海南四种暗罗属植物挥发油对三种癌细胞的体外增殖抑制作用

目的初步研究海南四种暗罗属植物斜脉暗罗、香花暗罗、海南暗罗和细基丸的茎、叶挥发油提取物的体外抗肿瘤活性。方法采用MTT法检测斜脉暗罗叶挥发油（PPL）、斜脉暗罗茎挥发油（PPS）、香花暗罗叶挥发油（PRL）、香花暗罗茎挥发油（PRS）、海南暗罗叶挥发油（PLL）、海南暗罗茎挥发油（PLS）、细基丸叶挥发油（PCL）、细基丸茎挥发油（PCS）八种挥发油对人类肺腺癌细胞（SPCA-1）、肝癌细胞（BEL7402）和白血病细胞（K562）的体外增殖抑制作用。结果八种提取物对3种癌细胞均显示出一定的抗肿瘤活性。PPL对所测试的SPCA-1、BEL7402和K562三种癌细胞的抑制作用较其他七种提取物更加明显,IC50值分别为4.01、2.70、4.29μg/m l。其余几种挥发油只对一种或两种细胞的增殖有较好抑制作用。结论四种暗罗属植物茎和叶提取出的挥发油均具有不同程度的抗肿瘤增殖活性,大部分挥发油活性较好。     

PHⅡ-7的体内外抗肿瘤活性及机制

目的研究PHⅡ-7的体内外抗肿瘤活性,为肿瘤的治疗提供新思路。方法采用MTT法检测PHⅡ-7对18种细胞系（其中包括5对敏感肿瘤细胞和相应耐药细胞株）的体外抗肿瘤活性;建立人白血病细胞K562和K562／A02裸鼠移植瘤模型,研究PHⅡ-7的体内抗肿瘤活性。结果PHⅡ-7对人肿瘤细胞的生长均有抑制作用,IC50为0．35-18．68μmol／L;其对于多药耐药（MDR）类细胞亦显示出较强的抑制作用。PHⅡ-7对耐药肿瘤细胞（K562／A02）移植瘤模型的抑制率为62％,对敏感肿瘤细胞（K562）移植瘤模型的抑制率为52％。结论PHⅡ-7体内外均可抑制肿瘤细胞的生长,其抗耐药肿瘤的作用可能存在多种机制。本研究为肿瘤的治疗提供了新思路。     

干扰素-α对人肝癌细胞增殖及侵袭的抑制作用

目的:研究人干扰素-α对人肝癌细胞系BEL-7402细胞增殖及侵袭的抑制作用.方法:常规培养的BEL-7402细胞加入人干扰素-α(1×106U/L)共同孵育24 h后,以MTT法检测干扰素-α对肿瘤细胞增殖的影响;Boyden小室法检测肝癌细胞侵袭能力的变化;明胶酶谱法检测肝癌细胞基质金属蛋白酶的变化.免疫组化法检测肿瘤细胞增殖核抗原的表达;TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡.结果:人干扰素-α可以明显抑制体外BEL-7402细胞的增殖(抑制率为20.2%);干扰素-α作用后在Boyden小室穿膜的肿瘤细胞数明显减少(抑制率为23.9%);肝癌细胞基质金属蛋白酶的分泌没有明显变化.干扰素-α组肿瘤细胞增殖核抗原的表达明显下降,凋亡细胞数明显增加.结论:低剂量的干扰素-α可以直接抑制肝癌细胞株BEL-7402的增殖,对BEL-7402细胞的侵袭有明显的抑制作用;可以抑制肿瘤细胞增殖核抗原的表达并诱导细胞凋亡.     

中药天南星提取物抗肿瘤活性研究

目的 探讨中药天南星提取物的体外抗肿瘤作用.方法 分别选用人红白血病细胞株K562、人胃癌细胞株BGC823、人宫颈癌细胞株HeLa,用MTT法测定天南星醇提物(RAE)和水提物(RAW)对体外肿瘤细胞的抑制作用.结果 体外抑瘤实验表明,对RAE敏感的最低药物浓度分别为3.9、62.5和250 μg/ml,半数抑制率(IC50)分别为65.07 μg/ml、0.59 mg/ml和5.11 mg/ml;对RAW敏感的最低药物浓度分别为15.6、62.5和250 μg/ml,IC50分别为0.24 mg/ml、0.78 mg/ml和82.17 mg/ml.结论 RAE和RAW体外均有很强的抗肿瘤作用,且RAE的作用高于RAW.     

半夏水提取液诱导人白血病K562细胞凋亡的初步研究

目的:观察半夏水提取液对K562细胞增殖及凋亡的影响,初步探讨半夏对白血病的抗肿瘤作用机制。方法:采用CCK-8法,检测半夏水提取液不同浓度梯度范围内(35、350、700、1 000μg/ml)及不同作用时间(24、48、72h)对K562细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测K562细胞48h凋亡及周期变化。结果:半夏水提取液对人白血病K562细胞的增殖有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性和时间依赖性;流式细胞仪分析结果显示半夏水提取液作用K562细胞48h后细胞凋亡百分率随半夏水提取液浓度增加而增加,且半夏水提取液可以诱导K562细胞周期阻滞在G0/G1期。结论:半夏水提取液在一定浓度范围内对人白血病细胞K562的增殖有抑制作用,且呈一定的量效时效关系;其对K562细胞的抑制作用可能与其诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞有关。     

反义局部粘着斑激酶脱氧寡核苷酸对肝癌细胞侵袭性生长的抑制作用

目的 观察反义局部粘着斑激酶脱氧寡核苷酸(FAK ODN)转染对肝癌细胞侵袭性生长的影响,并探讨其作用机制。 方法 以LipofecTAMINE介导的反义FAK ODN转染Bel 7402肝癌细胞株,测定Bel 7402肝癌细胞株体外生长曲线、细胞活力,测定不同时间点该细胞体外黏附能力变化,以Transwell小室测定细胞的体外侵袭能力,同时行FAK表达与细胞DNA含量的双参数流式细胞仪检测及细胞凋亡的流式细胞仪检测。 结果 p125FAK表达在反义转染组(6.49％±0.10％)显著低于正义转染组(14.33％±1.88％)与对照组(16.68％±1.62％),F=7.66,P<0.01;反义FAK ODN转染显著抑制Bel 7402肝癌细胞株的生长,其细胞活力显著下降,肿瘤细胞抑制率在30％-60％之间;细胞体外黏附能力受到显著抑制,黏附抑制率在25％-55％间;细胞的体外侵袭能力显著下降,侵袭抑制率在15％-25％之间;细胞凋亡显著增加;细胞周期分析显示S期细胞比率显著降低,细胞生长主要阻滞在G2/M期。 结论 FAK在Bel 7402肝癌细胞的黏附与迁移运动中发挥重要作用,其表达阻断显著抑制肝癌细胞的体外黏附与侵袭活性。FAK表达阻断显著抑制肝癌细胞的体外增殖,促进细胞凋亡。     

人脐带血LAK细胞克隆化及其对白血病细胞的杀伤效应

重组人白细胞介素Ⅱ(rhlL-2)刺激下,脐带血单个核细胞在半固体培养中可增殖形成淋巴细胞克隆.大约20％的克隆细胞具有明显的LAK活性,对NK敏感的K562、NK抵抗的H7402及HL60、KG-1、Jurket(?)等多种白血病细胞均有强烈的杀伤作用,对HL60白血病祖细胞增殖(CFU-L)也有显著的抑制作用.     

蜂毒素基因重组腺病毒抗肝癌作用的实验研究

目的将编码蜂毒素的基因用于肝癌治疗,为蜂毒素的临床应用提供实验依据.方法采用细菌内同源重组法构建携蜂毒素基因及甲胎蛋白(AFP)启动子的重组腺病毒,X-gal染色检测其转染效率,MTT法测定其对肝癌细胞的抑制作用,并观察其体外转染对肝癌细胞致瘤能力的影响及肿瘤内注射对荷肝癌裸鼠的抑瘤效果.结果蜂毒素基因mRNA在细胞中得到了转录;当感染复数(MOI)为10时,重组腺病毒在体外对BEL-7402人肝癌细胞的转染效率达到100%,体内转染亦有较高的效率.Ad-rAFP-Mel和Ad-rAFP对BEL7402细胞的抑制率分别为66.2%±2.7%和2.9%± 2.3%(t=30.83,P<0.01).Ad-CMV Mel对BEL7402、SMMC7721及L02细胞的抑制率分别为58.9%± 9.6%、65.9%±3.8%和31.7%± 1.2%,而Ad-rAFP-Mel对BEL7402、SMMC7721及L02细胞的抑制率分别为66.2%±2.7%、16.1%±6.6%和7.5%±3.3%,与Ad-CMV-Mel组比较t=1.27,P=0.27,t=11.31、P<0.01和t=12.12、P<0.01.重组腺病毒体外转染后,肝癌细胞致瘤能力减弱,肿瘤内注射,裸鼠皮下移植瘤消退. 结论蜂毒素基因重组腺病毒在体内外对肝癌均有特异性抑制作用,证明动物毒素基因作为抗肿瘤目的基因具有可行性.     

防风多糖诱导人白血病K562细胞凋亡的研究

目的:探讨防风多糖对体外培养人白血病K562细胞有无调亡诱导作用.方法:MTT法检测防风多糖对K562细胞的增殖抑制作用;荧光显微镜观察细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡的DNA断裂;流式细胞术采用Annexin-V/PI双染实验检测细胞凋亡.结果:MTT法检测显示防风多糖对K562细胞具有显著生长抑制作用;荧光显微镜下观察发现防风多糖作用的K562细胞中出现核固缩、凋亡小体;琼脂糖凝胶电泳呈现DNA梯形条带即(DNA ladder);流式细胞仪分析结果显示细胞凋亡百分率随防风多糖浓度增加而增加.结论:防风多糖对体外培养人白血病K562细胞具有增殖抑制及凋亡作用.     

白藜芦醇的小分子类似物RSVA314对白血病K562细胞迁移和增殖的影响

目的:探讨白藜芦醇的小分子类似物(RSVA314)对白血病K562细胞迁移和增殖的影响。方法:体外培养K562细胞,并分为4组:生理盐水对照组、RSVA314低剂量组(1μM)、RSVA314中剂量组(5μM)、RSVA314高剂量组(25μM)。采用CCK-8方法分别检测4组中K562细胞的增殖活性;采用TransweⅡ迁移实验分别检测4组K562细胞的迁移能力;采用Western blot分别检测4组K562细胞蛋白激酶B(AKT)的表达。结果:与对照组比较,RSVA314中、高剂量组OD值明显增加(P0.05或P0.01),提示其可抑制K562细胞的增殖活性。RSVA314低、中、高剂量组穿膜细胞数量明显减少,与对照组比较有明显差异(P0.05或P0.01)。Western blot检测显示RSVA314中、高浓度组可抑制AKT磷酸化的表达,与对照组比较有显著差异(P0.05或P0.01)。结论:RSVA314能抑制白血病K562细胞迁移和增殖,其机制可能与抑制K562细胞AKT磷酸化表达有关。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.