布拉酵母菌散联合蒙脱石散对轮状病毒性肠炎患儿的疗效、免疫功能及肠道微生态影响

目的探讨布拉酵母菌散联合蒙脱石散治疗轮状病毒性肠炎(RVE)患儿的临床疗效,以及对患儿免疫功能与肠道微生态影响。 方法选择2018年5月至2020年5月,于海南省妇女儿童医学中心就诊的126例RVE患儿为研究对象。采用随机数字表法,将其随机分为研究组(n＝63,采取布拉酵母菌散+蒙脱石散治疗)与对照组(n＝63,采取双歧杆菌+蒙脱石散治疗)。采用χ²检验,进行2组患儿临床疗效及不良反应率比较。采用成组t检验与配对t检验,对2组患儿临床症状持续时间、住院时间,治疗前、后血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-8,免疫功能指标CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺水平,以及肠道菌群数量等进行比较。2组患儿性别构成比、年龄、体重、轻与中度脱水发生率等临床资料,治疗前2组患儿血清TNF-α、IL-8及CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺水平,以及拟杆菌、大肠埃希菌、肠球菌、乳酸杆菌与双歧杆菌数量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。本研究经过海南省妇女儿童医学中心伦理委员会批准(审批文号：Z20180111),与患儿监护人均签署临床研究知情同意书。 结果①研究组患儿的治疗总有效率为96.8%(61/63),显著高于对照组的87.3%(55/63),并且差异有统计学意义(χ²＝3.910、P＝0.048)。②研究组患儿腹泻、呕吐、腹痛持续时间及住院时间分别为(32.4±5.5) h、(23.4±4.4) h、(25.6±3.9) h、(46.3±6.7) h,均显著短于对照组的(54.4±7.3) h、(46.8±6.6) h、(49.9±5.9) h、(66.3±7.5) h,并且差异均有统计学意义(t＝7.498、16.427、11.944、8.420, P<0.001)。③治疗后,2组患儿血清TNF-α、IL-8水平组内比较,均较治疗前显著降低;研究组亦均较对照组显著降低,并且差异均有统计学意义(P<0.001)。④治疗后,2组患儿CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平组内比较均显著增高,而CD8⁺水平组内比较,则显著降低;治疗后,研究组CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平,亦较对照组显著增高,而CD8⁺水平则较对照组显著降低,并且差异均有统计学意义(P<0.05)。⑤治疗后,2组患儿拟杆菌、乳酸杆菌及双歧杆菌数量组内比较,均较治疗前显著增高;研究组亦均较对照组显著增高;2组患儿肠球菌、大肠埃希菌数量,均较治疗前显著下降,研究组亦均较对照组显著下降,并且上述差异均有统计学意义(P<0.05)。⑥治疗中,2组患儿治疗相关不良反应率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。 结论布拉酵母菌散联合蒙脱石散治疗RVE患儿的临床疗效良好,可降低患儿炎症反应、改善机体免疫功能、调节肠道菌群,并且安全性较高。     

探讨在细菌性感染及病毒性感染疾病中淋巴细胞亚群的表达水平及意义

目的探讨不同感染性疾病患者外周血中T、CD3⁺CD4⁺T、CD3⁺CD8⁺T 、CD4^-CD8^-T、CD4⁺CD8⁺T、B、NK、CD4⁺Treg、CD8⁺Treg、CTL及CD28^-CTL等淋巴细胞亚群的表达水平,为不同感染性疾病的辅助诊断、免疫监测以及临床治疗提供依据。 方法选取本院2017年10月-2018年2月诊治的不同类型感染性疾病86例,其中败血症26例,HBV感染30例,EBV感染30例,对照组30例;用流式细胞术检测各组淋巴细胞亚群表达水平。 结果与对照组相比,HBV组、EBV组、败血症组患者的外周血CD3⁺CD4⁺T、CD3⁺CD8⁺T 、CD4⁺CD8⁺T、B、NK、CD4⁺Treg、CTL及CD28^-CTL等淋巴细胞亚群的表达水平差异具有统计学意义(P<0.05),HBV组中CD3⁺CD4⁺T和CTL升高,NK和CD28^-CTL降低;EBV组中CD3⁺CD8⁺T、CD4⁺Treg和CTL升高,CD3⁺CD4⁺T和NK降低;败血症组中B和CTL升高,CD4^-CD8^-T、NK和CD28^-CTL降低。与败血症和HBV组相比,EBV组的CD3⁺CD4⁺T表达降低,CD3⁺CD8⁺T和CTL表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与HBV组相比,败血症组CD4^-CD8^-T表达降低,与EBV组相比,败血症组B表达升高,HBV组CD28^-CTL降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。另外,比较发现HBV组、EBV组、败血症组三组患者的外周血中均表现为CTL表达升高,NK表达降低。 结论不同感染性疾病患者外周血中CD3⁺CD4⁺T、CD3⁺CD8⁺T 、CD4^-CD8^-T 、B、NK、CD4⁺Treg、CTL及CD28^-CTL等淋巴细胞亚群的表达水平存在差异,通过分析其表达水平的变化可为不同感染性疾病的辅助诊断、免疫监测以及临床治疗提供依据。     

丙种球蛋白辅助治疗对重症肺炎合并心力衰竭患儿预后的改善效果

目的分析丙种球蛋白辅助治疗对重症肺炎合并心力衰竭患儿预后的改善效果。方法选取2017年5月-2018年10月湖州市南浔区人民医院收治的重症肺炎合并心力衰竭患儿80例,采用随机数字表分为观察组和对照组,每组40例患儿。两组患儿均进行常规治疗,观察组在对照组基础上给予丙种球蛋白治疗。比较两组患儿的疗效,IgG水平,T细胞亚群CD4⁺、CD8⁺及CD4⁺/CD8⁺水平,阳性症状、体征的缓解时间及住院时间。结果观察组患儿有效率为95.00%,显著高于对照组患儿的72.50%(P<0.05)。治疗后,观察组患儿IgG、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平显著高于对照组患儿(均P<0.05),CD8⁺水平显著低于对照组患儿(P<0.05)。治疗后,观察组患儿IgG、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平显著高于治疗前(均P<0.05),CD8⁺水平显著低于治疗前(P<0.05)。观察组患儿阳性症状、体征的缓解时间及住院时间均显著短于对照组患儿(均P<0.05)。结论丙种球蛋白辅助治疗可提高重症肺炎合并心力衰竭患儿的疗效,增强患儿免疫功能,减轻阳性症状与体征,缩短住院时间,改善预后,值得临床推广。     

磁共振弥散加权成像对慢性肾脏疾病患儿肾功能的评估

目的探讨MRI弥散加权成像(DW-MRI)的表观弥散系数(ADC)对慢性肾脏疾病(CKD)患儿肾功能的评估作用。 方法选择2014年1月至2017年6月,四川大学华西第二医院收治的77例CKD患儿为研究对象,纳入病例组。根据儿童CKD分期,进一步将病例组患儿分为CKD 1～2期亚组(n＝60),CKD 3～5期亚组(n＝17)。将同期本院招募的16例健康儿童志愿者,纳入对照组。采用DW-MRI检测所有受试儿的双肾皮质、髓质ADC值。同时采集其接受DW-MRI检查前1个月内的血清肌酐浓度和肾小球滤过率估算值(eGFR)。病例组和对照组受试儿双肾皮质、髓质ADC值组间比较,采用成组t检验,组内比较采用配对t检验。采用方差分析对CKD 1～2期亚组、CKD 3～5期亚组及对照组3组患儿的双肾皮质、髓质ADC值进行比较,并采用Bonferroni法进一步进行两两比较。对CKD患儿双肾皮质、髓质ADC值与eGFR、血清肌酐浓度的相关性分析,采用Pearson相关性分析。本研究通过四川大学华西第二医院伦理委员会审查(审批文号：2014081)。对所有受试儿进行MRI检查前,均征得其监护人知情同意,并签署知情同意书。病例组和对照组受试儿性别构成比、年龄分别比较,差异均无统计学意义(P＝0.785、0.980)。 结果①病例组受试儿自身左、右肾皮质ADC值比较,以及左、右肾髓质ADC值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组受试儿自身左、右肾皮质ADC值比较,以及左、右肾髓质ADC值比较,差异亦均无统计学意义(P>0.05)。②CKD 1～2期亚组受试儿双肾皮质、髓质ADC值分别为(2.22±0.09)×10^－3 m²/s、(1.97±0.11)×10^－3 m²/s,CKD 3～5期亚组分别为(2.02±0.16)×10^－3 m²/s、(1.72±0.14)×10^－3 m²/s,对照组分别为(2.35±0.06)×10^－3 m²/s、(2.09±0.09)×10^－3 m²/s。上述3组受试儿双肾皮质、髓质ADC值分别整体比较,差异均有统计学意义(F＝42.942、48.956,P<0.001)。进一步对其进行两两比较的结果显示,上述3组受试儿任意2组的双肾皮质、髓质ADC值分别比较,差异均有统计意义(P<0.001)。③病例组CKD患儿中,双肾皮质、髓质ADC值与eGFR均呈线性正相关关系(r＝0.621、0.657,P<0.001),与血清肌酐浓度均呈线性负相关关系(r＝－0.708、－0.681,P<0.001)。 结论本研究认为,DW-MRI是评估CKD患儿肾功能的有效方法。ADC值可反映儿童肾功能,并且ADC值可为临床判断健康儿童、轻度CKD和中、重度CKD患儿提供参考依据。但是,DW-MRI是否对CKD患儿肾功能评估具有应用前景,则尚需大样本、多中心随机对照试验进一步研究、证实。     

2型糖尿病医院感染病原学和25-(OH)D3与T细胞亚群表达及意义

目的探讨老年2型糖尿病(T2DM)医院感染患者血前白蛋白(PAB)、25羟基维生素D3[25-(OH)D3]、T细胞亚群表达变化及对病原菌鉴别的临床价值。方法选取2016年7月-2019年12月杭州师范大学附属医院老年T2DM伴医院感染患者42例为感染组,同期T2DM无医院感染患者42例为未感染组。统计感染组病原菌分布特征,对比两组及不同感染类型(革兰阳性菌、革兰阴性菌)患者血PAB、25-(OH)D3、T细胞亚群(CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺)水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线探讨血PAB、25-(OH)D3、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺水平单一、联合检测鉴别病原菌类型的价值。结果42例感染患者共分离出病原菌42株,主要菌株为革兰阴性菌,共24株,占57.14%;感染组血PAB、25-(OH)D3、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺水平低于未感染组(P<0.05);革兰阴性菌感染患者血PAB、25-(OH)D3、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺水平低于革兰阳性菌感染患者(P<0.05);血PAB、25-(OH)D3、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺联合检测鉴别患者病原菌类型的曲线下面积(AUC)值0.877最大,鉴别敏感度为75.00%、特异度为94.44%。结论老年T2DM患者医院感染以革兰阴性菌为主,出现感染时血PAB、25-(OH)D3、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺水平降低,且革兰阴性菌感染患者降低更显著,上述细胞、因子联合检测便于临床早期鉴别病原菌类型,为经验用药提供参考。     

维生素B 6和丰诺安对X射线辐照小鼠外周血细胞的保护作用及意义

目的观察维生素B₆和丰诺安(20AA复方氨基酸)对X射线辐照小鼠外周血细胞的保护作用。 方法将小鼠随机分为对照组、模型组、维生素B₆组、丰诺安组和联合组。除对照组外，其余4组小鼠均接受X线照射。从照射前4 d开始至照射后第10天，对照组和模型组腹腔注射等渗盐水，维生素B₆组、丰诺安组和联合组分别腹腔注射维生素B₆、丰诺安、以及维生素B₆和丰诺安的混合液，照射后第11天处死小鼠，检测小鼠血常规和外周血淋巴细胞亚群。 结果与对照组相比，X线照射小鼠外周血白细胞总数、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、红细胞、血小板、自然杀伤(natural killer cell，NK)细胞、总T细胞、CD4^＋和CD8^＋ T细胞数量和血红蛋白浓度均显著降低(P<0.05)；CD4/CD8比值升高(P<0.05)；丰诺安、维生素B₆和混合液均可显著提高X线照射小鼠的白细胞总数、淋巴细胞、血小板、NK细胞、B细胞、总T细胞、CD4^＋和CD8^＋ T细胞数量(P<0.05)；混合液在提高总T细胞数量[(41.94%±10.90%)比(32.14%±5.86%)]和CD4^＋ T细胞数量[(33.11%±10.00%)比(25.01%±4.64%)]效果上优于维生素B₆(P<0.05)，在提高白细胞总数[(6.3±0.6)×10⁹/L比(3.7±0.5)×10⁹/L]和淋巴细胞数量[(5.3±0.4)×10⁹/L比(3.4±0.3)×10⁹/L]效果上优于丰诺安组(P<0.05)。 结论维生素B₆和丰诺安对X射线辐照小鼠外周血细胞具有保护作用，维生素B₆和丰诺安联合应用优于单一应用。     

T细胞亚群在儿童喘息性疾病中表达的研究

目的 探讨喘息性疾病患儿外周血T淋巴细胞亚群的表达及意义。 方法 应用流式细胞仪检测哮喘急性发作组、喘息性肺炎组及正常对照组儿童外周血T细胞亚群表达水平。结果 哮喘急性发作组和喘息性肺炎组CD3⁺淋巴细胞百分比均较正常对照组明显降低(P<0.01),且二者降低水平一致(P>0.05)。哮喘急性发作组CD4⁺淋巴细胞百分比较正常对照组和喘息性肺炎组均明显增高(P<0.05),且喘息性肺炎组CD4⁺淋巴细胞百分比与对照组比较差异也有统计学意义(P<0.05)。哮喘急性发作组及喘息性肺炎组CD8⁺淋巴细胞百分比与正常对照组比较明显降低(P<0.05),而哮喘急性发作组及喘息性肺炎组之间差异无统计学意义(P>0.05)。哮喘急性发作组和普通喘息组CD3^-CD19⁺和CD19⁺CD23⁺较正常对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),但这些指标在哮喘急性发作组和普通喘息组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。 结论细胞免疫功能紊乱参与儿童喘息性疾病的发病。     

布地奈德联合重组人干扰素α-1b治疗急性婴幼儿毛细支气管炎的临床疗效

目的探讨布地奈德联合重组人干扰素(rhIFN)α-1b治疗急性婴幼儿毛细支气管炎(AIB)的临床疗效。 方法选取2017年1月至2019年1月，长江大学附属仙桃市第一人民医院院收治的174例AIB患儿为研究对象。采用随机数字表法，将其分为观察组(n＝87)和对照组(n＝87)。对观察组患儿进行布地奈德雾化+rhIFNα-1b雾化吸入治疗，而对照组患儿仅进行布地奈德雾化吸入治疗。比较2组患儿一般临床资料，治疗总有效率，主要临床症状消失时间，治疗前、后患儿血清T淋巴细胞亚群(CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺)，免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)，以及血清白细胞介素(IL)-4、-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平变化情况。本研究遵循的程序符合纳入病例医院伦理委员会制定的伦理学标准，得到该委员会批准(审批文号：XTYYLW2021036)，并与所有患儿监护人签署临床研究知情同意书。 结果①2组患儿性别、年龄、病程、母乳喂养率等一般临床资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。②观察组患儿治疗总有效率(83/87，95.4%)显著高于对照组(71/87，81.6%)，并且差异有统计学意义(χ²＝8.135、P＝0.004)。③观察组患者咳嗽、喘息、气促及肺部啰音消失时间，均短于对照组，并且差异均有统计学意义(P<0.05)。④2组患儿治疗后，对CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺水平分别进行组间比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；而组内分别比较，则仅CD8⁺水平低于治疗前，其余CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平均分别高于治疗前，并且差异亦均有统计学意义(P<0.05)。⑤治疗后，观察组患儿IgG、IgA、IgM水平均分别高于对照组，并且差异均有统计学意义(P<0.05)；而组内分别比较，则IgG、IgA和IgM水平亦均高于治疗前，并且差异亦均有统计学意义(P<0.05)。⑥治疗后，2组患儿血清IL-4、-8及TNF-α水平均低于对照组，并且差异均有统计学意义(P<0.05)；而组内分别比较，则血清IL-4、IL-8及TNF-α水平亦均低于治疗前，并且差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论布地奈德联合rhIFNα-1b治疗AIB临床效果显著，可改善患儿临床症状及机体免疫功能，降低炎性反应。     

尖锐湿疣外周血HPV16抗原特异性CD_8~+CTL表型及其与HPV DNA的关系

目的 探究尖锐湿疣(CA)初发、复发患者外周血人乳头状瘤病毒(HPV)16抗原特异性CD_8⁺细胞毒性T细胞(CTL)表型特点及其与HPV DNA的关系。方法 选择海口市人民医院2017年10月-2020年10月收治的90例CA患者为研究对象，依据发病情况分为初发组43例和复发组47例，选择近期于医院接受包皮或子宫肌瘤手术患者30例为对照组，测定并比较外周血HPV16抗原特异性CD_8+细胞毒性T细胞(CTL)表型特点及其与HPV DNA的关系。方法 选择海口市人民医院2017年10月-2020年10月收治的90例CA患者为研究对象，依据发病情况分为初发组43例和复发组47例，选择近期于医院接受包皮或子宫肌瘤手术患者30例为对照组，测定并比较外周血HPV16抗原特异性CD_8⁺CTL频率、表型、分泌细胞毒性分子，HPV DNA水平。结果 CA患者CD_8+CTL频率、表型、分泌细胞毒性分子，HPV DNA水平。结果 CA患者CD_8⁺CTL、CD45RA+CTL、CD45RA^-CD27-CD27^-效应CTL、CD45RA-效应CTL、CD45RA^-CD27-CD27⁺中枢记忆CTL、CD45RA+中枢记忆CTL、CD45RA⁺CD27+CD27⁺初始性CTL、CD45RA+初始性CTL、CD45RA⁺CD27+CD27^-效应CTL等CTL频率与表型高于对照组(P<0.05),而复发组患者上述CTL频率与表型均高于初发组(P<0.05);CA患者颗粒酶B、穿孔素、自杀相关因子配体等CTL分泌细胞毒力分子高于对照组(P<0.05),而复发组患者CTL分泌细胞毒力分子水平高于初发组(P<0.05);初发组与复发组HPV DNA低载量患者CTL频率与表型、CTL分泌细胞毒力分子水平低于高载量患者(P<0.05);初发组、复发组患者CTL频率与表型比例、CTL分泌细胞毒力分子水平与HPV DNA载量呈正相关(P<0.05)。结论 外周血HPV16抗原特异性CD_8-效应CTL等CTL频率与表型高于对照组(P<0.05),而复发组患者上述CTL频率与表型均高于初发组(P<0.05);CA患者颗粒酶B、穿孔素、自杀相关因子配体等CTL分泌细胞毒力分子高于对照组(P<0.05),而复发组患者CTL分泌细胞毒力分子水平高于初发组(P<0.05);初发组与复发组HPV DNA低载量患者CTL频率与表型、CTL分泌细胞毒力分子水平低于高载量患者(P<0.05);初发组、复发组患者CTL频率与表型比例、CTL分泌细胞毒力分子水平与HPV DNA载量呈正相关(P<0.05)。结论 外周血HPV16抗原特异性CD_8⁺CTL表型及其分泌细胞毒性分子水平与尖锐湿疣发生、病情转归关系密切，同时其水平变化还与HPV DNA水平存在相关性。     

胸腔积液CD69表达在结核性胸膜炎诊断中的临床应用价值

目的 探究胸腔积液结核特异性CD4⁺T淋巴细胞活化诱导的CD69用于辅助诊断结核性胸膜炎的临床价值。方法 收集结核性胸腔积液43例、非结核性胸腔积液71例，同时检测2组胸腔积液结核特异性CD4⁺T淋巴细胞活化诱导的CD69、腺苷脱氨酶(ADA)及外周血结核T细胞γ-干扰素释放检测(TB-IGRA),另检测结核性胸腔积液组外周血结核特异性CD4⁺T淋巴细胞活化诱导的CD69水平。采用SPSS 26.0软件进行数据分析，诊断效能采用ROC曲线分析。结果 胸腔积液ΔCD4⁺CD69⁺值高于外周血(t=5.75,P<0.01)。TPE组ΔCD4⁺CD69⁺、ADA、外周血TB-IGRA检测结果均高于NTPE组(P<0.01)。胸腔积液ΔCD4⁺CD69⁺、ADA及外周血TB-IGRA鉴别诊断结核性胸膜炎的AUC分别为0.879、0.805、0.861。结论 胸腔积液结核特异性CD4     

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白与神经退行性疾病

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)作为细胞代谢和生存的关键调节剂,调节细胞的增殖,存活和代谢。越来越多的研究表明,mTOR是神经退行性疾病的新型治疗靶点,mTOR对于神经元的存活、发育和分化至关重要。 然而,基于mTOR介导的神经退行性疾病影响的分子机制尚未完全了解。本文综述了mTOR信号通路与神经退行性疾病之间关系的研究进展,并进一步讨论了mTOR在神经退行性疾病中的潜在作用。     

AKT／mTOR在胃癌组织中的表达及意义

目的研究蛋白激酶B／雷帕霉素靶蛋白（AKT／mTOR）在胃癌组织中的表达水平及与临床病理因素的关系。方法应用免疫组化染色测定磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）和磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）在胃癌（32例）、癌旁组织（20例）中的表达情况。结果p-AKT在胃癌、癌旁组织中的阳性表达分别为71．9％、25．0％。p-mTOR在胃癌、癌旁组织中的阳性表达分别为62．5％、20．0％。p-AKT、p—mTOR的表达与胃癌组织分化程度、TNM分期存在相关性（氏O．05），p-AKT、P—mTOR的表达与胃癌患者的年龄、性别、肿瘤直径大小无相关性（P〉0．05）。结论胃癌组织中p-AKT与p-mTOR蛋白的表达与病理分化程度呈负相关。AKT／mTOR信号通路在大部分胃癌组织中过度表达可能是胃癌发生发展的重要机制之一。     

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂降低肾移植受者人巨细胞病毒感染的研究进展

 人巨细胞病毒（HCMV）是感染人类的八大疱疹病毒之一,常感染免疫力低下者,尤其是移植术后患者、晚期艾滋病患者以及新生儿。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是酸肌醇-3-激酶（PI3K）家族下游的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT）,该激酶可影响HCMV感染的所有阶段。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂（mTORi）作为免疫抑制剂用于肾移植术后患者,可降低HCMV感染事件。本文就mTORi降低肾移植受者HCMV感染的研究进展进行综述。     

mTOR信号通路在哺乳动物睾丸中的作用

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）是磷脂酰肌醇激酶相关激酶家族的一员,是一种高度保守的丝/苏氨酸蛋白激酶。其参与调节蛋白质合成、能量代谢和氧化应激等多项生理功能,在细胞增殖、生长、分化过程中起着中心调控的作用。近年许多研究证实在哺乳动物睾丸中mTOR信号通路可以促进支持细胞（sertoli cell）增殖与分化;mTOR信号通路不仅调控血-睾屏障（blood-testis barrier）的形成,而且mTORC1与 mTORC2分别调节血-睾屏障的开放与闭合;在精子发生（spermatogenesis）过程中,mTOR信号通路调控精原干细胞的增殖分化与自我更新,且调控着精母细胞的减数分裂。因此,mTOR信号通路在哺乳动物睾丸中具有重要的调控作用。综述mTOR信号通路在睾丸中对支持细胞增殖分化、血-睾屏障形成和精子发生的调控作用。     

MHY1485 enhances X-irradiation-induced apoptosis and senescence in tumor cells

The mammalian target of rapamycin (mTOR) is a sensor of nutrient status and plays an important role in cell growth and metabolism. Although inhibition of mTOR signaling promotes tumor cell death and several mTOR inhibitors have been used clinically, recent reports have shown that co-treatment with MHY1485, an mTOR activator, enhances the anti-cancer effects of anti-PD-1 antibody and 5-fluorouracil. However, it remains unclear whether MHY1485 treatment alters the effects of radiation on tumor cells. In this study, the radiosensitizing effects of MHY1485 were investigated using murine CT26 and LLC cell lines. We examined mTOR signaling, tumor cell growth, colony formation, apoptosis, senescence, oxidative stress, p21 accumulation and endoplasmic reticulum (ER) stress levels in cells treated with MHY1485 and radiation, either alone or together. We found that MHY1485 treatment inhibited growth and colony formation in both cell lines under irradiation and no-irradiation conditions, results that were not fully consistent with MHY1485’s known role in activating mTOR signaling. Furthermore, we found that combined treatment with MHY1485 and radiation significantly increased apoptosis and senescence in tumor cells in association with oxidative stress, ER stress and p21 stabilization, compared to radiation treatment alone. Our results suggested that MHY1485 enhances the radiosensitivity of tumor cells by a mechanism that may differ from MHY1485’s role in mTOR activation.     

Leucine and protein synthesis: mTOR and beyond

The effects of amino acid intake on protein synthesis in the intact rat appear to be mediated almost entirely by a single amino acid: leucine. The effect of leucine on protein synthesis appears to be closely associated with eIF4G phosphorylation and its association with eIF4E, but whether eIF4G phosphorylation actually mediates the effects of leucine or is merely associated with these events has not been elucidated. Additional research is needed to determine whether leucine effects eIF4G phosphorylation, whether eIF4G phos-phorylation is essential for the effect of leucine on protein synthesis, and whether mTOR (mammalian target of rapamycin) or another component of the mTOR complex is somehow involved in leucine-specific signaling.     

亮氨酸对原代新生大鼠骨骼肌卫星细胞肌管形成和MyHC表达的作用研究

目的 探讨新生个体骨骼肌生长重要营养因子亮氨酸对新生大鼠骨骼肌卫星细胞肌管形成和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)表达影响的机制。方法 分离纯化原代新生大鼠骨骼肌卫星细胞,在细胞的分化阶段用不同浓度亮氨酸和雷帕霉素(0 mM亮氨酸,0.1 mM亮氨酸,0.5 mM亮氨酸,2.0 mM亮氨酸,2.0 mM亮氨酸+50 nM雷帕霉素)处理细胞,观察肌管形成情况并检测MyHC、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、p-mTOR和Myod的表达。结果 亮氨酸促进肌管的形成,随着原代新生大鼠骨骼肌卫星细胞分化MyHC表达逐渐增加(P<0.05、<0.01或<0.001)。亮氨酸浓度为0.5 mM和2.0 mM时原代新生大鼠骨骼肌卫星细胞p-mTOR表达水平高于亮氨酸浓度为0 mM组(P<0.05或<0.01),添加雷帕霉素后,p-mTOR表达水平下降(P<0.05)。亮氨酸浓度为0.5 mM和2.0 mM时原代新生大鼠骨骼肌卫星细胞Myod的表达水平高于亮氨酸浓度为0 mM组(P值均<0.05),雷帕霉素则抑制Myod的表达(P<0.05)。亮氨酸浓度为0.5 mM和2.0 mM时原代新生大鼠骨骼肌卫星细胞MyHC的表达水平高于亮氨酸浓度为0 mM组(P<0.05或<0.01),雷帕霉素则抑制MyHC的表达(P<0.05)。结论 亮氨酸通过mTORC1/Myod信号通路上调新生大鼠骨骼肌卫星细胞MyHC表达,促进肌管的形成。     

脑源性神经营养因子通过PI3K/Akt/mTOR信号途径对胚鼠缺氧神经元的保护作用

目的 探讨脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对缺氧(oxygen deprivation,OD)神经元的保护作用是否与激活自噬有关,其信号通路是否通过PI3K/Akt/mTOR途径。方法 1)建立胚鼠神经元OD损伤模型;CCK-8法观察不同浓度BDNF对OD神经元细胞活性的影响;2)检测OD神经元1,3,5 h自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达,情况观察BDNF对OD神经元的保护作用是否与自噬有关;3)检测p-Akt,p-mTOR,p-p70S6K以及LC3II的表达,对比BDNF与自噬激活剂雷帕霉素(mammalian target of rapamycin,Rapamycin)对Akt/mTOR/p70S6K的影响,以及自噬被3-MA抑制后,BDNF对Akt/mTOR/p70S6K的影响。结果 1)50 μg/L BDNF可对OD神经元起保护作用(P<0.05),100 μg/L BDNF效应次之;2)BDNF和/或Rapamycin在下调p-Akt/p-mTOR/p-p70S6K表达的同时可上调LC3II的表达;当3-MA抑制自噬后,BDNF对LC3II的上调作用被抑制。结论 BDNF通过PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号途径激活自噬,发挥对OD神经元的保护作用。     

环氧酶2、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白及人类表皮生长因子受体2与胃癌预后的相关性

目的：分析环氧酶2（COX-2）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）及人类表皮生长因子受体2（HER2/neu）与胃癌患者预后的相关性,为胃癌临床诊断和治疗提供实验依据。方法应用免疫组织化学染色方法对浙江省人民医院2008年4月至2010年4月期间诊治的80例胃癌患者手术样本进行分析,比较胃癌组织与癌旁正常胃组织中COX-2、mTOR及HER2/neu蛋白的表达差异。应用Spearman秩相关分析、Kaplan-Meier法、Log-rank检验以及多因素Cox风险比例回归模型描述和推断COX-2、mTOR及HER2/neu蛋白与胃癌病理分期及预后的相关关系。结果80份胃癌癌体组织样本中COX-2、mTOR、HER2/neu蛋白的阳性表达率分别为57.5%（46份）、36.3%（29份）和63.8%（51份）,明显高于配对癌旁正常胃组织（u=5.643、3.528和4.642, P 均<0.01）;COX-2和HER2/neu 蛋白表达水平和胃癌分期之间均呈正相关（rs=0.257、u=2.284, P<0.05; rs=0.382、u=3.395,P<0.01）;COX-2和HER2/neu蛋白阳性表达患者的总体生存情况和无复发生存情况明显劣于阴性表达患者（P均<0.05）;COX-2蛋白的表达水平是胃癌总体生存时间的独立预测因素（风险比=1.643,95%CI：1.085~2.489,P<0.05）。结论 COX-2、mTOR 和 HER2/neu 蛋白均参与了胃癌的发生或发展;COX-2和HER2/neu蛋白与胃癌的病理分期和总体生存时间相关;COX-2蛋白表达可作为胃癌预后的独立预测因子。     

褪黑激素调节Akt/mTOR信号通路对坏死性小肠结肠炎新生大鼠肠道屏障功能的影响

目的 探究褪黑素(Mel)是否能够通过调控蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对坏死性小肠结肠炎(NEC)新生大鼠肠道屏障功能发挥保护作用。 方法 90只新生大鼠随机分为正常组、模型组、Mel低(15 mg/kg)、高剂量组(30 mg/kg)与Mel(30 mg/kg)+Akti(5 μmol/L)组,除正常组外,其余4组建立NEC模型。实验结束后,取眼静脉血分离血清,检测D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)和内毒素含量;取回盲部肠组织,用于HE染色及检测IL-6、IL-1β、TNF-α含量与自噬基因(Beclin-1)、LC3B、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠回盲部肠组织细胞出现变性坏死,黏膜肌层水肿,绒毛脱落、缺失等现象;血清中D-乳酸、DAO、内毒素含量与肠组织中IL-6、IL-1β、TNF-α含量和Beclin-1、LC3B蛋白阳性率均明显升高(P＜0.05),p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR明显降低(P＜0.05);与模型组比较,Mel低、高剂量组大鼠回盲部肠组织病变明显改善;D-乳酸、DAO、内毒素含量与IL-6、IL-1β、TNF-α含量和Beclin-1、LC3B蛋白阳性率均依次降低(P＜0.05),p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR升高(P＜0.05);与Mel高剂量组比较,Mel+Akti组大鼠回盲部肠组织病变加重;D-乳酸、DAO、内毒素含量与肠组织中IL-6、IL-1β、TNF-α含量和Beclin-1、LC3B蛋白阳性率均明显升高(P＜0.05),p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR明显降低(P＜0.05)。 结论 Mel能够通过上调Akt/mTOR信号通路蛋白表达,抑制自噬,对NEC新生大鼠肠道屏障功能发挥保护作用。