人参皂甙对老龄大鼠Meynert核及大脑皮质脑源性神经营养因子含量的影响

目的观察Meyaert核（NBM）与大脑皮质神经元内脑源性神经营养因子（BDNF）的老龄性改变,探讨人参皂甙对BDNF蛋白含量表达的影响.方法雌性Wistar大鼠随机分为青年组、老龄组及老龄给药组.老龄给药组大鼠自18个月开始饲以人参皂甙至27月龄.对各组NBM及大脑皮层神经元进行免疫组织化学法染色、图像分析及统计学处理.结果老龄组大鼠NBM及大脑皮质内BDNF含量均显著低于青年组（P＜0.01）.给药组大脑皮质内BDNF含量较老龄组显著增加（P＜0.01）,但NBM内BDNF含量变化无统计学意义.结论老龄大鼠NBM及大脑皮质内BDNF含量显著降低,给予人参皂甙可显著提高大脑皮质神经元BDNF的表达.     

雷公藤内酯醇对大鼠大脑皮质内注射β-淀粉样蛋白后星形胶质细胞及胆碱能纤维的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇(TP)对大鼠大脑皮质内注射β-淀粉样蛋白(Aβ)后星形胶质细胞及胆碱能纤维的影响.方法:采用GFAP免疫组织化学方法、AChE组织化学方法检测各组大鼠大脑皮质星形胶质细胞和胆碱能纤维的表达.结果:Aβ组大鼠大脑皮质GFAP阳性星形胶质细胞数量、平均面积和平均光密度明显高于对照组,用药组大鼠大脑皮质GFAP阳性星形胶质细胞数量、平均面积和平均光密度较Aβ组明显减少;Aβ组大鼠大脑皮质胆碱能纤维密度明显低于对照组,用药组大鼠大脑皮质胆碱能纤维密度较Aβ组明显升高.结论:TP能抑制Aβ诱导的星形胶质细胞的活化,减轻Aβ所致的胆碱能纤维损害.     

老龄大鼠内侧隔核TrkB mRNA的表达及人参皂甙的保护作用

目的:探讨人参皂甙对老龄大鼠内侧隔核TrkB mRNA表达的影响,为老年记忆减退性疾病的发病机制及人参皂甙的临床应用提供分子生物学基础。方法:选用Wistar大鼠,分成青年组、老龄组、给药组,采用原位杂交组织化学方法检测大鼠内侧隔核TrkB mRNA含量的变化情况。结果:老龄组内侧隔核TrkB mRNA阳性反应物的平均灰度值与青年组相比呈非常显著增高,而给药组的平均灰度值比老龄组呈显著降低。结论:老龄时内侧隔核TrkB mRNA表达低于青年组,而给药组较老龄组明显增加。说明人参皂甙具有增强TrkB mRNA表达,防止中枢神经系统神经元退行性改变的作用。     

人参皂甙对老龄大鼠海马CA3区神经元超微结构影响的定性、定量研究

应用透射电镜技术结合图像分析观察了老龄大鼠海马CA_3区神经元超微结构的改变,并对比观察了人参皂甙对超微结构的影响.结果表明:老龄组神经元脂褐素数量比青年组增加6倍(P<0.01),面积增加9倍(P<0.01);而给药组脂褐素数量比老龄组减少18%(P<0.05),面积减少31%(P<0.05).此外,老龄组神经元内线粒体等细胞器出现明显变性、坏死、突触变性,神经毡内出现髓样体,膜性结构等异常改变;而给药组上述改变均见明显减轻或不出现.     

人参皂甙对老龄大鼠海马结构胆碱能纤维的影响

海马各区含有大量的乙酰胆碱酯酶(AChE)阳性终末,主要来源于基底前脑的胆碱能神经元。AD患者的中枢神经系统有广泛的神经病理学改变,其中以基底前脑胆碱能神经元损害占主要地位[1]。学习记忆、认知行为的改善程度与海马胆碱能纤维网的密度密切相关[2]。近来研究表明人参皂甙(GS)Rg1可明显改善淀粉样肽所致小鼠被动回避,能够改变AChE活性[3],并且认为其对胆碱能系统的影响可能是人参皂甙Rg1的重要作用机制之一。本研究拟探讨人参皂甙对老龄大鼠海马结构胆碱能纤维改变的影响,为人参皂甙抗脑衰老及改善老年动物胆碱能系统认知能力提供可…     

人参皂甙降低老龄大鼠海马CA3区神经元酸性磷酸酶活性的光、电镜观察

实验选用健康的Wistar大鼠,应用光、电镜酶细胞化学方法结合图像分析观察了老龄大鼠海马CA3区神经元的酸性磷酸酶的衰老变化,同时对比观察了人参皂甙对上述改变的影响.光镜结果表明:酸性磷酸酶含量老龄组比青年组增加36%,而给药组较老龄组减少20%;电镜结果表明:酸性磷酸酶反应产物面积老龄组比青年组增加5倍,给药组较老龄组减少2.5倍(P<0.01).光、电镜结果均提示老龄时海马CA3区神经元酸性磷酸酶活性增高,而人参皂甙具有降低酸性磷酸酶活性的作用.     

人参皂甙对老龄大鼠海马CA3区神经元超微结构影响的定性,定量研究

应用透射电镜技术结合图像分析观察了老龄大鼠海马ＣＡ３区神经元超微结构的改变，并对比观察了人参皂甙对超微结构的影响，结果表明：老龄组社会脂褐素数量比青年组增加６倍，面积增加９倍；而给药组脂褐素数量比老龄 组减少，面积减少３１％。     

模拟失重大鼠血液流变学异常与肌肉退行性变化的中药防护

目的观察四组中药合剂对尾吊大鼠血液流变学异常和肌肉退行性变的防护作用.方法采用大鼠头低位30°尾部悬吊模型模拟失重对机体的影响.120只SD雄性大鼠随机分为6组:对照组、单纯尾吊组、丹黄刺组(尾吊同时给予丹参、黄芪和刺五加生药的水煎剂)、参川熟组(尾吊同时给予川芎生药、熟地和人参地上甙的水煎剂)、参山杜组(尾吊同时给予西洋参、山楂、杜仲生药的水煎剂)、参银生组(尾吊同时给予人参根、银杏叶、生地的水煎剂). 实验第30d,经心脏取血,检测全血粘度、红细胞变形性、纤维蛋白原含量、血细胞压积、红细胞形态、肌肉重量、肌纤维类型和面积等指标.结果单纯尾吊导致大鼠体重明显降低(p<0.001),肌肉重量、肌肉纤维面积、Ⅰ型纤维比例显著下降(p<0.05,0.01),中切和低切血粘度、纤维蛋白原含量、异形红细胞比例明显增高(p<0.001);红细胞最大变形指数(DImax)和积分变形指数(IDI)(p<0.001,0.01)、血细胞压积明显降低(p<0.001).中药合剂组与单纯尾吊组相比, 血液流变学指标有较大改善,并可显著增加尾吊大鼠腓肠肌重量(p<0.05).结论中药合剂可改善尾吊导致的血液流变学及肌肉组织改变.     

人参皂甙Rb1对血管性痴呆大鼠认知功能及突触素表达的影响

目的:研究人参皂甙Rb1 (GSRb1)对血管性痴呆大鼠认知功能与海马突触素表达的影响.方法:将36只大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组.以双侧颈总动脉结扎法制作血管性痴呆大鼠模型.造模后治疗组大鼠腹腔注射GSRb1(30mg·kg-1·d-1).Y型迷宫和免疫组织化学法结合图像分析检测各组大鼠认知功能和海马突触素免疫阳性产物的平均光密度.结果:与对照组大鼠相比,模型组大鼠Y型迷宫中错误次数增加,模型组大鼠学习记忆能力减退,其海马区突触素免疫反应阳性产物平均光密度降低;与模型组相比,治疗组大鼠出错次数减少,而海马区突触素免疫阳性产物平均光密度升高.结论:人参皂甙Rb1可增加血管痴呆性大鼠海马区突触素表达,显著改善其认知功能.     

成年和老龄大鼠催产素及加压素系统的对比研究

目的:探讨成年和老龄大鼠外周和中枢内催产素和加压素的含量变化。方法:采用健康成年SpragueDawley(SD)雄性大鼠和一年半的老龄化雄性SD大鼠各4只,应用免疫组织化学方法对下丘脑视上核(SON)及室旁核(PVN)中催产素(OXT)及加压素(VP)进行染色研究;同时应用ELISA方法检测两组动物血浆中的激素浓度水平。结果:与成年大鼠相比,老龄大鼠下丘脑视上核和室旁核中的OXT及VP神经元数量变化不明显,但其免疫反应染色强度显著降低,灰度分析显示单个神经元和整个核团的光密度值明显下降(P0.05);正中隆起处VP和OXT纤维终末及膨体的免疫反应性也明显减弱。与此相对,Elisa检测显示老龄鼠血浆中的VP和OXT水平高于正常大鼠,且以VP的升高更为明显。结论:老龄鼠外周血和中枢神经元中的OXT、VP含量水平呈相反变化趋势,这可能与老龄鼠中的激素释放增加、储存减少有关,而这一变化可能参与某些老年相关疾病如水盐代谢障碍、高血压、学习记忆障碍的发生发展过程。     

神经生长因子促进老年鼠大脑皮质胆碱能纤维损伤后再生

目的：探讨神经生长因子（nerve growth factor,NGF)对老年鼠大脑皮质胆碱能神经纤维损伤后再生的影响。方法：老年SD大鼠顶皮质切一宽2mm的冠状切口,侧脑室注射NGF,AChE纤维染色结合体视系分析正常组,损伤对照组和NGF用药组切口嘴,尾侧区的胆碱能纤维的再生情况。结果：损伤对照组损伤1个月后,嘴侧AChE阳性纤维增生至正常111．44％,尾侧纤维减少至正常67．14％;NGF用药组嘴侧纤维密度比损伤对照组增多,为正常145．93％,尾侧纤维为正常127．95％,结论：提示NGF对老年乳类皮质胆碱能纤维后损伤再生具有一定促进作用。     

Age-related changes in cholinergic and noradrenergic transmission in the rat cerebellum. A histochemical and immunocytochemical study.

The histochemical and immunocytochemical distribution of some cholinergic and noradrenergic markers was compared in the cerebellum of young adult (3-month old) and aged (24-month old) Wistar rats. A decrease in the density and staining of acetyl cholinesterase (AChE) positive fibers, puncta and Golgi cells was found in both the cerebellar cortex and nuclei of aged rats. The age-related changes in choline acetyltransferase immunoreactivity were less pronounced than the changes in AChE activity. A reduction in the density of catecholamine fluorescent fibers and puncta was observed in the cerebellar cortex during aging. In aged rats the increase in monoamine oxidase (MAO)-A activity was more pronounced than the increase in MAO-B activity.     

Cholinergic fiber aberrations in nucleus basalis lesioned rat and Alzheimer's disease.

Innervation density and morphological aberrations of cholinergic fibers were studied with choline acetyltransferase (ChAT) immunocytochemistry and acetylcholinesterase (AChE) histochemistry in 30-35 month-old aged rats and rats with long-term bilateral lesions of the magnocellular basal nucleus (MBN). In addition, AChE histochemistry was performed on human cortical sections derived from autopsy brains of normal aged and Alzheimer's disease (AD) patients. A limited but variable number of morphological alterations were observed in ChAT-immunoreactive fibers in the cortex and the hippocampus of the aged control rats. The aged MBN-lesioned rats displayed a severely reduced number of cholinergic fibers in the denervated areas of the neocortex, whereas the surviving fibers showed a strongly increased number of aberrations. Fiber anomalies were also observed in the cortex of the aged human subjects and Alzheimer patients, the latter showing a higher incidence of such aberrations. Only a part of these distended profiles were seen in close association with senile plaques as detected in the AChE-stained material. These findings suggest that experimental MBN lesions combined with aging share with AD the induction of large quantities of fiber malformations. Implications of possible mechanisms in both conditions are discussed.     

老年性学习记忆减退大鼠新皮质和海马结构胆碱能纤维的定量研究

用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫行为检测方法以青年组平均逃避潜伏期９５％和９９％正常值范围上限值为界将老年大鼠分为学习记忆正常组（老年正常组）和学习记忆减退组（老年减退组）,以Ｈｅｄｒｅｅｎ等推荐的ＡＣｈＥ组织化学染色方法结合形态计量方法对各组大鼠的额、枕、内嗅皮质、海马ＣＡ１区多形层、腔隙分子层和齿状回分子层外带的胆碱能纤维密度进行分析,结果显示老年减退组较老年正常组、青年组各层（除枕叶外）ＡＣｈＥ阳性纤维数量均明显减少（Ｐ０．０５,Ｐ＜０．０１）。老年正常组与青年组相比各层阳性纤维数量有所减少,但除海马ＣＡ１区腔隙分子层差异显著外,其余差异均无显著性。相关分析结果表明大鼠各层ＡＣｈＥ阳性纤维数量与其平均逃避潜伏期呈负相关关系,与原平台象限游泳距离占总距离百分比呈正相关关系。本研究提示老年性学习记忆能力减退与新皮质、海马结构胆碱能纤维溃变密切相关。     

大脑皮质损伤后Ⅲ层和Ⅵ层内胆碱能纤维再生的研究

实验从2月龄SD大鼠64只，于顶叶皮质切一深3mm、宽2mm的冠状切口，用染AChE纤维的组织化学方法分析术后1～8周切口吻、尾侧区皮质Ⅱ层和Ⅵ层内胆碱能纤维的变化．结果表明：正常组皮质Ⅱ层纤维密度高于Ⅵ层（P＜0.01）；损伤组和损伤后胰岛素脑室内注射组（0．6IU／次／3d）在损伤后l～2周，皮质Ⅱ层内存留的纤维密度高于Ⅵ层，3周后Ⅵ层纤维再生幅度超过Ⅱ层（P＜0．05）；而在链尿菌素所致胰岛素缺乏的皮质损伤组，损伤后4周时Ⅵ层纤维密度仍低于Ⅱ层（P＜0．05）。提示皮质Ⅵ层内胆碱能纤维损伤后再生幅度大于Ⅱ层，推测可能与脑内胰岛素及其受体在皮质深部分布密度较高有关．     

睾丸酮对鼠脑皮质胆碱能纤维损伤后再生的影响

用2月龄去势雄性SD大鼠28只，建立皮质损伤模型，采用AChE染色法，通过计算切口两侧纤维数观察了睾丸酮对鼠脑皮质胆碱能纤维损伤后再生的影响。结果：损伤1周后用药组的损伤切口吻侧区的纤维密度明显高于损伤1周后的对照组和正常组（P＜0．01）；2周后，用药组纤维密度虽仍高于同期对照组（P＜0．01），但较1周时的密度明显降低；4周后用药组吻侧纤维密度较2周时升高，但与同期对照组差别不明显。同时也看到1周用药组损伤切口尾侧区的纤维密度甚低，明显低于正常值（P＜0．01），与同期报伤对照组差别不明显；2周和4周用药组尾侧区纤维密度增加高于对照组（P＜005）。提示：睾丸酮对鼠脑皮质损伤后胆碱能纤维再生有促进作用。     

Quantitative histochemistry of brain acetylcholinesterase and learning rate in the aged rat

Using a newly developed method for quantitative acetylcholinesterase (AChE) histochemistry we find a substantial decrease in AChE content in aged rats compared to young controls in the cholinergic cell body regions (the ventral pallidum and the medial septal nuclei) and, to a smaller extent in the projection areas (the cortex and hippocampus). In the same group of aged rats we find a severe deficit in the acquisition of a water maze task. Quantitative histochemistry is a potent method for detecting localized changes in AChE content in otherwise intact, learning-impaired aged rats.     

毁损Meynert基底核造成皮层及海马的乙酰胆硷酯酶减少行为学和形态学研究(英文)

本研究通过毁损Ｍ ｅｙｎｅｒｔ基底核（ｎｂＭ ）建立Ａｌｚｈｅｉｍ ｅｒ氏病（ＡＤ）动物模型。用乙酰胆硷酯酶（ＡＣｈＥ）细胞化学方法对模型动物大脑皮层及海马进行反应，评价ＡＣｈＥ 与ＡＤ 之间可能存在的关系。将４８ 只大鼠分成对照组及实验组，用Ｍｏｒｒｉｓ 水迷宫（ＭＷ Ｍ ）测定行为学变化。在实验组，以局部注射海人藻酸的方法毁损ｎｂＭ 。术后７ ｄ，再次检测其行为学变化。存活不同时间后，用ＡＣｈＥ 酶细胞化学技术染色脑切片，用图象分析系统测算海马层ＡＣｈＥ阳性神经元及纤维的体积密度。结果显示，毁损ｎｂＭ 鼠皮质及海马的ＡＣｈＥ阳性神经元纤维明显减少，其特征为片层结构缺失。这些变化在毁损ｎｂＭ 鼠３～４ 个月及９～１０ 个月组间无显著差异。本研究证明，毁损ｎｂＭ 出现的ＡＣｈＥ减少与ＡＤ 的发生关系密切，且与同一动物模型β 淀粉样蛋白及τ蛋白过度表达在时间上一致，后者是ＡＤ 病人的特征。     

胰岛素缺乏对皮质AchE阳性纤维损伤后再生的影响

用２ｍ龄ＳＤ大鼠２８只，建立皮质损伤模型，采用ＡｃｈＥ组织化学染色法，观察损伤切口两侧胆碱能纤维再生的变化。结果：损伤１周对照组切口两侧纤维较正常组大量丢失（Ｐ＜０．０１），４周后纤维密度较一周组增加（Ｐ＜０．０１），嘴侧纤维达到正常值。链尿菌素所致胰岛素缺乏的皮质损伤４周组纤维密度明显低于４周对照组（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），经胰岛素治疗的４周组，密度接近４周对照组；而损伤后胰岛素脑室内和腹腔内注射组纤维再生的密度明显高于４周对照组（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。提示：正常情况大脑皮质胆碱能纤维损伤后具有一定的再生能力，体内胰岛素缺乏使纤维损伤后的再生受到损害，而体内注入超生理水平的胰岛素时，则有促进损伤后纤维再生的作用。