一氧化氮合酶基因转染预防兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的实验研究

目的通过血管内转染内皮型一氧化氮合酶(e NOS)基因的方法,结合脑动脉病理学和超微结构观察,探讨e NOS基因转染对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的影响及其可能机制。方法采用枕大池二次注血法建立兔蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛模型。通过颈动脉微泵持续滴注方法进行基因转染。45只兔随机分为对照组、SAH组、Ade NOS组。各组分别于造模7 d后进行灌注固定取脑动脉行病理学和超微结构观察;测量大脑中动脉直径,同时免疫组化检测e NOS的表达。结果枕大池二次注血法造模后,血液广泛聚积于蛛网膜下腔,以基底池为主;免疫组化证实Ade NOS组7 d重组e NOS基因表达,重组e NOS主要表达于内皮质。7 d脑组织HE染色显示Ade NOS组脑动脉平均直径较SAH组增大;电镜下SAH组血管痉挛明显,海马神经元细胞肿胀,结构不完整,细胞核固缩,线粒体空泡化,Ade NOS组损伤明显减轻。结论采用颈动脉微泵持续滴注方法转染e NOS基因至兔脑动脉可缓解蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛,且这一效应可能通过增加内皮细胞重组内皮型一氧化氮合酶表达水平而实现。     

骨桥蛋白对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的作用

目的探究重组骨桥蛋白(r-OPN)对蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)的作用及其可能机制。方法将48只大鼠随机分为假手术+安慰剂组、SAH+安慰剂组、SAH+低剂量rOPN组和SAH+高剂量r-OPN组。采用枕大池二次注血法建立SAH模型。首次注血后72 h取脑脊液,处死大鼠,通过测量基底动脉横截面积和管壁厚度判断脑血管痉挛情况,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑脊液中内皮素-1(ET-1)水平,Western blot测定基底动脉磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-e NOS)和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)水平。结果与SAH+安慰剂组相比,SAH+高剂量r-OPN组大鼠基底动脉横截面积明显增加,管壁厚度明显减轻,脑脊液ET-1水平明显降低,基底动脉pe NOS表达明显升高,i NOS表达明显降低。结论 r-OPN能有效缓解SAH后CVS,其机制可能与抑制ET-1的产生、降低i NOS的表达,提高p-e NOS的表达有关。     

转染组织纤溶酶原激活物及内皮型一氧化氮合酶基因的内皮细胞和平滑肌细胞共同种植于人工血管对内膜增生的影响

背景：前期研究表明，双层细胞种植能有效提高内皮细胞保留率，将组织纤溶酶原激活物基因转染到内皮细胞中能提高其细胞溶解纤维蛋白的能力。 目的：采用双细胞种植及修饰内皮的组织纤溶酶原激活物基因提高内皮细胞保留率和抗栓能力，通过内皮型一氧化氮合酶基因调控平滑肌细胞的增殖，观察对小口径人工血管通畅率的影响。 方法：以4种不同组合细胞(内皮细胞+平滑肌细胞SMC，内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞，内皮细胞+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶，内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶)种植在PTFE管腔面。将新西兰大白兔随机分成4组，4种人工血管经旁路分别移植在4组兔的腹主动脉上。 结果与结论：移植后60 d，种植内皮细胞+平滑肌细胞组和内皮细胞+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶组内膜厚度无明显差异(P > 0.05)。与内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶组相比，未转染内皮型一氧化氮合酶组(内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞）内膜明显增厚(P < 0.05)；未转染组织纤溶酶原激活物组(内皮细胞+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶)内膜较薄(P < 0.05)。提示组织纤溶酶原激活物基因转染可以促进血管内膜增生导致血管狭窄，但同时转入内皮型一氧化氮合酶基因可以抑制组织纤溶酶原激活物的促进平滑肌细胞增殖及内膜增生的作用。     

内皮型一氧化氮合酶基因转染对移植人工血管内膜增生的作用*★

目的：平滑肌细胞增殖移行和血小板激活导致血栓形成是移植血管再狭窄的主要原因，一氧化氮可以抑制上述生物反应，但内皮型一氧化氮合酶基因转染是否抑制种植了平滑肌细胞的人工血管内膜增生还未得到证实。实验拟进一步观察内皮型一氧化氮合酶基因转染对种植平滑肌细胞的人工血管内膜增生的影响。 方法：实验于2006-04/2007-05在西安交通大学医学院中心实验室及分子生物学实验室完成。①实验材料：1月龄新西兰大白兔1只，用来获取平滑肌细胞。成年新西兰大白兔18只，随机数字表法分成3组，每组6只。正常细胞组移植未种植细胞的人工血管；LacZ转染组移植种植转染lacZ的平滑肌细胞的人工血管，内皮型一氧化氮合酶转染组移植种植内皮型一氧化氮合酶的平滑肌细胞的人工血管。②实验方法：构建含有报道基因lacZ和内皮型一氧化氮合酶基因的假型反转录病毒载体小鼠白血病病毒/疱疹性口炎病毒G糖蛋白，并转染平滑肌细胞。将转染了基因的细胞种植在人工血管上，并用血管旁路移植的方法植入兔腹主动脉。③实验评估：测定转染内皮型一氧化氮合酶基因及LacZ基因细胞培养上清中一氧化氮含量。血管植入30，100 d 后X-gal染色及苏木精-伊红染色观察人工血管上的平滑肌细胞，同时显微镜下测量每段血管内膜增生的厚度。 结果：纳入成年新西兰大白兔18只，均进入结果分析。①内皮型一氧化氮合酶转染组一氧化氮含量明显高于未转染的正常细胞组（P < 0.05)。平滑肌细胞转染lacZ基因后经X-gal染色，倒置显微镜下可见转染了基因的细胞被染成蓝色。②血管植入30 d，与正常细胞组比较，LacZ转染组和内皮型一氧化氮合酶转染组内膜厚度差异无显著性（P > 0.05）；100 d后，内皮型一氧化氮合酶转染组内膜厚度与正常细胞组无明显差异，与LacZ转染组相比较，差异显著（P < 0.05）。 结论：内皮型一氧化氮合酶基因转染抑制了种植平滑肌细胞的人工血管内膜增生。     

内皮素-1、一氧化氮和一氧化氮合成酶在蛛网膜下腔出血中的作用机制探讨

继发性脑血管痉挛是蛛网膜下腔出血(SAH)患者死亡和致残的重要原因.内皮素(ET-1)通过收缩脑血管、介导脑血管和脑组织损伤引发脑损伤;而一氧化氮(NO)和内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)对脑组织可以起到减少损伤作用;另一方面NO的过量生成以及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达可直接对细胞产生强大的毒性作用,或者通过诱导细胞凋亡来损伤脑组织;在蛛网膜下腔出血整个病理过程中ET-1和NO的失衡也在脑组织损伤过程中起着至关重要的作用.     

大剂量伽玛刀照射后脑组织一氧化氮合酶亚型表达改变及其与急性脑水肿的关系

目的探讨大剂量伽玛刀(γ刀)照射后脑组织一氧化氮合酶(NOS)亚型表达改变及其与急性脑水肿的关系。方法200Gy量γ刀照射正常大鼠脑,采用光镜、电镜、免疫组化及原位杂交技术研究照射后急性脑水肿的发生发展及脑组织NOS亚型表达变化。结果①照射后30min出现急性脑水肿病理改变,照射后2h出现明显血管源性脑水肿,照射后6h出现明显细胞性脑水肿,照射后3d急性脑水肿达高峰。②脑组织NOS亚型表达在照射后30min开始增高,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达分别于照射后2h及6h显著增高,神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达亦增高,但nNOS阳性表达细胞数量较少。3种NOS亚型表达增高持续时间长,伴行于脑水肿的急性发展阶段。结论大剂量γ刀照射后脑组织NOS亚型表达增高与急性脑水肿的发生发展有关。     

转录因子ZNF580促进血管内皮细胞eNOS的表达

目的研究血管内皮细胞中锌指核转录因子(ZNF580)对内皮型一氧化氮合酶(e NOS)表达的影响。方法通过基因芯片技术检测ZNF580过表达的人血管内皮杂交瘤细胞系(EA.hy926)中基因表达谱的变化。采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western bolt)检测转染了携带有ZNF580的慢病毒载体(Lenti-GFP-ZNF580)和携带ZNF580小干扰RNA慢病毒载体(LentiRNAi-ZNF580)的EA.hy926中ZNF580和e NOS mRNA和蛋白的表达变化。结果多种基因表达在ZNF580过表达的EA.hy926细胞中发生了改变,其中e NOS等基因的表达明显上调。转染了携带有(Lenti-RNAi-ZNF580)的内皮细胞中ZNF580和e NOS表达显著下调,而转染了Lenti-GFP-ZNF580的内皮细胞中ZNF580和e NOS表达显著上调。结论转录因子ZNF580促进了血管内皮细胞中e NOS的表达。     

一氧化氮合酶在脑缺血再灌注中的双重作用

目的 探讨短暂脑缺血再灌注后大鼠脑内3型一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)的表达及作用，为脑缺血治疗提供理论依据。方法 采用免疫组织化学方法，用3型NOS的多克隆抗体检测大鼠局灶性脑缺血2h再灌注15min及22h NOS在脑内的表达情况。结果 大鼠脑缺血2h再灌注15min，在脑缺血边缘区的血管壁及神经细胞出现内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)上调表达；脑缺血2h再灌注22h，在脑梗死区内表达神经元型一氧化氮合酶(neuronal mitric oxide synthase，nNOS)的神经细胞减少，并出现表达诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的胶质细胞，同时梗死边缘区血管及神经细胞出现eNOS及iNOS的上调表达。结论 在短暂脑缺血再灌注早期，缺血区周围可能有eNOS相关的保护机制；亚急性期eNOS及iNOS的保护及损伤机制并存；因此，在短暂脑缺血早期恢复灌注后予选择性iNOS抑制剂及促进eNOS活性有可能减少迟发性神经损伤。     

急性心肌梗死后猪血清内皮型一氧化氮合酶的表达：体外低能震波物理能量的影响途径*☆

背景：体外心脏震波治疗通过体外导入心肌的低能震波物理能量,使活体内血管再生因子及其受体表达上调,促进缺血组织的血管新生和加速侧支循环建立,但其具体作用机制尚不完全明确。 目的：观察体外心脏震波治疗对急性心肌梗死后猪血清内皮型一氧化氮合酶水平的影响。 方法：以冠脉左前降至远端栓塞法制作猪急性心肌梗死模型。造模后以抽签法随机分为2组：实验组于术后1,3,5 d接受3次体外心脏震波治疗,200击/点,共12点,能量为0.09 mJ/mm2。以单纯心肌梗死为对照组。于术前,术后即刻、1 d、3 d、5 d、1周、2周、3周、4周采用酶联免疫反应方法检测血清内皮型一氧化氮合酶水平。 结果与结论：实验组及对照组术后即刻血清内皮型一氧化氮合酶水平均较术前明显减少。实验组术后1 d接受体外心脏震波治疗后内皮型一氧化氮合酶表达开始升高,而对照组内皮型一氧化氮合酶呈下降趋势,说明实验组导入体内的超声波能量在心肌缺血局部产生了正性作用。第3次接受体外心脏震波治疗治疗后内皮型一氧化氮合酶表达达高峰,可持续两三周,第4周下降。对照组内皮型一氧化氮合酶随时间推移逐渐减少,两组间比较差异有非常显著性意义(P < 0.01)。结果说明体外心脏震波可通过效地促进内皮型一氧化氮合酶表达治疗急性心肌梗死。     

内皮型一氧化氮合酶基因转染对血管损伤后新生内膜增生的影响*

背景：一氧化氮能够抑制血管平滑肌细胞的迁移和增殖,而一氧化氮合酶是其合成的关键酶,有关一氧化氮合酶基因体内转染对平滑肌细胞及动脉粥样硬化血管损伤后内膜增生影响少有报道。 目的：观察内皮型一氧化氮合酶 (endothelial nitric oxide synthase,eNOS)基因体内局部转染对动脉粥样硬化大鼠血管损伤后新生内膜增生的抑制作用。 方法：建立动脉粥样硬化Wistar大鼠颈动脉球囊损伤模型,建模后随机分成空白对照组、AdCMV-lacz对照组和AdCMV-eNOS组,分别将PBS,AdCMV-lacz和AdCMV-eNOS体内转染至以上3组大鼠的损伤血管壁。转染2周后培养并鉴定损伤局部平滑肌细胞,并用RT-PCR法检测各组损伤及转染后血管平滑肌细胞eNOS mRNA的表达,同时观察转染后不同时期新生内膜增生的影响。 结果与结论：AdCMV-eNOS组的颈总动脉血管平滑肌细胞可表达eNOS mRNA。3组大鼠转染后1和3个月,AdCMV-eNOS组内膜/中膜面积比值低于空白对照组和AdCMV-lacz对照组(P < 0.01)。结果显示,eNOS基因体内转染损伤后血管可以抑制血管新生内膜增生,减少再狭窄发生率。     

中英文对照名词词汇(四)

<正>Alberta脑卒中计划早期CT评分Alberta Stroke Program Early CT Score(ASPECTS)脑卒中血管内治疗清醒镇静与插管全身麻醉对比研究Sedation vs.Intubation for Endovascular Stroke Tre Atment(SIESTA)study内皮型一氧化氮合酶endothelial nitric oxide synthase(e NOS)欧洲卒中组织European Stroke Organization(ESO)帕金森病Parkinson's disease(PD)胚胎发育不良性神经上皮肿瘤     

一氧化氮对沙土鼠缺血性脑损伤的影响

目的:研究一氧化氮(NO)在缺血性脑损伤中的作用。方法:沙土鼠前脑缺血性脑损伤模型,分组、分剂量进行。结果:小剂量N~G-硝基-L-精氨酸(LNNA)能明显减轻缺血性损伤后脑含水量。脑损伤后一氧化氮合酶(NOS)活力明显升高,LNNA能抑制NOS活力,抑制程度与剂量相关。缺血性损伤后海马神经元严重缺失。中、小剂量LNNA能减轻海马神经元缺失,而大剂量LNNA能加重神经元缺失。结论:脑缺血后NOS活性明显增加,加重缺血性脑损伤。适当降低脑组织NOS活性能明显减轻脑水肿和海马细胞坏死。提示NO对脑损伤毒性作用和保护作用与NO浓度相关。     

一氧化氮与癫癎的研究进展

癫癎是严重危害人类健康的常见病、多发病,引起癫(?)的病理机制复杂。目前一氧化氮(NO)参与癫(?)的发作已得到公认,但具体机制不明,现就NO与癫(?)的最新研究进展综述如下。1 NO的生物学特性 NO是L精氨酸(L-Arg)在一氧化氮合酶(NOS)作用下生成的,NOS主要有三种类型:Ⅰ型神经元型NOS(nNOS);Ⅱ型诱导型NOS(iNOS);Ⅲ型内皮型NOS(eNOS),nNOS和eNOS属于结构型NOS(cNOS),依赖ca2 或钙调蛋白,快速短暂生成NO。研究     

eNOS解偶联对大脑中动脉栓塞后大鼠神经血管单元的作用及机制

目的探讨大鼠大脑中动脉栓塞模型中,内皮型一氧化氮合酶(e NOS)解偶联对神经血管单元的作用及机制。方法将80只雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=40)和大脑中动脉栓塞(MCAO)组(n=40)。参照Longa法制作MCAO模型。栓塞后6 h,通过蛋白印记法检测缺血区e NOS不同偶联状态的表达情况及3-硝基酪氨酸(3-NT)的水平;通过尼氏染色比较缺血区神经元的形态及存活情况;通过免疫组织化学染色比较缺血区星形胶质细胞、微血管内皮细胞以及血脑屏障紧密连接对应的标记物GFAP、VWF、Occludin的表达水平;通过MRI的T2加权序列和动脉自旋标记(ASL)反应栓塞后脑组织病灶范围及血流情况。结果 MCAO后栓塞部位在T2序列上呈高信号,在ASL序列上血流信号减低。e NOS二聚体/单体的比例明显低于假手术组(P0.05);3-NT的含量明显高于假手术组(P0.05)。尼氏染色显示MCAO后神经元大量空泡形成,核固缩变性,数量显著减少;免疫组化结果显示,VWF、Occludin的表达较假手术组明显减少,而GFAP则明显增多(P0.05)。结论 MCAO会导致e NOS解偶联。e NOS解偶联后NO合成受限,而具有毒性作用的3-NT产生增多,炎症反应加重,从而对神经血管单元结构及功能产生破坏作用。     

氯美噻唑对大鼠脑出血周边组织一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性及细胞凋亡的干预作用

目的 研究氯美噻唑对大鼠脑出血周边组织一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性及细胞凋亡的影响.方法 Wistar大鼠112只,随机分为脑出血组和脑出血+氯美噻唑(CMZ)组,两组各分为(出血前和出血后4h、6h、12h、24h、72h、7d)7个时间点.利用化学方法测定大鼠脑出血周边组织NO含量、NOS活性;利用原位末端标记法测定出血周边组织中神经细胞的凋亡情况.结果 大鼠脑出血周边组织NO含量、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、一氧化氮合酶(NOS)4h开始升高(P<0.05),24h到7d显著升高(P<0.01),大约72h左右NO、iNOS、NOS达峰值.大鼠脑出血周边组织6h出现凋亡细胞,12h上升显著(P<0.01),3d凋亡细胞达峰值,与NO、iNOS、NOS峰值对应,7d时仍存在较多凋亡细胞.氯美噻唑干预后,NO含量、iNOS和NOS活性及凋亡细胞数量与脑出血组对应时间点比较显著下降(P<0.01).结论 大鼠脑出血周边组织NO含量增高,iNOS、NOS活性增强,脑出血周边组织神经细胞存在长时间凋亡,NO、iNOS可以促进其凋亡;氯美噻唑干预后NO含量降低,iNOS、NOS活性下降,减少大鼠脑出血周边组织神经细胞凋亡.     

17β-雌二醇对蛛网膜下腔出血脑血管痉挛的疗效与其可能机制

性别的差异是否影响颅内动脉瘤破裂所引发蛛网膜下腔出血后的预后,仍未有定论,雌性素对于血管扩张的可能作用也尚未确定。本研究评估17β-雌二醇（estradiol,E2）在大鼠两次出血的蛛网膜下腔出血动物模型中,对于蛛网膜下腔出血引发的脑血管痉挛的治疗效果与可能机制。方法 以0.3 mg/ml E2混合玉米油填充于30 mm长的硅胶管（Silastic tube）,于雄性大鼠引发蛛网膜下腔出血后1 h,包埋于动物皮下。测量包埋的第0、1、2、3、4及7天大鼠血中E2浓度。脑血管痉挛的程度以第一次出血后7天的基底动脉横切面平均面积来评估。同时检查基底动脉内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）及诱导型一氧化氮合酶（Inducible nitric oxide synthase,iNOS）的表现。结果 以E2治疗大鼠的血中浓度维持在生理浓度（56～92 pg/ml）,与给予赋形药物的溶剂对照组相比较,研究组E2浓度的增加有统计学上的意义。E2治疗能有意义的减少蛛网膜下腔出血引发的脑血管痉挛（P <0.01）。E2治疗能有意义的减少脑血管痉挛后基底动脉iNOS-mRNA及蛋白质的表达增加,而对照组无此作用。脑血管痉挛后eNOS-mRNA及蛋白质的表达受压抑,但可经E2治疗而减缓。结论 建议持续性给予E2,维持其于生理浓度,可防止蛛网膜下腔出血后的脑血管痉挛,E2防止蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的效益,部分与E2可防止蛛网膜下腔出血后iNOS的表达及保留eNOS的表达有关。因此,E2对于治疗蛛网膜下腔出血后的脑血管痉挛是一种值得进一步探讨的方法。     

一氧化氮合酶抑制剂对脊髓损伤后运动功能的影响

目的观察诱导型和神经型一氧化氮合酶(iNOS,nNOS)抑制剂对大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能的影响和机理。方法大鼠脊髓压迫伤后分别给予iNOS和nNOS抑制剂—氨基胍(AG)和7-硝基吲唑(7-NI)进行治疗,24h后用分光光度法测定组织中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性,72h后用流式细胞仪检测神经细胞凋亡情况,4周后用电生理和动物行为学等指标评价运动功能的恢复情况。结果AG和7-NI均可以抑制组织中的NO含量,并使NOS活性下降,同时降低神经细胞的凋亡比率,对运动功能的恢复前者优于后者。结论脊髓损伤后应用NOS抑制剂可以使伤后运动功能得到改善,AG的作用似乎更明显,提示iNOS活性变化可能对脊髓损伤的恢复更具决定作用。     

构建内皮型一氧化氮合酶真核表达载体及在内皮细胞的表达

背景：内皮型一氧化氮合酶表达产物对内皮细胞的影响是血管外科基础研究中的重要课题，对于生物人工血管的研制有重要意义。 目的：构建内皮型一氧化氮合酶基因真核表达载体pcDNA3.1/eNOS，以脂质体为介导观察其在血管内皮细胞中的转染效率，评价表达产物内皮型一氧化氮合酶的酶学活性及其对内皮细胞生长的影响。 设计、时间及地点：单一样本观察，实验于2005-07/2007-05在南京大学医学院附属鼓楼医院生物化学实验室完成。 材料：质粒PCMV-eNOS由勋阳医学院张群林教授惠赠。pcDNA3.1真核表达载体由南京大学博士后贾立军馈赠，pcDNA3.0/EGFP质粒由戚金亮博士提供。大肠杆菌DH5a和人脐静脉内皮细胞株(ECV304)为南京大学生物系保存。 方法：采用分子生物学技术，先用限制性核酸内切酶EcorⅠ酶切质粒PCMV/eNOS,电泳回收3.6 kb编码人内皮型一氧化氮合酶cDNA序列，克隆入质粒pcDNA3.1的EcorⅠ酶切位点，通过内皮型一氧化氮合酶cDNA序列中的XhoⅠ酶切位点筛选其插入载体的方向，构建pcDNA3.1/eNOS重组质粒。以Lipofec-tamine为介导将其与pcDNA3.0/EGFP共转染分离培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304)。 主要观察指标：①观察转染后对ECV304生长的影响，在流式细胞仪和荧光显微镜下计算转染效率。②以反转录-聚合酶链反应和免疫组织化学检测内皮型一氧化氮合酶基因的表达，测定内皮型一氧化氮合酶活性以及一氧化氮产量。③观察施加不同因素（L-精氨酸、氯化钙、乙二胺四乙酸、L-NAME）对内皮型一氧化氮合酶活性及一氧化氮合成的影响；同时检测此时ECV304生长所受影响。 结果：以脂质体为介导转染人脐静脉ECV304后，其转染效率为(32.6±2.6)%，反转录-聚合酶链反应和免疫组织化学检测到相应的内皮型一氧化氮合酶mRNA和蛋白表达，与对照组有明显差别；同时在上述不同因素影响下内皮型一氧化氮合酶活性出现明显差别；随着培养液一氧化氮浓度升高，ECV304生长曲线下降。 结论：成功构建pcDNA3.1/eNOS，在脂质体介导下能高效转染ECV304并良好表达，Ca2+是内皮型一氧化氮合酶的必要激活条件，ECV304的增生受到高浓度一氧化氮抑制。     

血管内一氧化氮合酶基因转染预防脑血管痉挛的实验研究

目的采用血管内基因转染的方法,将重组内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因转染入蛛网膜下腔出血(SAH)后迟发性脑血管痉挛大鼠脑动脉,探讨防治SAH后迟发性脑血管痉挛的新方法。方法首先构建携带eNOS基因的重组腺病毒。采用小脑延髓池二次注血法建立大鼠SAH后迟发性脑血管痉挛模型。通过颈动脉微泵持续滴注方法进行基因转染,并设置对照组。结果第7天采用免疫组化证实重组eNOS基因表达,重组eNOS主要表达于内皮层。第7天显微镜下测定血管内eNOS转染组脑动脉环平均直径较单纯SAH组增大,电镜观察血管痉挛较单纯SAH组减轻。结论通过本研究证实采用颈动脉微泵持续滴注方法可在大鼠脑动脉表达重组eNOS,重组基因主要表达于动脉内皮细胞,可达到缓解SAH后迟发性脑血管痉挛的目的。     

胰岛素对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的治疗作用

目前对自发性蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛尚缺乏有效的预防和治疗方法。近年来．胰岛素的血管活性作用正逐渐引起人们的重视。胰岛素可降低蛛网膜下腔出血后产生的高血糖，抑制高血糖对血管内皮细胞和脑组织的损害．并通过Ras-促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）途径促进内皮细胞的修复。同时，胰岛素还通过磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B（P13K-PKB）信号通路作用于内皮细胞，产生一氧化氮，抑制血管收缩，增加缺血区域的血流。本文对此进行综述。