动物源性细菌抗生素耐药判定标准的研究现状

抗生素在解决了许多细菌感染性疾病治疗问题的同时，其广泛不合理的应用以及细菌自身适应性的改变也加速了细菌耐药性的产生，对全球经济和公共健康带来严重危害。为了能够很好地监测细菌耐药性的变化和有效的指导临床用药，控制细菌的耐药性，建立细菌的耐药判定标准成为了一项具有实践意义的重要任务。建立耐药判定标准需要收集大量的信息，包括野生型细菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)分布，体外药效学和体内药动学的数据以及临床治疗相关的数据，主要包括野生型临界值、药效学临界值和临床临界值3个方面。本文综述了动物源性耐药判定标准的研究进展，总结了目前应用最广泛的两个折点制定组织美国临床实验室标准化协会(CLSI)和欧洲药敏实验标准化委员会(EUCAST)建立耐药判定标准的方法，为建立符合我国耐药现状的耐药判定标准提供理论基础。     

氨基糖苷类抗生素耐药菌的用药

1.耐药性的生物化学机制一修饰酶链霉素、卡那霉素、艮他霉素等氨基糖苷类抗生素的耐药性遗传因子存在于细菌的染色体和质粒中,由人体分离的耐药菌中,特别是对多种抗生素耐药菌,大多是质粒性耐药菌。由于转位子的发现,两者的区别不是绝对明显的。氨基糖苷类抗生素耐药性遗传因子的作用有三个,(1)产生氨基糖苷类抗生素的修饰酶,(2)使作用部位核蛋白体产生耐药作用,(3)发生输送系统的变化。三种类型的耐药性机构或单独或同时存在,并且相互影响。临床分离的葡萄球菌、肠道细菌、绿脓杆菌等耐药菌的耐药性是质粒性的,大都可产生氨基糖苷类抗生素修饰酶。     

氨基糖苷类抗生素的耐药机制及控制耐药性的策略

氨基糖苷类抗生素是高效，广谱抗生素，随着临床的广泛应用，细菌的氨基糖苷耐药性日趋严重，这在很大程度上降低了其临床应用的潜力，导致细菌氨基糖苷耐药性的因素包括；核糖体结合位点的变化；细菌对药物摄入及积累的降低，细菌产生使抗生素失活的钝化酶等，尤其对导致耐药性的最主要因素-氨基糖苷类抗生素钝化酶进行了较详细的论述，并根据耐药机制，从氨基糖苷类抗生素的结构改造，印化酶抑制剂及合理的临床用药等方面讨论了控制耐药性的策略。     

兽用抗菌药耐药判定标准的研究进展

兽用抗菌药因其可以有效地预防和治疗动物疾病而被广泛使用，造成了严重的细菌耐药。目前，兽药抗菌药的耐药判定主要参考美国临床和实验室标准协会(CLSI)和欧盟药敏试验标准委员会(EUCAST)公布的标准，但数据并不完整。我国近些年也开始建立适合自己国情的兽用抗菌药的耐药判定标准，但成果并不多。因此，急需建立和完善兽用抗菌药的耐药判定标准，以便于监测兽用抗菌药耐药性和指导临床准确使用兽用抗菌药。本文主要综述了CLSI和EUCAST两大组织已经公布的部分兽用抗菌药的耐药判定标准，以及近年来国内外兽用抗菌药耐药判定标准的研究进展，以期为兽用抗菌药耐药判定标准的发展提供理论参考。     

山东泰安地区致病性猪沙门菌氨基糖苷类耐药基因aph（3′）-Ⅱa的PCR扩增与序列分析

目的研究沙门菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性并分析其耐药基因aph(3′)-Ⅱa的序列。方法对19株致病性猪沙门菌的氨基糖苷类抗生素耐药性进行检测;对其质粒上的aph(3′)-Ⅱa基因进行PCR扩增,选取其中任意一株(WWS171)的PCR阳性产物进行耐药基因aph(3′)-Ⅱa的序列分析。结果沙门菌对氨基糖苷类抗生素产生了广泛的耐药性,耐药率达100%;耐药基因aph(3′)-Ⅱa经PCR扩增后在13株沙门菌的质粒上出现582bp的特异性产物,与药敏试验结果的阳性符合率为68.4%,具有较高的检出率;与GenBank上发表的AF078924.1、AF188331.1、AY333434.1、AY598820.1、DQ842000.1的耐药基因aph(3′)-Ⅱa的序列完全相同。结论aph(3′)-Ⅱa的PCR检测对氨基糖苷类抗生素耐药性具有较高的特异性,aph(3′)-Ⅱa基因是决定本试验中临床分离株氨基糖苷类抗生素耐药的主要基因,为氨基糖苷类抗生素耐药性的分子流行病学监测提供了依据。     

应对氨基糖苷类抗生素耐药的策略

氨基糖苷类抗生素在治疗感染性疾病中起着重要作用,尤其是革兰阴性菌引起的严重感染,但是随着临床上耐药菌株的出现较大地限制了此类抗生素的应用,因此,在对细菌耐药机制研究的基础上如何控制细菌的耐药性成为一项迫切需要解决的任务。针对细菌对氨基糖苷类抗生素产生抗性的机制不同,目前采用的措施主要有3种：1）对原有氨基糖苷类抗生素进行改造;2）开发氨基糖苷类抗生素修饰酶抑制剂;3）设计双功能氨基糖苷类抗生素。     

新型氨基糖苷类抗生素合成的最新进展

氨基糖苷类抗生素是治疗感染性疾病的一类重要药物.但是,随着细菌对氨基糖苷类耐药性不断增加,大大限制了其临床疗效,从而激起了人们对细菌耐药机制的研究和开发新的氨基糖苷类抗生素的兴趣.本文主要对近年来新氨基糖苷类衍生物的设计及合成的研究进展进行综述.     

山东泰安地区致病性猪沙门菌氨基糖苷类耐药基因aph(3'')-Ⅱa的PCR扩增与序列分析

目的 研究沙门菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性并分析其耐药基因aph(3')-Ⅱa的序列.方法 对19株致病性猪沙门菌的氨基糖苷类抗生素耐药性进行检测;对其质粒上的aph(3')-Ⅱa基因进行PCR扩增.选取其中任意一株(WWS171)的PCR阳性产物进行耐药基因aph(3')-Ⅱa的序列分析.结果 沙门菌对氨基糖苷类抗生素产生了广泛的耐药性,耐药率达100%;耐药基因aph(3')-Ⅱa经PCR扩增后在13株沙门菌的质粒上出现582bp的特异性产物,与药敏试验结果的阳性符合率为68.4%,具有较高的检出率;与GenBank上发表的AF078924.1、AF188331.1、AY333434.1、AY598820.1、DQ842000.1的耐药基因aph(3')-Ⅱa的序列完全相同.结论 aph(3')-Ⅱa的PCR检测对氨基糖苷类抗生素耐药性具有较高的特异性.aph(3')-Ⅱa基因是决定本试验中Il缶床分离株氨基糖苷类抗生素耐药的主要基因,为氨基糖苷类抗生素耐药性的分子流行病学监测提供了依据.     

肠外致病性大肠埃希菌多重耐药性及氨基糖苷类耐药基因分析

目的 检测临床分离猪、鸡源肠外致病性大肠埃希菌的耐药性,分析其携带的氨基糖苷类耐药基因,以指导临床用药,探究细菌对氨基糖苷类抗生素的抗性机制.方法 应用K-B法测定分离株对19种常用抗生素的耐药情况.用双纸片法检测产ESBLs菌株并进行基因分型.用PCR和测序方法检测氨基精苷类抗性基因aadA1,aadA2,strA-strB,aadB,aacC2,aac(3)-Ⅳ,aph(3')-Ⅰa,aph(3')-Ⅱa.结果 临床分离株表现多重耐药性,对头孢菌素类药物和阿米卡星的敏感性最高(63%～97%),93%的菌株耐药谱值≥10.共检测到两株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株,基因型属TEM-1+CTX-M-14.耐药菌株与相应的氨基糖苷类耐药基因符合率高(≥74%)且序列保守.结论 猪、鸡源肠外致病性大肠埃希菌呈多重耐药性,其对氨基糖苷类抗生素的抗性机制以产生针对该类抗生素的修饰酶为主.     

氨基糖苷-2″-O-腺苷酰转移酶的抑制剂——7-羟基(艹卓)酚酮

众所周知,临床上氨基糖苷类抗生素往往因耐药菌的酶促修饰而失效。能够修饰氨基糖苷类的酶可分为三类:N-乙酰转移酶、O-腺苷酰转移酶和 O-磷酸转移酶。然而,只有一种修饰酶存在不一定会产生对氨基糖苷类的耐药性,这是因为修饰速率也是产生耐药性的一个重要决定因素。已知有这样一些例子,即某些细菌含有能够修饰某种氨基     

Comparison of antimicrobial pharmacokinetic/pharmacodynamic breakpoints with EUCAST and CLSI clinical breakpoints for Gram-positive bacteria

This study compared the susceptibility breakpoints based on pharmacokinetic/pharmacodynamic (PK/PD) models and Monte Carlo simulation with those defined by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) and the European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) for antibiotics used for the treatment of infections caused by Gram-positive bacteria. A secondary objective was to evaluate the probability of achieving the PK/PD target associated with the success of antimicrobial therapy. A 10000-subject Monte Carlo simulation was executed to evaluate 13 antimicrobials (47 intravenous dosing regimens). Susceptibility data were extracted from the British Society for Antimicrobial Chemotherapy database for bacteraemia isolates. The probability of target attainment and the cumulative fraction of response (CFR) were calculated. No antibiotic was predicted to be effective (CFR≥90%) against all microorganisms. The PK/PD susceptibility breakpoints were also estimated and were compared with CLSI and EUCAST breakpoints. The percentages of strains affected by breakpoint discrepancies were calculated. In the case of β-lactams, breakpoint discrepancies affected <15% of strains. However, higher differences were detected for low doses of vancomycin, daptomycin and linezolid, with PK/PD breakpoints being lower than those defined by the CLSI and EUCAST. If this occurs, an isolate will be considered susceptible based on CLSI and EUCAST breakpoints although the PK/PD analysis predicts failure, which may explain treatment failures reported in the literature. This study reinforces the idea of considering not only the antimicrobial activity but also the dosing regimen to increase the probability of clinical success of an antimicrobial treatment.     

In vivo development of antimicrobial resistance in Pseudomonas aeruginosa strains isolated from the lower respiratory tract of Intensive Care Unit patients with nosocomial pneumonia and receiving antipseudomonal therapy

Pseudomonas aeruginosa causes severe nosocomial pneumonia in Intensive Care Unit (ICU) patients, with an increased prevalence of multiresistant strains. We examined the impact of the use of antipseudomonal antibiotic(s) on the susceptibility of P. aeruginosa isolated from ICU patients with clinically suspected hospital-acquired pneumonia collected in five teaching hospitals (110 non-duplicate initial isolates; 62 clonal pairs of initial and last isolates during treatment). Minimum inhibitory concentrations (MICs) were determined for amikacin, ciprofloxacin, meropenem, piperacillin/tazobactam (TZP), cefepime and ceftazidime (used in therapy) as well as five reporter antibiotics (aztreonam, colistin, gentamicin, piperacillin and ticarcillin) using Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) methodology. Susceptibility was assessed according to European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) and CLSI breakpoints. Resistance rates prior to treatment exceeded 25% for cefepime, ceftazidime, piperacillin, ticarcillin and aztreonam (EUCAST and CLSI) and for gentamicin, TZP and colistin (EUCAST only). The highest rates of cross-resistance were noted for ceftazidime and cefepime and the lowest rate for amikacin. Mean MIC values were systematically higher in isolates from patients previously exposed (1 month) to the corresponding antibiotic. For clonal pairs, a systematic increase in MIC between initial and last isolates (significant for amikacin, cefepime, meropenem and TZP) was noted. There was a significant correlation between the use of antibiotics (adjusted for respective proportional use of each drug) and loss of susceptibility at the population level when using EUCAST breakpoints. The high level of resistance of P. aeruginosa in ICU patients with nosocomial pneumonia as well as its further increase during treatment severely narrows the already limited therapeutic options. Further observational studies and the development of early diagnosis for resistant isolates are warranted.     

Revisiting Beta-lactams - PK/PD improves dosing of old antibiotics

Pre-clinical pharmacokinetic-pharmacodynamic assessments indicate Beta-lactam antibiotics have time-dependent killing, variable persistent antibiotic effects and that free drug T>MIC is the dominant pharmacodynamic index. Prolonged or continuous infusion therapy has improved microbiological responses in pathogens with MICs at or 2-4 fold higher than existing EUCAST clinical breakpoints in pre-clinical studies. Human population pharmacokinetic modelling combined with Monte Carlo Simulation indicates improved pharmacodynamic target attainment rates and hence predicts improved clinical responses for those pathogens with raised MICs. However, the majority of human clinical trials comparing prolonged or continuous infusion to intermittent injection have failed to show superior clinical cures and for the most part microbiological successes. The exception being in various subgroup analyses. Future clinical trials need to focus on defining the T>MIC sizes associated with clinical or microbiological cure in man, on those subgroups of patients where continuous, or prolonged infusion, is likely to be of greatest benefit, seek to reduce pharmacokinetic variability by the use of therapeutic drug monitoring and include measurement of the risks of emergence of resistance in target pathogens At present, the clinical evidence base for prolonged or continuous infusion therapy is insufficiently strong to support widespread use.     

氨基糖苷类抗生素的发展现状与机遇

近年来，细菌耐药问题引起各国和全社会的高度关注，氨基糖苷类抗生素作为临床使用的重要抗菌药物再度成为药物研究及临床应用关注的焦点。本文旨在探讨氨基糖苷类抗生素创新研究与发展的机遇。通过文献调研和PDB药物综合数据库检索的方法对氨基糖苷类抗生素的临床价值、安全性等方面进行综述，综合分析了近年来该类药物研发与市场现状，强调了以Plazomicin为代表的新型氨基糖苷类抗生素的良好抗菌活性和低耐药性。氨基糖苷类抗生素的临床价值正在被重新发掘。     

氨基糖苷类抗生素新型药物递送系统的临床应用与研发进展

近年来，为了避免氨基糖苷类抗生素的全身给药方式存在较强的毒副作用，氨基糖苷类抗生素的新型药物递送系统正有望成为临床应用的新手段，其研发已为目前抗生素领域的热门研究课题。本文主要综述了氨基糖苷类抗生素各类新剂型在临床的应用研究，以期为日益增长的细菌耐药性问题和氨基糖苷类抗生素临床新用途提供解决思路。     

泌尿系感染病原菌的分布及耐药性分析

目的探讨泌尿系感染病原菌的分布及耐药性,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法对2013年1月~2014年12月送检的尿标本进行病原菌培养、分离及鉴定,用纸片扩散法、E-test法或全自动细菌分析仪测定细菌对不同抗菌药物的敏感性,采用2013年版CLSI标准判读结果。结果共分离出4 027株病原菌,其中革兰阴性菌占66.4%,革兰阳性菌占25.7%,真菌占7.9%。检出率最高的前4位病原菌依次为大肠埃希菌、屎肠球菌、肺炎克雷伯菌和粪肠球菌。大肠埃希菌对亚胺培南和美罗培南最为敏感,对青霉素类耐药性最强。肠球菌属的整体耐药性十分严重,屎肠球菌比粪肠球菌的耐药率高,二者对万古霉素和利奈唑胺较为敏感。结论泌尿系感染病原菌对抗菌药物已产生了一定的耐药性,定期监测尿路感染病原菌的分布及耐药性,对指导临床合理用药具有重要意义。     

产ESBLs菌株的流行现状及耐药性分析

目的了解产ESBLs菌株的流行现状,依照新版CLSI文件指导原则对产ESBLs菌株的耐药性进行分析,为临床治疗产ESBLs菌株感染提供依据。方法收集笔者所在医院2010年8月～2011年12月临床标本中分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用DL-96细菌测定系统进行检测分析。结果大肠埃希菌ESBLs检出率为64.8%,肺炎克雷伯菌ESBLs检出率为31.6%;在药敏方面,依照新版CLSI文件指导原则,产ESBLs菌株对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南的敏感结果不再报为耐药;产ESBLs菌株对碳青霉烯类仍具有极高的敏感率;对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢西丁、阿米卡星、美满霉素的敏感性较好;对氟喹诺酮类、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、磺胺甲恶唑/甲氧苄啶、庆大霉素、四环素的敏感性差。结论抗菌药物的不合理应用,使产ESBLs菌株大量出现,而新版CLSI文件指导原则为临床治疗产ESBLs菌株感染,使用敏感的头孢菌素和氨曲南提供了依据,临床上应提高感染性疾病标本的送检率,依据药敏结果,科学合理使用抗生素。     

成人尿标本临床分离菌的分布及耐药性监测

目的：研究成人尿标本临床分离菌的分布及其耐药性，为临床使用抗菌药物提供依据。方法：收集某院2016年1月-2018年12月尿培养阳性菌株，采用VITEK 2-Compact仪器法或纸片扩散法测定分离菌的药物敏感性，参照CLSI 2018版折点判读结果，用WHONET5.6软件统计分析。结果：共分离出2 164株病原菌，革兰阴性杆菌占72.13%，革兰阳性球菌占23.01%，真菌占4.85%；主要为大肠埃希菌（50.05%）和肠球菌（14.33%）。3年间大肠埃希菌对喹诺酮类、碳青霉烯类耐药率有下降趋势，对头孢类耐药率无明显变化；肠球菌对喹诺酮类耐药率较高且无明显变化趋势，对青霉素类、高浓度庆大霉素耐药率有较大下降。革兰阴性杆菌对亚胺培南、美洛培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦较敏感。屎肠球菌对所测试抗菌药耐药率显著高于其他肠球菌，未发现耐万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺革兰阳性球菌。结论：尿路感染病原菌分布广泛，主要为肠杆菌科细菌和肠球菌。及时送检尿标本做病原学检查，根据药敏结果、严格按照抗菌药物临床应用分级管理办法使用抗菌药，可以减缓或降低细菌耐药性的产生。