隔药饼灸对动脉粥样硬化兔主动脉内皮细胞NF-κB及ICAM-1 mRNA表达的影响

目的:观察隔药饼灸对动脉粥样硬化(AS)兔主动脉内皮细胞核因子-κB(NF-κB)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨隔药饼灸干预AS形成的作用机制。方法:将50只新西兰大耳白兔随机分为5组:空白组、模型组、直接灸组、隔药饼灸组、西药组,每组10只,除空白组外,其余4组通过高脂饲料喂养及免疫损伤法建立兔AS模型。分别用RT-PCR技术、荧光定量PCR技术检测兔主动脉内皮细胞NF-κB mRNA、ICAM-1 mRNA表达。结果:与空白组相比,模型组主动脉内皮细胞NF-κB mRNA、ICAM-1 mRNA表达差异具有统计学意义(P<0.01);与西药组相比,隔药饼灸组NF-κB mRNA、ICAM-1 mRNA表达差异无统计学意义;直接灸组NF-κBmRNA、ICAM-1 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:隔药饼灸和直接灸抗AS与其降低AS兔主动脉内皮细胞NF-κB mRNA、ICAM-1 mRNA表达有关,隔药饼灸作用优于直接灸。     

隔药饼灸对动脉粥样硬化兔主动脉内皮细胞PPARγ蛋白及斑块中MMP-9 mRNA表达的影响

目的:观察隔药饼灸对动脉粥样硬化(AS)兔主动脉内皮细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白及斑块中基质金属蛋白酶-9 mRNA(MMP-9 mRNA)表达的变化,探讨隔药饼灸对兔AS的形成及斑块稳定性的影响。方法:将50只新西兰大耳白兔,通过高脂饲料喂养及免疫损伤法建立兔AS模型,随机分为空白组、模型组、直接灸组、隔药饼灸组和阿托伐他汀组,每组10只,治疗16周后用免疫组化法检测AS兔主动脉内皮细胞中PPARγ的蛋白表达;原位杂交法检测斑块中MMP-9 mRNA的表达。结果:隔药饼灸组、直接灸组和阿托伐他汀组PPARγ的蛋白表达和MMP-9 mRNA的表达均明显低于模型组(P<0.01,P<0.05);隔药饼灸组和阿托伐他汀组动脉粥样硬化斑块中MMP-9 mRNA的表达明显低于直接灸组(P<0.05,P<0.01),隔药饼灸组和阿托伐他汀组比较差异无统计学意义。结论:隔药饼灸可通过激活AS兔主动脉内皮细胞PPARγ的蛋白表达和抑制斑块中MMP-9 mRNA的表达,起到干预AS形成和稳定AS斑块的作用。     

隔药饼灸对动脉粥样硬化兔主动脉内皮细胞PPAR-γmRNA的影响

目的:观察隔药饼灸对动脉粥样硬化(artherosc lerosis,AS)兔主动脉内皮细胞过氧化酶体增殖物激活型受体γ(Peroxisom e proliferator-activated receptor,γPPARγ)的影响,探讨隔药饼灸延迟AS形成的作用机理。方法:将75只新西兰大耳白兔,通过高脂饲料喂养及免疫损伤法建立兔AS模型。然后随机分为5组,每组15只,即:空白组(空白对照组);模型组(AS模型组);直接灸组(AS模型+艾炷直接灸);隔药饼灸组(AS模型+隔药饼灸);西药组(AS模型+阿托伐他汀)。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测兔主动脉内皮细胞PPARγ蛋白表达。结果:模型组主动脉内皮细胞PPARγ的蛋白表达明显低于空白组、西药组、隔药饼灸和直接灸组,且有显著性差异(P<0.01,P<0.05);西药组与直接灸组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:西药组、隔药饼灸和直接灸组均能通过激活动脉粥样硬化兔主动脉内皮细胞PPARγ的蛋白表达,起到延迟动脉粥样硬化斑块形成的作用,西药组与隔药饼灸组作用相当,而西药组的作用要强于直接灸组。     

隔药饼灸对动脉粥样硬化兔主动脉内皮细胞过氧化酶体增殖物激活型受体γ的影响

目的观察隔药饼灸对动脉粥样硬化(AS)兔主动脉内皮细胞过氧化酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)的影响,探讨隔药饼灸延迟AS形成的作用机理。方法通过高脂饲料喂养及免疫损伤法建立兔AS模型。将75只新西兰大耳白兔随机分为5组,每组15只,即空白组(空白对照组),模型组(AS模型组),直接灸组(AS模型+艾炷直接灸),隔药饼灸组(AS模型+隔药饼灸),西药组(AS模型+阿托伐他汀)。治疗16周后检测兔主动脉内皮细胞PPARγ表达。结果模型组主动脉内皮细胞PPARγ的蛋白表达明显低于空白组、西药组和隔药饼灸组,且有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与直接灸组比较,西药组和隔药饼灸组PPARγ平均灰度值降低(P<0.05);西药组与隔药饼灸组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论隔药饼灸能通过激活AS兔主动脉内皮细胞PPARγ的蛋白表达,起到延迟AS斑块形成的作用。     

隔药饼灸对兔高脂血症合并动脉粥样硬化血管内皮细胞粘附因子E选择素mRNA表达的影响

目的从细胞和分子水平观察隔药饼灸对兔高脂血症(HLP)合并动脉粥样硬化(AS)的作用机理。方法将75只兔随机分为5组,即空白组、模型组、直接灸组、隔药饼灸组、药物(血脂康)组,每组15只。采用免疫反应性损伤法,建立兔HLP合并AS模型。聚合酶链式反应(RT-PCR)测定主动脉血管细胞粘附因子E选择素(E-sel)的基因表达。结果隔药饼灸组、直接灸组及药物组均使兔HLP合并AS血管内皮细胞粘附因子E-selmRNA表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。结论隔药饼灸对兔HLP合并AS的主动脉内皮细胞有一定的保护作用。     

隔药饼灸对兔动脉粥样硬化斑块中Toll样受体与核因子表达的影响

目的:观察隔药饼灸对兔动脉粥样硬化(AS)斑块中Toll样受体2(TLR 2)、TLR 4、核转录因子κB(NF-κB)mRNA表达的影响,探讨隔药饼灸稳定兔AS斑块的作用机制。方法:新西兰大耳白兔随机分为空白组、模型组、直接灸组、隔药饼灸组、药物组,每组12只。采用高脂饲料喂养及腹主动脉球囊损伤法建立兔AS模型。直接灸组及隔药饼灸组分别直接灸及隔药饼灸"巨阙"及双侧"天枢""丰隆"或双侧"心俞""脾俞""肝俞",每日1次,治疗8周。运用酶法测定血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG);比色法测定血浆高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL),并计算HDL/LDL;电泳法测定血浆载脂蛋白A(Apo-A)、载脂蛋白B(Apo-B);HE染色观察腹主动脉斑块组织结构及斑块的血管内膜厚度、内膜中膜厚度(IMT);实时荧光定量PCR技术检测兔AS斑块中TLR 2、TLR 4、NF-κB mRNA的表达水平。结果:与空白组比较,模型组血浆TC、TG、LDL、Apo-B含量显著升高(P0.01),Apo-A含量、HDL/LDL显著降低(P0.01),主动脉内膜厚度、IMT显著增加(P0.01),TLR 2、TLR 4、NF-κB mRNA表达水平显著升高(P0.01)。与模型组比较,各治疗组血浆TC、TG、LDL、Apo-B含量显著降低(P0.05,P0.01),Apo-A含量、HDL/LDL显著升高(P0.01),主动脉内膜厚度、IMT显著降低(P0.01),TLR 2、TLR 4、NF-κB mRNA表达水平显著降低(P0.05,P0.01)。与直接灸组比较,隔药饼灸组和药物组血浆TC、TG、LDL、Apo-B显著降低(P0.05,P0.01),Apo-A含量、HDL/LDL显著升高(P0.01),主动脉内膜厚度、IMT降低(P0.01,P0.05),TLR 2、TLR 4、NF-κB mRNA表达水平显著降低(P0.05,P0.01)。结论:隔药饼灸通过抑制兔AS斑块中TLR 2、TLR 4、NF-κB mRNA的表达,可能起到稳定AS斑块的作用。     

隔药饼灸对兔高脂血症合并动脉粥样硬化主动脉血管细胞粘附分子-1 mRNA表达的影响

目的:从细胞和分子水平观察隔药饼灸对兔高脂血症(HLP)合并动脉粥样硬化(AS)的作用机理。方法:将75只兔随机分为5组,即空白组、模型组、直接灸组、隔药饼灸组、药物(血脂康)组,每组15只。采用免疫反应性损伤法建立兔HLP合并AS模型。穴位选取“巨阙”“天枢”“心俞”“肝俞”等,每穴30min,每日1次,连续治疗6周。聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定主动脉血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)的基因表达。结果:隔药饼灸组、直接灸组及药物组均使兔HLP合并AS主动脉VCAM-1的mRNA表达显著下调(P<0·01)。结论:隔药饼灸对兔HLP合并AS的主动脉血管细胞有一定的保护作用。     

一贯煎对子痫前期大鼠胎盘NF-κB mRNA与MMP-9 mRNA表达影响

[目的]探讨中药一贯煎对子痫前期大鼠胎盘核转录因子-κB mRNA(NF-κB mRNA)和基质金属蛋白酶-9mRNA(MMP-9 mRNA)表达的影响。[方法]建立子痫前期Wistar大鼠模型,并灌胃给予中药一贯煎,监测给药前后大鼠血压及24 h尿蛋白变化。PCR法检测孕鼠胎盘NF-κB m RNA及MMP-9 m RNA的表达。[结果]1)NF-κB mRNA:与正常妊娠组相比,模型对照组及一贯煎治疗组均升高,与模型对照组相比,一贯煎治疗组降低,且差异均有显著性(P0.05)。2)MMP-9 m RNA:与正常妊娠组相比,模型对照组与一贯煎治疗组均降低,与模型对照组相比,一贯煎治疗组有所升高,且差异均有显著性(P0.05)。[结论]一贯煎通过降低子痫前期大鼠胎盘NF-κB mRNA的表达,升高MMP-9mRNA的表达治疗子痫前期大鼠。     

隔药饼灸对高脂血症兔主动脉内皮细胞超微结构的影响

目的:探讨隔药饼灸治疗高脂血症的作用机理.方法:将60只新西兰纯种兔随机分为4组,空白组:普食喂养;模型组:胆固醇高脂饮食喂养以建立兔高脂血症模型;直接灸组:即模型组加艾炷直接灸;隔药饼灸组:即模型组加艾炷隔药饼灸.应用透射电镜技术观察兔主动脉内皮细胞超微结构.结果:隔药饼灸组的内皮细胞较完整,大多形态正常,内弹力膜连续,厚薄较均匀,中膜平滑肌细胞较正常,与空白对照组的主动脉内皮细胞结构相似.但模型组的主动脉内皮细胞消失,胞浆可见大量脂质沉积,内弹力膜中断,厚薄不均,有灶性溶解,中膜平滑肌细胞有脂质沉淀,且有泡沫样改变.结论:隔药饼灸对高脂血症兔的主动脉内皮细胞有一定的保护作用.     

隔药饼灸对动脉粥样硬化兔血清载脂蛋白A及载脂蛋白B水平的影响

目的观察隔药饼灸对动脉粥样硬化（AS）兔血清载脂蛋白A（apoA）、载脂蛋白B（apoB）含量及A/B比值的影响。方法将75只兔随机分为空白组、模型组、直接灸组、隔药饼灸组、药物组。采用高脂饲养和免疫损伤方法建立AS兔模型,各组同时施加相应的干预措施治疗16周后,取颈动脉血,用电泳法测定apoA、apoB,比较各组血清中apoA、apoB含量及A/B比值的变化情况。结果与模型组比较,各治疗组血清apoA含量升高（P〈0.01）,A/B比值升高（P〈0.05）,apoB含量降低（P〈0.01）。结论隔药饼灸对AS兔血清apoA、apoB含量及A/B值具有调节作用。     

冠心病不稳定型心绞痛与MMP-1、MMP-2、MMP-3相关性研究

目的:研究冠心病不稳定型心绞痛(UA)患者血清MMP-1、MMP-2、MMP-3的表达,并探讨其与冠状动脉狭窄程度和斑块不稳定性之间的关系。方法:分离出30例UA和30例CPS患者血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其中的MMP-1、MMP-2、MMP-3表达水平,并进行相关性研究。结果:UA和CPS组患者血清中MMP-1、MMP-2、MMP-3有统计学意义(P<0.005)。结论:冠心病不稳定型心绞痛患者血清中MMP-1、MMP-2、MMP-3表达水平增高,提示其可能是动脉粥样硬化不稳定斑块的发病机制之一。     

MMP-2、MMP-9在葡萄胎组织中的表达以及意义

目的探讨MMP-2、MMP-9在葡萄胎组织中的表达情况,以确定二者预测葡萄胎恶变的可能。方法收集41例清宫术后病理诊断为葡萄胎患者的首次清宫组织,并收集17例正常早孕（〈12周）无其他疾病、要求终止妊娠的绒毛组织作为对照组。将组织分为正常绒毛组（17例）、葡萄胎组（29例）、侵葡组（12例）,观察MMP-2、MMP-9在侵蚀性葡萄胎、葡萄胎以及正常绒毛表达强度。蛄果MMP-2、MMP-9在侵葡组、葡萄胎组以及正常绒毛组的灰密度值依次为70．93±8．87／86．91±8．81,102．40±7．13／109．38±5．60．105．64±5．30／111．27±4．33,侵葡组MMP-2,MMP-9的阳性表达明显高于其他2纽（P均〈0．01）,但葡萄胎组与正常绒毛组相比无显著性差异（P〉0．05）;在侵葡组的表达中MMP-2和MMP-9呈正相关。结论MMP-2、MMP-9高表达可能在葡萄胎、侵蚀性葡萄胎发生发展过程中有促进作用,能促进葡萄胎组织的恶变。在含有高危因素的葡萄胎恶变患者中,MMP-2、MMP-9的表达明显升高,联合检测MMP-2、MMP-9对预测葡萄胎的恶变具有-定的临床意义,有可能成为临床预测葡萄胎恶变的重要指标。     

桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12、Smad-2蛋白表达水平影响的实验研究

目的:研究桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12、Smad-2蛋白表达水平的影响。方法:将30只小鼠随机分到6个组中,分别为中药高、中、低剂量组、阳性对照组(VE组)、模型对照组、和空白对照组。模型对照组、VE组和中药低、中、高剂量组小鼠造皮肤光老化模型,空白对照组小鼠正常饲养。在造模前30 min,给各组小鼠灌胃,空白对照组和模型对照组给生理盐水,高、中、低剂量组给相应剂量药液,VE组给予维生素E滴剂。造模完成后,采用Western blot方法检测小鼠组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12、Smad-2蛋白表达水平含量。结果:与空白对照组比较,模型对照组小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12蛋白含量的表达水平显著上升,差异具有统计学意义(P<0.01),Smad-2蛋白表达水平显著下降(P<0.01);与模型对照组相比,中药低、中、高剂量组小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12蛋白含量的表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01),Smad-2蛋白表达水平显著上升,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:桃红四物汤对皮肤光老化具有一定的保护作用。     

MMP3、MMP7在腰椎间盘突出组织中的表达及其临床意义

目的：检测腰椎间盘突出症患者突出椎间盘组织中基质金属蛋白酶3（MMP-3）、基质金属蛋白酶7（MMP-7）的表达,为研究椎间盘突出重吸收提供生化依据,以便进一步了解腰椎间盘突出组织重吸收的发生机制。方法：运用免疫组织化学法,通过兔抗人MMP-3、MMP-7的单克隆抗体,对30例突出腰症椎间盘标本进行染色。结果：在突出椎间盘组织中,破裂型比非破裂型MMP-3、MMP-7的阳性表达率更高,其差异有统计学意义。结论：MMP-3、MMP-7与椎间盘突出重吸收可能有关,破裂型比非破裂型更易于重吸收。     

加味阳和汤对膝骨性关节炎病患MMP-3、MMP-9水平的影响研究

目的:通过对比研究,分析加味阳和汤对膝骨性关节炎(OA)病患血清MMP-3基质金属蛋白酶-3、MMP-9(基质金属蛋白酶-9)的影响,探讨其治疗效果。方法 :以骨伤科收诊的138例膝关节OA病患为研究对象,随机分为治疗组和对照组。两组病患均给予双氯芬酸钠缓释片100mg,连续服用4周。其中治疗组同时加用加味阳和汤。对两组血清MMP-3、MMP-9水平治疗前后的变化进行对比,分析其临床疗效。结果:经过治疗后显示,治疗组和对照组病患MMP-3与MMP-9的水平均下降显著,治疗组明显低于对照组,治疗组总有效率(97.01%)显著高于对照组(84.06%)。两组不良反应对比差异无意义。结论:在治疗膝关节OA时,加味阳和汤可以降低病患血清MMP-3、MMP-9水平,保护软骨基质和细胞,拥有很好的疗效。     

白虎汤对原发性肝癌TACE术后患者MMP-1、MMP-3、MMP-9蛋白酶的影响及其临床意义

目的:探讨白虎汤对原发性肝癌TACE术后患者MMP-1、MMP-3、MMP-9蛋白的影响及其临床意义。方法:选择医院感染科2010年2月—2013年3月120例确诊为原发性肝癌并行TACE术后并发发热的患者作为研究对象,随机分为2组,每组60例。对照组予常规西医治疗,予消炎痛栓纳肛,50 mg/次,每日2次,并口服头孢克肟分散片,100 mg/次,每日2次,10 d为1疗程;观察组予中药汤剂白虎汤加减治疗,每日1剂,早晚分服,10 d为1个疗程。均于1个疗程后评价治疗效果及不良反应发生率,并对比两组治疗前后基质金属蛋白酶(MMP-1、MMP-3、MMP-9)变化情况;同时对两组患者进行随访,观察患者术后6个月、1年、2年、3年的复发率及生存率。结果:观察组的有效率为86.4%(51/59),明显高于对照组的有效率75.9%,并且治疗后观察组的MMP-1、MMP-3、MMP-9均显著下降(均P0.01);而对照组的MMP-1、MMP-3、MMP-9亦有所下降,但仅MMP-9下降具有统计学意义(P0.05)。治疗后两组MMP-1、MMP-3表达、MMP-9水平比较,观察组均低于对照组,(均P0.05),而MMP-1、MMP-3表达水平差异更为显著(P0.01);此外,治疗后观察组在半年、1年、2年内的肿块复发率均低于对照组(P0.05),而生存率均高于对照组(P0.05)。结论:白虎汤治疗原发性肝癌TACE术后并发发热较使用西药治疗疗效高,痊愈时间快,复发率低,安全性高,且对原发性肝癌TACE术后具有防复发作用,值得临床推广应用。     

桂枝茯苓胶囊对子宫腺肌病小鼠病灶组织MMP-2、MMP-7的影响

目的:探讨桂枝茯苓胶囊治疗子宫腺肌病(Adenomyosis,以下简称Ad)的实验依据。方法:将7周龄雌性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、中药组和西药组,除正常组以外,对其他3组小鼠行经腹同种异体垂体宫腔移植手术,术后正常组和模型组小鼠灌胃蒸馏水,中药组灌胃桂枝茯苓胶囊,西药组灌胃孕三烯酮,用药3个月,停药后继续饲养3个月,并行病理切片HE染色和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-7免疫组化测定。结果:小鼠Ad发病率模型组(90.0%)>中药组(75.0%)>西药组(69.2%)>正常组(0.0%),且MMP-2和MMP-7在动情间期子宫内膜的表达强于动情期,在模型组Ad病灶中的表达最强,和正常组相比差异显著(P<0.05),在中药组中的表达有所下降,在西药组中的表达更低,与模型组差异显著(P<0.05)。结论:采用BALB/c系小鼠行经腹同种异体垂体移植术可以作为建立Ad动物模型的理想方法,桂枝茯苓胶囊能降低小鼠Ad的发生率,其作用机理与调节MMP-2、MMP-7蛋白表达水平有关。     

中风病急性期痰热证与MMP-1和MMP-3表达的影响＊

目的 研究缺血性中风病急性期痰热证与MMP-1和MMP-3表达的相关性，其相关性研究能否形成微观辨证的依据。方法 筛选发病7天内就诊于中国中医科学院西苑医院的缺血性中风痰热证患者45名，非痰热证44名，对每例患者分别作出痰湿证、气虚证、血瘀证、内风证、阴虚证和内火证的量化诊断，并用ELISA法检测血清中MMP1和MMP-3的含量。结果 痰热证组和非痰热证组MMP-1和MMP-3的表达均无明显差异。结论 MMP-1和MMP-3不能作为痰热证的微观指标，需进一步寻找微观指标对中风病痰热证证候诊断及疗效评价提供更加客观支持。     

Quinic acid esters from Pluchea indica with collagenase, MMP-2 and MMP-9 inhibitory activities

Investigation of collagenase inhibitory natural components afforded two quinic acid esters (1 and 2) and quercetin (3) from the leaves of Pluchea indica (Compositae). Of these, compounds 1 and 2 exhibited collagenase inhibitory activity (IC(50)) at a concentration of less than 10 microm, and 1 showed matrix metalloproteinase (MMP)-2 and -9 inhibitory activity (IC(50)) at 2.5 and 6.4 microm, respectively.     

中药川贝母对哮喘模型小鼠MMP-2,MMP-9和TIMP-1的影响

观察中药川贝母对哮喘模型小鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的影响,探讨其治疗哮喘的作用机制。BALB/C小鼠,随机分为正常组、模型组、高剂量组、低剂量组、阳性对照组。除正常组外,其他各组用卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型。造模成功后高剂量组和低剂量组分别按18.0,9.0 mg·kg-1剂量给予中药川贝母灌胃;阳性对照组于腹腔注射0.5 mg·kg-1剂量地塞米松;正常组和模型组等量生理盐水灌胃,每天1次,连续28 d。观察各组小鼠气道反应性的变化,支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和白细胞分类的变化以及支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度的变化;ELISA法检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1水平;RT-PCR检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1 mRNA的表达。结果显示,模型组气道反应性、BALF中细胞总数以及中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞计数、支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组(P0.05或P0.01);模型组MMP-2,MMP-9和TIMP-1水平和mRNA表达明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。推断中药川贝母可改善哮喘模型小鼠气道重塑状态,其机制可能与其降低MMP-2,MMP-9和TIMP-1有关。