大孔吸附树脂柱层析结合高速逆流色谱分离纯化环孢菌素小组分

应用大孔吸附树脂柱层析与高速逆流色谱相结合的方法．对环孢菌素A结晶母液中的两个小组分进行分离纯化。首先采用大孔树脂以丙酮-水（起始浓度50％，V／V）为洗脱液对母液进行梯度洗脱，达到去除色素杂质和富集环孢菌素小组分的目的，然后分别选择正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水（5：6：6：5）和石油醚：甲醇：丙酮：水（3：1：3：2）为两相体系，以上相为固定相，下相为流动相对富集部分进行分离纯化。用高效液相色谱仪进行单组分纯度测定。结果表明采用大孔吸附树脂柱层析与高速逆流色谱相结合的方法可分离纯化这两个小组分，得到纯度97％以上的单组分，收率可达80％以上，初步质谱和HPLC分析判断其中一个组分可能为环孢菌素E，另一个可能为环孢菌素的未知组分。     

高速逆流色谱技术在环孢菌素A质量研究中的应用

目的 探讨高速逆流色谱在环孢菌素A原料药质量研究及有机杂质的分离制备方面的应用.方法 对两份环孢菌素粗品进行直接高速逆流色谱分离,制备环孢菌素杂质组分;应用大孔吸附树脂柱层析与高速逆流色谱相结合的方法,对两份环孢菌素A结晶母液中的2个未知杂质组分进行大孔吸附树脂柱富集后进行高速逆流色谱分离制备,并进行初步结构鉴定.结果 分离得到杂质组分环孢菌素B、C、D、H和2个新杂质组分,一个与环孢菌素L同质,初步判断另一个组分为环孢菌素E.结论 高速逆流色谱法能对环孢菌素A的有机杂质进行有效分离制备.这些有机杂质的制备有助于环孢菌素A的质量监控,为实现环孢菌素A原料药生产的安全性、有效性和质量可控性提供了科学有效的保障.     

Cu2+配位逆流色谱分离纯化抗霉素同系物

应用Cu2+配位逆流色谱对抗霉素发酵粗提物进行分离纯化研究,选择正己烷/甲醇/乙酸乙酯/水(5:3:2:2,V/V)为两相体系,以上相为固定相,下相为流动相进行分离纯化,用高效液相色谱仪测定单组份纯度.实验结果表明Cu2+配位逆流色谱可将抗霉素粗品分离纯化,得到9个纯度96％以上的抗霉素单组份,收率达60％以上.     

离心沉淀色谱法分离纯化香菇多糖

目的：建立一种香菇多糖的离心沉淀色谱分离方法，分离纯化香菇多糖。方法：把80％乙醇作为高速逆流色谱仪的固定相，利用不同浓度的乙醇作为流动相，对香菇多糖进行梯度洗脱。结果：香菇多糖在高速逆流色谱仪上，成功地分离出不同分子量的多糖组分。结论：借助高速逆流色谱，可以建立一种新型的分离纯化菌类多糖的方法——离心沉淀色谱法。     

高速逆流色谱法分离小花黄堇中延胡索乙素和原阿片碱

目的高速逆流色谱法分离纯化小花黄堇中延胡索乙素和原阿片碱。方法采用高速逆流色谱法进行分离,以正已烷．乙酸乙酯．甲醇．水（8：8：12：8,V／V）为溶剂系统．上相为固定相,下相为流动相,转速：800r·min一,流速：2mL·min－1,检测波长：280nm。结果从小花黄蔓总生物碱提取物中分离得到延胡索乙素和原阿片碱。纯度分别可达99．2％和99．6％。结论利用高速逆流色谱法可高效分离和纯化小花黄堇中延胡索乙素和原阿片碱。     

高速逆流色谱法从棉花花提取物中分离制备异槲皮素

目的 应用高速逆流色谱法分离制备异槲皮素.方法 对棉花花提取物用高速逆流色谱法一步分离纯化,以醋酸乙酯-水(1∶1)为两相溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,主机转速为800 r/min,体积流量2.0 mL/min,检测波长254 nm,采用波谱法对所得化合物进行结构鉴定,薄层色谱、高效液相色谱法测定产品的纯度.结果 在该条件下经一步分离可得到质量分数为99％的异槲皮素对照品.结论 该方法操作简便,适合于从棉花花提取物中分离制备异槲皮素对照品.     

高速逆流色谱法分离纯化楤木总皂苷中的楤木皂苷A及活性研究

目的： 采用高速逆流色谱法（HSCCC）对楤木大孔树脂纯化所得总皂苷中的楤木皂苷A进行分离纯化并做体外抗血小板研究。方法： 采用75%乙醇渗滤提取楤木原药材，渗滤液经过大孔树脂纯化，所得总皂苷粉末作为高速逆流色谱分离的样品。采用TBE-300B型高速逆流色谱仪，以氯仿：甲醇：正丁醇：水（4：4：1：3.5）为溶剂体系进行分离纯化，采用两种逆流色谱操作模式（0~130 min为正接正转，体系下相流动；130~180 min为正接反转，体系上相流动，流动相流速为5.0 mL·min^-1，仪器转速为850 r· min^-1，温度为25℃）进行分离。采用二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）诱导小鼠体外血小板聚集，分别采用不同浓度HSCCC分离后的四号馏分处理，检测空白对照管与不同浓度的4号馏分给药管富血小板血浆在5 min内的最大聚集率，计算血小板聚集的抑制率。结果： 楤木大孔树脂提取物经过HSCCC一步纯化，得到的楤木皂苷A纯度为95.81%；分离所得楤木皂苷A呈浓度依赖的抑制ADP诱导的血小板聚集，最大抑制率达80%。结论： 利用大孔树脂富集总皂苷，HSCCC分离纯化总皂苷中的楤木皂苷A，为楤木皂苷A的分离纯化提供了一种新的简便、高效的途径。抗血小板活性研究表明HSCCC法分离得到的楤木皂苷A具有初步的抗血小板凝聚作用。     

马钱子生物碱组分的提取和分离制备

目的建立马钱子生物碱组分的超声提取方法,研究其分离纯化工艺。方法以马钱子碱和士的宁含量为指标,采用均匀设计筛选马钱子生物碱的最佳超声提取工艺,并采用高速逆流色谱法分离其生物碱组分。结果最佳提取工艺为10倍量50%乙醇溶液(pH=5),在600 W功率下超声60 min;应用高速逆流色谱法,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(3∶5∶3∶5)为溶剂体系,分离得到纯度为94.1%的马钱子碱组分和纯度为92.5%的士的宁组分。结论本实验优选出的提取工艺稳定、经济、可行,高速逆流色谱适用于马钱子生物碱的分离纯化。     

利用高速逆流色谱分离制备达托霉素

达托霉素是一种重要的临床抗耐药菌抗生素,其分离纯化较困难.本文研究了利用高速逆流色谱法快速制备达托霉素纯品的方法.研究获得的两相系统为乙酸乙酯-正丁醇-水(2mmol/L TFA)(4∶1∶5 V/V),上相为固定相,下相为流动相.在该条件下通过高速逆流色谱收集纯化目标产物,并冻干后获得淡黄色的粉末,液相纯度大于95％.经UPLC-MS分析鉴定产物与达托霉素一致.该方法可以用于达托霉素纯品的快速制备.     

分离青葙子中皂苷的一种新方法

目的:采用连接有蒸发光散射检测器的高速逆流色谱仪制备和分离青葙子中的2个皂苷青葙苷C(celosin C)和青葙苷D(celosin D)。方法:参考溶剂选择软件选择两相溶剂,并对从半制备型高速逆流色谱仪(HSCCC)收集到的组分进行HPLC-ELSD分析,确定其纯度。结果:两相溶剂以正丁醇-乙酸乙酯-甲醇-水(3.5∶3.5∶0.6∶10)+0.5%冰醋酸的分离效果最佳。青葙总皂苷经过一步分离纯化,得到celosin C和celosin D,二者纯度分别为99.4%和98.9%。结论:本文首次报道应用HSCCC法纯化青葙子中的皂苷类化合物,该实验也证实了HSCCC结合ELSD可以用于分离没有紫外吸收的天然化合物。