多种油脂肪乳剂对超未成熟儿肝功能影响

目的: 探讨多种油脂肪乳剂对超未成熟儿肝脏功能的影响。方法: 回顾分析2015年7月1日至2021年6月30日收治的胎龄＜28周、接受肠外静脉营养超过2周的超未成熟儿60例。根据应用脂肪乳剂种类不同,分为SMOF (多种油脂肪乳)组(n=30),和LCT (长链脂肪乳)组(n=30)。比较2组DBIL、ALT、γ-GT、TBA达峰值的指标及胃肠外营养相关性胆汁淤积(PNAC)发病率。结果: LCT组DBIL、ALT、γ-GT、TBA峰值均数分别为25.7(6.5~223)μmol·L^-1、(52.5±44.7) U·L^-1、(204.9±74.7) U·L^-1、(64.9±48.6)μmol·L^-1,SMOF组DBIL、ALT、γ-GT、TBA峰值均数分别为15.1(5.2~167.7)μmol·L^-1、(32.5±18.8) U·L^-1、(176.9±74.7) U·L^-1、(53.3±35.8)μmol·L^-1,其中2组DBIL、ALT峰值比较,P分别为0.026及0.034,差异均有统计学意义。2组γ-GT、TBA峰值比较差异无统计学意义。LCT组PNAC发生率为40%,SMOF组PNAC发生率为16.7%,2组比较差异有统计学意义(P=0.042)。结论: 与LCT比较,SMOF能减轻超未成熟儿DBIL、GOT、γ-GT、TBA的严重程度,并降低PNAC的发生率,对肝脏有一定的保护作用。     

小檗碱衍生物9-OH小檗碱的抗帕金森病活性和作用机制研究

目的: 探究小檗碱衍生物9-OH小檗碱对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶盐酸盐(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine hydrochloride,MPTP)诱导的斑马鱼帕金森病(Parkinson’s disease,PD)症状是否具有缓解作用。方法: 受精后1 d (day post fertilization,dpf)的斑马鱼胚胎,设置空白对照组,50 μmol·L^-1 MPTP造模组,50 μmol·L^-1 MPTP与不同质量浓度(100,300,500 μmol·L^-1)9-OH小檗碱共处理组。4 dpf时,分别观察并记录各组斑马鱼多巴胺神经元及脑部血管的发育情况;5 dpf时,监测行为学,记录各组行为学数据并分析差异,收集后检测PD相关基因表达变化,包括编码α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)的α-syn、编码E3泛素连接酶(E3 ubiquitin protein ligase,Parkin)的parkin、编码自噬相关基因5(autophagy related gene 5,Atg5)的atg5、编码微管相关蛋白1轻链3B (microtubule-associated protein 1 light chain 3B,Lc3b)的lc3b。结果: MPTP造模组的斑马鱼多巴胺神经元和脑部血管出现不同程度的损伤,且出现运动迟缓、焦虑等PD状行为,与PD相关的基因表达也出现异常;而MPTP与9-OH小檗碱共处理组的斑马鱼多巴胺神经元和脑部血管的损伤得到改善,行为学能力得到恢复,且PD相关基因的表达趋于正常。结论: 小檗碱衍生物9-OH小檗碱对MPTP诱导的斑马鱼帕金森病症状有缓解作用。     

逆萎康含药血清调控AKT/GSK-3β/β-catenin通路抑制MC细胞的上皮间质转化

目的：逆萎康（NWK）含药血清对MC细胞（MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞系（GES-1）恶性转化）上皮间质转化（EMT）的影响及可能机制。方法：用不同浓度含药血清作用于MC细胞,采用蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin、p-AKT Ser⁴⁷³、β-catenin、α-SMA、GSK-3β、p-GSK-3β Ser⁹、AKT蛋白的表达影响;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测C-myc基因的表达影响。结果：与空白组比较,蛋白质印迹实验表明,逆萎康含药血清、AKT抑制剂GSK690693（10 μmol·L^-1）使得β-catenin、p-AKT Ser⁴⁷³、E-cadherin和p-GSK-3β Ser⁹在蛋白水平的表达下调（P<0.05）,而α-SMA、N-cadherin和vimentin在蛋白水平上的表达上调（P<0.05）,但GSK-3β和AKT这两种蛋白的表达差异不显著;qRT-PCR结果证实逆萎康含药血清可以抑制C-myc mRNA（P<0.05）的表达,并且加入抑制剂后抑制作用增强,差异具有显著性。结论：逆萎康通过抑制AKT/GSK-3β/β-catenin信号通路的活化,抑制MC细胞的EMT过程。     

雷诺定受体介导的BK通道开放在他克莫司对大鼠胸主动脉舒张中的作用

目的:探究他克莫司对大鼠胸主动脉的舒张作用及其机制.方法:采用多道生理记录仪测定大鼠胸主动脉环张力,观察他克莫司对去甲肾上腺素诱导收缩的胸主动脉血管环的舒张作用,并观察伊比蝎毒素(选择性大电导钙离子激活的钾离子通道抑制剂)和雷诺定(Ryanodine,肌浆网钙离子释放抑制剂)对他克莫司舒张曲线的影响.结果:他克莫司对去甲肾上腺素(NE 1.0×10^-6 mol·L^-1)预收缩有内皮和去内皮大鼠胸主动脉环均有显著地舒张作用,且非内皮依赖性途径在他克莫司对血管的舒张作用中起着重要作用,他克莫司对NE预收缩的去内皮大鼠胸主动脉环的舒张作用,可被雷诺定(10 μmol·L^-1)和iberiotoxin(100 nmol·L^-1)抑制,分别从(17.41±1.94)%降至(12.38±1.17)%(雷诺定孵育前后比较,P< 0.05,n=7)和(16.69±2.66)%降至(10.46±1.17)%(iberiotoxin孵育前后比较,P< 0.05,n=7).结论:他克莫司对血管的舒张作用主要是通过雷诺定受体引起钙火花的释放,从而激活大电导钙离子激活的钾离子通道(BK通道)开放引起的.     

罗汉果苷V通过Wnt/β-catenin信号通路对糖尿病状态成骨细胞增殖与分化的影响

目的:探索罗汉果苷V(mogroside V,MV)对糖尿病状态下成骨细胞增殖分化的影响及其可能的作用机制。方法:构建糖尿病大鼠模型,分离培养正常大鼠和糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞。CCK8法检测不同质量浓度MV对糖尿病大鼠成骨细胞的毒性和增殖活性,并筛选出适宜的MV浓度用于后续实验;取正常大鼠和糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞,分别设立正常对照组、高糖组及MV+高糖组,茜素红染色及定量分析检测成骨分化情况,实时荧光定量PCR检测成骨相关因子ALP、OCN及Wnt/β-catenin信号通路相关因子Runx2,β-catenin,Axin2,Lef1及Osterix的mRNA表达。结果:0~0.4 g·L^-1质量浓度范围内MV对糖尿病状态成骨细胞均未表现出毒性,且浓度为6.25×10^-3g·L^-1时促进细胞增殖活性最强;与高糖组相比,MV+高糖组(含质量浓度为6.25×10^-3g·L^-1 MV)成骨分化能力增强,ALP、OCN、Runx2、β-catenin、Lef1、Osterix的表达显著升高,Axin2的表达显著降低。 结论:罗汉果苷V可促进糖尿病状态成骨细胞增殖与分化,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关。     

产ESBL大肠埃希菌致血流感染的临床特征及危险因素分析

目的： 探讨产ESBLs大肠埃希菌血流感染的临床特征及危险因素。方法： 回顾性分析2016年01月-2018年12月某院发生的大肠埃希菌血流感染住院患者临床特征、产超广谱β内酰胺酶（extended spectrum β-lactamase,ESBL）情况及药敏结果等。结果： 共纳入大肠埃希菌血流感染患者170例,ESBLs菌株98例;重症医学科占比最高（50例,29.4%）,其中ESBLs菌株30例（30.6%）,非ESBLs菌株20例（27.8%）。ESBLs菌株对头孢唑林、头孢噻肟、氨苄西林、哌拉西林全部耐药;对阿莫西林克拉维酸钾、氨苄西林舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦的敏感率为70.6%、20.2%、80.2%。ESBLs组WBC、NEU计数、NEU%、PCT水平高于非ESBLs组,差异有显著性（Z=-2.149,P=0.032;Z=-2.521,P=0.012;Z=-2.990,P=0.003;Z=-2.149,P=0.032;Z=-2.543,P=0.011）。单因素分析示慢性肺部疾病、泌尿道梗阻、慢性肝胆疾病、高血压、碳青霉烯类抗菌药用药史、β-内酰胺酶抑制剂复合制剂在2组间差异有显著性（χ²=4.891,P=0.027;χ²=6.746,P=0.009;χ²=7.934,P=0.005;χ²=6.041,P=0.014;χ²=36.862,P< 0.001;χ²=15.178,P<0.001）,Logistics多因素回归分析显示慢性肺部感染、泌尿道梗阻、碳青霉烯类抗菌药物、β-内酰胺/酶抑制剂类抗菌药物是ESBLs菌株血流感染的独立危险因素（χ²=6.515,P=0.011;χ²=3.709,P=0.050;χ²=39.237,P<0.001;χ²=16.922,P<0.001）。ESBLs菌株致病变多见左肺或同时累及双肺（χ²=9.042,P=0.002;χ²=6.541,P=0.013）。结论： 该院血流感染大肠埃希菌ESBLs检出率较高,耐药率高,炎症程度更明显。经验性治疗应结合患者危险因素考虑合理使用β内酰胺酶抑制剂复合制剂或碳青霉烯类抗菌药物。     

芥酸酰胺抑制甘氨酸裂解介导抗大鼠应激性肝损伤的机制研究

目的：研究芥酸酰胺（erucamide,Era）对应激所致大鼠肝损伤的作用机制。方法：将成年雌性SD大鼠分为3组：正常组（normal group）、应激性肝损伤组（stress-induced liver injury,SLI）和SLI+erucamide （95.4 μmol·L^-1·kg^-1）治疗组。使用Illumina测序平台对来自9个大鼠肝脏组织的转录组进行测序,筛选差异表达的基因和相关的细胞信号传导途径及RT-qPCR验证基因表达。HE染色法观察大鼠肝脏组织的病理变化,并通过微孔板法测定丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）的水平。将处于对数生长期的LO2细胞分为正常组,皮质酮组,芥酸酰胺和甘氨酸（glycine,Gly）干预组。皮质酮（corticosterone,Cort,300 μmol·L^-1）用于体外诱导LO2细胞损伤,并使用MTT比色法测定并计算细胞活力。结果：芥酸酰胺对大鼠应激性肝损伤具有显著影响,HE染色法和ALT/AST检测实验结果证明了这一点（P<0.05）;此外,芥酸酰胺降低了甘氨酸裂解系统中关键基因DLD和AMT的表达（P<0.05）,从而减少甘氨酸裂解,达到预防大鼠应激性肝损伤的作用。在体外实验中,芥酸酰胺和甘氨酸均可预防Cort诱导的LO2肝细胞损伤。结论：芥酸酰胺抑制了甘氨酸的裂解以抗大鼠应激性肝损伤。     

心脉隆对离体人脐动脉血管张力的影响及其机制

目的：探讨心脉隆对离体人脐动脉血管张力的影响,并分析其机制。方法：运用离体血管张力测定实验方法,累积加入不同浓度的心脉隆,观察其对静息人脐动脉的张力影响;加入60 mmol·L^-1 KCl、1 μmol·L^-1苯肾上腺素（PE）使血管收缩、张力平稳后,观察不同浓度心脉隆对预收缩的人脐动脉张力的影响;同时观察细胞外Ca²⁺浓度、L-型钙通道阻滞剂维拉帕米（VEP）对心脉隆血管效应的影响。结果：心脉隆能浓度依赖性收缩静息状态下内皮完整的离体人脐动脉,对KCl、PE预收缩的离体人脐动脉有进一步增加张力的作用,在无钙灌流液中诱发的血管收缩效应明显减弱,随着细胞外Ca²⁺浓度增加其致血管收缩张力增加,维拉帕米能显著抑制心脉隆对人脐动脉的收缩反应。结论：心脉隆可促进细胞外Ca²⁺内流和细胞内Ca²⁺释放,从而具有浓度依赖性地收缩离体人脐动脉的作用。     

上呼吸道感染对精神分裂症患者氯氮平血药浓度的影响

目的：分析上呼吸道感染与精神分裂症患者的氯氮平（clozapine,CLZ）血药浓度、不良反应三者的相关性。方法：纳入35例CLZ稳定治疗的精神分裂症伴有上呼吸道感染的住院患者,分别采集感染前后清晨服药前的空腹血,采用HPLC-MS测定CLZ稳态谷浓度。结果：35例患者在感染后CLZ血药浓度有不同程度的升高,基线期平均血药浓度为（481.6±258.0）μg·L^-1,感染期平均血药浓度为（853.8±452.4）μg·L^-1。17例患者发生了CLZ血药浓度升高后的不良反应,其中最多的是精神性不良反应。结论：上呼吸道感染对CLZ血药浓度的升高有一定影响,并导致不良反应的发生。所以住院感染期间CLZ血药浓度的监测是至关重要的,同时应注意剂量的调整,减少不良反应发生的风险。     

大麻二酚对应激性心肌损伤的预防及其机制

目的：探索应激性心肌损伤之后,大鼠心肌组织及心肌细胞的状态和可能的作用机制。方法：采用水浸束缚应激的方式,建立大鼠应激性心肌损伤模型,观测大麻二酚治疗之后应激大鼠心率和血压的变化,血清中CORT、BNP、c-TnI、TNF-α和Il-1β的含量变化,以及应激前后心肌组织中mRNA的差异表达,将差异表达最显著的前100位基因按照具有氧化作用和抗氧化作用进行分类,采用HE染色和免疫组化研究方法,观察大麻二酚对应激性心肌损伤的影响,并利用Western blot研究应激性心肌损伤后心肌细胞中蛋白质差异表达。结果：通过HE染色、免疫组化和生化酶学检测验证大鼠应激性心肌损伤模型,心肌损伤的大鼠心率和血压明显升高（P<0.05）,血清中CORT （P<0.05）、BNP （P<0.05）、c-TnI （P<0.05）、TNF-α（P<0.05）和Il-1β（P<0.01）也显著升高,使用大麻二酚预处理之后,大鼠的心率（P<0.05）和血压（P<0.01）明显下降,血清中CORT （P<0.001）、c-TnI （P<0.001）、TNF-α（P<0.01）和Il-1β（P<0.05）也显著降低,转录组显示差异表达最显著的前100位基因中,44个基因发挥氧化作用,34个基因具有抗氧化作用。体外研究发现,心肌细胞应激之后细胞中MDA含量明显升高（P<0.01）,SOD （P<0.01）和GSH （P<0.01）显著降低,经过剂量为2.5 μmol·L^-1的大麻二酚预处理之后,MDA含量明显降低（P<0.01）,SOD （P<0.05）和GSH （P<0.01）水平却明显升高,利用Hoechst 33342和Annexinv-FITC/PI进行双染凋亡细胞检测,发现应激之后心肌细胞凋亡数量显著增加,大麻二酚预处理可减少心肌细胞凋亡,应用Western blot检测发现,应激之后Gsk3β和Bax蛋白表达量显著升高,而Nrf2和Bcl2蛋白表达量则显著降低,经过大麻二酚预处理之后Gsk3β、Bax蛋白表达量显著降低,Nrf2和Bcl2蛋白表达量显著升高。结论：大麻二酚可预防大鼠应激性心肌损伤,并且其作用机制与减少Gsk3β、Bax的表达和升高Nrf2、Bcl2蛋白的表达水平有关。     

柚皮苷对抗表阿霉素所致H9C2心肌细胞毒性的研究

目的: 柚皮苷(Nar)对抗表阿霉素(EPI)所致H9C2心肌细胞毒性的研究。方法: 取H9C2心肌细胞均分为空白组、对照组、模型组、低剂量、中剂量及高剂量组,低剂量、中剂量及高剂量组分别给予10,20,40 μmol·L^-1 Nar预处理24 h后加入5 μmol·L^-1 EPI,对照组加入等体积的培养基,同样条件下培养。ELSIA法检测5组细胞肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平,CCK-8法检测5组心肌细胞活力,Western blot 法检测GRP78、Bax及 Bcl-2 蛋白水平。结果: (1)CK-MB、LDH及MDA水平在模型组>低剂量组>中剂量组>高剂量组>对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05);(2)心肌细胞活力在对照组>高剂量组/中剂量组>低剂量组>模型组,差异均有统计学意义(均为P<0.05),但高剂量组及中剂量组间无统计学意义(P>0.05);(3)GRP78及Bax蛋白水平在模型组>低剂量组>中剂量组/高剂量组>对照组,但Bcl-2蛋白水平在对照组>高剂量组/中剂量组>低剂量组/模型组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论: 柚皮苷具备潜在的保护表阿霉素所致H9C2心肌细胞损伤作用,其作用机制可能与上调Bcl-2表达有关。     

高效液相色谱-电雾式检测器法同时测定川芎茶调颗粒中7个活性成分

目的：建立高效液相色谱法联合电雾式检测器同时测定川芎茶调颗粒中阿魏酸、甘草酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、Z-藁本内酯、欧前胡素及异欧前胡素的含量。方法：采用Agilent Eclipse XDB-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以10 mmol·L^-1甲酸铵（A）-80%乙腈（B）为流动相,梯度洗脱,流量1.0 mL·min^-1,柱温35℃,CAD雾化器温度为35℃,采集频率10 Hz,过滤常数5.0。结果：阿魏酸、甘草酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、Z-藁本内酯、欧前胡素及异欧前胡素的质量浓度分别在0.55~17.50（r=0.999 9）,5.90~295.00（r=0.999 9）,2.51~125.50（r=0.999 9）,5.02~251.00（r=0.999 9）,4.99~249.50（r=0.999 9）,1.03~51.50（r=0.999 8）及0.59~29.50 μg·mL^-1（r=0.999 8）内线性关系良好;平均加样回收率分别为97.78%,97.76%,97.54%,98.09%,97.98%,97.89%及98.05%,RSD（n=6）分别为0.96%,1.50%,0.84%,1.49%,1.50%,1.37%及1.65%;方法精密度、重复性和溶液稳定性均符合规定。10批样品中上述7个成分含量范围分别为0.45~0.60,4.93~6.20,2.01~2.73,2.63~3.43,4.72~5.70,1.13~1.84及0.38~0.52 mg/袋。结论：经方法学验证,本方法准确性好,灵敏度高,简便易行,可用于川芎茶调颗粒中多指标成分的质量控制研究。     

鞣花鞣质肠道代谢产物Urolithins的合成及其对膀胱癌T24细胞增殖的研究

目的:合成鞣花鞣质肠道代谢产物尿石素(urolithins)系列物,并研究其体外抗癌活性。方法:本研究通过溴化反应、醛基氧化反应、铜催化的偶联酯化反应以及去甲基化反应等有机化学反应,构建了5种urolithins的合成路线,并利用核磁共振氢谱、碳谱确证了其结构。随后采用CCK8法测定了所得化合物对膀胱癌T24细胞增殖的影响。结果:显示urolithin A,urolithin B,甲基化urolithin C及甲基化urolithin A均可不同程度的抑制膀胱癌T24细胞增殖,其IC50分别为87.59,36.08,46.65,和213.97μmol·L-1。其中urolithin B对T24细胞的增殖抑制活性最强,urolithin C对T24细胞几乎没有抑制作用。结论:本研究合成的5种urolithins除urolithin C以外对T24细胞均有不同程度的抑制作用,且urolithin B对T24细胞的抑制作用最强。该合成路线简单、反应条件温和,同时为尿石素及其衍生物的合成和设计提供了新的思路。     

超高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中沙丁胺醇浓度

目的：建立测定人血浆中沙丁胺醇浓度的超高效液相色谱-质谱联用方法。方法：内标选用沙丁胺醇-d9,以甲醇沉淀血浆中蛋白,取上清液吹干复溶;采用Welch Ultimate XS-C₁₈色谱柱（3.0 mm×100 mm,3 μm）,预柱选用Welch Ultimate XB-C₁₈柱（2.1 mm×5 mm,5 μm）,以含0.1%甲酸5 mmol·L^-1乙酸铵的5%乙腈和纯乙腈为流动相,梯度洗脱;应用电喷雾离子化,正离子模式下进行多反应监测沙丁胺醇（m/z 240.2→m/z 147.9）和内标沙丁胺醇-d9（m/z 249.1→m/z 149.1）的浓度。结果：沙丁胺醇的线性范围为5~2 000 pg·mL^-1,定量下限为5 pg·mL^-1,日内、日间准确度为101.93%~109.03%,精密度RSD为1.45%~8.50%。结论：本方法简便、准确、灵敏、稳健且经济,适用于硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂的临床药动学研究和生物等效性评价。     

熊果酸对大鼠肾小球系膜细胞凋亡及TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的： 观察熊果酸（ursolic acid,UA）对活化的大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cells,MCs）凋亡与TGF-β₁/smads信号通路的影响,探讨UA抗肾纤维化的作用机制。方法： 原代培养并分离、纯化大鼠肾小球系膜细胞,转化生长因子β₁（TGF-β₁）刺激活化后,熊果酸按低剂量（2.5 μmol·L^-1）、中剂量（5 μmol·L^-1）、高剂量（10 μmol·L^-1）进行干预。Cell counting kit-8（CCK-8）及流式细胞仪分别检测系膜细胞活力及凋亡率,免疫印迹法测定系膜细胞TGF-β₁受体（TβRI、TβRII）、磷酸化蛋白P-smad信号分子表达的变化。结果： 5 μg·L^-1 TGF-β₁明显激活系膜细胞增殖,上调TGF-β₁受体表达及Smad2的磷酸化,抑制系膜细胞凋亡。低、中、高剂量熊果酸均能抑制系膜细胞增殖,促进凋亡,并下调系膜细胞TGF-β₁受体表达,抑制Smad2的磷酸化。结论： 熊果酸可通过影响TGF-β₁/Smads信号通路,诱导系膜细胞凋亡,拮抗细胞增殖,这可能是熊果酸抗肾脏纤维化的部分细胞学机制。