庆大霉素鼓室内注射对耳蜗的毒性及刺五加的保护作用-听觉电生理研究及电镜观察

目的:采用庆大霉素鼓室内注射,通过听觉电生理研究及电镜观察,研究豚鼠中耳局部应用庆大霉素的耳蜗毒性作用,以及刺五加有无对抗庆大霉素耳毒性作用。方法:选择健康豚鼠44只,随机分成3组:庆大霉素组、庆大霉素和刺五加组、生理盐水组。分别检测3组豚鼠ABR。鼓室内注射每天1次,连续7天:第1、2组注射3%庆大霉素,第3组注射生理盐水。第2组同时腹腔注射刺五加注射液,每天1次,连续14天。2周后检测3组ABR反应阈。处死,制备标本行电镜观察。结果:第1组ABR反应阈于给药前、后分别为20.63±6.55dbSpl、69.69±18.02dbSpl;第2组分别为18.75±5dbSpl、40.33±16.53dbSpl;第3组分别为19.17±4.69dbSPI、23.75±8.53dbSpl。单因素方差分析(ANOVA),给药前3组ABR反应阈差异(F=0.5,P>0.05)无统计学意义;给药前、后3组ABR反应阈差异(F=24.31,P<0.01)有统计学意义。给药前、后各组ABR反应阈之差(配对t检验),第1和第2组有统计学意义,第3组无统计学意义。给药前、后3组ABR反应阈之差两两比较(scheffe检验),第1组和第2组、第1组和第3组、第2组和第3组均有统计学意义。扫描电镜第1组,可见corti器外毛细胞纤毛稀疏、脱落及破坏,内毛细胞基本正常;第2组可见外行细胞纤毛倒伏、变形及模糊,内毛细胞正常;第3组可见耳蜗内、外行细胞均正常。透射电镜第1组可见corti器毛细胞核染色质固缩、凝聚,线粒体嵴断裂,空泡样变性;第2组毛细胞线粒体肿胀,嵴模糊,部分断裂;第3组毛细胞正常。结论:豚鼠鼓室内注射庆大霉素可以导致耳蜗corti器毛细胞破坏,ABR反应阈显著提高,具有明显的耳蜗毒性。联合应用中药刺五加组的豚鼠也出现了耳蜗corti器毛细胞破坏,ABR反应阈提高,但比单独应用庆大霉素组程度轻,表明刺五加具有对抗庆大霉素耳毒性作用。提示临床应禁用庆大霉素溶液滴耳,并可采用中药刺五加治疗药物性耳聋。     

5-磷酸二酯酶抑制剂对庆大霉素所致豚鼠耳毒性影响的研究

目的探讨5-磷酸二酯酶(PDE5)抑制剂对庆大霉素所致豚鼠耳毒性的听功能及耳蜗形态学的影响。方法采用随机数字表法将36只豚鼠分为空白对照组、庆大霉素组和PDE5抑制剂组,每组各12只;其中空白对照组未给予特殊处理,庆大霉素组和PDE5抑制剂组给予连续腹腔注射庆大霉素120 mg·kg^-1·d^-13周后,庆大霉素组继续给予腹腔注射生理盐水4 ml·kg^-1·d^-1,PDE5抑制剂组给予腹腔注射他达那非(选择性5-磷酸二酯酶抑制剂)2 mg·kg^-1·d^-1,均连续给药4周后,分别测试庆大霉素给药前1天、庆大霉素给药后3周、给药生理盐水和他达那非后1、2及4周三组豚鼠听性脑干反应(ABR)阈值及波Ⅰ潜伏期,扫描电镜观察生理盐水和他达那非给药4周后豚鼠耳蜗毛细胞的形态变化。结果在庆大霉素给药3周后,PDE5抑制剂组与庆大霉素组ABR阈值及波Ⅰ潜伏期较空白对照组明显升高及延长(均为P<0.01),PDE5抑制剂组与庆大霉素组之间差异无统计学意义(P>0.05)。在给予他达那非干预1、2、4周时,PDE5抑制剂组ABR阈移及波Ⅰ潜伏期均小于庆大霉素组,差异有统计学意义(均P<0.01)。用药4周后扫描电镜观察,庆大霉素组豚鼠耳蜗外毛细胞听毛紊乱、融合及缺失;而PDE5抑制剂组耳蜗病变较轻,听毛仅有轻微倒伏、融合现象。结论PDE5抑制剂能够减轻庆大霉素所致豚鼠耳蜗毛细胞损害,对庆大霉素引起的听力损伤有一定的治疗作用。     

经圆窗应用地塞米松对豚鼠庆大霉素耳毒性的拮抗作用北大核心CSCD

目的探讨经圆窗局部应用地塞米松和全身应用地塞米松对庆大霉素致聋豚鼠耳蜗损害的拮抗作用。方法选用听力正常豚鼠60只,随机分为4组:①庆大霉素组,肌肉注射庆大霉素120mg·kg-1·d-1,1次/天,共10天;②全身用药组,肌肉注射庆大霉素(用法同庆大霉素组),同时腹腔注射地塞米松2.5mg·kg-1·d-1,1次/天,共10天;③局部用药组,肌肉注射庆大霉素(用法同庆大霉素组),右耳经圆窗局部用明胶海绵浸地塞米松(5mg/ml)约0.1ml,共1次。④对照组:肌肉注射与庆大霉素等体积的生理盐水,1次/天,共10天,右耳经圆窗局部用地塞米松1次。于实验前、停药后第1天和第10天分别检测各组动物的听性脑干反应(ABR),显微镜下观察中耳粘膜反应,扫描电镜观察耳蜗毛细胞的形态学变化。结果停药第10天,除对照组外,庆大霉素组、全身用药组、局部用药组动物ABR反应阈较实验前均有不同程度的升高,其中庆大霉素组的反应阈明显高于局部用药组(P<0.05)。扫描电镜下可见庆大霉素组动物耳蜗毛细胞损害严重,而全身和局部用药组动物耳蜗毛细胞损伤程度明显减轻;各组动物中耳粘膜正常。结论地塞米松可以在一定程度上减轻庆大霉素所致的耳毒性,经圆窗局部给药的效果优于全身应用。     

NGB基因转染拮抗庆大霉素耳毒性作用的实验研究

目的验证阳离子脂质体介导脑红蛋白(neuroglobin,NGB)基因转染对庆大霉素致豚鼠耳毒性的保护作用。方法将ABR反应阈均不超过40dB SPL的120只健康花色豚鼠随机分为5组,每组24只:Ⅰ组:空白对照组;Ⅱ组:人工外淋巴液对照组(经左耳注入人工外淋巴液);Ⅲ组:人工外淋巴液实验组(经左耳注入人工外淋巴液后肌肉注射庆大霉素);Ⅳ组:空质粒转染组(经左耳注入空质粒pEGFP-C1后肌肉注射庆大霉素);Ⅴ组:NGB基因转染组(经左耳注入pEGFP-NGB后肌肉注射庆大霉素),庆大霉素均经后腿肌肉注射120mg.kg-1.d-1,共给药14天。停止给药后喂养14天,各组均行ABR检测,耳蜗基底膜铺片、免疫组化观察各组豚鼠耳蜗基底膜毛细胞形态学及NGB蛋白表达的变化。结果给药后Ⅰ组ABR反应阈平均为37.22dB SPL(左耳)和36.94dB SPL(右耳),Ⅱ组阈值平均为37.22dB SPL(左耳)和37.50dB SPL(右耳),Ⅲ组阈值平均为119.44dB SPL(左耳)和122.22dB SPL(右耳);Ⅳ组阈值平均为119.72dB SPL(左耳)和120.83dB SPL(右耳);Ⅴ组阈值平均为83.89dB SPL(左耳)和100.56dB SPL(右耳)。Ⅴ组ABR反应阈较Ⅰ组和Ⅱ组显著升高(P<0.05),较Ⅲ组和Ⅳ组显著降低(P<0.05)。Ⅴ组中手术耳ABR反应阈较非手术耳降低(P<0.05)。耳蜗基底膜铺片示Ⅰ组和Ⅱ组内外毛细胞排列整齐,无缺失,Ⅲ组和Ⅳ组内外毛细胞极少量残存,其中ABR阈值大于135dB SPL的豚鼠耳蜗毛细胞几乎消失殆尽,Ⅴ组毛细胞部分缺失,且主要是外毛细胞;免疫组织化学染色示Ⅴ组耳蜗毛细胞NGB蛋白表达量较其余各组均显著增高(P<0.05),其余各组几乎均未见明显阳性表达。结论本研究成功验证了阳离子脂质体介导NGB基因转染对庆大霉素致豚鼠耳毒性具有有效的保护作用。     

还原型谷胱甘肽拮抗庆大霉素耳毒性作用观察

目的观察还原型谷胱甘肽对庆大霉素耳蜗毒性的拮抗效果,并且比较了两种给药方法对其效果的影响.方法健康黑目豚鼠41只,随机分为五组,各组动物在观察期结束后,检测由8kHz、4kHz、2kHz频率短音诱发的脑干听觉诱发电位Ⅲ波反应阈;扫描电镜观察外毛细胞形态变化;采用耳蜗基底膜铺片的方法,对深染的外毛细胞表皮板进行计数.结果谷胱甘肽组耳蜗三排外毛细胞呈V字型排列有序.庆大霉素组外毛细胞纤毛散乱、倒伏,深染的表皮板数明显增加,Ⅲ波反应阈明显提高.合并给药组深染的表皮板数较庆大霉素组明显减少,Ⅲ波反应阈的提高幅度明显减小(P＜0.05).后继给药组深染的表皮板数和8kHz、4kHz的Ⅲ波反应阈与庆大霉素组比较均无统计学差异(P＞0.05),然而2kHz的Ⅲ波反应阈与庆大霉素组比较差异有显著性(P＜0.05),谷胱甘肽组与生理盐水组差异无显著性(P＞0.05).结论还原型谷胱甘肽与庆大霉素合并应用可以显著地减轻庆大霉素的耳毒性;庆大霉素停药后再给予还原型谷胱甘肽,对耳蜗高频段的毛细胞所受庆大霉素毒性可能难以产生拮抗作用,但是对耳蜗中、低频段的毛细胞可能提供一定程度的保护作用.     

一氧化氮对庆大霉素耳毒性的影响

目的研究耳蜗内不同水平的一氧化氮(NO)含量对庆大霉素(GM)耳毒性的影响.方法将实验动物豚鼠随机分为GM组;庆大霉素加左旋精氨酸(GM加L-Arg)组;庆大霉素加NG-单甲基-L-精氨酸(GM加L-NMMA)组和正常对照组.实验过程中观察动物体重变化,检测ABR反应阈;取标本检测血清和耳蜗组织NO含量,耳蜗铺片观察毛细胞损失程度.结果对照组动物体重增加明显,各实验组体重增加缓慢,其中GM加L-Arg组体重略有下降.实验第4周,GM加L-Arg组ABR反应阈升高明显,与GM组比较有统计学意义(P<0.05),GM加L-NMMA组ABR反应阈升高较少,与GM组比较有统计学意义(P<0.05).GM加L-Arg组血清和耳蜗NO含量明显升高,GM加L-NMM A组NO含量升高不明显,与GM组比较差异具有显著性(P<0.05).耳蜗铺片各组毛细胞损失程度与ABR变化相对应.结论增加耳蜗NO含量可增加GM耳毒性,减少耳蜗NO含量可减轻GM耳毒性.     

西地那非对豚鼠噪声性听觉损伤阈移的影响

目的 探讨西地那非(sildenafil)对豚鼠噪声性听觉损伤阈移的影响.方法 将豚鼠按随机数字表法分为对照组、噪声暴露组和西地那非给药组,每组10只.西地那非组及噪声组豚鼠在白噪声(A计权声压级110 dB)暴露1周后分别腹腔注射西地那非10 mg/(kg·d)及生理盐水4mL/(kg·d),连续给药4周.分别测试噪声暴露前1日、噪声暴露后1、2及4周听性脑干反应(ABR)阈值,并通过扫描电镜观察噪声暴露后4周豚鼠耳蜗毛细胞的形态变化.结果 噪声暴露1后,噪声暴露组豚鼠ABR阈值(声压级)平均提高19.1 dB,随着时间推移,阈移逐渐加大,暴露后4周,阈值平均提高22.0 dB;西地那非组噪声暴露后ABR阈值提高19.8 dB,给药后阈移逐渐减小,给药后4周,阈值仅平均提高4.8 dB.西地那非组与噪声暴露组相比,除噪声暴露结束后这一时间点以外,其余给药后各时间点ABR阈值差异均具有统计学意义(P值均＜0.05).扫描电镜显示,噪声组豚鼠耳蜗内、外毛细胞均出现听毛紊乱、融合及缺失;而西地那非组耳蜗病变较轻,听毛仅有轻微倒伏、融合现象.结论 西地那非能够减轻噪声对豚鼠耳蜗毛细胞的损害,降低噪声性听觉损伤引起的ABR阈值升高.     

FK506拮抗庆大霉素耳毒性的实验观察

目的 初步探讨FK506拮抗庆大霉素耳毒性的效果。方法 通过分别检测庆大霉素损伤组与庆大霉素加不同剂量FK506（1mg、2mg）保护组实验动物听性脑干反应(ABR)阈值的变化,并结合耳蜗铺片琥珀酸脱氢酶（SDH)染色方法观察动物耳蜗形态学变化,观察FK506拮抗庆大霉素耳毒性的作用。结果 实验动物的听觉生理检查显示FK506能够拮抗庆大霉素耳毒性,FK506保护组动物听阈明显低于庆大霉素损伤组(P<0.01),随剂量增加,保护作用越明显;同时形态结果显示FK506保护组外毛细胞缺失明显少于庆大霉素损伤组(P<0.01)。结论 FK506对庆大霉素引起的耳毒性有拮抗作用。     

应用顺铂建立C57小鼠感音神经性聋模型的实验研究

目的 探讨顺铂诱发C57小鼠感音神经性聋模型的制备方法。方法 将C57BL/6J小鼠随机分成4组,A组:耳蜗圆窗龛生理盐水给药5μL;B组:耳蜗圆窗龛顺铂给药5μL（1mg/mL）;C组:经鼓膜中耳腔顺铂给药10μL/d×5d（1mg/mL）;D组:腹腔注射顺铂6mg/(kg·d)×5d。用全频程脑干听觉诱发电位（ABR）检测4个组动物的听觉反应阈为指标,以动物各频率听觉反应阈上升≥10dB定为听力减退,并通过异硫氰酸荧光素（FITC）标记的鬼笔环肽染色观察用药后毛细胞的形态学变化。结果 A、C、D组ABR反应阈用药前后无明显变化（P>0.05）;B组小鼠顺铂用药后48h全频程ABR反应阈均升高（P<0.05）,且毛细胞出现损伤、脱落,其损伤从顶回到底回有逐渐加重的趋势,外毛细胞较内毛细胞损伤严重。结论 圆窗龛给药途径是建立顺铂诱发C57小鼠耳聋模型的有效途径。     

盐酸椒苯酮胺对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤的听力保护作用北大核心CSCD

目的探讨盐酸椒苯酮胺(piperphentonamine hydrochloride,PPTA)对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后听功能保护作用及其对耳蜗组织形态的影响。方法将32只成年豚鼠随机分为4组,每组8只,第1组为正常组(不做任何处理),第2组为空白对照组(手术切开颈前正中皮肤,分离出双侧椎动脉、双侧颈总动脉,但不做其它处理),第3组为缺血再灌注对照组(阻断双侧椎动脉及右侧颈总动脉建立豚鼠耳蜗缺血再灌注模型,再灌注同时股静脉给予与PPTA同等剂量生理盐水),第4组为缺血再灌注实验组(手术造模成功后,再灌注同时静脉给予PPTA 10mg/kg)。测量实验前后各组动物的听性脑干反应(ABR)波Ⅲ反应阈。动物造模成功后24小时迅速断头取听泡,每组取4只扫描电镜下观察耳蜗结构、另外4只用透射电镜观察耳蜗结构。结果实验前4组动物ABR波Ⅲ反应阈差异无统计学意义(P>0.05),缺血再灌注24h后第3组ABR波Ⅲ反应阈显著高于第1组和第2组(P<0.05),第4组ABR波Ⅲ反应阈比第3组明显降低(P<0.05);扫描及透射电镜下可见第3组耳蜗外毛细胞纤毛倒伏、脱落,内毛细胞纤毛散乱,血管纹内皮细胞核固缩、边集,神经元可见脱髓鞘改变,而第4组的耳蜗组织损伤明显减轻。结论 PPTA可以防止耳蜗缺血再灌注损伤后毛细胞损伤缺失,对豚鼠耳蜗缺血再灌注听力损伤有保护作用。     

Cochlear hair cell loss in single-dose versus continuous round window administration of gentamicin

CONCLUSIONS: Gentamicin-induced cochlear hair cell loss depends on local middle ear administration kinetics and the total drug dose. Single-dose gentamicin instillation in the middle ear is associated with a high variation in hair cell loss. OBJECTIVE: To compare the effects of single-dose and continuous round window administration of gentamicin on cochlear hair cell loss in a guinea pig model. MATERIAL AND METHODS: Two methods for drug administration to the inner ear were used. In groups of five animals, a total dose of 0.8 or 3.2 mg of gentamicin was either instilled as a single dose directly into the round window niche or administered continuously over a 1-week period using a pump-catheter system. Continuous administration was achieved by means of a posterior tympanotomy and subcutaneous placement of an osmotic pump fitted with a catheter. The tip of the catheter was fixed in the round window niche. One group of five animals served as controls and received a saline infusion. The animals were sacrificed after 1 week and hair cell loss was determined microscopically after dissection and phalloidin labelling of the basilar membrane and organ of Corti. RESULTS: Quantitation of cochlear hair cell loss revealed a dose-dependent effect of gentamicin. With both treatment modalities the higher dose induced a higher percentage of hair cell loss. There was inner and outer hair cell loss in all four groups that received gentamicin. With the single-dose instillation, hair cell loss was distributed irregularly from the round window membrane towards the cochlear apex, whereas continuous administration induced hair cell loss close to the round window membrane. Single-dose instillation induced greater hair cell loss than continuous administration at the same dose. The inter-individual variation in hair cell loss was highest following single-dose instillation.     

水杨酸盐预防庆大霉素耳毒性的试验研究

目的 探讨大剂量应用庆大霉素时,观察水杨酸钠是否仍有预防耳毒性的作用。方法 选33只健康雄性豚鼠。随机分为A(11只)、B(11只)、C(11只)三组。A组腹腔注射药物庆大霉素+水杨酸钠;B组腹腔注射庆大霉素;C组腹腔注射生理盐水。每组动物用药前、用药后第2、4、6、8、10天分别行双耳ABR的阈值测试。耳蜗铺片光镜下毛细胞记数,分别用SPSS软件进行统计学处理。结果 体重:A组体重平均增加10.2克,B组体重平均减少5.2克,对照组体重平均增加16.5克,A组与B组比较差异有显著性(P<0.01)。ABR检查:第10天A组平均阈值为43.15±6.96,较B组平均83.93±19.33有显著改善(P<0.01),A组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。毛细胞计数:A组比B组损伤毛细胞数减少有显著性差异(P<0.01),B组毛细胞损伤明显增加,与对照组相比有显著性差异,A组与对照组无显著性差异。结论 提示在临床上为了在短期内控制细菌感染采用大剂量的庆大霉素时,仍可用水杨酸来预防其耳毒性。     

Middle ear instillation of gentamicin and streptomycin in chinchillas: electrophysiological appraisal of selective ototoxicity

The purpose of this study was to investigate selective vestibular ototoxicity of gentamicin and streptomycin in the chinchilla model. In total, 10 chinchillas underwent left middle ear instillation of one of three agents: gentamicin, streptomycin and saline. Electrophysiological data (otoacoustic emissions (OAEs), auditory brainstem evoked response (ABRs), and ice-water electronystagmography were recorded before and after instillation. Animals were sacrificed for temporal bone studies using scanning electron microscopy. Morphological changes in the cochlear and vestibular neuroepithelia were correlated with electrophysiological changes. Widespread ipsilateral cochlear and vestibular neuroepithelial injuries were observed and correlated with loss of OAEs, ABRs and ice-water caloric response. This study provides no evidence of selective vestibular ototoxicity of gentamicin or streptomycin. Morphological damage correlates with, but precedes loss of electrophysiological parameters. Chinchillas, like other small mammals, may not be an ideal model for the study of human ototoxicity.     

Investigation of the ototoxicity of gadoteridol (ProHance) and gadodiamide (Omniscan) in mice

Conclusion: In the mouse, when a tympanic perforation is present, gadoteridol does not seem to cause ototoxicity. Gadodiamide may cause mild ototoxicity other than toxicity to the outer hair cells of the cochlea.

Objectives: Endolymphatic hydrops have been visualized through intra-tympanic injection of gadolinium-based contrast agents (GBCAs) and three-dimensional fluid-attenuated inversion recovery (3-D FLAIR) magnetic resonance imaging. However, reports on the safety of GBCAs are limited. This study aimed to assess ototoxicity of gadoteridol and gadodiamide.

Method: In a prospective, randomized, controlled trial, myringotomies in the left ear were performed in 20 male C57 BL/6 mice. After testing the baseline auditory brainstem response (ABR) (range?=?8–32?kHz), the test solution (gadoteridol, gadodiamide, saline, or cisplatin) was injected into the left ear. ABR testing was repeated 14 days after test solution application. In morphological experiments, images of post-mortem surface preparations were assessed for cochlear hair cell status.

Results: At 14 days following gadoteridol application, there was no significant change in ABR thresholds at 8, 16, or 32?kHz. Gadodiamide application caused a significant change in the ABR threshold at 8?kHz. Apparent cochlear hair cell loss was not observed in the surface preparation after gadoteridol or gadodiamide application.     

水杨酸钠致耳蜗电生理改变

目的：了解水杨酸钠对耳蜗功能的影响，探讨其可能的作用机制。方法：采用水杨酸钠在活体豚鼠耳蜗进行灌注，同时监测豚鼠耳蜗电位中的复合动作电位(CAP)和总合电位(SP)的阈值及输入输出曲线变化，对耳蜗功能进行评估。结果：水杨酸钠可引起CAP和SP阈值同步改变，两者的变化呈一一对应关系。结论：水杨酸钠主要作用于耳蜗外毛细胞，通过影响外毛细胞的能动作用而影响耳蜗功能。     

纯中药制剂复聪汤对庆大霉素致聋豚鼠耳蜗毛细胞修复再生的实验研究

目的观察纯中药制剂对庆大霉素致聋动物和耳蜗毛细胞的修复再生作用。方法选用73只健康青年豚鼠,行听力学检查后,53只动物连续肌肉注射庆大霉素(80mg.kg-1.d-1)24～30天致聋(GM组),其间死亡8只,剩余45只随机分成中药治疗组(25只)和致聋后对照组(20只),中药治疗组给予纯中药制剂"复聪汤Ⅰ号"口服液和"复聪汤Ⅱ号"滴耳液治疗,致聋后对照组同法给予生理盐水。另外20只豚鼠作为正常对照组,每天肌肉注射等量生理盐水。在治疗30、60和90天后对GM组两组动物分别行ABR、DPOAE检测,同时,每一时间点处死6只动物,左侧耳蜗行扫描电镜观察,右侧耳蜗铺片行光镜观察和毛细胞计数。结果实验前所有豚鼠的听功能正常;连续注射庆大霉素30天后,GM组豚鼠ABR反应阈值上升到50～80dB SPL,DPOAE幅值降低,光镜和电镜下表现为耳蜗毛细胞纤毛断碎、倒伏、融合和消失,多处毛细胞表皮板肿胀、突起和疱疹样变性,或毛细胞被完全挤出网状板,基底回和第三回耳蜗毛细胞严重消失;中药治疗30天后,80%的耳聋豚鼠的ABR反应阈恢复到30～50dB SPL,DPOAE幅值明显提高;耳蜗铺片和电镜观察显示耳蜗毛细胞数目有一定恢复,组织结构有修复现象,扫描电镜可见再生毛细胞仅出现少量纤毛,而致聋后对照组未发现此种现象;治疗60天后,耳蜗毛细胞数目明显增多,Corti器的毛细胞区有大量的增殖细胞出现,扫描电镜可见成小束的新生纤毛出现在毛细胞缺失部位,同时支持细胞大量增殖;治疗90天后,再生的静纤毛束已基本形成,尤其是耳蜗基底部位的毛细胞明显增多,听功能基本正常。结论纯中药制剂复聪汤对庆大霉素致聋豚鼠耳蜗毛细胞有一定的修复和再生作用。     

Differential vulnerability of inner and outer hair cell systems to chronic mild hypoxia and glutamate ototoxicity: insights into the cause of auditory neuropathy.

OBJECTIVE: To describe the effects of long-term mild hypoxia and of glutamate poisoning on the functional properties of the cochlea. METHODS: Outer hair cell activity was monitored using otoacoustic emissions and cochlear microphonics, and inner hair cell/cochlear afferent function was measured using neural responses (cochlear action potentials or auditory brainstem responses [ABRs]). RESULTS: In contrast to the effects of acute anoxia, in which all aspects of cochlear function are simultaneously lost, mild, long-term hypoxia results in a clear differential effect on outer versus inner hair cell systems. During a 2-hour period of mild hypoxia, ABR amplitude and threshold deteriorate significantly, whereas outer hair cell function, as reflected by otoacoustic emissions, shows little or no change. A similar dissociation between inner and outer hair cell function is observed during instillation of glutamate (1-10 mM), where the cochlear microphonic and the otoacoustic emissions are unchanged, whereas cochlear action potential amplitudes are reduced. CONCLUSION: These studies demonstrate a difference in vulnerability of inner and outer hair cell systems. The inner hair cell/cochlear afferent system is vulnerable to long-term, mild hypoxia; this may be an etiologic factor in hearing loss of cochlear origin, particularly in high-risk birth infants with auditory neuropathy.     

长期注射水杨酸钠对大鼠下丘GAD67和GABAAα1、c-fos表达的影响

目的 通过观察长期注射水杨酸钠对大鼠听性脑干反应(ABR)及下丘GAD67和GABAAα1、c-fos表达的影响,探讨大鼠下丘GAD67、GABAAα1、c-fos表达的改变在水杨酸钠耳毒性中的可能机制。 方法 将24只成年健康Wistar大鼠随机分为2组:水杨酸钠组(肌肉注射10%水杨酸钠175 mg/kg,2次/d,连续28 d)、对照组(每天相同时间注射等量生理盐水,连续28 d)。两组大鼠在处死前进行ABR检测并观察ABR反应阈及波Ⅲ潜伏期的变化,然后将大鼠断头处死并迅速剥离下丘,采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)、蛋白质印迹(Western blot)方法检测下丘GAD67、GABAAα1、c-fos mRNA及蛋白表达的变化。 结果 ①药物注射28 d后,水杨酸钠组较注射前以及对照组ABR反应阈明显升高,波Ⅲ潜伏期明显延长,差异有统计学意义(P<0.01);②水杨酸钠组GAD67、GABAAα1、c-fos mRNA及其蛋白表达水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。 结论 GAD67、GABAAα1、c-fos均不同程度参与了水杨酸钠耳毒性的发生发展过程, c-fos表达的上调则可能与水杨酸钠作用于机体后引起听觉中枢神经活动增强有关。     

睫状神经营养因子防治强脉冲噪声对豚鼠内耳损伤的实验研究

目的探索应用睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ,ＣＮＴＦ）防治强脉冲噪声对豚鼠内耳损伤的可能性,为强脉冲噪声致聋的防治提供新的方法。方法制作强脉冲噪声致聋豚鼠模型３６只,１８只应用ＣＮＴＦ肌内注射３周,１８只等量的生理盐水作对照,正常对照豚鼠１８只,进行耳蜗铺片计算机图像分析毛细胞计数,螺旋神经节细胞计数、耳蜗乙酰胆碱酯酶染色铺片观察和ＡＢＲ反应阈测定。结果正常对照组、噪声暴露后２１ｄ的生理盐水对照组和ＣＮＴＦ组耳蜗毛细胞平均总数（ｘ±ｓ,下同）分别为９０９４±１０３．６、７３５１±１９６．５、８５２２±２０３．１;而螺旋神经节细胞计数在耳蜗中轴切片第二回下段３组间差异有显著性,分别为５１±４．７２、２７±６．９４、３７±１０．４。乙酰胆碱酯酶染色铺片结果示ＣＮＴＦ组较生理盐水对照组耳蜗乙酰胆碱酯酶活性损失轻、范围小。结论ＣＮＴＦ在一定程度上能防止受损的螺旋神经节细胞及外毛细胞发生变性坏死,并可能促进其损伤的修复。