前列腺癌患者外周血PSA mRNA的意义

目的 探讨前列腺特异抗原（PSA） mRNA在前列腺癌（PCa)患者外周血表达的意义。方法 运用巢式RT－PCR检测36例PCa患者,28例良性前列腺组织增生（BPH）患者和15例健康志愿者外周血。结果 BPH患者和志愿者外周血PSA mRNA均阴性,36例PCa外周血PSA mRNA阳性率38．9％（14／36）。PSA mRNA表达阳性率随肿瘤分期进展而增高,各期阳性率有显著差异（P＜0．05）。结论 PSA mRNA特异表达于PCa外周血,可用作PCa微转移的指标。     

前列腺组织Galanin及GalR2表达及意义

目的探讨Galanin及Galanin 2型受体（GalR2）在前列腺良恶性组织中的表达及其临床意义。方法收集50例前列腺增生（BPH）、50例未转移前列腺癌（PCa）及30例发生骨转移前列腺癌（BM）标本,应用免疫组织化学法检测Galanin及GalR2的表达,并进行临床病理相关性分析。结果 BPH组、PCa组和BM组Galanin阳性表达分别为9、34、25例;GalR2阳性表达分别为40、7、2例。PCa组及BM组Galanin的阳性表达率显著高于BPH组（χ2=25.50、32.75,P〈0.01）,而PCa组与BM组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;BPH组GalR2的阳性表达率显著高于PCa组及BM组（χ2=43.72、40.43,P〈0.01）,而PCa组与BM组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。在PCa组及BM组内,Galanin与GalR2的表达均呈显著负相关（rs=-0.55、-0.77,P〈0.01）。结论 Galanin在前列腺癌组织有较高的阳性表达;GalR2在BPH组织有较高的阳性表达,而在恶性肿瘤组织中低表达。Galanin在前列腺癌组织可能通过与GalR2之外的两种受体相结合从而发挥生物学作用;Galanin与GalR2蛋白的联合检测对前列腺良恶性病变的诊断具有较好的临床意义。     

CD146、血管内皮生长因子与前列腺癌血管生成关系的研究

目的探讨CD146、血管内皮生长因子（VEGF）在前列腺癌（PCa）中的表达及与肿瘤血管生成的关系。方法采用免疫组织化学法检测39例PCa和20例良性前列腺增生（BPH）组织中CD146、VEGF的表达情况,并检测CD34标记的肿瘤微血管密度（MVD）。结果 PCa组织中CD146的阳性表达率（82.05%）明显高于BPH组织（15.00%,P〈0.05）,其表达与PCa的病理分级无关（P〉0.05）,与临床分期有关（P〈0.05）。PCa组织中VEGF的阳性表达率（74.36%）明显高于BPH组织（10.00%,P〈0.05）,其表达与PCa的病理分级和临床分期有关（P〈0.05）。PCa中MVD（37.41±7.95）显著高于BPH（17.62±2.40,P〈0.05）,MVD与病理分级和临床分期显著相关（P〈0.05）。PCa中CD146阳性组及VEGF阳性组MVD（39.73±6.68、40.79±6.03）均高于CD146阴性组及VEGF阴性组（26.83±3.24、27.62±3.24,均P〈0.05）,CD146与VEGF的表达呈正相关（r=0.643,P〈0.05）。结论 CD146、VEGF在PCa中高表达并且与肿瘤血管生成密切相关。CD146、VEGF表达和微血管的形成在PCa的发生、浸润和转移中起重要作用。     

胚胎干细胞基因Nanog，Oct-4基因在前列腺癌中的表达及意义

【目的】探讨Nanog基因和Oct-4基因在良性前列腺增生（BPH）,前列腺上皮内瘤变（PIN）及前列腺癌（PCa）中的表达及其在PCa发生发展中的作用。【方法】用免疫组织化学法检测BPH（n=30）、PIN（n=8）厦、PCa（n=94）中胚胎干细胞相关基因Nanog,Oct-4的表达水平,并比较三者之间的差异。【结果】Nanog基因和Oct-4基因在BPH和PIN组织中无明显差异（P〉0．05）。PCa组织中的Nanog基因和Oct-4基因明显高于BPH及PIN（P〈0．05）。随着PCa组织Gleason评分的增加,肿瘤中干细胞相关基因Nanog,Oct-4的表达也明显增多（P〈0．05）。【结论】Nanog,Oct-4基因在前列腺癌中均有表达,其表达水平与肿瘤的组织学分级相关。     

VEGF和KDR在前列腺癌和良性前列腺增生组织中的表达

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及其受体激酶插入嵌合受体（kinase insert domain-containing receptor,KDR）在前列腺癌（prostate cancer,PCa）发生中的作用。方法对26例PCa和30例良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia,BPH）标本进行石蜡包埋免疫组化染色,分析VEGF和KDR在PCa和BPH组织中的表达情况。结果 VEGF和KDR在PCa组织中的表达明显高于BPH组织（P〈0.01）,在PCa组织中阳性部位主要位于PCa细胞和血管内皮细胞,在BPH组织中主要表达于腺上皮细胞和血管内皮细胞。结论 VEGF和KDR与PCa的发生可能有关,以VEGF和KDR为共同靶点有望成为PCa新的治疗途径。     

HSP27表达与前列腺癌关系研究

目的 研究热休克蛋白27（HSP27）与前列腺癌的关系.方法 采用免疫组化检测75例前列腺癌和30例前列腺增生组织中HSP27的表达,分析其表达与前列腺癌分化、临床分期及转移之间的关系.结果 HSP27阳性率在良性前列腺增生中是23.3%（7/30）,在前列腺癌中是65.3%（49/75）,两者之间的表达有显著性差异（P＜0.05）;HSP27阳性率在Gleason评分为2～4、5～7、8～10分中分别是40.0%（10/25）、68.8%（22/32）、94.4%（17/18）,HSP27阳性率在不同Gleason评分之间有显著性差异（P＆lt;0.05）;HSP27表达还与临床TNM分期、淋巴结和远处转移有关（P＜0.05）.淋巴结转移性前列腺癌中HSP27阳性率为85.7%（24/28）,高于无淋巴转移的51.1% （24/47）;HSP27表达阳性率在有远处转移的前列腺癌中为93.8%（15/16）,高于无淋巴转移的57.6% （34/59）.结论 HSP27表达与前列腺癌的分化、转移有关,可作为前列腺癌靶向治疗的分子靶标.     

CD44s和CD15在前列腺癌组织中的表达及其意义

目的；探讨细胞黏附分子CD44s和CD15在前列腺癌（Pca）组织中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化SP法检测42例前列腺癌（PCa）组织和15例良性前列腺增生（BPH）组织中CD44s和CD15的表达，并用图像分析系统测量CD44s和CD15的平均光密度值。结果：（1）PCa组织中CD44s的表达明显低于BPH组织（P〈0．01），CD44s在PCa组织中的表达随着Gleason分级、临床分期的增加而明显降低（P〈O．01）转移组中CD44。表达明显低于无转移组（P〈0．01）。（2）PCa组织中CD15的表达显著高于BPH（P〈0．01），CD15在PCa组织中的表达随着Glcason分级、临床分期的增加而增强（P〈0.001）;转移组中CD15的表达显著高于无转移组（P〈0．001）。（3）在PCa组织中CD44s与CD15表达呈负相关（r=-0．785，P〈0．001）．结论：CD44s和CD15的异常表达在PCa的恶性进展过程中起重要作用，将两者结合分析，可更准确判断肿瘤恶性程度、转移和预后。     

前列腺癌组织BMP2表达及其与DIF-1的相关性

目的探讨骨形态发生蛋白2（BMP2）在前列腺癌（PCa）及前列腺增生（BPH）组织中的表达及其与细胞分化的关系,并进一步分析其与分化抑制因子1（DIF-1）的相关性。方法采用免疫组化SP法,分别检测PCa和BPH组织中BMP2和DIF-1的表达,采用图像分析软件分析阳性表达的灰度和面积,并采用直线相关方法分析BMP2和DIF-1的相关性。结果 BPH组织中BMP2和DIF-1呈阴性或弱阳性表达;PCa组织中BMP2和DIF-1均呈阳性表达。在PCa组织中,BMP2和DIF-1的表达水平与Gleason评分呈正相关（rs=0.61、0.63,P〈0.01）;BMP2与DIF-1的表达也呈正相关（r=0.92,P〈0.01）。结论在PCa组织中BMP2与DIF-1的表达存在相关性,且二者的表达均与PCa的恶性程度密切相关,提示二者可能与PCa的发生发展有关。     

前列腺癌组织mPGES-1表达及其与COX-2的相关性

目的 探讨膜结合型前列腺素E合成酶1（mPGES-1）在前列腺癌（PCa）及前列腺增生（BPH）组织中的表达,并进一步分析其与环氧合酶2（COX-2）的相关性。方法 采用免疫组化SP法检测30例PCa和20例BPH组织中mPGES-1和COX-2的表达,用图像分析软件分析阳性表达的灰度和面积,并采用直线相关方法 分析mPGES-1和COX-2的相关性。结果 BPH组织中mPGES-1和COX-2表达呈阴性（14/20）或弱阳性（6/20）;PCa组织中mPGES-1和COX-2均呈现阳性表达（30/30）。在PCa中,mPGES-1和COX-2的阳性面积表达水平与Gleason评分呈正相关（r=0.633、0.607,P〈0.01）;mPGES-1与COX-2也呈正相关（r=0.959,P〈0.01）。结论 mPGES-1和COX-2在PCa中均为高表达,且与PCa的Gleason评分呈正相关;mPGES-1和COX-2的表达呈正相关,提示两者在PCa发生发展中共同发挥重要作用。     

基于前列腺干细胞抗原为靶点的肿瘤免疫治疗

<正>前列腺干细胞抗原(prostate stem cell antigen,PSCA)是通过糖基磷脂酰肌醇(glycosyl phosphatidylinositol,GPI)锚定在细胞膜表面的膜蛋白,最早于1998年由Reiter等[1]在研究前列腺癌时发现。PSCA属于Ly-6/Thy-1家族,因与干细胞抗原2(stem cell antigen-2,SCA-2)有30%的同源性,被命名为PSCA。研究发现PSCA在前列腺癌呈过量表达,在膀胱癌、胰腺癌、肾细胞癌、卵巢黏液瘤、葡萄胎亦表达增加[2-6]。PSCA不仅是前列腺癌等相关肿瘤诊断及     

经直肠前列腺穿刺活组织检查阳性结果分析

目的通过研究前列腺特异性抗原(PSA)的水平来评价与前列腺癌(PCa)的关系。方法采用8针活组织检查(活检)方法,对血清PSA>4μg/L,直肠指诊检查前列腺质地异常、结节,经直肠前列腺超声怀疑前列腺占位病变的328例患者进行经直肠前列腺活检,所得结果进行病理分析。结果良性前列腺增生(BPH)192例,占58.5%;PCa 103例,占31.4%,其中包括前列腺基底细胞癌1例;前列腺炎14例,占4.3%;前列腺上皮内瘤9例,占2.8%;非典型性腺瘤样增生6例,占1.8%;结核2例,占0.6%;平滑肌肉瘤1例,占0.3%;淋巴瘤1例,占0.3%。根据PSA值分5组:≤4μg/L组(B超或直肠指诊有异常),4.1～10.0μg/L组,10.1～20.0μg/L组,20.1～100.0μg/L组,>100.0μg/L组。各组PCa检出率依次为:8.9%、13.3%、23.1%、37.9%和73.2%。各组间阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.01),采用相关性分析,各组阳性率与血PSA值呈正相关。结论在PSA水平不高的情况下前列腺肿瘤的检出率也不低,在合理筛选患者的前提下,经直肠前列腺穿刺活检阳性结果与PSA水平...     

JKTBP在前列腺癌细胞系和组织中的表达差异及其意义

目的研究在雄激素依赖性及雄激素非依赖性前列腺癌细胞系、组织和前列腺增生（BPH）组织中JKTBP的表达差异。方法应用RT-PCR和Westernblot比较雄激素依赖性前列腺癌（AD-PCa）细胞系LNCaP及雄激素非依赖性前列腺癌（AI-PCa）细胞系DU145JKTBPmR—NA和蛋白的表达差异;应用免疫组化方法比较BPH、AD-PCa和AI-PCa组织中JKTBP的表达差异。结果在LNCaP细胞系中JKTBPmRNA和蛋白的表达水平均较低,相反,在DU145细胞系中两者均呈高表达,两细胞系间mRNA和蛋白的表达差异具有统计学意义（P〈0．05）。JKTBP在20例BPH组织中均表达阴性;在20例AD-PCa组织中有4例弱阳性,2例阳性,14例阴性;而在6例AI-PCa组织中5例呈强阳性表达,1例弱阳性;三组之间表达差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论JKTBP在AD／AI-PCa细胞系、组织和BPH组织中的表达存在差异,其可能参与了前列腺癌的进展过程,是前列腺癌进展的一个指标。     

消痰散结方干预对胃癌组织核转录因子NF-κB P~(65)蛋白表达影响的研究

目的通过建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤模型,观察消痰散结方对胃癌组织核转录因子NF-κB P65蛋白表达的影响,探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法采用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植模型,随机分成模型组,消痰散结低、中、高剂量组,5-Fu组,每组8只,观察消痰散结方干预对胃癌组织NF-κB P65蛋白表达的影响。结果①消痰散结方低、中、高剂量组抑瘤率分别为36.62%、44.82%、58.11%,呈现出剂量依赖效应,且消痰散结方高剂量组抑瘤率高于5-Fu组(51.82%),差异无统计学意义;②消痰散结方低剂量组NF-κB P65蛋白的阳性表达与模型组相比无统计学差异(P>0.05),消痰散结方中、高剂量组、5-Fu组NF-κB P65蛋白的阳性表达与模型组相比P<0.05,有统计学意义,但组间相比无统计学意义。结论消痰散结方对裸鼠人胃癌原位移植瘤有较好的抑制肿瘤生长作用,揭示其发挥作用的关键与抑制NF-κB P65蛋白的表达有关,从而阻断胃癌发展,控制肿瘤复发与转移。     

LMWH对裸鼠胃癌原位模型生长、转移及趋化因子SDF-1表达的影响

【目的】探讨低分子肝素（LMWH）对裸鼠胃癌原位模型生长、转移及趋化因子SDF-1表达的影响。【方法】应用原位移植方法建立裸鼠胃癌原位模型,术后7d将裸鼠随机分为3组：对照组（生理盐水）、化疗组（5-氟尿嘧啶）、LMWH组（低分子肝素钙）,分别每周注药2次,共5周,第6周处死动物,观察裸鼠胃癌原住模型肿瘤转移及生长情况。采用RT—PCR技术检测胃肿瘤组织SDF-1mRNA表达水平。【结果】化疗组、LMWH组肿瘤体积较对照组明显缩小,差异有统计学意义（P〈0．05）;LMWH组胃癌原位模型肿瘤转移率（20％）低于对照组（70％）,差异有统计学意义（P〈0．05）,而与化疗组之间差异无统计学意义（P〉o．05）;LMWH组SDF-1mRNA表达均较对照组和化疗组低,差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】LM—wH可抑制裸鼠胃癌原位模型的肿瘤生长及远处转移,其部分机制可能与降低肿瘤sDF_1的表达有关。     

Prostate Stem Cell Antigen DNA Vaccination Breaks Tolerance to Self-antigen and Inhibits Prostate Cancer Growth

Prostate stem cell antigen (PSCA) is a cell surface antigen expressed in normal human prostate and over expressed in prostate cancer. Elevated levels of PSCA protein in prostate cancer correlate with increased tumor stage/grade, with androgen independence and have higher expression in bone metastases. In this study, the PSCA gene was isolated from the transgenic adenocarcinoma mouse prostate cell line (TRAMPC1), and a vaccine plasmid construct was generated. This plasmid PSCA (pmPSCA) was delivered by intramuscular electroporation (EP) and induced effective antitumor immune responses against subcutaneous TRAMPC1 tumors in male C57 BL/6 mice. The pmPSCA vaccination inhibited tumor growth, resulting in cure or prolongation in survival. Similarly, the vaccine inhibited metastases in PSCA expressing B16 F10 tumors. There was activation of Th-1 type immunity against PSCA, indicating the breaking of tolerance to a self-antigen. This immunity was tumor specific and was transferable by adoptive transfer of splenocytes. The mice remained healthy and there was no evidence of collateral autoimmune responses in normal tissues. EP-assisted delivery of the pmPSCA evoked strong specific responses and could, in neoadjuvant or adjuvant settings, provide a safe and effective immune control of prostate cancer, given that there is significant homology between human and mouse PSCA.     

血清前列腺特异性抗原在前列腺癌诊断与临床分期中的应用

目的探讨血清前列腺特异抗原(PSA)在前列腺癌诊断及其临床分期中的价值。方法采用放射免疫分析法检测前列腺癌患者(58例)和前列腺其他疾病患者(58例)血清PSA水平,对患者进行分组,比较前列腺癌组与前列腺其他疾病组的PSA水平,并将前列腺癌病人按分期分为A、B、C、D四组,统计各组在PSA正常值区(0～4ng/ml)、PSA值灰区组(4.1～10ng/ml)、PSA值升高区(10.1～20ng/ml)、高危区(>20ng/ml)四个区中的分布情况。结果前列腺癌组PSA为(72.34±69.87)ng/ml,对照组PSA为(3.47±2.37)ng/ml,两组比较,差异有统计学意义(t=2.68,P<0.05)。前列腺癌患者的分期和PSA值分布情况:A期7例,2例位于PSA灰区、3例位于PSA升高区、2例位于PSA高危值区;B期12例,2例位于PSA正常值区、1例位于PSA灰区、5例位于PSA升高区、4例位于PSA高危值区;C期9例、1例位于PSA灰区、3例位于PSA升高区,5例位于PSA高危值区;D期30例,2例位于PSA升高区、28例位于PSA高危值区。Spearman等级相关分析显示:PSA值与前列腺癌临床分期呈正相关(r=0.66,P<0.05)。结论 PSA在前列腺癌的诊断中有重要的价值;PSA值与前列腺癌临床分期呈正相关,PSA值越大,临床分期越晚,对前列腺癌患者的分期有重要的参考意义。可以提高预测特异度。     

多西环素对大肠癌裸鼠移植瘤的影响

目的观察金属蛋白酶组织抑制剂（多西环素）对大肠癌裸鼠皮下移植瘤的影响，为大肠癌的治疗寻求一个新的可能治疗途径。方法将10只BALB／C（nu／nu）裸鼠随机分为对照组和实验组，每组5只，将人大肠癌细胞系LoVo细胞种植入裸鼠皮下，建立裸鼠皮下人大肠癌移植瘤模型。对照组应用生理盐水瘤内多点直接注射；实验组应用多西环素瘤内多点直接注射。记录2组裸鼠肿瘤大小，观察肿瘤生长曲线，计算生长抑瘤率。结果第26天肿瘤体积大小和肿瘤生长抑制率：实验组分别为（889．8±80．8）mm^3和49．7％，对照组分别为（1755．8±203．8）mm^3和0，2组比较，差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论多西环素可以抑制大肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长，有可能腐用于大肠痛的治疗。     

人核小体结合蛋白1小分子干扰RNA重组慢病毒抑制非激素依赖性前列腺癌体内生长的实验研究

目的探讨重组慢病毒介导的人核小体结合蛋白1（NSBP1）基因沉默对非激素依赖性前列腺癌细胞系DU145移植瘤生长的抑制作用及机制。方法慢病毒lentivirus-NSBP1转染非激素依赖性前列腺癌细胞系DU145。用转染细胞成瘤,观察抑瘤效果。运用实时RT-PCR和Western blot方法检测移植瘤中NSBP1、cyclinB1与Bcl-2的mRNA和蛋白的表达。结果体内实验证实NSBP1表达水平的降低,对肿瘤细胞在裸鼠体内成瘤率没有影响,但对肿瘤的生长有明显抑制作用。同时随着NSBP1表达水平的降低,cyclinB1和Bcl-2的mRNA及蛋白的表达也降低。结论NSBP1-RNAi-lentivirus重组慢病毒能有效抑制DU145细胞移植瘤的生长,NSBP1可能通过调控cyclinB1、Bcl-2基因的变化影响肿瘤细胞的生长。     

小干扰RNA抑制卵巢癌模型裸鼠移植瘤葡萄糖调节蛋白94的表达及意义

背景：一些实验在模型鼠移植瘤中葡萄糖调节蛋白94被敲除后,细胞黏附中断,刺激肝起源细胞增殖,进而促进肝肿瘤的发生,推测葡萄糖调节蛋白94在肝癌中起到保护作用。 目的：应用小干扰RNA技术抑制裸鼠卵巢癌模型皮下移植瘤内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白94的基因表达,探讨移植瘤中葡萄糖调节蛋白94基因及蛋白表达的变化对移植瘤生长的影响。 方法：从GeneBank中选取人类葡萄糖调节蛋白94基因序列,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体psiSTRIKETM/葡萄糖调节蛋白94。建立人卵巢癌HO-8910细胞株裸鼠皮下接种模型,并将真核表达载体转染入裸鼠移植瘤体内,观察肿瘤生长情况。卵巢癌裸鼠模型经过不同给药方案干预后分为特异性小干扰RNA组,非特异性小干扰RNA组和生理盐水对照组, RT-PCR和免疫组化SP法检测葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白在肿瘤内的表达情况,并观察模型裸鼠的移植瘤生长情况。 结果与结论：成功构建RNA干扰质粒载体,所有裸鼠模型均接种成功,5 d后即可见皮下肿瘤形成,14 d左右肿瘤直径达7-10 mm。转染质粒完毕后抑瘤率为65.1%,与非特异性小干扰RNA组和生理盐水对照组比较,差异有显著性意义（P＜0.01）。psiSTRIKETM/GRP94治疗后瘤体内葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白显著下调（P ＜0.01）。说明靶向葡萄糖调节蛋白94 mRNA的小干扰RNA可显著抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能是诱导葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白表达下调所致。