定喘汤对哮喘模型小鼠肺组织炎性因子及NLRP3炎症小体的影响

目的观察定喘汤对哮喘模型小鼠肺组织炎性因子及NLRP3炎症小体的影响。方法将小鼠随机分为NS+NS组、NS+DCT组、OVA+NS组和OVA+DCT组,每组12只。OVA+NS及OVA+DCT组采取OVA联合LPS致敏复制中性粒细胞为主的哮喘小鼠模型。NS+DCT及NS+NS组采用生理盐水替代。NS+DCT及OVA+DCT组采用定喘汤灌胃;OVA+NS及NS+NS组以生理盐水替代。末次灌胃24 h后,每组取6只小鼠采集BALF,采用ELISA检测IL-1β、IL-4、IL-17的表达;每组另取6只小鼠取左肺中叶行免疫组化检测,取左肺下叶检测IL-1β、NLRP3、caspase-1的蛋白表达水平。结果与NS+NS组和NS+DCT组相比,OVA+NS组和OVA+DCT组小鼠肺组织炎性指标显著上升,肺泡周围出现炎性因子聚集,BLAF中IL-1β、IL-4、IL-17含量显著上升。与OVA+NS组相比,OVA+DCT组BLAF中IL-1β、IL-4、IL-17含量,肺组织炎性指标及NLRP3、caspase-1等蛋白表达均下降。与NS+NS组比较,NS+DCT组小鼠BLAF中IL-1β、IL-4、IL-17含量,肺组织炎性指标及NLRP3、caspase-1等蛋白表达均无显著差异。结论定喘汤可以抑制NLRP3炎症小体,降低IL-1β、IL-17含量,减少炎性因子募集,减轻气道及肺组织中炎症反应和提高抗炎作用,改善气道结构反应,缓解哮喘症状。     

宁夏沙枣花乙醇提取物对哮喘模型小鼠气道炎症的实验研究

目的:观察沙枣花乙醇提取物对哮喘模型小鼠气道炎症及血清白介素4(Interleukin-4,IL-4)、IgE-免疫球蛋白(IgE-immunoglobulin,IgE)、γ干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)含量的影响,探讨其抑制哮喘气道炎症的作用机制。方法:将BALB/c小鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、地塞米松10mg/kg组和沙枣花乙醇提取物4g/kg、8g/kg、16g/kg组,除空白对照组外,其余各组用改良的卵白蛋白多点注射致敏与雾化吸入激发法建立小鼠哮喘模型,连续14 d。小鼠末次激发24 h后,处死各组小鼠留取标本。镜下观察各组哮喘小鼠肺组织病理形态变化及支气管肺泡灌洗液中白细胞计数和分类计数,并进行炎症评分;采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定小鼠支气管肺泡灌洗液及血清中IL-4、IgE、IFN-γ含量。结果:与模型组比较,沙枣花乙醇提取物8g/kg、16g/kg组和地塞米松组可显著降低哮喘模型小鼠支气管肺泡灌洗液及血清中IgE、IL-4含量和IL-4/IFN-γ比值;16g/kg、8g/kg组和地塞米松组可显著升高支气管肺泡灌洗液及血清中IFN-γ含量。与模型组比较,沙枣花乙醇提取物16g/kg、8g/kg组和地塞米松组可显著降低白细胞总数、嗜酸性粒细胞及巨噬细胞比率;各给药组可显著升高中性粒细胞比率。病理切片染色结果显示沙枣花乙醇提取物16g/kg、8g/kg组能够明显减轻肺组织细胞炎性浸润等病理症状,与模型组比较,可显著降低炎症评分。结论:沙枣花提取物可通过降低IL-4及IgE含量、升高IFN-γ的含量,调节Th1/Th2免疫平衡而改善哮喘模型小鼠气道炎症。     

黄芩汤对哮喘模型大鼠IL-17及IL-23表达的影响

目的探讨黄芩汤(黄芩和甘草)对哮喘模型大鼠白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-23(IL-23)表达的影响及可能作用机制。方法将32只SD大鼠随机分4组,正常对照组、哮喘模型组、布地奈德组、黄芩汤组,采用卵清白蛋白致敏加激发法复制大鼠哮喘模型。分类计数外周血炎症细胞,采用HE染色评价各组大鼠气道炎症程度,酶联免疫法ELISA检测血清及支气管肺泡灌洗液中IL-17的浓度,免疫组化标记法测量肺部IL-23水平。结果与正常组比较,模型组哮喘大鼠的气道炎症明显加重,血清及支气管肺泡灌洗液中IL-17的水平升高,肺部IL-23的表达增强(P<0.01)。与模型组比较,布地奈德组和黄芩汤组哮喘大鼠的气道炎症明显减轻,血清及支气管肺泡灌洗液中IL-17的水平降低,肺部IL-23的表达下降(P<0.01);结论黄芩汤和布地奈德可以对抗气道炎症且无统计学意义的差异(P>0.05),但前者大鼠体质量增加相对较快,且性情较平稳。     

芥子咳喘贴对支气管炎模型小鼠药效学作用观察

目的观察芥子咳喘贴对支气管炎模型小鼠的镇咳、祛痰、抗炎的药效学作用。方法将80 只C57BL/6 小鼠随机分为空白对照组、平喘止咳贴组、芥子咳喘贴常规剂量组、芥子咳喘贴高剂量组,每组20 只。采用 氨水引咳法制备小鼠咳嗽模型、呼吸道酚红排泌实验观察排痰情况、脂多糖（LPS）鼻饲诱导法观察小鼠支气管 炎性反应。药物干预后,测定5 min 内模型小鼠咳嗽次数和潜伏时间、分光光度计检测肺泡灌洗液中酚红浓 度、微量样本多指标流式蛋白定量技术（CBA 法）检测小鼠外周血与灌洗液中白细胞介素（IL）-6、IL-10、IL-12、 干扰素γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）水平。结果与空白对照组比较, 芥子咳喘贴常规剂量组、高剂量组及平喘止咳贴组咳嗽次数明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）;与平喘 止咳贴组比较,芥子咳喘贴常规剂量组、高剂量组咳嗽次数明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）;而常规 剂量组、高剂量组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。与空白对照组比较,芥子咳喘贴常规剂量组、高剂量组 明显延长咳嗽潜伏时间,差异有统计学意义（P＜0.05）,但二者之间比较无明显差异（P＞0.05）。与空白对照组 比较,芥子咳喘贴常规剂量组、高剂量组肺泡灌洗液酚红浓度明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05）;高剂 量组肺泡灌洗液酚红浓度明显高于常规剂量组,差异有统计学意义（P＜0.05）。与空白对照组比较,常规剂量 组血浆炎性因子MCP-1、IL-6 水平明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）;肺泡灌洗液中炎症因子水平比 较,各组差异无统计学意义（P＞0.05）。结论芥子咳喘贴具有良好的镇咳、祛痰作用,可降低外周血炎症因 子MCP-1、IL-6 水平,芥子咳喘贴常规剂量组、高剂量组药效学作用总体相当。     

细芥化痰平喘凝胶贴膏对哮喘小鼠气道炎症的影响

[目的]观察细芥化痰平喘凝胶贴膏对哮喘小鼠气道炎症的影响,探讨其治疗支气管哮喘的作用机制。[方法]选取60只健康雄性BALB/c小鼠,随机分为正常组、哮喘模型组、细芥化痰平喘凝胶贴膏低剂量组、中剂量组、高剂量组、细芥敷贴丸组,每组10只。除正常组外,其余各组采用卵清蛋白（OVA）致敏和激发建立小鼠哮喘模型,取小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）进行炎性细胞的总数及炎细胞分类计数检测,苏木素-伊红（HE）染色、丽春红酸性品红-苯胺蓝（Masson）染色观察肺组织病理学变化。采用酶联免疫吸附法（ELLSA）检测小鼠BALF中γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)的含量。[结果] 1)OVA成功致敏和激发,建立小鼠哮喘模型。2）与正常组相比,BALF中炎症细胞总数及以嗜酸性粒细胞（EOS）为主的各分类炎症细胞均显著增加（P<0.01）,细芥化痰平喘凝胶贴膏低中高3个剂量组、细芥敷贴丸组均能不同程度地抑制炎性细胞总数及炎症细胞的增加（P<0.01）,细芥敷贴丸组、细芥化痰平喘凝胶贴膏中剂量组两组对白细胞及EOS等炎...     

基于多途径联合效应的甘草防治脓毒血症活性成分筛选及作用机制研究

目的 研究甘草中有效组分对脓毒血症的防治作用及机制。方法 采用小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDM)构建体外NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)炎症小体激活模型及H2O2诱导的氧化应激模型筛选出甘草抗炎、抗氧化应激的有效组分,采用ip脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,20 mg/kg)诱导C57BL/6小鼠脓毒血症致死模型以及脓毒血症模型,评价致死模型中小鼠的生存率及脓毒血症模型小鼠腹腔灌洗液中巨噬细胞和中性粒细胞在渗出细胞中的占比以及外周血和腹腔灌洗液中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平。结果 基于BMDM细胞NLRP3炎症小体激活模型筛选出甘草中有效组分刺甘草查耳酮,可显著抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cystein-asparate protease-1,Ca...     

苦豆碱对哮喘小鼠肺功能及NF-κB、TNF-α、IL-1β的影响

目的:观察苦豆碱(aloperine,ALO)对哮喘小鼠肺功能及肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)炎性细胞及血清和肺组织NF-κB、TNF-α、IL-1β水平的影响,探讨其作用机制。方法:将120只小鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松(10 mg/kg)组及苦豆碱高、中、低剂量(80、40、20mg/kg)组。以卵清白蛋白(Ovalbumin,OVA)+氢氧化铝致敏、激发制备哮喘小鼠模型。各组小鼠给予相应剂量的药物7d,每天1次,于末次给药24h后,每组取10只小鼠进行肺功能测定,取另10小鼠测血清NF-κB、TNF-α、IL-1β含量,收集BALF进行炎性细胞计数,取肺组织用Western-blot法检测苦豆碱对哮喘小鼠肺组织NF-κB、TNF-α及IL-1β蛋白表达的影响。结果:与哮喘模型组比较,苦豆碱80、40 mg/kg可使哮喘小鼠0.1秒用力呼气容积(Forced expiratory volum in 0.1 second,FEV0.1)、0.2秒用力呼气容积(Forced expiratory volum in 0.2 second,FEV0.2)、用力呼气流量25-75(Forced expiratory flow,FEF25-75)、最高呼气流速(Peak expiratory flow,PEF)增加,使哮喘小鼠BALF中性粒细胞增多,嗜酸性粒细胞及淋巴细胞减少,使血清及肺组织NF-κB、TNF-α及IL-1β水平明显降低。结论:苦豆碱可改善哮喘小鼠肺功能、减轻哮喘症状及炎症反应,其作用机制可能与调控NF-κB炎症信号通路,降低炎症因子TNF-α及IL-1β的水平有关。     

灵芝多糖对急性酒精性肝损伤小鼠肝脏脂肪沉积及N LRP3炎性小体表达的影响

目的:探讨灵芝多糖对急性肝损伤小鼠肝脏脂肪沉积及NLRP3炎性小体表达的影响。方法:将48只健康KM小鼠随机分为对照组、模型组及实验组,每组16只。模型组及实验组小鼠以慢性酒精喂养联合急性酒精灌胃法构建急性酒精性肝损伤小鼠模型,且实验组建模期间灌胃150 mg/kg灵芝多糖,1次/d。以全自动生化分析仪检测小鼠肝功能及脂代谢指标;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清炎性反应递质水平;苏木精-伊红(HE)染色检测小鼠肝组织病理学形态;油红O染色观察肝脏组织脂肪沉积;蛋白免疫印迹法(WB)检测肝组织NLRP3炎性小体表达。结果:各组小鼠的血清谷丙转氨酶(ALT),血清谷草转氨酶(AST),血清白细胞介素-1β(IL-1β),血清白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),油红O染色评分,肝组织NLRP3炎性小体相对表达量等,模型组与对照组比较,血清AST、ALT、三酰甘油、总胆固醇、游离脂肪酸、IL-1β、IL-6、TNF-α水平,油红O染色评分及肝组织NLRP3炎性小体相对表达量升高,而实验组均较模型组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:灵芝多糖可通过抑制肝脏组织NLRP3炎性小体表达,抑制急性酒精性肝损伤小鼠炎性反应及肝脏脂肪沉积,有效缓解肝组织损伤,恢复其肝功能。     

哮喘小鼠肺组织中SDF-1的表达及意义

目的探讨哮喘小鼠肺组织中基质细胞衍生因子1(SDF-1)的表达与气道炎症的关系。方法清洁级雌性昆明小鼠随机分为对照组、哮喘组,每组10只。建立卵白蛋白致敏的哮喘小鼠模型,用免疫组织化学方法检测各组小鼠肺组织中SDF-1的表达,分别用HE染色和Wright-Giemsa染色方法对各组小鼠气道炎症细胞及支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞情况进行评估。结果哮喘组小鼠的支气管黏膜上皮细胞破坏、增生,管周有大量的炎细胞浸润,SDF-1的表达明显高于对照组;哮喘组BALF中炎细胞总数及嗜酸性粒细胞、中性粒细胞及淋巴细胞明显高于对照组;SDF-1表达量与气道炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞及淋巴细胞呈正相关。结论 SDF-1在哮喘小鼠气道炎症细胞募集中可能有重要作用。     

喘消雾化液平喘,祛痰作用及对气道炎性细胞的影响

采用致痉剂致喘、酚红排泌试验和测定致豚鼠肺泡灌洗液及外周血炎症细胞等方法,观察喘消雾化液的平喘、祛痰作用及气道炎性细胞的影响。结果,喘消雾化液雾化给药,拮抗组胺和乙酰胆碱等量混合液所致豚鼠哮喘反应（Ｐ〈０．０１）;增加小鼠呼吸道酚红排泌量（Ｐ〈０．０５及Ｐ〈０．０１）;同时对抗原攻击引起的致敏豚鼠支气管肺泡灌洗液和外周血ＷＢＣ总数、淋巴细胞总数、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞呈明显抑制作用（Ｐ〈０．０１