骨肉瘤大剂量甲氨喋呤化疗的血清药物浓度监测

测定骨肉瘤大剂量甲氨喋呤（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅＭＴＸ）化疗４２例次，化疗方案分两组，第一组ＭＴＸ剂量为２００ｍｇ／ｋｇ，静脉滴注时间为２、４、６小时；第二组静脉滴注时间为６小时，ＭＴＸ剂量为２００ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ。结果表明，零时血清药物浓度随滴注时间的延长而下降，为６．２×１０－４ｍｏｌ／Ｌ，５．１×１０－４ｍｏｌ／Ｌ、５．０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ，各时间组之间无显著性差异；零时血清药物浓度随ＭＴＸ剂量增加而显著增高，为５．０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ、７．７×１０－４ｍｏｌ／Ｌ、１．１×１０－３ｍｏｌ／Ｌ、２．７×１０－３ｍｏｌ／Ｌ。零时血清药物浓度越高，血清药物浓度下降速度越快，２４小时为１×１０－６ｍｏｌ／Ｌ左右，２４小时以后，下降速度缓慢，至７２小时为１×１０－７ｍｏｌ／Ｌ左右。２４小时以后的血清药物浓度差异不大     

羟基喜树碱抑制膀胱癌细胞机制探讨

目的 探讨羟基喜树碱的机制，为其临床治疗和预防浅表性膀胱癌提供理论和依据。方法 应用ＭＴＴ法、台盼蓝染色法、流式细胞术及电子显微镜技术，在体外研究羟基喜树碱对人Ｔ２４膀胱癌细胞生长的抑制作用，以及对细胞周期的影响，同时观察其是否可诱导细胞凋亡。结果 羟基喜树碱明显抑制Ｔ２４膀胱癌细胞的生长，对Ｔ２４细胞的半数抑制剂量（ＩＣ５０）为２８．５６ｍｇ／Ｌ；羟基喜树碱能阻止肿瘤细胞从Ｓ期进入Ｇ２／Ｍ期，并     

三烯高诺酮和米非司酮对离体大鼠及人体子宫内膜生长的抑制作用

大鼠子宫内膜离体培养４天后分组给药：对照组；丹那唑１０－６，３×１０－６，１０－５ｍｏｌ／Ｌ；三烯高诺酮３×１０－８，１Ｏ－７，３×１Ｏ－７ｍｏｌ／Ｌ；米非司酮１０－６，１０－５，１０－４ｍｏｌ／Ｌ。于给药５天后取培养子宫内膜切片，镜下观察其形态变化，全自动图象分析仪细胞计数。结果表明，丹那唑抑制大鼠子宫内膜的生长，而三烯高诺酮和米非司酮未见明显抑制效应。人体子宫内膜离体培养４天后分组给药，１Ｏ－９ｍｏｌ／Ｌ雌二醇、１０－７ｍｏｌ／Ｌ孕酮均能促进子宫内膜的生长。在给雌二醇或孕酮的同时加３×１０－６ｍｏｌ／Ｌ丹那唑或１０－７ｍｏｌ／Ｌ三烯高诺酮或１Ｏ－５ｍｏｌ／Ｌ米非司酮。结果表明，丹那唑、三烯高诺酮和米非司酮均能抑制子宫内膜的生长，而在雌二醇或孕酮缺乏的条件下，三烯高诺酮和米非司酮对子宫内膜的生长没有明显抑制作用。此结果表明三烯高诺酮和米非司酮对子宫内膜生长的抑制作用有赖于雌二醇或孕酮的存在。     

逆转录病毒转体介导的人IL—2基因在膀胱肿瘤细胞T24中的表达

报道逆转录病毒载体介导的人白细胞介素－２（ＩＬ－２）ｃＤＮＡ在人源性膀胱肿瘤细胞Ｔ２４中的表述，ＩＬ－２ｃＤＮＡ插入到真核表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ中，构建成ＩＬ－２ｃＤＮＡ的表达载体ｐＤＯＲＩＬ２，磷酸钙沉淀法将其导入Ｔ２４细胞中，经Ｇ４１８选择，转染阳性率约为２０％；原位杂交技术检测ＩＬ－２ｃＤＮＡ可转录ＩＬ－２ｍＲＮＡ，细胞培养上汪肿ＩＬ－２活性２４小时每１０＾５细胞为８－３４Ｕ／ｍｌ。表明Ｉ     

芬太尼,阿芬太尼对低氧性肺血管收缩的影响

用家兔ＨＰＶ模型研究芬太尼和阿芬太尼对低氧性肺血管收缩（ＨＰＶ）的影响。３０只家兔随机分为三组，低氧组、芬太尼组和阿芬太尼组，每组均经三次低氧。芬太尼组和阿芬太尼组，三次低氧时药物浓度分别为２．３×１０－４ｍｍｏｌ／Ｌ、４．６×１０－４ｍｍｏｌ／Ｌ、６．９×１０－４ｍｍｏｌ／Ｌ和１．３×１０－３ｍｍｏｌ／Ｌ、２．６×１０－３ｍｍｏｌ／Ｌ、３．９×１０－３ｍｍｏｌ／Ｌ。与低氧组相比，芬太尼及低浓度阿芬太尼对ＨＰＶ无影响（Ｐ＞０．０５）。而３．９×１０－３ｍｍｏｌ／Ｌ，阿芬太尼时明显抑制ＨＰＶ（Ｐ＜０．０１）。提示阿芬太尼抑制ＨＰＶ与剂量相关。低氧前后灌流液中ＰＧＩ２和ＴＸＡ２的浓度测定，发现ＰＧＩ２／ＴＸＡ２平衡改变可能参与阿芬太尼抑制ＨＰＶ。     

抗骨质疏松药XW630对成骨细胞碱性磷酸酶mRNA表达的影响

目的研究新设计的抗骨质疏松药物ＸＷ６３０对成骨细胞碱性磷酸基因表达的影响,为其治疗骨代谢性疾病提供理论和实验依据。方法以成骨细胞ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１为体外实验模型,用含有１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ浓度的ＸＷ６３０,雌酚酮,四环素及四环素加雌酚酮的细胞培养液ＤＭＥＭ培养细胞,２４ｈ和７２ｈ提取细胞总ＲＮＡ并与碱性磷酸酶ｃＤＮＡ进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交。结果ＸＷ６３０对成骨细胞ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１合成和分泌碱性磷酸     

血管舒张药物解痉作用的研究

目的探讨６种常用血管舒张药的作用机理并比较药物的作用强度。方法将大鼠颈总动脉环悬挂在含２０ｍｌＫｒｅｂｓ液的浴槽中，测定血管环对各种药物反应后等长收缩张力的变化。结果利多卡因、硝苯啶、山莨菪碱、罂粟碱、硝普钠和酚妥拉明对１０－７ｍｏｌ／Ｌ去甲肾上腺素收缩的血管均产生恒定的舒张反应。半数抑制剂量（ＩＣ５０）硝普钠为３．１６×１０－８ｍｏｌ／Ｌ，罂粟碱为４．２０×１０－７ｍｏｌ／Ｌ，硝苯啶为１．３２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ，酚妥拉明为１０－７ｍｏｌ／Ｌ，山莨菪碱为５．６２×１０－５ｍｏｌ／Ｌ，利多卡因为１０－４ｍｏｌ／Ｌ。去除血管内皮不影响硝普钠，硝苯啶，酚妥拉明和山莨菪碱对血管的舒张作用；但抑制了浓度为１０－７～１０－５ｍｏｌ／Ｌ罂粟碱的血管舒张作用，增强了浓度为１０－５～１０－４ｍｏｌ／Ｌ利多卡因的血管舒张作用。结论硝普钠、罂粟碱、硝苯啶、酚妥拉明、利多卡因和山莨菪碱均是有效的血管松弛剂，以硝普钠的作用最强。内皮细胞的功能可影响罂粟碱和利多卡因的血管舒张作用。     

过氧化亚硝酸钠导致大鼠睾丸支持细胞DNA损伤的研究

在一氧化氮与氧自由基共同存在的环境中，二者反应生成过氧化亚硝酸（ＯＮＯＯ－），可以氧化多种底物，具有强烈毒性。我们采用ＤＮＡ解螺旋的荧光测定法（ＦＡＤＵ），观察了ＯＮＯＯ－对大鼠睾丸支持细胞ＤＮＡ的破坏作用。材料与方法　酸化的过氧化氢与亚硝酸钠４℃下反应制备ＯＮＯＯ－［１］。成年雄性ＳＤ大鼠５只，无菌条件下取出睾丸制备纯支持细胞单细胞悬液［２］。０１５ｍｏｌ／ＬＰＢＳ调节细胞浓度至５０×１０６／ｍｌ。系列浓度ＯＮＯＯ－（共分６组：对照组、分解对照组、２５×１０－５ｍｏｌ／Ｌ组、５×１０－５ｍ…     

膀胱癌细胞凋亡检测方法的比较研究

目的 比较几种检测羟基喜树碱（ＨＰＴ）诱导的膀胱癌细胞凋亡的方法。方法 通过流式细胞分析观察ＨＰＴ诱导Ｔ２４膀胱癌细胞凋亡的量效关系;通过荧光染色对凋亡细胞的形态特征进行分析;直接使用苏木素染色进行细胞凋亡的检测;应用ＤＮＡ分析进行ＤＮＡｌａｄｄｅｒ检测。结果 （０．０１￣１０）μｇ／ｍｌ的ＨＰＴ在体外能够诱导Ｔ２４细胞凋亡,其最佳诱导时间在３小时以后。流式细胞（０．０１￣１０）μｇ／ｍｌ的ＨＰ     

成年大鼠破骨细胞体外培养及细胞凋亡的观察

目的　为研究骨重建过程中破骨细胞的关键作用,建立成年大鼠（１２ ～５０ 周龄） 破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。方法　大鼠处死后,在无菌条件下取出股骨,剪去两骺端,以αＭＥＭ 将骨髓细胞冲洗出, 并离心洗细胞２ 次,置于αＭＥＭ 培养液,内含αＭＥＭ,体积分数为１０％ 的胎牛血清（ＦＣＳ） 和１α,２５（ＯＨ）２ Ｖｉｔ Ｄ３ １０ －８ ｍｏｌ／Ｌ,在２４ 孔板内,以体积分数为５ ％ 的ＣＯ２ ,３７ ℃,培养８ 天。按原位ＤＮＡ 末端标记（ＴＵＮＥＬ）检测试剂盒方法染色细胞,以荧光显微镜观察细胞凋亡。结果　经活体观察、ＨＥ染色、抗酒石酸酸性磷酸酶（ＴＲＡＰ） 染色,光学显微镜、扫描电镜观察骨片之陷窝的形成,证实培养的细胞为破骨细胞;ＴＵＮＥＬ 检测,荧光显微镜下可见破骨细胞核染色质浓缩、裂解等凋亡细胞的典型变化与未凋亡的破骨细胞。结论　本实验建立了成年大鼠破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。