羟胺发色法测定超氧化物歧化酶

超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是一类广泛存在于细胞内的金属酶,它特异地催化氧自由基(O_2(?))的歧化反应,是机体清除氧自由基的重要酶.目前SOD 的常规测定方法以邻苯三酚自氧化法     

慢性充血性心力衰竭患者血清超氧化物歧化酶含量的变化

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是体内氧化代谢过程中产生的超氧阴离子(O_2~-)的清除剂。而O_2~-可引发自由基的连锁反应,引起生物膜结构的广泛损伤破坏,与机体内炎症、衰老、肿瘤有密切联系。SOD可催化O_2的歧化反应生成H_2O_2,进一步代谢生成水,从而清除O_2~-,保护机体免受O_2~-的损害。因此,探讨活性氧自由基和SOD代谢在慢性心衰中作用具有重要意义。     

肺心病患者红细胞超氧化物岐化酶活性探讨

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase SOD)是一种广泛存在于生物体内与细胞氧代谢密切相关的蛋白酶,它的生物学作用是高度专一性地催化对机体有害的超氧自由基(O_2~-),以消除O_2~-对机体的损害作用。通过对慢性肺源性心脏病(下简肺心病)患者红细胞SOD活性的检测,探讨它们在肺心病诊断、治疗和预后方面的意义。材料和方法一、对象为1989年11月～1990年5月在我院收治的肺心病患者54例,病历完整,符合全国第三届肺心病会议制定的诊断标准,其中男39例,女15例;     

几种常见疾病中血清SOD含量的观察

近年来随着研究的深入,自由基对生物体的损害作用得到肯定。机体内自由基主要是氧自由基(O_2),超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase SOD)则是机体内O_2的清除剂。因此,了解机体内SOD水平的变化对于判断体内自由基的产生与清除平衡状态有重要意义。然而关于疾病中血清SOD水平的报道存在分岐,本文将就此内容作一初步探讨。     

白血病细胞内SOD及GSH-Px活性研究

观察了29例白血病患者白血病细胞内超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化酶(GSH—Px)活性及血清脂质过氧化物(LPO)水平。研究结果表明:①白血病细胞内SOD活性明显升高,GSH—Px活性显著降低,血清LPO水平增高;②白血病细胞内SOD及GSH—Px活性分别与外周血白血病细胞百分数呈正负相关;③与单核细胞白血病(M_4,M_5)及淋巴细胞白血病相比,粒细胞白血病(M_1,M_2,M_3)细胞内SOD活性相对较高,GSH—Px活性相对较低;④白血病细胞内SOD活性在白血病缓解与复发过程中无显著性差异,而GSH—Px活性则在缓解后回升,复发时又重新降低。上述结果提示,白血病细胞自身存在有明显的过氧化物损伤,给予白血病患者抗氧化治疗是必要的,白血病细胞GSH—Px活性可作为白血病活动的观察指标。     

姜黄素对氧化应激条件下心肌细胞线粒体的保护作用

目的探讨姜黄素对氧化应激条件下心肌细胞线粒体的保护作用。方法体外培养H9c2心肌细胞,分为正常对照组、过氧化氢(H_2O_2)组、姜黄素组(姜黄素预处理)。除对照组外,其余各组用H_2O_2处理6 h,建立心肌细胞氧化应激损伤模型。姜黄素组建模前30 min加入相应浓度的姜黄素。6 h后MTT观察H9c2心肌细胞存活率;分光光度计检测细胞培养液中培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性和线粒体中丙二醛(MDA)水平以及超氧化物歧化酶(SOD)活性;流式细胞仪检测线粒体膜电位;酶标仪检测细胞内三磷酸腺苷(ATP)含量及ATP酶;激光共聚焦观察细胞内活性氧(ROS)和活性氮簇(RNS)的产生;透射电镜观察线粒体的形态结构。结果姜黄素可以显著提高氧化应激条件下H9c2心肌细胞存活率。与对照组相比,H_2O_2组线粒体及线粒体嵴水肿增加,密度降低,呈空泡化,LDH和CK-MB水平显著升高(P0.05),ROS、RNS和线粒体内MDA水平显著升高(P0.05),SOD、ATP、线粒体钠钾ATP酶(Na+k+-ATPase)和钙镁ATP酶(Ca~(2+)Mg~(2+)-ATPase)活性水平及线粒体膜电位显著降低(P0.05)。与H_2O_2组相比,姜黄素组线粒体及线粒体嵴水肿减轻,密度增加,空泡化程度减轻,LDH和CK-MB水平显著降低(P0.05),ROS、RNS和线粒体内MDA水平显著降低(P0.05),SOD、ATP、线粒体Na+k+-ATPase和Ca~(2+)Mg~(2+)-ATPase活性水平及线粒体膜电位显著增加(P0.05)。结论姜黄素可以减轻氧化应激条件下H9c2心肌细胞的线粒体损伤,其机制可能与清除细胞内氧化应激产物,增强线粒体内抗氧化酶活性有关。     

黄芩素对H_2O_2诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响机制研究

目的探究黄芩素对过氧化氢(H_2O_2)诱导肾小管上皮细胞活性、凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的肾小管上皮NRK52E细胞株随机分为5组,对照组为正常培养,H_2O_2组为500μmol/L H_2O_2干预细胞24 h,H_2O_2组+黄芩素(50μmol/L)、H_2O_2组+黄芩素(100μmol/L)、H_2O_2组+黄芩素(200μmol/L)为加入不同浓度黄芩素和500μmol/L H_2O_2处理细胞;四甲基偶氮唑(MTT)检测细胞的活性,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞的凋亡率,蛋白质印迹法(Western Blot)检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、活化的Caspase-3(Cleaved Caspase-3),试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。结果 H_2O_2诱导NRK52E细胞活性降低(P0.05)、凋亡率增加(P0.05),SOD活性降低(P0.05),MDA活性增加(P0.05),Cleaved Caspase-3蛋白水平显著升高(P0.05);与H_2O_2组相比,不同浓度黄芩素提高NRK52E细胞的活性(P0.05),降低凋亡率(P0.05),提高SOD活性(P0.05),降低MDA活性和Cleaved Caspase-3蛋白水平(P0.05)。结论黄芩素可抑制肾上腺上皮细胞氧化应激反应,并通过下调磷酸化Caspase-3蛋白水平,从而抑制细胞凋亡,减轻细胞损伤。     

尿液超氧化物歧化酶活力测定

超氧化物歧化酶(Superoxido Dismutase SOD)是以超氧自由基(O_2~-)为底物的特异性酶,能清除机体內经各种途径产生的超氧自由基,在防御超氧物毒性、抗辐射损伤、预防衰老及防治肿瘤和炎症等方面均起着重要作用。目前SOD是研究较广泛的一个课题,血清和红细胞SOD活力的研究已相当活跃,而尿液SOD活力研究正式报道较少。本文参照汪义军等人血清SOD活力测定方法,建立了尿液总SOD(T—SOD)、Mn—SOD、Cu Zn—SOD活力的检     

超氧化物歧化酶在现代诊断学中的作用

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是一种广泛存在于生物体内与细胞氧代谢密切相关的蛋白质。1969年Mccord和Fridv-Dich首次从牛红细胞内分离出这种酶,指出它的生物学作用是高度专一性地催化对机体有害的超氧阴离子自由基(O2的歧化反应:O2+O2+2H SOD H_2O_2+O_2并命名为SOD,从而掀起了医学界对SOD的研究热潮。现已知道SOD与缺血(氧)性疾病、缺血(氧)再灌注组织损伤、炎症性疾病、肿瘤、衰老等病理、生理过程有着密切的关系。本文旨在复习有关文献,展现其在临床疾病的诊断学中的作用,以引起临床工作者的关注。     

超氧化物歧化酶与超氧阴离子自由基在急性粒细胞白血病细胞中的表现及意义

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是所有有氧代谢细胞生存所必须的一种酶,它能有效地清除机体代谢过程中产生的超氧阴离子自由基(O_2~-)。自从自由基与癌症的关系提出以后,SOD、O_2~-在肿瘤细胞中的变化日益引起人们的兴趣,本文旨在将它们在急性粒细胞白血病(AML)细胞中的表现做一综述,并探讨其在AML发生中的作用及某些机制。     

人红细胞超氧化物歧化酶及全血铜,锌含量的初步研究

超氧化物歧化酶(SOD)按金属辅基成分不同至少可分为Cu·Zn—SOD、Mn—SOD和Fe—SOD三类。SOD广泛地分布于各种生物体内,人红细胞主要为Cu·Zn—SOD。各类SOD都催化超氧阴离子自由基(O_2~-)发生歧化反应,使对机体过量的O_2~-得到清除。铜金属原子作为SOD的活性中心,锌则与稳定酶的结构和催化活性有关。为此,作者测定了109名不同年龄组健康男性红细胞的SOD值和全血的铜、锌含量,以期探讨它们与增龄及衰老的关系,可否将SOD作为衰老的参考指标之一和通过控制铜、锌摄入量来影响SOD值以延缓衰老。现将结果报告如下。     

静滴复方丹参注射液对腰椎间盘突出症患者自由基代谢的影响

目的　观察复方丹参注射液静滴对腰椎间盘突出症 (LIDP)患者血清一氧化氮 (NO)和超氧化物歧化酶 (SOD)的影响及其疗效。方法　将 4 2例LIDP患者随机分为丹参组 2 1例和常规组 2 1例进行比较 ,于治疗前、后分别用硝酸还原酶法和羟胺氧化法测定患者血清NO含量及SOD活性 ,同时应用目测类比评分法 (VAS)对疼痛进行评估 ,采用LIDP疗效定量评价进行疗效评定。结果　LIDP患者复方丹参液静滴治疗后 ,血浆NO含量减少和SOD活性增高 ,与常规组相比差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;丹参组疗效优于常规组。结论　复方丹参注射液静滴可降低LIDP患者NO水平 ,提高SOD活性 ,增强机体抗氧能力 ,减轻自由基的损害 ,临床疗效优于常规组     

TNF-α与胰岛素抵抗

最近研究表明,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在胰岛素抵抗中发挥着重要作用。肥胖机体能超表(?)TNF-α并与胰岛素抵抗的程度呈正相关。TNF-α能抑制胰岛素受体(InR)和葡萄糖转移因子-4(GluT4)的(?)性,它是由胰岛素介导InRβ链和InR底物-1(IRS-1)发生酪氨酸磷酸化和GluT4进行葡萄糖胞内转运的(?)在抑制剂。中和TNF-α的作用,可以明显改善肝外组织InR的酪氨酸蛋白激酶(TPK)的活性,提高机体对胰岛素的敏感性。这些研究为胰岛素抵抗综合症的治疗和诊断及判断预后开辟一个新领域。     

小柴胡汤对过氧化氢诱导的人皮肤成纤维细胞氧化应激损伤的保护作用

目的研究小柴胡汤水煎液对过氧化氢诱导的人皮肤成纤维细胞氧化应激损伤的保护作用。方法培养人皮肤成纤维细胞(HDF),建立HDF细胞H_2O_2损伤模型;使用不同浓度(20、50、100μg/ml)小柴胡汤水煎液干预H_2O_2损伤的HDF细胞,并设置H_2O_2模型组;MTT法检测细胞活力;化学发光法检测细胞内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及活性氧(ROS)含量,蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bax、NF-kB和p53蛋白表达。结果相对于H_2O_2模型组,20、50、100μg/L小柴胡汤水煎液保护组的细胞活力均显著提高(P0.05;P0.01;P0.01);100μg/L柴胡汤水煎液保护组SOD活性显著升高(P0.01),MDA含量和ROS荧光强度显著降低(P0.01);100μg/L柴胡汤水煎液保护组NF-kB、p53、Bcl-2表达显著降低(P0.05),而Bax表达却显著升高(P0.05)。结论小柴胡汤水煎液能保护过氧化氢诱导的HDF细胞氧化应激损伤,其机制与降低胞内过氧化程度、阻断NF-kB通路有关。     

甲状腺机能亢进患者血清Cu,Zn—SOD含量检测分析

超氧化物歧化酶(SOD)广泛分布于生物体内,是机体内产生的一种特定蛋白酶。它在人体内有两种方式存在:①Cu、Zn-SOD存在于胞浆;②Mn-SOD存在于线粒体。血液中红细胞仅有Cu、Zn-SOD,白细胞则有两种SOD。血清中的SOD来源于血细胞,故能反映血细胞所含SOD的变化。其中Cu、Zn-SOD是重要的超氧自由基清除剂。它能阻止并清除自由基的连锁反应,催化有毒的超氧化物阴离子自由基O_2~-歧化成过氧化物等,使机体免受损害。近年来Cu、Zn-SOD已经引起医学界、     

白血病细胞的组织因子活性

急性非淋巴细胞白血病(ANLL)82例病人中,7例经化疗白血病细胞不减少而死于DIC。75例经化疗白血病细胞明显减少的6例在诱导缓解化疗期内死于DIC.9例伴发DIC,以后加大肝素剂量治疗。21例未加大肝素剂量治疗的18例伴发DIC。剩下39例未用肝素治疗的8例伴发DIC。总计有48例患者在15.2±6.3天伴发了DIC,其中30例白血病细胞的组织因子(TF)活性超过5.5L/10~(?)细胞,而仅有2例低于0.8L/10~(?)细胞,明显高于未伴发DIC者(0.3±4.2L/10~(?)细胞),P<0.01。所有M_3~-病人白血病细胞TF活性是7-230L/10~(?)细胞,平均38.9±2.3L/10~(?)细胞,明     

异丙酚对胚胎大鼠中脑神经细胞缺氧复氧损伤的影响

目的观察不同浓度异丙酚(Propofol)对大鼠胚胎中脑神经细胞缺氧损伤的保护作用。方法建立原代培养神经细胞缺氧损伤模型,形态学观察以及细胞存活率,测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性、丙二醛(MDA)含量。结果异丙酚能明显改善缺氧损伤神经细胞的形态改变,提高细胞存活率,减少细胞内LDH的漏出,并可显著提高细胞内SOD活性,减少脂质过氧化产物MDA的产生。结论异丙酚对神经元缺氧损伤具有明显的保护作用。     

曲美他嗪通过抑制MicroRNA-423-5p凋亡信号通路保护H_2O_2引起的心肌缺血再灌注损伤

目的探讨曲美他嗪通过microRNA-423-5p(miR-423-5p)凋亡信号通路对H_2O_2引起的缺血再灌注损伤保护作用的分子生物学机制。方法培养小鼠心肌细胞,先以CCK-8和TUNEL检测对比观察H_2O_2对心肌细胞活性及凋亡的影响,同时以RT-q-PCR定量检测各组心肌细胞内miR-423-5p表达的情况。再通过质粒转染细胞上调和下调miR-423-5p的表达,观察心肌细胞的活性及凋亡情况。最后在H_2O_2诱导组中加入不同浓度曲美他嗪,检测miR-423-5p和下游通道的表达以及细胞活性和凋亡情况。结果以H_2O_2处理小鼠心肌细胞会上调miR-423-5p的表达,同时降低心肌细胞的活性并引起凋亡(p0.01)。以质粒转染心肌细胞提高miR-423-5p表达可以降低心肌细胞活性并引发凋亡;降低miR-423-5p表达则可以减轻H_2O_2引起的细胞活性降低及凋亡效应(p0.01)。在H_2O_2处理组中加入曲美他嗪可以下调miR-423-5p的表达,同时减轻心肌细胞活性降低及凋亡比例(p0.01)。结论 H_2O_2通过上调心肌细胞中的miR-423-5p表达诱导心肌细胞活性降低并引起凋亡,曲美他嗪通过抑制该miR的表达从而减少H_2O_2对心肌细胞活性的损伤并减少凋亡。     

姜黄素与银杏内酯B联合三氧化二砷在治疗白血病中对心肌细胞氧化损伤保护的作用比较

目的 研究比较银杏内酯B与姜黄素联合三氧化二砷(As2O3)治疗白血病过程中对心肌细胞氧化损伤的保护作用.方法 对人白血病细胞株NB4进行培养,设立对照组、As2O3组、银杏内酯B组及姜黄素组.对照组:原营养液继续培养;As2Oa组:加入As2O3 2μmol/L;银杏内酯B组:加入As2O3 2 μmol/L+银杏内酯B 0.1mmol/L;姜黄素组:加入As2O3 0.5 μmol/L+姜黄素50 μmol/L.以分光光度法检测超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX),流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平.结果 经姜黄素、银杏内酯B干预后的NB4细胞超微结构都能得到明显改善,姜黄素、银杏内酯B均显著提高了NB4细胞内ROS、SOD含量及GSH-PX活力,姜黄素组较银杏内酯B组显著提高NB4细胞内ROS、SOD含量及GSH-PX活力(P＜0.01).结论 姜黄素、银杏内酯B均可联合As2O3,上调机体ROS、SOD水平,提高GSH-PX的活性,拮抗自身氧化损伤,姜黄素对心肌细胞氧化损伤的保护作用优于银杏内酯B,为进一步提高白血病临床疗效打开了新思路.     

丹参对老年难治性心力衰竭患者氧化／抗氧化系统的作用

目的：探讨丹参注射液对老年人心力衰竭患者血中GSHPx、CAT、SOD酶活性及LPO含量的影响。方法：选取健康老年人36例。检测静脉血全血超氧化物歧化酶(SOD)、全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)和过氧化氢酶(CAT)的活性及血浆脂质过氧化物(LPO)和丙二醛(MDA)的浓度．然后与老年难治性心力衰竭组治疗前的此五项指标进行对应比较；选择78例老年难治性心力衰竭患者，随机分成两组，试验前均监测静脉血SOD、GSH—Px和CAT的活性及LPO和MDA的浓度并评价心功能。然后试验组在给予常规治疗的同时合并给予丹参注射液，16g／d，qd，疗程2周；对照组只给予常规治疗，2周后。复测上述指标，比较各组前后的变化。结果：(1)老年难治性心力衰竭患者SOD、GSH—Px和CAT的活性比健康对照组低，而LPO及MDA的浓度比健康对照组高，均P＜0．01。(2)丹参组试验前后比较，SOD、GSH—Px和CAT活性明显增高，且LPO和MDA浓度明显降低，均P＜0．05；而对照组则无显著变化，P＜0．05。(3)丹参组心力衰竭纠正的有效率显著高于对照组，P＜0．05。结论：老年难治性心力衰竭患者机体的抗氧化防御能力降低，丹参注射液可通过提高机体的抗氧化能力，消除氧自由基和脂质过氧化物起到纠正心力衰竭的作用。