核酸疫苗及其在传染病学中的应用

核酸疫苗是将编码某种能引起保护性免疫反应的抗原蛋白的基因片段 DNA重组到能在真核生物中表达的载体内 ,然后直接导入动物或人体内进行有效表达 ,进而诱导宿主产生对该抗原的各种免疫应答 ,以达到预防疾病的目的。其过程类似于病原微生物感染或减毒活疫苗的接种 ,但克服了减毒活疫苗可能反祖并导致人类疾病的缺点。该疫苗能在工程菌 (大肠杆菌 )内快速繁殖 ,提纯方法简便 ,可大大降低疫苗的成本。因此 ,核酸疫苗有可能成为预防传染性疾病的新型疫苗。核酸疫苗包括 DNA疫苗和 RNA疫苗。目前研究较多的是DNA疫苗 ,因其不需要任何化学载…     

核酸疫苗大规模质粒纯化研究进展

DNA疫苗又称基因疫苗,是指将编码某种蛋白质抗原的重组真核表达载体直接注射到动物体内,使外源基因在活体内表达,产生抗原激活机体的免疫反应,从而诱导产生特异性的体液免疫和细胞免疫应答,具有预防和治疗疾病的作用。核酸疫苗具有减毒疫苗的优点,同时基本不存在逆转的危险,因此被认为是继传统疫苗、基因工程亚单位疫苗之后的第三代疫苗。     

日本血吸虫病核酸疫苗研究进展

血吸虫病是严重危害人类健康的寄生虫病,寻找新的杀虫药物和开发研制有效抗血吸虫疫苗已成为刻不容缓的工作。随着现代分子生物学及免疫学的发展,血吸虫病疫苗已由减毒活疫苗、基因重组抗原疫苗发展到核酸疫苗等阶段[1-2]。疫苗是20世纪最重要的公共卫生成就之一[3]。传统的疫苗研究策略是模拟自然感染,成功的疫苗多依赖于中和抗体的产生;虽然减毒活疫苗的免疫保护作用效果显著,但缺乏足够的虫源,且多种抗原成分不一定全部产生保护力,甚至可能导致免疫性病变或免疫抑制。基因重组抗原疫苗应用安全,但只能引起体液免疫,且蛋白的提取纯化步骤…     

重组寄生虫-BCG疫苗研究进展

卡介苗 (Bacillecalmette Guerin ;BCG)是一种活的减毒结核菌株 ,主要用于结核病的预防。Cirillo等氏[1] 认为BCG是一种理想的疫苗载体 ,Matsuo等氏[2 ] 在BCG中成功构建了外源抗原分泌系统 ,这为发展BCG成为多价疫苗载体打下了坚实的基础。为了将外源DNA有效引入分支杆菌 ,需构建大肠杆菌 分支杆菌穿梭表达载体。这种穿梭载体让外源DNA在大肠杆菌中操作 ,然后转化分支杆菌 ,通过自动复制或同源整合与基因组进行基因交换 ,从而在分支杆菌中稳定表达外源基因。据报道现有重组BCG疫苗有表达肺炎球菌表面蛋白A的rBCG PspA疫苗 ,…     

寄生虫的核酸疫苗研究

所谓核酸疫苗，就是把外源基因克隆到真核质粒表达载体上，然后将重组的质粒ＤＮＡ直接注射到动物体内，使外源基因在活体内表达，产生的抗原激活机体的免疫系统，引发免疫反应。核酸疫苗具有突出的优点：（１）能诱导全方位的免疫应答，优于亚单位疫苗和灭活疫苗，既可产生细胞免疫又可诱导体液免疫; (2) 安全性, 没有减毒疫苗和灭活疫苗可能引起的致病作用; (3) 能表达经修饰的天然抗原, 由于抗原在真核细胞内表达, 能形成正确的折叠和进行翻译后修饰; (4) 长效性, 质粒DNA 可在细胞内存在两个月, 且单次免疫即可获得免疫保护作用达两年; (5) 能构建成多价疫苗并进行多级免疫; (6) 生产简便、成本低廉、稳定性好且贮运方便。所以, 核酸疫苗已在细菌、病毒、寄生虫等感染性疾病和肿瘤的预防和治疗中显示出巨大的潜力[1 ] , 部分感染性疾病的核酸疫苗已进入临床实验阶段[2 ]。核酸疫苗作为继灭活疫苗、减毒疫苗和基因工程亚单位疫苗之后的第三代疫苗, 正在成为一个新的研究热点。本文将重点介绍核酸疫苗的作用机理、研究的基本策略及其在寄生虫病防治中的应用。     

旋毛虫病疫苗

综述了旋毛虫病减毒活疫苗、天然抗原 (成虫、新生幼虫和肌幼虫粗抗原、ES抗原及纯化抗原 )疫苗、合成肽疫苗、重组抗原疫苗、核酸疫苗及其诱导的保护性免疫应答和预防接种效果 ,讨论了影响疫苗免疫效果的因素 ,如免疫佐剂、接种途径和接种剂量等。     

核酸疫苗研究状况及其在寄生虫病方面的应用

目前用于寄生虫病预防和治疗的疫苗种类很多。在血吸虫病、弓形虫病、疟疾、利什曼病等病种方面,已有多种疫苗,如减毒活疫苗、重组抗原疫苗、合成肽疫苗、抗独特型疫苗、基因工程重组疫苗和核酸疫苗等。不论疫苗的组成如何,设计新疫苗应致力于充分表达免疫原性和诱发免疫记忆的能力;进一步改善抗原决定簇的质量、密度和位置,以诱导预防疾病所需要的免疫应答。在设计新疫苗的各种方法中,很难预测最佳方法。用DNA重组技术或化学合成得到的亚单位疫苗的大小有限,限制了它们表达免疫原性的能力,选用几种对T、B细胞有适当活性的肽段结合起来,可…     

旋毛虫病疫苗

综述了旋毛虫病减毒活疫苗、天然抗原(成虫、新生幼虫和肌幼虫粗抗原、ES抗原及纯化抗原)疫苗、合成肽疫苗、重组抗原疫苗、核酸疫苗及其诱导的保护性免疫应答和预防接种效果，讨论了影响疫苗免疫效果的因素，如免疫佐剂、接种途径和接种剂量等。     

基因免疫

又称DNA免疫、核酸免疫、遗传免疫,是近几年快速发展的一种新型免疫方法,是将含编码外源蛋白基因的质粒DNA直接导入动物组织,外源基因于体细胞中表达后,表达产物被提呈,与主要组织相容性复合物(MHC)结合,刺激机体产生相应的抗体和细胞毒性T淋巴细胞(CTLS),分别介导体液免疫和细胞免疫应答。这种外源基因可表达相应的抗原,具有疫苗的功能,又称为DNA疫苗(DNA Vaccine)或核酸疫苗(nucleic acid vaccine),由于不儒任何化学载体,故又称裸DNA疫苗(naked DNA vaccine)。基因疫苗可广泛应用于疟疾、流感、艾滋     

人兽传染病核酸疫苗研究进展

核酸疫苗是将编码抗原蛋白的外源基因插入一定的核酸载体后直接接种机体，使之在体内表达抗原蛋白，从而激发机体免疫应答的一种新型疫苗型式。按照核酸载体类型的不同，核酸疫苗可分为RNA疫苗“‘和DNA疫苗‘”两种。就目前的研究来看，大多数学者在设计核酸疫苗时采用的是以质粒为载体的I）NA疫苗技术，即将编码抗原蛋白的目的基因，通过基因重组技术，插入哺乳动物细胞表达质粒载体后构建而成‘’－”。需要指出的是，由于核酸疫苗技术是在1990年被W。lff等‘”偶然发现后应用不久的一门新型技术，故而描述此项技术的名称似无最后定…     

血吸虫病DNA疫苗研究进展

血吸虫病疫苗研究已有 6 0多年的历史 ,大体上经历了死疫苗、减毒活疫苗和分子疫苗这几个研究阶段。死疫苗的抗感染效果很差 ,几乎不能诱导机体产生保护性免疫力 ;减毒活疫苗虽能产生明显的保护性免疫力 ,但存在抗原大批量供应及潜在致病性等缺点 ,其实际应用受到一定限制 ;分子疫苗比较完全 ,是一种很好的血吸虫病疫苗 ,但它要经过基因克隆、表达和蛋白纯化等复杂过程 ,成本较高 ,因此尚需研制新型血吸虫病疫苗。Wolff等 [1 ]将编码功能蛋白的质粒 DNA肌肉注射小鼠 ,发现质粒 DNA可在局部肌肉组织表达。这种 DNA既是载体 ,又是抗原的来…     

癌胚抗原多聚核酸疫苗的研究进展

多聚核酸疫苗(Polynucleotide vaccine),多被称为核酸疫苗(nucleic acid vaccine),包括DNA 疫苗和 RNA 疫苗二种,是九十年代兴起的一种以核酸为基础的新的免疫接种技术。由于该疫苗既能激发与重组活疫苗相似的免疫反应,又具有亚单位疫苗的安全性,且具有制备简     

利什曼原虫核酸疫苗的研究现状

核酸疫苗(ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＶａｃｃｉｎｅｓ)包括ＤＮＡ疫苗和ＲＮＡ疫苗,但目前研究最多的是ＤＮＡ疫苗(ＤＮＡｖａｃｃｉｎｅ)。ＤＮＡ疫苗是指将编码某种抗原蛋白的外源基因克隆到真核质粒表达载体上,然后将重组的质粒ＤＮＡ直接注射到动物体内,从而通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答。核酸疫苗又称为基因疫苗或裸ＤＮＡ疫苗,这种免疫称为核酸免疫、基因免疫、ＤＮＡ介导的免疫及遗传免疫等。1　核酸疫苗的作用机理核酸疫苗的免疫学机理尚不完全清楚,目前初步研究认为编码目的基因的质粒Ｄ…     

核酸疫苗的研究现状和临床应用前景

核酸疫苗又称基因疫苗,是近年来发展起来的1种新型疫苗,该免疫方法是指插入有目的基因的真核表达质粒DNA,将其直接注入体内,质粒DNA可在体内表达目的基因所编码的蛋白,该蛋白可作为抗原诱导机体产生特异性的体液和细胞免疫反应,发挥免疫保护作用,特别是可诱导产生较强的CTL反应。核酸疫苗可望用于预防和治疗某些慢性病毒如HBV、     

以减毒沙门氏菌为载体的疫苗研究

减毒沙门氏菌可侵入宿主的淋巴细胞中,表达异源抗原,激发宿主的体液免疫反应和细胞免疫反应,因已减毒,最终可被宿主消除。以减毒沙门氏菌为载体的疫苗具有抗原不需提纯、可口服等优点,已引起广泛重视,同时在核酸疫苗的研制中具有新的应用前景。     

乙型脑炎病毒膜蛋白B区多肽抗原的表达、纯化及血清学评价

目的在原核表达系统中对乙型脑炎病毒包膜糖蛋白(E蛋白)的B区多肽抗原进行高效表达、纯化及血清学评价。方法利用PCR技术从乙脑减毒活疫苗中扩增编码B区的DNA片段,酶切消化后连接到表达载体pET22b上,用此连接产物转化大肠埃希菌BL21(DE3)并表达B区多肽抗原,表达产物经液相层析纯化;用乙脑病人血清对纯化后的B区多肽抗原进行评价。结果重组质粒pET22b-JEB经双酶切,其插入的外源基因片段为372 bp,与预期DNA片段大小一致。将纯化前与纯化后的蛋白作SDS-PAGE电泳,均可见一条约16kD的外源基因蛋白带,与计算的相对分子质量相符。经WB和ELISA血清学评价,表明重组B区多肽抗原具有较高的灵敏性及特异性。结论成功构建了表达载体pET22b-JEB,在原核系统中表达的B区多肽抗原具有良好的血清学检测价值。     

HBV和HCV核酸疫苗的临床应用前景

核酸疫苗是指将含有编码抗原蛋白的DNA序列及必要的表达调控元件的重组质粒DNA直接导入机体组织，通过宿主细胞的转译系统表达目的抗原，诱导机体发生免疫应答的一种新型疫苗。近年来核酸疫苗的研究发展迅速，在乙型肝炎和丙型肝炎防治方面也取得了令人瞩目的成绩。1. HBV、HCV核酸疫苗的目的基因和载体：HBV有多种抗原蛋白编码基因。包括编码包膜蛋白的S基因、preS1基因、preS2基因，编码HBcAg和HBeAg的Ｃ基因等。包膜蛋白能诱导保护性抗体；HBcAg是CTL的靶抗原，其诱发的CTL应答有利于清除HBV，而HBeAg诱导抗HBe产生并减…     

以减毒沙门氏菌为载体的疫苗研究

减毒沙门氏菌可侵入宿主的淋巴细胞中，表达异源抗原，激发宿主的体液免疫反应和细胞免疫反应，因已减毒，最终可被宿主消除。以减毒沙门氏菌为载体的疫苗具有抗原不需提纯，可口服等优点，已引起广泛重视，同时在核酸疫苗的研制中具有新的应用前景。     

鼠伤寒沙门氏菌疫苗株产生的重组多房棘球绦虫抗原诱导小鼠和犬的体液和细胞免疫应答

作者用DNA重组技术将多房棘球绦虫特异性抗原的基因片段转入减毒活鼠伤寒沙门氏菌疫苗LT2MIC株中复制表达,以研制能诱发中间宿主和终宿主保护性免疫应答的多价疫苗。将携带多房棘球绦虫基因片段(产生种特异性抗原Ⅱ/3—10)的重组pVM II/3-10质粒,转入鼠伤寒沙门氏菌疫苗LT2MIC株虫,作为重组疫苗;将不含插入基因的pUR278质粒转入鼠伤寒沙门氏菌疫苗LT2MIC     

免疫刺激序列与DNA疫苗

DNA疫苗是将保护性抗原的编码基因克隆到真核质粒表达载体上 ,重组质粒接种后编码基因在活体内表达 ,形成抗原诱导机体产生特异性免疫应答。这一新的疫苗形式较之传统疫苗具有如下优势 :①目的抗原体内表达、修饰 ,以天然构象递呈给宿主免疫系统 ;②可将编码不同抗原的基因构建在同一个质粒中 ,使接种一种疫苗预防多种疾病成为可能 ;③抗原可以经主要组织相容性复合体 (MHC)如MHC Ⅰ类、MHC Ⅱ类分子途径递呈 ,诱导产生体液和细胞介导的免疫应答。在多种疾病的动物模型上证实DNA疫苗诱导的免疫反应具有一定的保护性 ,在感染性疾病、肿…