用高效液相色谱法测定冬虫夏草及虫草乌鸡胶丸中麦角甾醇的含量

本文将样品直接皂化,环己烷提取,用分配柱和吸附柱进行提取液的净化和浓缩,HPLC法测定了冬虫夏草及虫草乌鸡胶丸中麦角甾醇的含量,为虫草及其制剂中麦角甾醇的含量测定建立了简便可行的方法。     

山东不同产地北虫草中麦角甾醇提取工艺与含量测定的研究

目的：建立北虫草子实体质量评价的HPLC方法,研究和比较山东区域不同产地的北虫草子实体中麦角甾醇的提取工艺和含量。方法：采用正交试验设计筛选北虫草中麦角甾醇最佳提取工艺,利用HPLC法定量分析10个不同产地北虫草子实体中麦角甾醇的含量;采用色谱柱为Promosil-C18柱,流动相为甲醇,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为282 nm。结果：北虫草中麦角甾醇的最佳提取最佳工艺为A2B3C2,即料-液比为1∶40,40℃时超声提取75 min;不同产地的北虫草中麦角甾醇含量范围为0.25%~0.68%。结论：本方法操作简便,结果准确可靠,可用于北虫草子实体中麦角甾醇的含量测定,为北虫草的质量评价提供了参考。     

RP-HPLC-UV法测定5种发酵虫草制剂中麦角甾醇的含量

目的:建立RP-HPLC-UV法测定5种发酵虫草制剂百令胶囊、宁心宝胶囊、心肝宝胶囊、至灵胶囊及金水宝胶囊中麦角甾醇的含量。方法:色谱柱为Agilent SB TC C18(250 mm×4.6 mm,5μm),检测波长283 nm,流动相为甲醇-水(98:2),流速1.0 mL.min-1。结果:麦角甾醇进样量在0.42～6.29μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999)。平均加样回收率(n=3)分别为98.1%,100.7%,99.6%;RSD分别为2.3%,1.6%,1.6%。18批发酵虫草制剂中麦角甾醇含量,百令胶囊为6.06～6.10 mg.g-1,宁心宝胶囊为2.51～3.93 mg.g-1,心肝宝胶囊为3.47～4.42 mg.g-1,至灵胶囊为2.48～4.61 mg.g-1,金水宝胶囊为3.45～3.87 mg.g-1。结论:本文方法操作简便、灵敏,具有良好的重复性和稳定性,可用于发酵虫草制剂中麦角甾醇的检测。     

HPLC 测定虫草破壁灵芝孢子粉中虫草素与腺苷含量

目的 建立虫草破壁灵芝孢子粉中腺苷虫草素含量测定方法.方法采用 HPLC 法测定虫草破壁灵芝孢子粉中腺苷、虫草素的含量,色谱柱为LK PN C18 柱,流动相为甲醇-水 （12：88） 流速为 1 ml/ min,检测波长为 260 nm.结果 腺苷和虫草素进样量与峰面积在 10 μg/ min~80 μg/ min 范围内均呈良好线性关系,相关系数r 分别为0.9988 和0.9992;平均回收率分别为99.6% 和99.9%.RSD 分别为0.54%,0.58% （n=6）.结论 本方法操作简便、快速、结果准确,可作为该制剂中腺苷和虫草素的质量控制监测.     

加压溶剂提取-高效液相色谱法测定天然和人工虫草中的麦角甾醇、核苷及其碱基

目的建立同时测定虫草中麦角甾醇、核苷及其碱基含量的简便方法。方法正交法优化加压溶剂提取条件；HPLC法同时测定天然和人工虫草中上述成分的含量。结果以甲醇为提取溶剂，提取温度160 ℃，提取时间5 min，提取压力10 MPa，循环1次，提取1次。采用Zorbax NH₂分析柱(250 mm×4.6 mm ID, 5 μm)，流动相为A(乙腈)-B(10 mmol·L^-1醋酸铵溶液)二元梯度洗脱：0-5.0 min，B%为0→15%；5.0-25.0 min，B%为15%→20%；25.0-35.0 min，B%为20%→ 40%；35.0-45.0 min，B%为40%→ 80%；45.0-50.0 min，B%为80%。结论本法能够快速、简便地测定虫草中麦角甾醇、核苷及其碱基的含量。     

人工蛹虫草子实体中游离麦角甾醇的提取及含量测定

目的从人工蛹虫草子实体中提取游离型麦角甾醇,并测定其含量.方法采用正交设计法筛选麦角甾醇最佳提取条件,用HPLC法测定麦角甾醇含量.结果麦角甾醇在5.8～58.0μg·ml-1范围内线性关系良好(r=O.999 9),平均加样回收率为99.5%(RSD=1.3%).结论该提取方法快速、简便,结果准确、可靠.     

冬虫夏草人工繁育品与野生品基于甾醇特征图谱的比较研究

目的：对冬虫夏草人工繁育品与野生品进行比较研究,建立基于甾醇类成分的特征图谱,并比较麦角甾醇含量的差异,为该药材的质量监管提供参考。方法：以10批冬虫夏草人工繁育品、17批野生品以及5批凉山虫草为研究对象,采用超高效液相色谱法,以麦角甾醇为对照品,选用XBridgeC18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.6 μm）;流动相为甲醇-水（95：5）,检测波长282 nm,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,采用CHEMPATTERN化学计量学软件对野生品色谱图进行处理,生成特征图谱,并计算所有批次的相似度。结果：17批野生冬虫夏草、10批冬虫夏草人工繁育品与野生品对照图谱之间的相似度均大于0.9,相似度良好;而5批凉山虫草相似度均未超过0.8,相似度较低。10批人工繁育品的平均含量为0.121%±0.031%;17批野生品的平均含量为0.115%±0.045%;5批凉山虫草的平均含量为0.468%±0.038%。冬虫夏草人工繁育品和野生品基于甾醇的特征图谱以及麦角甾醇含量基本一致;与凉山虫草有显著性差异。结论：本研究有助于冬虫夏草的真伪鉴别,同时为冬虫夏草人工繁育资源开发以及合理使用提供科学依据。     

九州虫草的核苷类成分及不同部位两种活性成分含量的分布

目的快速测定九州虫草中的部分核苷类成分及其主要活性成分虫草素与腺苷的含量,并考察九州虫草不同部位虫草素和腺苷含量的分布.方法用高效毛细管区带电泳法确定野生和人工九州虫草中的核苷类成分,测定虫草素和腺苷的含量,并比较它们在九州虫草不同部位含量的分布.结果蒙山九州虫草中含有至少8种核苷或碱基,其中抗肿瘤活性成分虫草素的含量远高于冬虫夏草和蛹虫草,且人工栽培九州虫草中虫草素的含量又显著高于野生九州虫草.腺苷主要存在于九州虫草子座中,而虫草素则不仅在九州虫草子座中含量甚高,人工栽培九州虫草虫体中虫草素含量也较高.结论天然和人工九州虫草及其不同部位的核苷和碱基成分存在一定差异,九州虫草中的虫草素含量高,具有良好的栽培、药用与开发前景.     

山西特有香棒虫草的药学成分研究

目的研究山西特有香棒虫草黄褐异丽金龟Anomala exolenta Fald.幼虫感染香棒虫草菌Cordyceps barnesii Thwaites药用成分。方法进行样品提取条件筛选、高效液相色谱法分析条件筛选及方法学考察。结果确定了水提超声、260 nm、乙腈-水(4∶96)、C18色谱柱的实验条件。结论建立了香棒虫草中腺苷、虫草素的含量测定方法,重现性及准确度良好,为进一步开发利用提供了理论依据。     

北虫草中虫草素和虫草多糖的提取纯化研究

目的研究北虫草中虫草素和虫草多糖的提取纯化工艺。方法采用正交实验法研究提取工艺,采用柱分离法,以虫草素和虫草多糖的含量为指标,考察流速、上样体积和洗脱剂浓度对纯化工艺的影响。结果提取的最佳工艺为:加10倍量水,回流提取3次,每次1h。优化的纯化工艺为:将提取液浓缩至1mL,相当于北虫草粉0.1g,以2BV·h~(-1)的流速上样,上样体积为0.6BV,先用2BV的水洗脱,再用4BV体积分数为40%的乙醇溶液以1～2BV·h~(-1)的流速洗脱,收集乙醇洗脱液。结论该提取纯化工艺经验证实验证明可行。     

RP-HPLC测定天然与人工冬虫夏草中游离麦角甾醇的含量

目的：比较天然与人工冬虫牙草中游离麦角甾醇的含量,探讨麦角甾醇作为冬虫夏草质控指标的可行性。方法：采用HP1100高效液相色谱仪,Allsphere C18色谱柱,甲醇－水（95∶5）为流动相,检测波长为275nm,流速1ml/min。结果：不同来源的天然冬虫夏草游离麦角甾醇含量差异显著,但均明显高于人工虫草菌丝。结论：麦象甾醇可作为冬虫夏草质控指标之一。     

虫草花与冬虫夏草腺苷成份的比较研究

目的 比较研究虫草花与冬虫夏草腺苷成份的含量.方法 采用高效液相色谱法测定腺苷的含量,色谱柱为岛津Shim-pack VP-ODS柱(200mm×4.6 mm,5μm);流动相为磷酸盐缓冲剂(pH=6.5)-甲醇(17:3);流速为1ml/min;检测波长为260nm.结果 腺苷的线性范围为0.078 35-0.399 88μg,呈现较好的线性关系,平均加样回收率为96.22%,RSD为0.21%(n=5).结论 虫草花的活性成份腺苷含量明显高于冬虫夏草腺苷含量,具有与冬虫夏草相似的滋补功效.     

超临界流体色谱法测定三七及云南白药中人参二醇和人参三醇的含量

本文用超临界流体色谱法(SFC)测定了三七和云南白药中人参二醇及人参三醇的含量。使用15%硫酸乙醇—水(1:1)直接进行水解,然后碱水解,克服了文献报道的水解不完全、结果不稳定、不能定量回收的缺点。本法取样量少,灵敏度高,操作简单、快速、整个分析过程可在8h内完成。     

高效液相色谱法测定蛹虫草人工固体培养物中核苷类化合物的含量

目的建立高效液相色谱法测定蛹虫草人工固体培养菌皮中核苷类化合物的含量。方法采用pH 6 .5磷酸盐缓冲液 甲醇 (85∶15 )为流动相 ,流速为 1.0ml/min ,检测波长为 2 6 0nm。结果蛹虫草人工固体培养物菌皮中主要成分虫草素在 4 .0 3～ 10 0 .8μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为A =39.5 8C - 0 .0 342 ;尿苷在 3.6 8～ 92 .0μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为A =2 4 .32 9C - 0 .0 0 2 7;腺苷在 3.84～ 96 .11μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为A =18.0 12C - 0 .0 2 35。结论人工固体培养菌皮中核苷类成分的含量随培养时间发生一定的变化 ,高效液相色谱法可用于蛹虫草人工培养物中核苷类化合物的测定 ,为控制其质量提供了简便易行的方法。     

联用色谱用于冬虫夏草的化学成分测定

目的：对冬虫夏草虫体和子座部分的甾醇和核苷类化合物进行多组分定性定量分析,并比较核苷类化合物的提取方法。方法：用HPLC-DAD联用色谱检测,借助HELP法解析,基于组分的色谱保留时间和光谱曲线进行定性,然后用总体积积分法定量。结果：HPLC-DAD联用色谱检测和HELP法解析相结合,可验证色谱峰的纯度,分辨重叠峰,得到各组分的纯色谱和光谱曲线。该法的样品回收率为99.97%～100.81%,虫体和子座部分的化学成分存在差异,用水提取核苷类化合物的效果较好。结论：综合利用色谱和光谱两方面信息,可提高组分定性定量结果的准确度。     

超临界流体色谱法测定三七及云南白药中人参二醇和人参三醇的含量

本文用超临界流体色谱法(SFC)测定了三七和云南白药中人参二醇及人参三醇的含量。使用15%硫酸乙醇—水(1:1)直接进行水解,然后碱水解,克服了文献报道的水解不完全、结果不稳定、不能定量回收的缺点。本法取样量少,灵敏度高,操作简单、快速、整个分析过程可在8h内完成。     

高效液相色谱法定量分析冬虫夏草中尿苷和腺嘌呤

目的采用高效液相色谱法同时测定冬虫夏草中尿苷和腺嘌呤2个成分的含量。方法采用Kromasil C18柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(5:95)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长260nm。结果尿苷和腺嘌呤质量浓度质量浓度均在5～500μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r≥0.9991),平均加样回收率分别为99.25%和99.43%,RSD分别为1.18%和1.52%(n=6)。结论该方法快速、准确、重现性好,可用于同时测定冬虫夏草中尿苷和腺嘌呤的含量。