辛伐他汀促进大鼠骨髓基质细胞的成骨分化

目的观察辛伐他汀体内给药对去卵巢大鼠骨髓基质细胞(BMSC)增殖和分化的影响,探讨辛伐他汀的成骨作用机制.方法24只12周龄雌性SD大鼠随机分成4组,每组6只假手术组(G1)和去卵巢组(G2)每天蒸馏水灌胃;去卵巢大鼠10mg·kg-1·d-1辛伐他汀灌胃(G3);去卵巢大鼠20mg·kg-1·d-1辛伐他汀灌胃(G4).实验持续4周,第29天处死所有大鼠取骨髓细胞培养.用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测成骨细胞的增殖能力;细胞培养第14天用半定量RT-PCR和western blot检测Runx2/Cbfal mRNA和蛋白的表达、第16天检测碱性磷酸酶活性(ALP)和第21天检测茜素红染色.结果辛伐他汀不能促进去卵巢大鼠成骨细胞增殖.G3组和G4组的Runx 2/Cbfa1 mRNA表达水平和ALP活性都显著高于G2组,给药两组之间无显著差别.G4组的Runx 2/Cbfal蛋白表达水平比G2组和G3组显著增加,G2组与G3组无明显差别.茜素红染色表明辛伐他汀能促进成骨细胞的矿化能力,两种剂量组之间无明显差别.结论辛伐他汀体内给药能够促进去卵巢大鼠BMSC向成骨细胞分化,但是不能促进细胞增殖.     

雌激素治疗去卵巢大鼠骨丢失的不同部位效应观察

目的探讨雌激素对去卵巢(OVX)大鼠骨丢失的作用敏感部位。方法8月龄SD大鼠去卵巢后,皮下注射17β-雌二醇(E2)(10、30μg.kg-1.d-1)3月,双能X线骨密度仪检测全身总骨密度(BMD),离体腰椎(L4-6)、股骨、胫骨BMD。实验分为假手术组、去卵巢模型组、雌激素小剂量组、雌激素大剂量组,每组10只。结果E2可逆转OVX所致总BMD降低,增加OVX后腰椎整体及3个兴趣区BMD。E2治疗可升高OVX后股骨BMD,其中股骨整体、股骨近端和股骨远端处改变最为明显(P<0.01),其余各兴趣区BMD改变相对稍弱,而股骨中段最不敏感。胫骨BMD指标中以胫骨近端最为敏感(P<0.01),而中远端几乎无改变。结论雌激素对去卵巢(OVX)大鼠的作用敏感部位与骨量丢失敏感部位具有一致性,雌激素增加骨密度主要在腰椎、股骨近端、股骨远端和胫骨近端。     

辛伐他汀部分阻止尾悬吊大鼠股骨近端骨量的丢失

目的：观察辛伐他汀体内给药对尾悬吊大鼠骨量和骨髓基质干细胞增殖﹑分化的影响。方法18只9周龄雄性SD大鼠被随机分成3组,每组6只：第一组（G1）,正常对照组,每天蒸馏水灌胃;第二组（G2）,尾悬吊组,每天蒸馏水灌胃;第三组（G3）,尾悬吊大鼠每天20 mg/kg辛伐他汀灌胃。实验持续3周,所有大鼠在最后一次灌胃的第二天被处死,取大鼠右侧股骨用双能X线骨密度仪测量骨密度。取大鼠左侧股骨和胫骨骨髓细胞向成骨细胞定向培养,并作如下检测：碱性磷酸酶活性和von Kossa染色分别在细胞培养第16天和25天检测。在细胞培养第21天,采用Real-time RT-PCR检测BMP-2、RANKL mRNA的表达。结果尾悬吊组大鼠骨量低于对照组。全长骨密度（ tBMD）及远端骨密度（ dBMD） G1组显著高于G2、G3组,近端骨密度（ pBMD） G1组显著高于G2组,但与G3组没有区别, G3组高于G2组但没有显著差别。细胞外基质矿化能力（ von Kossa染色）、ALP比活性以及RANKL、BMP-2 mRNA水平各组间均没有显著差别。结论尾悬吊3周可致大鼠骨骨质疏松,辛伐他汀体内给药可部分阻止股骨近端骨量丢失,但不能显著促进骨髓基质干细胞向成骨细胞分化。     

罗格列酮对雌性大鼠骨代谢的影响

目的观察马来酸罗格列酮对雌性大鼠骨代谢的影响。方法 3月龄雌性Wistar大鼠40只随机分为4组,正常对照组(NC组)、低剂量(3mg.kg-1.d-1)罗格列酮组(Ros-1组)、中剂量(10mg.kg-1.d-1)罗格列酮组(Ros-2组)和高剂量(30 mg.kg-1.d-1)罗格列酮组(Ros-3组)。每日定时按照每公斤体重6ml灌胃,NC组给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃作为对照,干预12周。处死后,测定右侧股骨骨密度、血清骨代谢标记物和相关激素及细胞因子水平。结果 Ros-3组的股骨骨密度较其他三组显著降低,反映骨形成的血清骨钙素水平在Ros-2及Ros-3组显著降低,而其他骨代谢标记物无显著变化。各组的雌二醇、睾酮、瘦素水平无差异。Ros-3组IGF-1水平降低。各组炎症因子的水平无有意义的变化。结论较大剂量的罗格列酮能减少正常雌性大鼠的骨形成,降低骨密度,对循环中雌二醇、睾酮及多数细胞因子无显著性影响。     

新型雌激素哌嗪雌酚酮对去卵巢小鼠骨代谢及骨生物力学的影响

目的研究哌嗪雌酚酮(piperazinyl estrone,PE)对去卵巢小鼠骨代谢及骨生物力学的影响,并探讨其作用机制。方法70只昆明种雌性小鼠,随机分为7组,Basal组,Ovx组,Ovx+PE 0.5mg.kg-1.d-1组,Ovx+PE 1.0 mg.kg-1.d-1,Ovx+PE 2.0 mg.kg-1.d-1,Ovx+E 0.71mg.kg-1.d-1灌胃给药共42 d,处死小鼠,采用骨形态计量学、骨生物力学测定哌嗪雌酚酮对去卵巢小鼠的骨量及力学指标的影响。结果去卵巢小鼠骨小梁面积明显减少63%,小鼠股骨结构力学和材料力学指标均呈现显著性降低,表现出骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松;而哌嗪雌酚酮各剂量组的骨量均有不同程度增加,小鼠股骨的力学参数有不同程度提高;雌酚酮通过明显抑制骨吸收,轻度抑制骨形成增加骨量。结论哌嗪雌酚酮中剂量组(1.0 mg.kg-1.d-1)轻度抑制骨转换增加去卵巢小鼠的骨量,改善去卵巢小鼠股骨的生物力学特性。     

辛伐他汀对大鼠骨量及骨髓基质干细胞增殖、分化过程中Smad1，2，7表达的影响

目的 观察辛伐他汀体内给药对大鼠骨量和骨髓基质干细胞增殖分化的影响.方法 16只6 w龄雌性DD大鼠按体重随机分成2组,每组8只:第一组(G1),实验组,辛伐他汀灌胃20 mg/kg·d(S20),持续6 w;第二组(G2),对照组,每天蒸馏水灌胃(N),持续6 w.于最后一次灌胃的第二天处死所有大鼠,取左侧股骨行骨密度和骨组织形态计量学测定;取右侧股骨和胫骨骨髓细胞向成骨方向诱导培养,并作如下检测:采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测定向成骨分化中的骨髓基质干细胞的增殖能力;细胞培养第16 d和28 d分别检测碱性磷酸酶(ALP)比活性、ALP染色和von Kossa染色;细胞培养第21 d,提取总RNA,采用Real-time RT-PCR检测Smad1、2、7的mRNA的表达.结果 辛伐他汀体内给药干扰6 w后大鼠骨量和骨密度无显著变化,体外培养骨髓基质干细胞所有检测基因mRNA水平、细胞增殖能力、矿化能力(von Kossa染色)、ALP比活性、ALP染色两组间均无显著差别.结论 辛伐他汀体内给药6 w对大鼠骨最及骨髓基质干细胞的增殖和分化无显著作用.     

普萘洛尔对去卵巢大鼠骨密度及血清IL-6的影响

目的 探讨普萘洛尔对去卵巢大鼠骨密度及对血清IL-6水平的影响。方法 50只健康雌性未交配6个月龄SD大鼠随机分为5组,每组10只:①假手术组(sham);②去卵巢(PVX)后雌激素治疗组(O E);③OVX后普萘洛尔治疗组(O p);①OVX后雌激素 普萘洛尔治疗组(O E P);⑤OVX后安慰剂组(OVX);OVX后1周开始经灌胃给予普萘洛尔8 mg·kg-1·d-1、皮下注射17β-雌二醇20μg·kg-1·d-1,共12周。动物处死时留取第3,4,5腰椎、血清标本,进行骨密度分析及血清IL-6水平测定。结果 O P、O E P、O E组的骨密度较手术组(OVX)明显增高(P<0.05),血清IL-6较OVX组明显下降(P<0.01)。结论 普萘洛尔能有效地预防OVX大鼠的骨丢失,同时降低血清IL-6水平。     

降钙素对OA大鼠关节软骨及软骨下骨的保护作用

[目的]研究降钙素(calcitonin,CT)对骨性关节炎(OA)模型大鼠关节软骨和软骨下骨的保护作用.[方法]采用前叉韧带切断(anterior cruciate ligament transection,ACLT)法制备大鼠OA模型,30只12周龄雌性SD大鼠,随机分成3组:假手术组(Sham, n=10)、手术组(ACLT+NS, n=10)和给药组(ACLT+CT, n=10).术后ACLT+CT组皮下注射鲑鱼降钙素10 IU·kg-1·d-1,连续12周;ACLT+NS组则给予等量生理盐水.术后12周处死动物取材,采用Mankin评分系统评分;用双能骨密度仪测量右侧股骨远端1/4骨密度和股骨内外侧髁软骨下骨的骨密度;右侧股骨髁脱钙后切片,行番红"O"染色和MMP-13免疫组化染色;右侧胫骨近端做硬组织切片,测量软骨下松质骨的骨组织形态计量学参数.[结果](1)Sham组和ACLT+CT组关节软骨Mankin评分结果显著低于ACLT+NS组.(2)ACLT+NS组软骨下骨骨密度、骨量(BV/TV,Tb.Th)均显著高于Sham组及ACLT+CT组.(3)ACLT+NS组关节软骨MMP-13表达显著高于Sham组及ACLT+CT.[结论]降钙素10 IU·kg-1·d-1皮下注射12周能够抑制OA大鼠关节软骨的退变,其作用机制可能与下调关节软骨中MMP-13的表达及抑制软骨下骨的增生硬化并改善其微观结构有关.     

高浓度酒精摄入对大鼠股骨骨质成分的影响

目的 观察长期摄入高浓度酒精对大鼠股骨代谢的影响.方法 清洁级SD雄性大鼠30只,随机分成3组:基础对照组、正常对照组(蒸馏水灌胃)、酒精给予组,酒精给予组给予50%(体积分数)乙醇,按4 g·kg-1·d-1)剂量灌胃,共60天.然后处死全部大鼠.股骨进行羟脯氨酸和骨钙、磷、铁、镁、锌元素的测定和比较.结果 与基础对照组和正常组相比,酒精组的各参数值都明显降低(P<0.05).结论 长期摄入酒精抑制骨矿化,并抑制骨基质形成,最终造成股骨骨量的丢失,诱发骨质疏松.     

中等强度跑台运动对去卵巢大鼠后肢骨骨矿物含量和骨密度的双重调节作用

目的 观察中等强度跑台运动对去卵巢大鼠后肢骨骨矿物含量(BMC)和骨密度(BMD)的影响.方法 将60只3月龄未经产雌性SD大鼠按体重随机分为假手术、去卵巢静止、去卵巢运动Ⅰ、去卵巢运动Ⅱ、去卵巢运动Ⅲ和去卵巢运动Ⅳ 6个组.各运动组经1周的跑台适应训练后,按实验设计分别进行为期14周的正式跑台训练.实验结束时,腹主动脉取血处死大鼠,双能χ-射线骨密度仪检测右侧游离股骨和胫骨的BMC和BMD.结果 ①与假手术组相比,去卵巢静止组股骨近端和远端以及胫骨近端BMC和BMD显著下降,但股骨中段以及胫骨中段和远端BMC和BMD无显著变化.②与去卵巢静止组相比,去卵巢运动Ⅰ组股骨近端和远端BMC显著增加,股骨中段以及胫骨3个部位BMC均无显著变化;去卵巢运动Ⅱ组和Ⅲ组股骨和胫骨3个部位BMC 均无显著变化;去卵巢运动Ⅳ组股骨3个部位BMC均无显著变化,而胫骨3个部位BMC均显著下降.③与去卵巢静止组相比,去卵巢运动Ⅰ组股骨近端和远端以及胫骨近端BMD 显著增加, 而股骨中段和胫骨中段和远端BMD无显著变化;去卵巢运动Ⅱ组和Ⅲ组股骨和胫骨任何部位BMD均没有显著变化;去卵巢运动Ⅳ组股骨3个部位BMD无显著变化,而胫骨3个部位BMD却显著下降.结论 较低中等强度跑台运动能减缓去卵巢大鼠股骨近端和远端骨矿物含量和骨密度的下降;而较高中等强度跑台运动却能加速去卵巢大鼠胫骨近端骨矿物含量和骨密度的下降.