荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA法乙肝免疫学检测的探讨

目的探讨HBV感染者乙肝免疫学检测与HBV—DNA的关系,为合理治疗乙肝患者提供较准确的依据。方法用ELISA方法检测HBV感染者乙肝免疫学检测,用PCR方法检测HBV—DNA,并对结果进行分析。结果HBsAg（＋）HBe般（＋）HBcAb（＋）组（大三阳组）患者血清HBV—DNA检出率97．06％（66／68）,平均拷贝数为（2．15E＋07）mL;HBsAg（＋）HBeAb（＋）HBcAb（＋）组（小三阳组）患者血清HBV—DNA检出率为62．64％（57／91）,平均拷贝数为（2．47E＋04）mL;HBsAg（＋）HBcAh（＋）组血清HBV—DNA检出率为52．94％（18／34）,平均拷贝数为（6．39E＋04）mL。结论HBsAg和HBeAg阳性与HBV～DNA复制密切相关。乙肝免疫学检测和HBV—DNA检测将成为指导乙型肝炎防治的重要手段。     

HBV-DNA与HBV血清标志物的关系

对312例HBV感染者进行HBV血清标志物检测,并同时以PCR法检测HBV—DNA,部分病人同期进行ALT检测.HBsAg、HBeAg抗HBC同时阳性者, HBV—DNA的检出率达92.7％,二者有较好的一致性.抗HBs阳性及抗HBc与抗HBe双阳性者,未检出 HBV—DNA,但单项抗HBc阳性者有20％(2/10)HBV—DNA阳性.分析HBeAg阴性,抗HBe阳性病例,HBV—DNA的检出与ALT改变无明显关系,但与临床分型有关.急性肝炎的检出率仅6.3％,而慢性活动型肝炎和肝硬化的检出率均达到50％以上.     

HBV-DNA定量与乙肝标志物及谷丙转氨酶结果对比分析

目的探讨血清中HBV—DNA定量与乙肝标志物（HBV—M）及谷丙转氨酶（ALT）之间的关系及临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链式反应法（FQ—PCR）和ELISA法分别检测578例病人的血清HBV—DNA含量和HBV-M,自动生化分析仪检测ALT并对结果进行对比分析。结果HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV—DNA检出率833％（259／2311）,平均拷贝数1.1×10^8／ml。HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV--DNA检出率33．5％（44／132）,平均拷贝数5.9×10^8／ml。HBsAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV-DNA检出率242％（14／58）,平均拷贝数1.9×10^8／ml。HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV—DNA检出率78％（1／15）,平均拷贝数3.5×10^3／ml。全阴性组血清HBVDNA检出率53％,平均峙贝数2．0×10^3／ml。HBsAg（＋）、aBeAg（＋）组的HBV--DNA阳性率高、定量值高,而HBsAg（＋）、HBeAg（-）组HBV—DNA阳性率较低、定量值也较低,二者差异有显著性;HBsAg（-）者亦可检出HBV-DNA;HBV感染者ALT阳性的概率增大,但二者在数量上无相关性。结论同时检测血清乙肝标志物和HBV—DNA及谷丙转氨酶,对临床HBV感染、复制及传染性的判断具有重要意义。     

Taqman技术检测儿童HBV DNA载量的临床应用

目的：研究儿童HBV DNA及血清学标志物与乙肝病毒复制的关系,探讨其应用于儿童乙型肝炎患者的临床价值。方法：对190例儿童乙型肝炎患者血清分别采用Taqman技术测定HBV DNA,ELISA法（酶免疫吸附法）检测血清标志物,速率法检测丙氨酸转氨酶（ALT）,综合分析并评价其相互关系及临床联合检测的价值。结果：190例患儿HBsAg＋、HBeAg＋、抗HBc＋阳性组125例,HBV DNA检出125例,检出率100%;ALT增高35例,占28%。HBsAg＋、抗HBe＋、抗HBc＋阳性组55例,HBV DNA检出15例,检出率27.3%;ALT增高10例,占18%。HBsAg＋、抗HBc＋阳性组10例,HBV DNA检出1例,检出率10%。结论：抗HBe阳性组复制水平相对较低,与成人无显著差异,HBVDNA载量与ALT水平高低无相关性,乙肝病毒含量的高低与肝功能受损程度不呈正相关。     

老年慢性乙型肝炎乙肝标志物及乙肝病毒DNA的检测

目的：了解老年慢性乙型肝炎患者体内乙型肝炎病毒（HBV）复制与血清标志物之间的关系。方法：分别用血清斑点杂交、PCR和PCR产物斑点杂交方法对100例老年慢性乙型肝炎标本进行检测。结果：在HBsAg、HBeAg及抗－HBc阳性的老年慢性乙肝中，三种方法的HBV－DNA检出率分别为66.67%、96.67%、100%；在HBsAg、抗－HBc及抗－HBe阳性患者中，三种方法的HBV－DNA检出率分别为27.78%、46.30%、51.85%；在抗－HBs、抗－HBc或抗－HBe阳性患者中三种方法的HBV－DNA检出率分别为0％、12．50％、18．75％。结论：在HBsAg、HBeAg同时阳性时，HBV复制最为活跃；在HBsAg、抗－HBc、抗－HBe同时阳性时，HBV受到一定程度的抑制；抗－HBs并伴有其它抗体阳性时HBV仍有复制。用杂交方法来判断PCR产物的结果更为准确。     

乙型肝炎病毒（HBV）荧光定量检测与免疫学标志物检测的比较与分析

目的了解马鞍山地区HBV-DNA荧光定量检测与HBV血清标志物检测结果之间的关系。方法运用荧光定量PCR（FQ-PCR）检测患者血清中的HBV—DNA,同时运用ELISA法检测HBV血清标志物,并对结果进行对比研究。结果HBsAg（＋）HBeAg（＋）HBcAb（＋）组患者血清HBV-DNA检出率最高为95.16％,HBsAg（＋）HBeAg（-）HBcAg（＋）组患者血清HBV-DNA检出率为41.46％,HBsAg（＋）HBeAb（＋）HBcAb（＋）组患者血清HBV—DNA检出率为24.52％,HBsAg（＋）HBeAg（＋）HBcAb（＋）组HBV—DNA检出率显著高于其它各组（P〈0.05）。结论HBV—DNA检测水平与血清学标志物HBeAg高度相关,两种方法联合检测对临床诊断与抗病毒药物治疗具有重要指导意义。     

Study on the Relationship between Hepatitis B Virus Serum Markers and Content of HBV-DNA in Patients with Hepatitis B of Various Clinical Types

目的 探讨不同临床类型乙型肝炎患者HBV血清标志物及HBV DNA含量关系,为乙肝防治提供依据.方法 306例乙肝患者中,慢性肝炎104例、肝硬化126例、肝癌76例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清HBV标志物(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc),用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV DNA,分析两者的关系.结果 306例患者小三阳(HBsAg阳性、抗-HBe阳性、抗-HBc阳性)检出率为47.06%(144/306),大三阳(HBsAg阳性、HBeAg阳性、抗-HBc阳性)检出率为20.26%(62/306);慢性肝炎组大三阳检出率、HBV DNA含量均高于肝硬化组、肝癌组(P均＜0.01);慢性肝炎组小三阳检出率均低于肝硬化组、肝癌组(P均＜0.01).62例大三阳组患者HBV DNA含量高于144例小三阳组患者(P＜0.05).结论 慢性肝炎患者HBV血清标志物以大三阳表现为主,肝硬化、肝癌患者以小三阳表现为主,慢性肝炎患者HBV DNA含量高于肝硬化、肝癌患者,HBV血清标志物及HBV DNA联合检测对乙型肝炎患者的临床诊断及治疗具有重要意义.     

乙肝“两对半”少见模式分析

HBV感染后血清标志物的模式表现呈多样化。本科血清免疫室2004年共检测到42例少见模式，占阳性总例数的0．6％（42／6744）。其中HBsAg（-）、抗HBs（-）、HBeAg（＋）、抗HBe（-）、抗HBc（＋）者33例，HBsAg（＋）、抗HBs（-）、HBeAg（＋）、抗HBe（＋）、抗HBc（＋）者9例。     

乙型肝炎后肝硬化患者腹水中HBV标志物的临床分析及意义

目的 探讨腹水中HBV标志物(HBVM)的情况和传染性。方法 收集50例乙型肝炎后肝硬化患者，同时测定其血清和腹水中HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBc、抗HBe以及血清HBV—DNA。结果 血清与腹水中HsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc的阳性率无明显差异。结论 腹水HBeAg阳性者具有传染性，在进行有关腹水的操作时采取一定的消毒隔离措施非常必要。     

乙型肝炎病毒血清学标志物与乙肝DNA相关性探讨

目的探讨乙肝病毒DNA（HBV-DNA）病毒载量与各型乙型肝炎血清标志物之间的关系。方法运用酶联免疫吸附测定法、荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术对857例各型乙型肝炎患者进行HBV-DNA含量及血清学标志物检测（两对半）。结果血清学检测乙肝表面抗原（HBaAg）＋乙肝病毒e抗原（HBeAg）＋乙肝病毒核心抗体（抗HBc）阳性（大三阳）患者HBV-DNA阳性率明显高于其他类型（阳性率97．9％）,且其病毒载量显著高于其他组。HBsAg＋乙肝病毒e抗体（HBeAb）＋抗HBc阳性（小三阳）阳性检出率也较高（阳性率51．3％）其病毒载量高于其他组。结论HBV-DNA与HBeAg的存在明显正相关。在临床工作中,不仅要应用乙肝血清标志物来判断HBV是否在体内复制,更要结合PCR检测技术来测定HBV-DNA含量。     

乙型肝炎病毒血清学标志物与HBV-DNA含量的相关性分析

目的分析乙型肝炎病毒载量（HBV-DNA）与乙肝病毒血清标志物（HBVM）之间的关系。方法运用酶联免疫吸附测定法（ELISA法）、荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术对200例乙型肝炎患者分别检测血清标志物及HBV-DNA含量。结果当HBV-DNA含量在107-108U/ml时,HBeAg阳性的大三阳模式组即HBsAg＋HBeAg＋HBcAb＋的血清学检测率（45.3%）明显高于其他模式组,HBV-DNA含量在不同模式组有显著性差异（P〈0.01）;当HBV-DNA含量在103-104U/ml时,小三阳模式组即HBsAg＋HBeAb＋HBcAb＋的血清学检测率（61.3%）明显高于其他模式组,HBV-DNA含量在不同模式组有显著性差异（P〈0.01）;而在4例HBV血清标志物全阴性的标本中仍检出HBV-DNA;1例HBsAb＋患者也检出了HBV-DNA.结论在各种HBV模式中,以HBeAg阳性者病毒复制水平最高,而血清中未检出标志物者并不能排除HBV感染,HBsAb＋的病人也可能有传染性。两种方法联合检测对临床有不同的指导意义。     

乙肝HBV DNA荧光定量检测与血清标志物结果相关性分析

目的 研究乙肝血清学标志物（HBV-M）结果与HBV-DNA水平的关系，分析HBV DNA阳性率在各年龄组的分布情况。方法对深圳市部分服务行业人员血清应用荧光定量PCR检测和ELISA法检测并对结果进行分析。结果1781例乙肝血清学标志物阳性血清中有1102例HBV-DNA阳性。其中883例1．3．5阳性（俗称“大三阳”）血清中HBV-DNA的阳性率为96．15％；722例1．4．5阳性（俗称“小三阳”）血清中HBV-DNA的阳性率为24．38％；138例1．5阳性血清中HBV-DNA的阳性率为38．41％；22例1．3阳性血清中HBV-DNA的阳性率为90．91％；11例HBsAg阳性血清中HBV-DNA阳性率为36．36％。结论两种方法检测乙肝标志物有密切的相关性。荧光定量PCR是检测HBV-DNA含量较精确的方法，能正确反映乙肝病毒的复制水平和活跃程度；HBsAg和HBeAg与HBV-DNA含量有着明显的相关关系。     

HBV携带者血清和白带HBV-DNA FQ-PCR检测分析

目的了解乙型肝炎病毒HBV携带者血清与白带中HBV—DNA含量的关系及其意义。方法选择经血清学检测诊断为女性HBV携带者867例，采用荧光定量聚合酶链反应（FQ—Pen）技术测定其白带中和血清HBV—DVA含量，并对所有检测指标进行相关性分析。结果867例携带HBV女性中，HbsAg、HbeAg、HbcAb三大阳者的血清和白带中HBV—DNA的阳性检出率均为100％；HbsAg、HbeAb、HbcAb三小阳组阳性率分别为85．6％和84．3％；HB．sAg、HBsAb两组的阳性率分别为86．6％和83，7％，白带HBV—DNA含量与血清HBV—DNA含量呈正相关（r=0，896），且白带HBV—DNA含量低于血清含量近10^1。蛄论白带与血清中HBV—DNA含量呈正相关。血清HBV—DVA阳性的育龄女性应作白带HBV—DVA检测，以对其阳性者采取防治措施，降低HBV母婴播率具有重要意义重大。     

荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床价值

目的：探讨荧光定量PCR（ FQ-PCR）检测乙型肝炎病毒（ HBV）-DNA的临床意义。方法：采用FQ-PCR检测265例乙型肝炎（乙肝）患者和150名健康体检者的血清HBV-DNA,并将结果与酶联免疫吸附试验测定的乙肝血清标志物进行比较。结果：不同血清标志物模式的各组均可检出 HBV-DNA 阳性,其中 HBsAg、HBeAg、HBcAb 阳性组和 HBsAg、HBeAg 阳性组的HBV-DNA阳性率和病毒拷贝数均显著高于其他血清标志物模式组和对照组（P〈0.01）。 HBV所致不同疾病类型的HBV-DNA阳性率差异均无统计学意义（P〉0.05）,但急性乙肝病毒拷贝数均明显高于其他疾病（P〈0.01）。结论：FQ-PCR检测HBV-DNA可以直接反映是否存在HBV感染,判断病毒的复制能力和传染性,指导临床用药和观察疗效,具有重要的临床意义。     

乙肝病毒前S1抗原与乙肝血清标志物及HBV-DNA的相关性分析

目的：分析乙肝病毒前S1抗原（PreS1-Ag）与乙肝血清标志物、HBV-DNA的相关性,探讨PreS1-Ag检测在乙肝诊断中的意义。方法：分别采用ELISA、PCR的方法对328例乙肝患者进行HBV血清标志物、前S1抗原及HBV-DNA的检测。结果：在HBsAg（＋）HBeAg（＋）HBcAb（＋）、HBsAg（＋）HBeAg（＋）的模式下,HBV-DNA、PreS1-Ag的检出率分别为86.8%、85.8%和100.0%、100.0%,两者的检出率间差异无统计学意义（P〉0.05）,在HBsAg（＋）HBeAb（＋）HBcAb（＋）、HBsAg（＋）HBcAb（＋）及HBsAg（＋）HBeAb（＋）的模式下,HBV-DNA、PreS1-Ag的检出率分别为43.2%、45.8%;47.3%、46.1%;10.0%、10.0%。在HBV-DNA（＋）情况下,PreS1-Ag的阳性率为86.9%,HBV-DNA和PreS1-Ag的阳性率也比较吻合。结论：PreS1-Ag与乙肝血清标志物及HBV-DNA密切关联,能够很好的反映乙肝病毒的复制及传染性,对于乙肝的诊治具有指导意义。     

乙型肝炎患者HBV-DNA定量检测与HBV血清学标志组合的关系

目的：了解HBV感染的不同血清学组合的HBV-DNA阳性情况。方法：对324例血清同时进行ELISA方法测定HBV-M及荧光定量PCR法检测HBV-DNA。结果：HBsAg（＋）组HBV-DNA阳性率为78.4%（254/324）,HBsAg（-）组HBV-DNA阳性率为4.8%（5/103）,两组间差异有统计学意义（P〈0.05）。HBsAg（＋）HBeAg（＋）HBcAb（＋）血清HBV-DNA阳性率为100.0%（120/120）,平均含量为1.61×107拷贝/ml;HBsAg（＋）HBeAb（＋）HBcAb（＋）血清HBV-DNA阳性率为47.0%（76/162）,平均含量为3.42×104拷贝/ml;HBsAg（＋）HBcAb（＋）血清HBV-DNA阳性率为69.0%（29/42）,平均含量为6.32×103拷贝/ml;HBsAb（＋）HBeAb（＋）HBcAb（＋）血清HBV-DNA阳性率为5.2%（5/96）,平均含量为4.12×101拷贝/ml。结论：定量PCR可真实反映HBV感染、复制及病程变化,对乙型肝炎临床诊断及治疗均有较大的指导意义。     

Positive Rate of Different Hepatitis B Virus Serological Markers in Peking Union Medical College Hospital,a General Tertiary Hospital in Beijing△

Objectives To investigate the positive rate of different hepatitis B virus (HBV) serological markers, and the demographic factors related to HBV infection.
Methods We enrolled all patients tested for HBV serological markers, such as HBV surface antigen (HBsAg), HBV surface antibody (HBsAb), hepatitis B e antigen (HBeAg), hepatitis B e antibody (HBeAb), HBV core antibody (HBcAb), and HBV-DNA from July 2008 to July 2009 in Peking Union Medical College Hospital. The positive rate of each HBV serological marker was calculated according to gender, age, and de- partment, respectively. The positive rates of HBV-DNA among patients with positive HBsAg were also analyzed.
Results Among 27 409 samples included, 2681 (9.8%) were HBsAg positive. When patients were divided into 9 age groups, the age-specific positive rate of HBsAg was 1.2%, 9.6%, 12.3%, 10.9%, 10.3%, 9.7%, 8.0%, 5.8%, and 4.3%, respectively. The positive rate of HBsAg in non-surgical department, surgical department, and health examination center was 16.2%,5.8%,and 4.7%, respectively. The positive rate of HBsAg of males (13.3%) was higher than that of females (7.3%,P=0.000). Among the 2681 HBsAg (+) patients, 1230 (45.9%) had HBV-DNA test, of whom 564 (45.9%) were positive. Patients with HBsAg (+), HBeAg (+), and HBcAg (+) result usually had high positive rate of HBV-DNA results (71.8%,P=0.000).
Conclusions Among this group of patients in our hospital, the positive rate of HBsAg was relatively high. Age group of 20-29, males, and patients in non-surgical departments were factors associated with high positive rate of HBsAg.     

荧光定量PCR检测HBV-DNA与血清标志物的关系探讨

目的:探讨乙型肝炎血清HBV-DNA水平与乙肝抗原抗体模式的关系。方法:对320例血清标本同时用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV DNA和用酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙肝标志物,根据不同检测结果进行对比分析。结果:320份血清中,乙型肝炎病毒标志物不同组合HBV-DNA阳性率有差异(P<0.01),320份血清中,有188例HBV-DNA阳性,占56.2%,HBsAg HBeAg HBcAb阳性者HBV-DNA阳性率占98.6%,>10copies/ml占64.5%,HBsAg HBeAb HBcAb阳性者HBV-DNA阳性率占37.5%,10 copies/ml占18.2%。结论:HBeAg和HBV-DNA有明显的相关性,PCR定量检测HBV-DNA含量更有助于判断体内HBV复制的情况及传染性强弱,在临床上有重要意义。     

HBV-M与HBV-DNA的定量关系探讨

目的:探讨时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测乙型肝炎患者血清免疫标志物(HBV-M)与实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)定量检测乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)含量之间的关系。方法:采用FQ-PCR技术检测239例患者血清中HBV-DNA含量,同时用TRFIA检测乙型肝炎病毒五项标志物及含量,并对各项检测结果进行统计学分析,同时以HBV-DNA拷贝数的对数为横坐标,HBV-M含量的对数为纵坐标,求线性回归及相关系数(r)。结果:239例乙肝患者血清中,HBV-DNA的阳性率与HBV-M不同组合之间有差异,HBsAg+/HBeAg+/HBcAb+组HBV-DNA的阳性检出率明显高于其它组,达96.33%(105/109),HBsAg+/HBeAb+/HBcAb+组为43.90%(54/123),HBsAg+/HBcAb+组为42.86%(3/7)。并且随HBsAg、HBeAg含量增高,HBV-DNA含量也增高,存在一定的相关性(r=0.364,r=0.536)。抗-HBs,抗-HBe及抗-HBc与HBV-DNA之间,无明显相关性。结论:HBeAg阳性是病毒复制的重要指标;抗-HBe的出现不能作为HBV复制停止的指标;HBsAg、HBeAg浓度与HBV-DNA之间有良好的相关性,HBsAg和HBeAg浓度变化可以作为临床评价乙肝病毒复制程度和抗病毒疗效的参考指标;联合采用TRFIA检测HBV-M与FQ-PCR定量检测HBV-DNA能更早的诊断HBV感染,了解病毒的复制情况和观察疗效及判断预后。     

HBV-DNA与其病毒免疫标志物的关系

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV-DNA与病毒免疫标志物的关系。方法:采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)对568份HBV感染者血清中HBV-DNA含量进行检测,同时用ELISA法检测其HBV免疫标志物。结果:HBsAg、HBeAg和HBcAb阳性组HBV-DNA阳性率约为98.9%;HBsAg、HBcAb和HBeAb阳性组HBV-DNA阳性率约为65.4%;HBsAb、HBcAb和HBeAb阳性组HBV-DNA阳性率约为13.9%;三组间HBV-DNA阳性率有明显差异(P<0.01)。HBeAg阳性标本中HBV-DNA阳性率最高,达92.0%;HBsAg与HBV-DNA的符合率最高,为77.6%。结论:检测HBV-DNA含量结合血清病毒标志物对乙型肝炎的临床诊断治疗以及病情判断有重要意义。