清开灵有效组分对大鼠缺血脑组织星形胶质细胞活化的影响

目的：探讨清开灵有效组分对大鼠缺血脑组织星形胶质细胞活化的影响。方法：参照Longa法复制大鼠脑缺血模型，清开灵有效组分干预，免疫组化分析缺血脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、酸性钙结合蛋白(S-100β)表达的组间与时效特征。结果：脑缺血后GFAP、S-100β表达增强。用药可增强缺血：12hGFAP、S-100β的表达，促进星形胶质细胞的激活，对受损神经元发挥保护作用；至缺血24h，除珍珠母水解液组外，其余用药组促进GFAP、S-100β表达的作用减弱。结论：清开灵有效组分促进星形胶质细胞活化的作用具有明显时效性和相对特异性，黄芩苷、栀子苷的作用在于促进星形胶质细胞的反应性增生，而胆酸、珍珠母水解液则表现为对星形胶质细胞功能活化的促进作用。     

甲基强的松龙对深低温脑缺血再灌注大鼠脑组织S-100β蛋白表达的影响

目的观察甲基强的松龙(MP)对深低温脑缺血再灌注大鼠脑组织S-100β蛋白表达的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和MP组,应用SABC技术检测脑组织S-100β蛋白表达。结果假手术组脑组织S-100β蛋白呈基础水平表达;MP组S-100β蛋白表达量与模型组比较显著降低。结论MP可能通过抑制S-100β的过量表达,对深低温缺血再灌注脑损害发挥保护作用。     

益气通络解毒胶囊抗脑缺血性再灌注损伤的作用及其机制

本文观察了益气通络解毒胶囊抗脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。选用SD大鼠,随机分为假手术组,模型组,益气通络解毒胶囊高、中、低剂量组,尼莫地平组,每组10只。采用大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型,观察对大鼠神经缺损功能的恢复,脑梗死体积,缺血侧脑组织SOD活力、MDA含量、NO含量和NOS活力,Bcl-2和Bax蛋白表达,血清中IL-1β、IL-6和TNFα等炎症因子含量,以及缺血侧脑组织IL-1βmRNA表达的影响。结果表明,益气通络解毒胶囊可显著地减轻MCAO模型大鼠的神经功能缺损症状,促进神经功能缺损症状的恢复;显著地缩小大鼠MCAO后脑组织梗死体积,降低脑梗死体积百分率;显著地提高缺血再灌注后大鼠脑组织中SOD活性、明显降低MDA含量、NO含量和NOS活力,减轻自由基对脑的损伤;上调Bcl-2蛋白、下调Bax蛋白表达;明显降低血清中IL-1β、IL-6和TNFα等炎症因子的含量以及缺血侧脑组织IL-1βmRNA表达水平。益气通络解毒胶囊具有明显抗细胞凋亡、抗氧化和抗炎等作用,对大鼠脑缺血性损伤具有明显的保护作用。     

党参总皂苷对大鼠局灶性脑缺血性损伤的保护作用

目的观察党参总皂苷(TSC)对大鼠局灶性脑缺血性损伤的保护作用,并初探其机制。方法 54只SD大鼠随机分为假手术组、假手术给药组、模型组、治疗组。假手术给药组及治疗组每日1次TSC60mg·kg~(-1)灌胃,假手术组及模型组灌胃等体积的生理盐水,7d后建立大鼠右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)的局灶性脑缺血模型,24h后观察各组大鼠死亡率、神经功能症状,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色测量脑梗死体积,real time RT-PCR法测定缺血周边区肿瘤生长因子α(Tnf-α)、白细胞介素1β(Il-1β)、环氧酶2(Cox-2)、内皮型一氧化氨合酶(Nos3)及诱导型一氧化氮合酶(Nos2)的mRNA表达。结果 TSC明显降低MCAO所致的死亡率及神经功能评分,并减少脑梗死体积(均P<0.05)。同时,TSC明显抑制了缺血周边区Tnf-α、Il-1β、Cox-2、Nos3及Nos2的mRNA表达(P<0.05),而对假手术给药组大鼠无明显影响(P>0.05)。结论 TSC对大鼠局灶性脑缺血性损伤有保护作用,其机制与抑制炎症相关基因的mRNA表达有关。     

法舒地尔预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞色素C和caspase-3表达的影响

目的研究法舒地尔对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤细胞色素C(CytC)和caspase-3蛋白表达的影响,探讨其脑保护机制。方法线栓法制作大鼠中动脉缺血再灌注损伤模型。成年雄性SD大鼠120只随机分成3组:假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注模型组(Mod组)、法舒地尔干预组(Fas组),再分为再灌注3h、12h、24h和48h,以及TTC染色组5个亚组,每组8只大鼠。缺血再灌注后进行神经功能缺损评分(NDS),免疫组织化学方法检测脑组织中CytC蛋白、cas-pase-3的表达,TTC染色测量鼠脑梗死体积并计算百分比。结果①Sham组大鼠无神经功能缺损,NDS评分为0,TTC染色亦未见脑组织梗死;Mod组和Fas组大鼠均有明显的神经功能缺损,TTC染色亦可见明显的脑组织梗死;但与Mod组相比,Fas组神经功能缺损少、NDS评分低(P<0.01),脑梗死体积减小(P<0.05)。②与Sham组相比,脑缺血再灌注后,Mod组和Fas组大鼠脑组织CytC和caspase-3的表达显著升高(P<0.01),其中CytC表达高峰出现在12h,caspase-3表达高峰出现在24h;Fas组和Mod组间比较显示Fas组CytC和caspase-3的表达又显著低于Mod组(P<0.01)。结论①法舒地尔能减轻大鼠脑局灶性缺血再灌注引起的神经功能缺损,减小脑梗死体积。②部分抑制脑缺血再灌注引起的CytC和caspase-3表达增加可能是法舒地尔的脑保护机制之一。     

白藜芦醇对大鼠脑缺血/再灌注损伤后星形胶质细胞活化的影响

目的研究白藜芦醇对大鼠脑缺血/再灌注损伤后星形胶质细胞活化的影响。方法 45只SD♂大鼠随机分成假手术组(Sham)、对照组(Con)和白藜芦醇组(30 mg·kg-1,Res),每组15只。于缺血/再灌注后3 h使用白藜芦醇或溶剂治疗,连用7 d。脑缺血24 h时,TTC法检测脑梗死体积,HE染色检测病理变化,Longa评分行神经功能评分,免疫组织化学检测缺血半暗带皮质半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达。脑缺血14 d时,免疫组织化学及免疫荧光法检测胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和神经元NeuN蛋白表达。结果白藜芦醇治疗较对照组能明显改善神经功能、减小梗死体积、减少神经元脱失及凋亡,抑制星形胶质细胞的活化与增殖(P<0.01)。结论白藜芦醇治疗可抑制星形胶质细胞的异常活化,保护缺血半暗带神经元,改善神经功能。     

磷酸肌酸钠对脑梗死的保护作用

目的观察磷酸肌酸钠对脑梗死的影响,探讨其对脑梗死的保护作用。方法 Wistar大鼠60只随机分成3组:假手术组、脑梗死组、磷酸肌酸钠组(PCr组),每组20只。观察大鼠的神经功能缺损评分。脑缺血6 h后将大鼠处死,检测血清及脑匀浆SOD、MDA、GPX活性,计算脑梗死体积,观察大鼠海马组织的超微结构。结果脑梗死组大鼠神经功能缺损评分与PCr组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。脑梗死组和PCr组大鼠血清及脑组织匀浆内SOD、GPX、MDA水平与假手术组比较,差异有统计学意义;脑梗死组和PCr组之间比较,差异也具有统计学意义(P<0.05)。PCr组大鼠的梗死体积较脑梗死组明显减小(P<0.05)。结论 PCr可减少脑缺血后神经功能缺损评分,缓解缺血后脂质过氧化程度,降低脑梗死体积,减轻神经细胞损伤。     

玫瑰总黄酮对小鼠局灶性脑缺血模型的影响

摘要 目的：观察玫瑰总黄酮对小鼠局灶性脑缺血再灌注模型的保护作用。方法：采用线栓法阻塞左侧大脑中动脉,建立小鼠局灶性脑缺血再灌注模型。于手术前尼莫地平组、脑络通组、玫瑰总黄酮大、中、小剂量组分别给予相应的药物灌胃,假手术组、手术模型组、同时给予同体积0.5%CMC灌胃,每天1次,连续给药7d。末次给药1h后造模,手术清醒后,对小鼠神经功能评分,再灌注22h,测血清中S-100β蛋白含量,取脑组织TTC染片,计算脑梗死面积。结果：小鼠局灶性脑缺血再灌注模型复制成功,玫瑰总黄酮各剂量组均显著降低小鼠神经功能缺失评分,减少小鼠脑梗死面积,显著降低血清中S-100β蛋白的含量,显著改善脑组织中皮质区的病理损伤。结论：玫瑰总黄酮可通过降低血清中S-100β蛋白的含量,改善神经功能缺失评分,减少脑梗死面积,改善大脑皮质区的病变情况,从而减轻脑组织缺血再灌注的损伤。     

尼莫地平对大鼠脑缺血再灌注损伤疗效分析

目的探讨尼莫地平对大鼠缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用结扎颈总动脉的方法制备缺血再灌注模型,对缺血前、再灌注48h后对大鼠进行神经功能评分和脑梗死体积,对正常组、缺血前注射尼莫地平组、未注射尼莫地平组及再灌注后注射尼莫地平组4组大鼠神经功能评分和脑梗死体积。结果与模型组组相比,缺血前及灌注后静脉滴注尼莫地平大鼠神经功能缺损明显减少,脑梗死体积明显减少(P<0.05)。结论尼莫地平治疗脑缺血再灌注损伤有疗效,对脑缺血大鼠有神经保护作用,而且在缺血前给药能减少大脑梗死的面积。     

缺血预处理对再缺血后脑组织caspase-3表达的影响

目的 研究缺血预处理后对再次脑缺血的神经功能、脑梗死体积以及脑组织中caspase-3表达的影响,探讨脑缺血预处理引起的脑保护机制.方法 48只健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(体质量200～250 g)随机分两组:脑缺血组(n=24)和脑缺血预处理组(简称预处理组,n=24).各组按再缺血时间6 h、1 d、2 d、4 d分为4个亚组.结果 在缺血后相同时间点,预处理组比缺血组神经功能缺损评分明显减轻(P＜0.05),梗死体积明显减小(P＜0.05),caspase-3阳性细胞表达明显降低(P＜0.05).结论 缺血预处理组对再次缺血可产生保护作用,减轻神经功能缺损症状,缩小梗死体积,减少caspase-3的表达,增强脑组织对脑缺血的耐受能力,提示抑制凋亡的发生可能是缺血预处理诱导脑缺血耐受的机制之一.     

神经元特异性烯醇化酶、S-100β蛋白与急性脑梗死关系的临床研究

目的探讨急性脑梗死患者血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）和S-100β蛋白的变化及与急性脑梗死的关系。方法采用酶联免疫吸附法测定80例急性脑梗死患者NSE、S-B100β蛋白及40例健康体检者（对照组）血清NSE和S-100β蛋白含量。结果急性脑梗死患者血清NSE和S-100β蛋白浓度均明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,且NSE和S-100β蛋白水平随梗死面积的增大及神经功能缺损程度的加重逐渐升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论血清NSE和S-100β蛋白水平较好地反映了急性脑梗死梗死面积及神经功能缺损程度,可以作为判断急性脑梗死梗死面积、评价疗效和估计预后的一个重要手段。     

前列地尔对局灶性脑缺血模型大鼠大脑皮层基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9表达的影响

目的:探讨前列地尔对局灶性脑缺血模型大鼠大脑皮层基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP-9表达的影响。方法:取SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照(尼莫地平1 mg.kg-1)组和前列地尔低、中、高剂量(1.25、2.50、5.00μg.kg-1)组,每组5只,连续给予相应药物6 d,每日1次,末次给药后建立局灶性脑缺血模型,于大鼠清醒后进行神经功能缺损评分,缺血24 h后检测各组大鼠大脑皮层MMP-2、MMP-9的表达情况。结果:与假手术组比较,模型组神经功能缺损评分明显更高,MMP-2、MMP-9表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组和前列地尔中、高剂量组神经功能缺损评分明显较低,MMP-2、MMP-9表达明显降低(P<0.05)。结论:前列地尔预处理对局灶性脑缺血模型大鼠具有神经保护作用,其机制可能与抑制大脑皮层MMP-2、MMP-9的表达有关。     

Nrf2调控AIM2炎症小体在大鼠脑缺血再灌注 损伤中的作用

目的 探讨核因子E2相关因子2（Nrf2）对脑缺血再灌注损伤的影响及对黑色素瘤缺乏因子2（AIM2）炎症 小体的调控作用。方法 将108只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、脑缺血再灌注模型组（I/R 组）、Nrf2抑制剂鸦胆子苦醇（Bru）干预组（Bru组），每组再按随机数字表法进一步分为脑缺血再灌注后8、24、72 h组， 共9组，每组12只。I/R组和Bru组采用线栓法建立大脑中动脉栓塞（MCAO）模型。于相应时间点对各组行神经功能 缺损评分；采用2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色测定脑梗死面积；HE染色检测脑组织病理损伤；荧光定量PCR 法检测缺血侧脑组织中AIM2 mRNA表达；Western blot法检测缺血区脑组织中AIM2、Nrf2蛋白的表达；酶联免疫吸 附试验法检测缺血区脑组织中凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-1、白细胞介素（IL）-1β和IL-18 的表达。结果 与Sham组比较，I/R组各时间点神经功能缺损评分升高，脑组织病理损伤显著加重，AIM2 mRNA以 及Nrf2、AIM2、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白表达水平升高（P＜0.05）。与I/R组比较，Bru组各时间点神经功能 缺损评分升高，脑组织病理损伤更重，Nrf2蛋白表达水平降低，AIM2 mRNA和蛋白，ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋 白表达水平升高（P＜0.05）。结论 Nrf2在脑缺血再灌注损伤中具有内源性神经保护作用，其机制可能与Nrf2可负 性调控AIM2炎症小体，减少炎性细胞因子的释放有关。     

脂氧素A_4对大鼠局部永久性脑缺血的保护作用

目的探讨脂氧素A4(lipoxinA4,LXA4)对大鼠局部永久性脑缺血损伤的保护作用。方法健康成年SD♂大鼠,体重200～250g,随机分为4组:假手术组(Sham),缺血模型组(Model),LXA410ng治疗组,LXA4100ng治疗组。用改良线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉永久性缺血模型。Sham组插入栓线仅约10mm。大鼠于放线栓成功后10min内给予右侧侧脑室内注射等容量的LXA4(5μl)或生理盐水(5μl)。缺血24h后,评价神经功能缺损情况;2,3,5-氯化三苯四唑(TTC)染色观察脑梗死范围;分光光度计法测定缺血侧脑皮质丙二醛(MDA)含量和髓过氧化物酶(MPO)活性;ELISA法检测缺血侧皮质肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素1β(IL-1β)的含量;HE染色观察脑组织病理学改变。结果LXA410ng、100ng能明显改善神经功能损伤症状,减少大鼠局部永久性缺血后脑梗死体积百分比,降低脑组织MPO活性以及MDA、TNF-α和IL-1β的含量,减轻脑组织病理学损伤,且LXA4100ng组在改善大鼠神经功能及抑制皮质TNF-α的表达上明显优于10ng组。结论LXA4对大鼠局部永久性脑缺血损伤有一定保护作用。     

大鼠脑缺血再灌注早期过氧化物酶体增殖物激活受体γ 活化与细胞焦亡的关系

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）活化在大鼠脑缺血再灌注损伤中与细胞焦亡的关 系。方法 40只SPF级雄性SD 大鼠随机分为假手术组（sham组）、模型组（MCAO组）、给药组（PGZ组、PGZ+GW9662 组）,每组10只;采用Zea-Longa评分法进行神经功能评分,TTC染色测量脑梗死面积,运用Western blot 技术分析大 鼠脑组织中PPARγ,焦亡关键蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（caspase-1）、Gasdermin D（GSDMD）及炎症因子白细 胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）的表达变化。结果 与 sham 组比较,缺血再灌注 24 h 后 MCAO 组中 PPARγ 表达明显降低（P＜0.05）,焦亡关键蛋白 caspase-1、GSDMD 及炎症因子 IL-1β、IL-18 水平显著增高（P＜ 0.05）,神经功能评分明显增加,脑梗死面积增大（P＜0.01）;与MCAO组比较,PGZ组中PPARγ显著升高（P＜0.05）, 焦亡关键蛋白caspase-1、GSDMD及炎症因子IL-1β、IL-18水平降低（P＜0.05）,神经功能评分显著下降,脑梗死面积 减少（P＜0.01）;而PGZ+GW9662组中,PPARγ的作用被逆转。结论 在脑缺血再灌注损伤早期PPARγ激活可通过 抑制细胞焦亡产生从而减轻神经细胞损伤。     

苦碟子注射液对大鼠急性脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的观察苦碟子注射液对脑缺血-再灌注损伤的保护作用并探讨其可能机制。方法用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO)。大鼠随机分成假手术组(sham)、脑缺血-再灌注损伤组(I/R)和苦碟子保护组(KD)。观察神经功能学评分,形态学观察(光镜和电镜),如脑梗塞面积(HE染色)及测定脑组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果苦碟子注射液可降低缺血-再灌注损伤后的神经功能学评分、脑梗死面积、缺血脑组织丙二醛含量,减轻形态结构损伤,提高超氧化物歧化酶活性。结论苦碟子注射液对于脑缺血-再灌注损伤有一定的保护作用,其作用机制与清除氧自由基和抗脂质过氧化有关。     

银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究银杏叶提取物(EGB)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分成假手术、模型、丹参和EGB组,分别在脑缺血再灌注后24h处死大鼠,观察其神经功能缺失评分,应用TTC染色观察梗死体积,尼氏染色观察神经元形态结构特征并计数健存神经元数量,检测血清氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)变化,Western-blot检测脑组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达。结果:经过EGB治疗后,EGB组行为学评分和脑组织梗死体积测量均低于模型组(P<0.05)。EGB组的坏死及凋亡细胞大大减少,健存神经元数目((66.91±7.53)%)较模型组((43.51±4.77)%)显著增多(P<0.05)。EGB组血清SOD高于模型组,MDA低于模型组(P<0.05)。24h后模型组iNOS表达较假手术组和EGB组明显增高(P<0.05)。结论:EGB能显著减小梗死范围,减少神经细胞凋亡,提高SOD含量,降低MDA含量和抑制iNOS表达,对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有良好的神经保护作用。     

通络逐瘀汤对脑缺血/再灌注损伤的临床研究

目的观察通络逐瘀汤对脑缺血/再灌注损伤的保护作用,并对其机制作初步探讨。方法对大鼠大脑中动脉缺血2h/再灌注22h模型采用不同方案治疗,比较其神经病学评分、脑梗死范围及抗脑缺血/再灌注损伤的效果;放射免疫法检测患侧皮质内皮素（ET）、血栓素B2（TXB2）、6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）含量的变化。结果大鼠脑缺血2h/再灌注22h后,假手术组大鼠神经病学评分均为0分,无脑梗死;尼莫地平组和通络逐瘀汤30、60mg/kg组神经病学评分和脑梗死范围均小于生理盐水组,差异有统计学意义（P〈0.05）。生理盐水组ET及TXB2含量高于假手术组,6-Keto-PGF1α活性低于假手术组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;尼莫地平组和通络逐瘀汤30、60mg/kg组ET及TXB2含量低于生理盐水组,6-Keto-PGF1α活性高于生理盐水组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论通络逐瘀汤对脑缺血/再灌注损伤有保护作用,其作用机制与抑制ET、TXB2含量,提高6-keto-PGF1α活性,维持TXB2/6-keto-PGF1α动态平衡有关。     

前列地尔对局灶性脑缺血模型大鼠大脑皮层中iNOS和eNOS表达的影响

目的:探讨前列地尔对局灶性脑缺血模型大鼠大脑皮层中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。方法:取大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照(尼莫地平1mg.kg-1)组和前列地尔低、中、高剂量(1.25、2.50、5.00μg.kg-1)组,每组10只,腹腔注射相应药物6d,每日1次,末次给药后建立局灶性脑缺血模型,大鼠清醒后进行神经功能缺损评分,采用免疫组化法和免疫印迹法检测各组大鼠建模2h后iNOS、eNOS的表达。结果:与假手术组比较,其余各组神经功能缺损评分均明显增加,iNOS阳性细胞数和表达量均明显增加,除模型组外其余各组eNOS阳性表达量均增加(P均<0.05);与模型组比较,阳性对照组和前列地尔中、高剂量组神经功能缺损评分均明显降低,阳性对照组和前列地尔3个剂量组iNOS阳性细胞数和表达量均明显降低、eNOS阳性细胞数和表达量均明显增加(P均<0.05)。结论:前列地尔预处理对局灶性脑缺血模型大鼠具有保护作用,其机制可能与下调大脑皮层iNOS、上调eNOS的表达有关。