胞发育成熟可能并非必需。     

γδT细胞的抗原识别机制

Ｔ细胞表面表达两类抗原受体（ＴＣＲ）：ＴＣＲαβ和ＴＣＲγδ。ＴＣＲαβ可特异地识别由抗原呈递细胞（ＡＰＣ）表面Ⅰ类或Ⅱ类ＭＨＣ分子呈递的抗原肽，而ＴＣＲγδ则主要以ＭＨＣ非限制方式识别各类抗原。最近对ＴＣＲγδ所识别的抗原类型及方式进行了较为深入的研究，本文就其进展作一述评。１　ＴＣＲγδ的多样性和分布特点提示其抗原识别的特殊性　　同ＴＣＲαβ和免疫球蛋白（Ｉｇ）类似，ＴＣＲγδ基因由重组的Ｖ、Ｄ、Ｊ和Ｃ区组成。虽然γ、δ位点的Ｖ区多样性不及α和β，但其连接区多样性则使ＴＣＲγδ存在甚至超过Ｔ…     

病原体抗原对γδT细胞细胞毒活性及细胞因子产生的影响

目的体外研究病原体抗原活化的γδＴ细胞的细胞毒和细胞因子产生的反应性以及对ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖的影响，以期进一步澄清γδＴ细胞的功能。方法用洗淘法从外周血中分离纯化出γδＴ细胞，在体外探讨植物血凝素和结核分枝杆菌（Ｍ．ｔｂ）、人类６型疱疹病毒（ＨＨＶ－６）和阴道毛滴虫（ＴＶ）病原体抗原对γδＴ细胞的细胞毒活性和细胞因子产生的影响，并采用细胞隔离渗透培养法观察γδＴ细胞分泌的细胞因子对ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖的作用。结果Ｍ．ｔｂ比ＴＶ可更强地促进γδＴ细胞对Ｋ５６２细胞的杀伤活性。Ｍ．ｔｂ和ＨＨＶ－６可刺激γδＴ细胞主要分泌ＴＨ１型细胞因子ＩＦＮ－γ，而ＴＶ可刺激γδＴ细胞优势产生ＴＨ２型细胞因子ＩＬ－６。经抗原活化的γδＴ细胞分泌的可溶性因子可促进ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖。结论细胞内感染的病原体是激发γδＴ细胞产生ＴＨ１型细胞因子的诱导因子，并对其杀伤活性有所增强，而细胞外感染病原体可激发γδＴ细胞产生ＴＨ２型的细胞因子。     

辅佐细胞在磷酸—乙脂激活γδT细胞中的作用

目的：研究辅佐细胞在非肽类抗原ＭＥＰ激活γδＴ细胞中的作用及机制。方法：用花环沉降法分离出正常人外周血中的Ｔ细胞,通过细胞计数和ＦＡＣＳ,观察ＭＥＰ激活γδＴ细胞时辅佐细胞的作用。结果：ＭＥＰ激活γδＴ细胞需要有ＩＬ－２的持续存在。ＭＥＰ和ＩＬ－２联合作用于Ｔ细胞可少量激活其中的γδＴ细胞,但与ＩＬ－２的单独作用无明显差异。     

神经酰胺对结核杆菌低分子多肽抗原诱导的γδT细胞活化及凋亡作用

目的：研究神经酰胺对结核杆菌低分子多肽抗原（Ｍｔｂ）诱导的γδＴ细胞活化及凋亡作用。方法：用结核杆菌低分子多肽抗原刺激正常人ＰＢＭＣ，并用磁珠阳性分选法获得高纯度的γδＴ细胞。通过ＭＴＴ试验观察神经酰胺、鞘磷脂酰以及神经酰胺合成酶抑制剂ＦｕｍｏｎｉｓｉｎＢ１对γδＴ细胞的活化作用；ＦＡＣＳ检测其对γδＴ细胞的亡作用。结果：Ｍｔｂ刺激获得的γδＴ细胞可达７３％。磁珠分选后可高达９８％；高浓度神经酰胺及鞘磷脂酶能抑制γδＴ细胞的增殖。而出现凋亡，ＦｕｍｏｎｉｓｉｎＢ１则对γδＴ细胞的增殖及凋亡无明显影响。结论：鞘磷脂水解产生的社经酰胺对γδＴ细胞的有致凋亡作用。     

正常人外周血TCR的检测

正常人外周血ＴＣＲ的检测陈英玉，马树俊，龙振洲，陶家平（北京医科大学免疫学教研室北京１０００８３）大多数Ｔ细胞的ＴＣＲ是由αβ链组成的异二聚体，少数Ｔ细胞的ＴＣＲ是由γδ链组成。由于在免疫缺陷等免疫性疾病中发现有较高水平的ＴＣＲγδ￣＋细胞￣［１－３...     

结核杆菌低分子多肽抗原诱导活化的γδ＋T细胞的细 …

目的 探讨选择性扩增人γδ＋Ｔ细胞的方法及其细胞毒性。方法 用耐热性结核杆菌低分子多肽抗原（Ｍｔｂ）刺激正常人ＰＢＭＣ，并用磁珠阳性分选法获得高纯度的γδ＋Ｔ细胞，通过ＭＴＴ试验观察γδ＋Ｔ细胞对人红白细胞白血病细胞株Ｋ５６２的细胞观察γδ＋Ｔ细胞对人红白细胞白血病细胞株Ｋ５６２的细胞毒活性。结果 Ｍｔｂ刺激及磁珠分选后的γδ＋Ｔ细胞可达７３％和９８％。效靶细胞比例为１０：１时其对Ｋ５６２细胞的杀     

辅佐细胞在磷酸一乙脂激活γδT细胞中的作用

目的：研究辅佐细胞在非肽类抗原ＭＥＰ激活γδＴ细胞中的作用及机制。方法：用花环沉降法分离出正常人外周血中的Ｔ细胞,通过细胞计数和ＦＡＣＳ,观察ＭＥＰ激活γδＴ细胞时辅佐细胞的作用。结果：ＭＥＰ激活γδＴ细胞需要有ＩＬ－２的持续存在。ＭＥＰ和ＩＬ－２联合作用于Ｔ细胞可少量激活其中的γδＴ细胞,但与ＩＬ－２的单独作用无明显差异。加入辅佐细胞能大大促进ＭＥＰ和ＩＬ－２联合激活γδＴ细胞的作用,且明显强于ＩＬ－２的单独作用。辅佐细胞分泌的上清对ＭＥＰ激活γδＴ细胞无明显促进作用。结论：ＭＥＰ激活γδＴ细胞需要辅佐细胞的参与,可能主要通过与Ｔ细胞间的直接接触而起作用。     

HSP70多肽刺激PBMCs体外扩增γδT细胞及其抗肿瘤效应的研究

运用分离提纯所获的肿瘤膜蛋白ＨＳＰ７０－多肽在体外刺激人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ），成功地建立了γδＴ细胞的扩增培养系统。扩增培养后γδＴ细胞从占外周血Ｔ淋巴细胞的３．５％±２．８％（健康人样本）、１１．５％±１０．８％（急性白血病样本）相应地升高至５２．８％±７．９％和６０．４％±５．９％，并以表达ＴＣＲＶγ９－Ｖδ２亚型为主。运用５１Ｃｒ细胞毒试验探讨了γδＴ细胞的杀伤效应，发现：ＨＳＰ７０－多肽激活的γδＴ细胞对一系列肿瘤细胞包括ＮＫ敏感的Ｋ５６２、ＬＡＫ敏感的Ｄａｕｄｉ以及自体或异体新鲜肿瘤细胞等都具有高效的细胞毒活性，另外，在γδＴ细胞上清中可检出高水平的ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－８等细胞因子。以上结果提示：γδＴ细胞作为一种细胞毒性Ｔ淋巴细胞具有高效、特异的杀伤效应，在肿瘤免疫中具有重要作用。     

抗体固相法体外扩增人肿瘤浸润γδT淋巴细胞

以抗ＴＣＲγδ抗体选择性活化扩增γδＴＩＬ的方法，可以从小量肿瘤组织，有效扩增其中微量存在的γδＴＩＬ。实验证实：本法可在３～４ｗｋ内获得较高纯度的γδＴＩＬ，纯度可达８５％以上，所得γδＴＩＬ具有较为完整的受体库（ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅ）此法获得的γδＴＩＬ可用于进一步的功能研究，γδＴ细胞克隆及过继免疫治疗研究。     

免疫磁珠纯化γδT淋巴细胞的方法

γδＴ淋巴细胞在人外周血单个核细胞中的含量不超过１０ ％ , 而研究γδＴ淋巴细胞的功能需要大量的γδＴ淋巴细胞。为此, 采用磁珠（ｍａｇｎｅｔｉｃ ｍｉｃｒｏｂｅａｄｓ）阳性选择（ｐｏｓｉｔｉｖｅｓｅｌｅｃｔｉｏｎ） 法分离和纯化γδＴ淋巴细胞, 纯化可达９９％ 左右; 同时对富集的γδＴ淋巴细胞在体外的增殖和细胞毒效应进行观察, 此法快速、有效、纯度高, 对γδＴ淋巴细胞功能影响较小。为γδＴ淋巴细胞的研究和应用提供了便利。     

CD45蛋白酪氨酸磷酸酶与小鼠表皮γδT细胞发育的关系

目的探讨ＣＤ４５分子在γδＴ细胞发育过程中的作用。方法采用ＣＤ４５基因敲除变种鼠，观察其Ｖγ３树突状表皮Ｔ细胞（Ｖγ３ＤＥＴＣ），这类唯一居住于鼠类表皮组织的γδＴ细胞的变化。以原位免疫标记观察其表皮内Ｖγ３ＤＥＴＣ的分布密度和免疫表型，以ＲＴ－ＰＣＲ检测表皮细胞中Ｖγ３ＴＣＲｍＲＭＡ的表达水平，以双荧光ＦＣＭ测定Ｖγ３ＤＥＴＣ在表皮细胞中及Ｖγ２Ｔ细胞在淋巴结细胞中所占比例，并与野生型鼠作对照。结果ＣＤ４５缺失鼠表皮内Ｖγ３ＤＥＴＣ的密度、免疫表型，表皮细胞Ｖγ３ＴＣＲｍＲＮＡ表达水平以及Ｖγ３ＤＥＴＣ和Ｖγ２Ｔ细胞分别在表皮细胞及淋巴结细胞中的比例与野生型鼠无明显差异。结论ＣＤ４５分子虽在αβＴ细胞发育中起重要作用，但对包括Ｖγ３ＤＥＴＣ及Ｖγ２Ｔ细胞在内的γδＴ细胞之成熟过程可能并非必需     

正常人 TCRγδ细胞系的建立及功能研究

本文以抗 Ｔ Ｃ Ｒγδ单克隆抗体固相法体外选择性扩增获得１０ 例高纯度（８４２ ％ ±５８ ％ ） 正常人 Ｔ Ｃ Ｒγδ细胞系。在体外功能研究时发现, 植物血凝素（ Ｐ Ｈ Ａ） 、结核分枝杆菌（ Ｍｔｂ ） 、阴道毛滴虫（ Ｔ Ｖ） 和人类６ 型疱疹病毒（ Ｈ Ｈ Ｖ ６ ） 的刺激对已处于高增殖和高肿瘤细胞（ Ｄａｕｄｉ 细胞） 细胞毒活性状态的 Ｔ Ｃ Ｒγδ细胞已无进一步增强活性的影响。结果表明, 抗体刺激已使γδ细胞处于活化状态, 其细胞增殖和细胞毒活性无需抗原的再刺激即可得到很好的维持。提示 Ｔ Ｃ Ｒγδ单抗活化的γδ Ｔ 细胞可能成为肿瘤过继治疗的一种候选效应细胞。抗体活化的γδ Ｔ细胞本身具有分泌 Ｉ Ｌ ２ 和 Ｉ Ｎ Ｆ γ的能力。在抗原刺激的条件下, 细胞内感染的微生物（ Ｍｔｂ 和 Ｈ Ｈ Ｖ ６ ） 刺激γδ Ｔ细胞产生 Ｔｈ１ 型细胞因子（ Ｉ Ｌ ２ 和 Ｉ Ｎ Ｆ γ） ; 而细胞外感染病原体 Ｔ Ｖ的刺激则无明显增加γδ Ｔ 细胞的 Ｔｈ１ 型细胞因子分泌。这一结果提示, 在抗胞内病原体中, γδ Ｔ 细胞可控制 Ｔｈ１ 细胞反应性炎症的发生与发展。     

阐明γδ型T细胞机能的新途径

阐明γδ型Ｔ细胞机能的新途径［英］／西村仁志…／／ＭｏｌｅｃｕｌａｒＭｅｄｉｃｉｎｅ．－１９９３，３０（９）．－１２０１～１２０２在免疫应答中起中心作用的Ｔ细胞，通过其受体识别各种抗原。Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）分为αβ型和γδ型两种。γδ型ＴＣＲ基固的表...     

T细胞受体γδ表型淋巴细胞与肿瘤免疫

Ｔ细胞受体γδ表型细胞是一个新发现的Ｔ淋巴细胞亚群，约占人外周血淋巴细胞总数的３－１０％。实验证明，此类细胞具有多种细胞因子的分泌能力且可表现出对多种自体及建纱肿瘤细胞较强的细胞毒活性。因其具有特殊的ＭＨＣ非限制性的抗原识别方式，在某些肿瘤浸润淋巴细胞中的存在以及经过继免疫实验可获得明显的抗肿瘤效应而引起了免疫学工作者们的兴趣。本文仅就γδＴ细胞在肿瘤免疫研究的近年进展作一综述。     

成人外周血αβ T细胞和γδT细胞体外活化CD69表达的比较性研究

目的：γδＴ细胞具有细胞毒效应，探讨γδＴ细胞体外活化的规律将有助于这类细胞的临床应用。方法：将成人外周血分别置于ＰＨＡ（４０ｍｇ／Ｌ）、ＰＤＢ（２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ）及ＰＨＡ（４０ｍｇ／Ｌ）加上ＰＤＢ（２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ）的条件下进行全血培养，在培养２ｈ和６ｈ后分别用双色免疫标记流式细胞法对外周血Ｔ细胞的ＴＣＲαβ、ＴＣＲγδ和ＣＤ６９分子进行分析。结果：Ｔ细胞在受刺激后２ｈＣＤ６９分子即有所增高，但其增加的程度因Ｔ细胞亚群和刺激剂不同而有差别，ＰＨＡ和ＰＤＢ分别使αβＴ细胞ＣＤ６９表达百分率由对照组的４４８±１３６升高到８７９±１６７和７３３６±２９８；ＰＨＡ和ＰＤＢ分别使γδＴ细胞ＣＤ６９表达百分率由对照组的１３６５±１７４升高到３５８４±１４０和９９０３±０９７。与２ｈ的情况相比，αβＴ细胞在各种刺激剂作用６ｈ后ＣＤ６９表达均有进一步的增高，γδＴ细胞在ＰＨＡ作用６ｈ后ＣＤ６９表达继续上调。结论：γδＴ细胞对多克隆活化剂的反应比αβＴ细胞更早和更强。这一特征更有利于体外扩增γδΤ细胞并将其用于临床免疫治疗。     

类风湿性关节炎患者关节滑液和滑膜中γδT细胞？…

探讨在类风湿性关节炎患者的着急滑液和滑膜中选择性存在,且有数量升高的γδＴ细胞的免疫学功能,以阐述类风湿性关节炎的发病机理。方法应用固相抗扩增法,建立关节滑液,滑膜和外周血γδＴ细胞系,并在此基础上,探讨了γδＴ细胞的细胞表型,细胞毒活性,增殖活性和细胞因子分泌情况。     

γδT细胞及其培养上清成份对骨髓造血细胞集落形成的影响

目的　研究γδＴ 细胞及其培养上清成份对骨髓造血细胞集落形成的影响。方法　运用体外半固体造血集落培养观察了人γδＴ 细胞及其分泌上清对自体骨髓造血集落（ＣＦＵＣ） 形成的影响。结果　γδＴ 细胞及其培养上清能刺激自体骨髓造血集落的形成;其培养上清中可检出ＩＦＮγ、ＴＮＦ、ＩＬ８ 等细胞因子。结论　γδＴ 细胞能分泌一系列具有不同效应的造血调控因子,但其共同的作用结果则具有一定的造血刺激效应,可能成为一种新型的ＣＴＬ 用于肿瘤的过继免疫疗法。     

人外周血致敏型γδ+T细胞在体外的扩增

建立一种人外周血γδ＾＋Ｔ细胞体外选择性扩增的模式：即在ＩＬ－２的作用下,不需要γδ＾＋ＴＣＲ特异性配体的刺激,可使一类个体体外培养的外周血单个核细胞中的γδ＾＋Ｔ细胞发生优先增殖,逐渐成为培养细胞的主要群体。方法将１０个γδ＾＋ＴＣＲ的个体ＰＢＭＣ分别在含３＊１０＾５Ｕ／ＬＩＬ－２培养液中培养１－２ｗｋ后,其中的γδ＾＋Ｔ细胞的比率可达３８％－７８％。结果对３个宋的个体的坟增帮ＲＴ－ＰＣＲ分析表