胶类药材的氨基酸分析及鹿茸皮的利用试探

胶类药材系蛋白质类化合物,其滋补作用的主要有效成分为蛋白质水解物、肽类及氨基酸。故将鹿茸皮胶、阿胶、龟板胶、鹿角胶分别溶于6N盐酸,于封闭管中110℃水解,并用AA-100型氨基酸分析仪测定各种氨基酸的含量,试探生产鹿茸精的副产品——鹿茸皮熬制成胶作为补胶而应用。     

乃乐多薄层鉴别及其葛根素含量测定研究

目的:进行乃乐多薄层鉴别及其葛根素含量测定的研究。方法:利用TLC法鉴别阿胶、蒲公英、金银花,HPLC法测定葛根素成分。结果:阿胶、蒲公英、金银花TLC斑点清晰,阴性对照无干扰。葛根素在11.97~264.6μg/mL范围内线性关系良好,精密度及稳定性良好,平均加样回收率为99.70%,乃乐多中葛根素含量为(0.135,1±0.019,7)mg/g。结论:薄层鉴别及葛根素含量测定方法准确,能够有效控制乃乐多质量。     

林蛙油软胶囊的质量标准

目的:林蛙油软胶囊质量标准的确定。方法:采用双酶水解的方法,冷冻干燥后与一定辅料制囊;用氨基酸纸层析法确定氨基酸的种类。采用双向溶剂法,第一溶剂系统:正丁醇88甲酸水(15∶3∶2)展开4.5h;第二溶剂系统:正丁醇12氨水95乙醇(13∶3∶3)展开4.8h。用比色法测定氨基酸的含量;用凯氏定氮法测定蛋白质的含量。结果:氨基酸的纸层析能够有很好的分离度,有17种氨基酸,斑点蓝紫色,只有脯氨酸为黄色斑点;林蛙油中氨基酸的含量(4.655±0.2352),平均加样回收率为99.468;林蛙油软胶囊的蛋白质含量为(22.30±2.5)。     

一测多评法测定阿胶中4种主要氨基酸的含量

目的:采用一测多评法测定阿胶中L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸4种氨基酸类成分的含量。方法:采用HPLC法,以L-羟脯氨酸为内参物,测定与甘氨酸、丙氨酸和脯氨酸的相对校正因子,计算对应的含量,同时采用外标法测定阿胶中4个指标成分的含量,比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。结果:L-羟脯氨酸在0.017~0.26μg(r=0.999 8),甘氨酸在0.033~0.50μg(r=0.999 7),丙氨酸在0.015~0.23μg(r=0.999 5),脯氨酸在0.025~0.37μg(r=0.999 8)与峰面积均呈现良好的线性关系,4种成分加样回收率在96.8%~98.4%,RSD均3.0%,测得甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸对L-羟脯氨酸的相对保留时间分别为1.386,1.940和2.129,相对校正因子分别为0.642,0.975和0.951。对一测多评法的计算值和外标法的测定值进行了比较,两者无显著差异。结论:一测多评法在阿胶4种氨基酸类成分的含量测定中具有适用性。     

发酵前后蜣螂粉水溶性活性物质含量比较研究

目的:对蜣螂粉发酵前后的水提取液中活性物质的含量进行比较。方法:以改良Lowry法测定发酵前后蜣螂粉水提取液中蛋白质含量,苯酚-硫酸法测定多糖含量,定磷法测定磷含量,进而换算成核酸的含量,以单因素方差分析比较组间差异。结果:发酵前后蜣螂粉水提取液中蛋白质含量分别为99.65mg/g、89.01mg/g,多糖含量分别为5.67mg/g、14.58mg/g,核酸含量分别为15.72mg/g、23.02mg/g。与发酵前相比,发酵后蜣螂粉中可溶性蛋白含量减少,多糖和核酸含量增加,3种物质含量变化差异均有统计学意义(P0.01)。     

六种补胶的比较研究

圆盘电泳结果指出,六种补胶都有一共同带,海龙胶在阴极端多一带。氨基酸分析表明,它们都有17种以上氨基酸,黄明胶含量最高,必需氨基酸含量阿胶最高。阿胶和海龙胶均无胱氨酸。阿胶、黄明胶、鹿角胶、鳖甲胶都有补血作用;海龙胶和龟板胶有升白细胞作用;鹿角胶有抗疲劳作用;鹿角胶和海龙胶可使胸腺增重。     

苦菜的营养及食用、药用价值开发

1苦菜的营养成分苦菜嫩叶中含水分88%,蛋白质3%,脂肪1%,含有17种氨基酸,还有维生素及一些矿物元素。根据中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所编著的《食物成分表》,鲜苦菜胡萝卜素的含量(9120mg/100g)是芹菜(60mg/100g)的152倍、白菜(250mg/100g)的36倍、胡萝卜(4130mg/100g)的2.2     

蚯蚓粪对白及产量及药材品质的影响

目的:探讨蚯蚓粪对白及产量和品质的影响。方法:利用盆栽的栽培方式,采用称重法测定白及产量;采用水提醇沉法提取白及多糖,苯酚-硫酸作显色剂,紫外-可见分光光度计法测定白及多糖含量;采用水提醇沉法提取白及胶,60℃烘干,称重法测定白及胶含量。结果:施用蚯蚓粪50~200 g均能提高白及块茎的鲜重和干重,其中施用蚯蚓粪100 g对2年生白及单株块茎总鲜重和总干重增重效果最好。随着施肥量的增加,白及多糖和白及胶的含量均呈现先上升再下降的趋势,与对照相比,施肥量为100~200 g有利于促进白及多糖和白及胶的合成,其中施肥100~150 g对白及多糖和白及胶含量影响最大。随着施肥次数的增加,白及多糖和白及胶含量也相应增加,其中,在展叶期,结实前期、后期各施肥一次,效果最佳。结论:施用100~150 g蚯蚓粪有利于提高白及产量和白及多糖、白及胶的合成。     

天麻不同生长时期对氨基酸和蛋白质含量变化的研究

目的:比较天麻不同生长期各种氨基酸及蛋白质含量变化,探讨氨基酸及蛋白质含量变化对天麻质量的影响.方法:利用氨基酸自动分析仪,测定天麻氨基酸含量,用Bradford法测定蛋白质含量.结果:天麻中含有丰富的氨基酸和蛋白质,其中具有人体必需的多种氨基酸.白麻、箭麻氨基酸含量相近,并显著高于米麻和无性种麻.天麻中蛋白质的含量以米麻最高,白麻次之,无性种麻最低.结论:白麻与箭麻氨基酸的种类、含量相近,蛋白质含量较高,可进一步开发利用;种麻氮基酸、蛋白质含量可能对商品麻的质量产生影响,应加强种麻的质量临控.     

鹿皮胶对失血性血虚动物模型的影响

目的:观察鹿皮胶对失血性血虚动物模型的影响.方法:通过断尾法复制失血性血虚动物模型,以白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、血小板(PLT)为指标,观察鹿皮胶对血虚动物模型的影响.结果:鹿皮胶可升高失血性血虚小鼠的RBC、HGB、HCT.结论:鹿皮胶具有较好的补血作用.     

阿胶DNA提取方法优化

目的:优选阿胶DNA的提取方法和效率,为其他高蛋白含量产品中DNA的提取提供参考。方法:采用十二烷基苯磺酸钠(SDS)法和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取阿胶DNA,针对阿胶产品的自身特性,优选SDS法中蛋白酶K作用时间和蛋白洗脱步骤。结果:在同等条件下,SDS法较CTAB法对阿胶DNA的平均提取量高0.022 g·L-1。优化的SDS法为蛋白酶K作用时间1.5 h,使用酚-三氯甲烷-异戊醇洗脱阿胶中蛋白质,重复3次;阿胶DNA的纯度较原工艺提高了48.3%。结论:采用SDS法对阿胶中蛋白的清除作用较CTAB法效率高,优化的SDS法对阿胶DNA的提取适用性较强,为阿胶中动物来源分子生物学检测提供条件。     

阿胶商品药材中氨基酸种类、含量及指纹图谱分析

目的:通过比较阿胶不同商品药材中氨基酸的种类、含量及其指纹图谱,评价各阿胶药材的质量。方法:采用HPLC柱前衍生化氨基酸自动分析仪,测定13批阿胶药材中18种氨基酸含量及指纹图谱。结果:所有阿胶样品中均检出16种氨基酸,其中人体必须氨基酸7种;16种氨基酸的线性方程r值均大于0.9953,平均回收率为98.1%¹05.0%,RSD均小于2.0%;通过中药色指纹图谱相似度评价系统,确定20个共有峰构成阿胶药材指纹图谱的特征峰。结论:此方法可用于阿胶商品药材的品质评价。     

象皮滑石粉烫制工艺研究及炮制前后氨基酸含量分析

目的:筛选象皮滑石粉烫制的最佳工艺,分析炮制前后象皮中蛋白质和氨基酸的含量。方法:以粉碎率和醇溶性浸出物为评价指标,采用L_9(3~4)正交试验法,考察烫制温度、烫制时间和翻炒速度;采用凯氏定氮法和氨基酸自动分析仪测定象皮中蛋白质、氨基酸的含量。结果:最佳炮制工艺为100 kg象皮加30 kg滑石粉,烫制温度350~380℃,以15 r/min的速度翻炒3 min。炮制前后的象皮中均含有16种氨基酸,生象皮中蛋白质含量为92.4%,氨基酸总量为62.79%;滑石粉烫制象皮中蛋白质含量为98.2%,氨基酸总量为67.03%。折算炮制得率后,炮制前后蛋白质与氨基酸含量均无显著差异。结论:优选出的象皮滑石粉烫制工艺稳定可行,重现性好。     

结合PLS-DA分析通过4种游离氨基酸的含量测定鉴别不同厂家阿胶

目的 建立HPLC测定阿胶中4种游离氨基酸的方法并根据结果分析不同厂家阿胶的含量差异。方法 以Agilent AAA (150mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,以0.1mol/L醋酸钠溶液(用醋酸调节pH值至6.5)-乙腈(97∶3)为流动相A,乙腈-水(4∶1)为流动相B进行梯度洗脱测得3个厂家16批阿胶中4种游离氨基酸的含量。将数据导入SIMCA-P11.5软件进行PCA、PLS-DA分析。结果 3个厂家的阿胶都能够聚在一起,并且区分效果良好。结论 不同厂家的阿胶游离氨基酸含量存在差别,所建立的PLS-DA模型能够有效的区分福牌阿胶、东阿阿胶和宏济堂阿胶。     

阿胶的一种简易鉴别法

阿胶及其它动物胶类多由胶原及其部分水解产物所组成,其成分基本上是蛋白质,水解产生多种氨基酸,阿胶含氮16.3-16.54%。在适当的条件下,阿胶及其它胶类溶液,有转变为粘性的半固体凝胶的胶凝现象,影响这些溶液的胶凝主要因素是温度和浓度。观察不同浓度胶类溶液的胶凝温度,可以区分真品阿胶和假阿胶。     

北虫草有效成分对机体生理功能的影响

目的:研究北虫草有效成分对机体生理功能的影响。方法:氨基酸含量测定采用氨基酸分析仪,其他各种有效成份的测定均采用高效液相色谱法。血红蛋白(Hb)含量、红细胞(RBC)和白细胞(WBC)计数测定采用血常规分析仪。用惠普监测仪连续监测心率。结果:运动后实验组中Hb含量为(158.97±6.55)g/L,WBC计数为(6.29±1.06)×109/L,与对照组比较,差异有统计学意义,P<0.05。实验组运动前和运动后监测心率,运动前用药使心率下降,运动后用药使心率提高,差异有统计学意义,P<0.05。结论:北虫草提取物通过对机体血红蛋白、红细胞数、白细胞数和心率的调节使机体对运动的耐力增强,对训练产生的疲劳具有促进恢复的作用。     

发酵前后天龙粉水溶性活性物质含量对比研究

目的:比较中药天龙粉发酵前后水溶性活性物质的含量。方法:采用超声水提取法分别提取天龙粉发酵前后所含的水溶性活性成分,通过改良Lowry法测定其蛋白质含量、苯酚-硫酸法测定其多糖含量、定磷法测定其核酸含量。结果:天龙粉发酵前蛋白含量为68.5730mg/g,发酵后为130.6559mg/g;天龙粉发酵前多糖含量为6.5771mg/g,发酵后为13.4492mg/g;而天龙粉发酵前核酸含量为17.7146mg/g,发酵后为9.1373mg/g。结论:天龙粉发酵前的核酸含量较高,而发酵后的蛋白质和多糖含量较高。     

进口驴皮与国产驴皮制备阿胶质量的比较

目的比较进口(埃及)驴皮与国产(甘肃)驴皮制备阿胶的质量。方法采用相同制胶工艺,分别以进口驴皮与国产驴皮制备阿胶。分光光度法测定铅、镉、砷、汞、铜、铬的含有量,HPLC法测定L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸的含有量。结果进口与国产驴皮制备阿胶中6种元素限度均相当,4种氨基酸含有量与比例均一致,符合《中国药典》要求。结论该方法可为海外采购驴皮的可行性提供了依据。     

鹿角胶与阿胶的成分研究

鹿角胶与阿胶为名贵中药,具有滋养、强壮、补血、止血等作用,已有近二千年的药用历史。文献指出,鹿角胶与阿胶的成分,与白明胶相似。在比较阿胶与新阿胶成分的研究中,我们测定阿胶的总氮在14%以上,并含17～18种氨基酸。为深入了解鹿角胶与阿胶的成分,我们继续进行了如下的工作:胶中游离氨基酸、胶水解后氨基酸的定性与定量;通过醇处理     

UPLC-QqQ/MS法检测阿胶强骨口服液阿胶及杂皮源成分

目的:建立阿胶强骨口服液中阿胶及掺杂皮源成分的专属性检测方法。方法:用序列分析用胰蛋白酶对阿胶强骨口服液及掺入不同杂皮胶的伪品中胶类成分进行酶解,采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-QqQ/MS),选择阿胶特征分子离子峰m/z 539.8→612.4及牛皮源特征肽A特征离子对m/z 641.3→726.2作为检测离子对,离子化模式为ESI+,进行多反应监测。同时,建立阿胶强骨口服液中马皮胶成分红外谱检测法,结合质谱法鉴别掺伪马皮胶样品。结果:3批购买的阿胶强骨口服液保留时间均与阿胶对照药材一致,在7.7 min出峰,未出现与牛皮胶溶液对应的牛皮特征色谱峰。6批掺入不同杂皮胶(牛皮胶、猪皮胶和马皮胶)中2批马皮胶自制口服液检测出阿胶对照特征峰;2批牛皮胶口服液样品检测出牛皮源特征峰。红外光谱结果显示马皮胶自制口服液在1400～1700 cm^-1处吸收峰较特异,可与其它胶质进行区别,补充阿胶强骨口服液对马皮源成分的鉴别。结论:该检测方法专属性强,可用于阿胶强骨口服液中阿胶及杂皮源成分的检测,为阿胶强骨口服液质量标准提升提供了新的思路和方法。