红景天苷对异丙肾上腺素致大鼠急性心肌缺血的影响

目的：研究红景天苷对异丙肾上腺素（ISO）致大鼠急性心肌缺血的影响。方法：连续两天皮下给予ISO,诱导大鼠急性心肌缺血模型,观察红景天苷对大鼠心电图的影响,检测血清中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量,测定心肌梗死面积。结果：红景天苷（6.0、12.0、24.0mg/kg）能有效对抗心电图T波和J点的升高,显著降低血清中LDH、CK和MDA的含量,升高血清中SOD的含量（P〈0.01,P〈0.05vs模型）,明显减少心肌梗死面积（P〈0.01vs模型）。结论：红景天苷对ISO所致大鼠急性心肌缺血有一定的保护作用。     

淫羊藿苷对过氧化氢诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

目的研究淫羊藿苷对过氧化氢所致血管内皮细胞损伤的影响。方法体外培养血管内皮细胞,淫羊藿苷预处理24h后,采用过氧化氢诱导氧化损伤模型,MTT法测定细胞活性,测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）的释放、细胞中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）的活力。结果淫羊藿苷能明显提高细胞存活率,增加细胞内SOD活性,降低培养液中LDH释放和细胞内MDA含量。结论淫羊藿苷对过氧化氢诱导的血管内皮细胞损伤有明显的保护作用,可能与其抗氧化有关。     

红景天苷对实验性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨红景天苷对心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 采用冠状动脉结扎法制备大鼠急性心肌缺血模型,观察红景天苷对其心电图、心肌梗死范围以及血清中酶活性的影响.结果 红景天苷可以改变缺血再灌注损伤大鼠心电图S-T段的变化幅度,降低大鼠急性心肌梗死面积,抑制血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性,提高超氧化物歧化酶(SOD)的活力,同时降低丙二醛(MDA)的含量.结论 红景天苷对心肌缺血再灌注损伤具有较好的保护作用.     

红景天苷对实验性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨红景天苷对心肌缺血再灌注损伤的影响。方法采用冠状动脉结扎法制备大鼠急性心肌缺血模型,观察红景天苷对其心电图、心肌梗死范围以及血清中酶活性的影响。结果红景天苷可以改变缺血再灌注损伤大鼠心电图S-T段的变化幅度,降低大鼠急性心肌梗死面积,抑制血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性,提高超氧化物歧化酶(SOD)的活力,同时降低丙二醛(MDA)的含量。结论红景天苷对心肌缺血再灌注损伤具有较好的保护作用。     

灯盏乙素对过氧化氢致心肌细胞损伤的作用与机制研究

目的：探讨灯盏乙素对过氧化氢（H2O2）损伤心肌细胞的保护作用。方法：将大鼠H9C2心肌细胞分为对照组、H2O2 (200 μmol·L-1)干预组以及灯盏乙素(100、200 μmol·L-1)+H2O2 (200 μmol·L-1)干预组,每组设6个复孔。各组经过药物干预6 h后,通过 MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪测定细胞凋亡率;测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、磷酸激酶（CK）、谷草转氨酶（AST）活性和丙二醛（MDA）含量;测定细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。结果：与对照组比较,H2O2干预组H9C2心肌细胞存活率显著降低且凋亡率显著升高,培养液中 LDH、CK、AST 活性和 MDA 含量均显著升高,细胞中 SOD、CAT、GSH-Px 活性显著降低,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。与 H2O2干预组比较,灯盏乙素（100、200 μmol·L-1）+H2O2（200 μmol·L-1）干预组培养液中H9C2心肌细胞存活率显著升高、凋亡率显著降低,培养液中LDH 、AST、CK活性和MDA 含量均显著降低,细胞中SOD、CAT、GSH-Px活性显著升高,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论：灯盏乙素能够有效提高 H2O2诱导状态下 H9C2 心肌细胞存活率并降低凋亡率,改善细胞中抗氧化酶活性、降低细胞损伤,提示灯盏乙素对H2O2诱导 H9C2心肌细胞氧化应激损伤具有剂量相关性的保护作用。     

红景天苷对脂多糖诱导的支气管上皮细胞损伤的保护作用

目的：探讨红景天苷对脂多糖（LPS）诱导的正常人支气管上皮细胞（NHBE）损伤的保护作用及机制。方法：培养NHBE细胞,调整其细胞的密度为每毫升含有1＆#215;104个,给予不同浓度的红景天苷（3.3、10、30μg·mL-1）作用24 h,MTT检测细胞的活力,观察红景天苷在正常的情况下对人支气管上皮细胞的影响。在此基础上,以终浓度为2μg·mL-1的LPS作用NHBE细胞6 h,诱导其损伤,然后给予红景天苷24 h,MTT检测细胞活力,收集上清液,ELISA试剂盒检测炎症因子IL-6（白介素-6）、IL-1β（白介素-1β）、TNF-α（肿瘤坏死因子-α）的水平,收集细胞,用Western blot方法测定细胞中的蛋白NF-κB（核因子）、MAPK（丝裂原活化蛋白激酶）的表达。结果：在正常条件下,红景天苷对人支气管上皮细胞的活力无影响,没有损伤作用。红景天苷可明显降低培养液中IL-6、IL-1β、TNF-α的水平（P〈0.01）,降低细胞中NF-κB、MAPK的表达（P〈0.01）。结论：红景天苷可以通过降低IL-6、 IL-1β、TNF-α的水平来减轻LPS诱导的NHBE细胞的损伤,减轻炎症反应。     

红景天苷衍生物N03对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用

目的：研究红景天苷衍生物1-C-β-D-吡喃葡萄糖基-N-（2′-氯苯甲基）甲胺（1-C-β-D-glucopyranosyl-N-(2’-chlorophenyl) methyl methanamine,N03）对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用。方法：以1~2 d龄Wistar大鼠乳鼠心室肌进行心肌细胞培养并建立缺氧-复氧损伤模型,检测不同浓度（2,10,50 mg•L-1）N03预处理后细胞的形态变化,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶（CK）、天冬氨酸转移酶（AST）的泄漏量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,luminometer法检测细胞中三磷酸腺甘(ATP)水平,荧光探针负载法检测其是否能够拮抗缺氧-复氧损伤所引起的细胞内活性氧(ROS)升高和钙超载。结果：红景天苷衍生物N03能减轻心肌细胞缺氧-复氧损伤后LDH,CK和AST的漏出量,同时能够升高SOD活性,降低缺氧-复氧损伤所致的ATP水平下降程度和拮抗细胞内ROS升高和钙超载。结论：红景天苷衍生物N03对缺氧-复氧损伤的心肌细胞具有明显的保护作用,可能对心肌缺血的一些疾病具有治疗作用     

红景天苷对大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的研究红景天的主要成分红景天苷对大鼠离体心脏缺血－再灌注损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法将大鼠随机分为对照组和红景天苷组2组,取各大鼠离体心脏,按Langendorff预灌注10min,夹闭30min,再灌注120min,期间实时测定血流动力学指标：左室舒张末期压（LVEDP）、左室发展压（LVDP）、左室收缩压最大变化速率（＋dP／dtmax）、左室舒张压最大下降速率（－dP／dtmin）。复灌末,心脏用1％三苯四氯化磷酸盐缓冲液（TTC）孵育15min,通过TTC染色法测定大鼠心肌梗死面积。实验结束后,测定丙二醛（MDA）含量及心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）和一氧化氮合酶（NOS）活力。结果与对照组相比,红景天苷组的LvEDP下降,而LVDP、＋dP／dtmin、－dP／dtmin均上升。给药后,大鼠离体心脏的血流动力学指标有所好转。红景天苷组梗塞面积（14．7±5．5）％明显低于对照组（28．4±4．6）％（P＝0．00012）。生化指标测定结果表明红景天苷组可降低磷酸肌酶（CK）活性和MDA含量,提高SOD和NOS的活性。结论红景天苷对大鼠离体心脏缺血－再灌注损伤的保护作用,这可能是它能抑制氧化应激所致的。     

红景天苷对大鼠心肌缺血损伤保护作用的研究

目的:评价红景天苷对大鼠实验性心肌缺血损伤的保护作用.方法:采用腹腔注射异丙肾上腺素(ISO)的方法制作大鼠心肌缺血模型,观察红景天苷对造模后大鼠心电图ST段心肌组织的损伤情况、血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)水平与血浆中丙二醛(MDA)含量、超氧化物岐化酶(SOD)活性的影响.结果:与模型组比较,红景天苷组大鼠心电图ST段偏移的幅度明显下降(P＜0.05),可降低血清LDH、CK的水平,还可降低血浆MDA含量并增加血浆SOD的活性(P＜0.05,P＜0.01).结论:红景天苷可明显减轻大鼠心肌缺血损伤程度,对异丙肾上腺素所致大鼠心肌缺血损伤具有显著的保护作用.     

红景天苷对小牛胸主动脉内皮细胞的保护作用

目的:探讨红景天苷对小牛胸主动脉内皮细胞过氧化损伤﹑缺氧/复氧损伤的作用及其机制.方法:体外培养原代小牛胸主动脉内皮细胞,观察红景天苷对正常细胞增殖的作用及cNOS活性;用H2O2和Na2S2O4分别复制过氧化损伤模型和复制缺氧/复氧损伤模型,测定细胞活性(MTT法),并测量LDH、NO、SOD和MDA含量.结果:红景天苷明显促进正常内皮细胞增殖,给药后24小时作用明显,增加细胞裂解液中cNOS活性;在氧化损伤模型和缺氧/复氧损伤模型中,红景天苷明显提高细胞存活率,增加胞内SOD活性和NO的释放,降低培养液中LDH释放量和胞内MDA含量.结论:红景天苷能促进正常内皮细胞增殖,对缺氧/复氧损伤、过氧化损伤内皮细胞均有一定的保护作用.     

艾塞那肽预处理对过氧化氢损伤的H9c2心肌细胞的保护作用研究

目的:研究胰高血糖素样肽1(GLP-1)类似物艾塞那肽(EX)预处理对过氧化氢损伤的H9c2心肌细胞的保护作用。方法:取体外培养的H9c2心肌细胞,分为正常对照组、模型组和0·01、0·1、1、10nmol·L-1EX预处理组。除正常对照组外,其余各组用过氧化氢诱导H9c2心肌细胞建立氧化应激损伤模型,EX预处理组建模前30min加入相应浓度EX,共培养6·5h后,检测各组细胞细胞活力和培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:与正常对照组比较,模型组H9c2细胞活力、SOD活性明显降低,LDH、CK-MB活性和MDA含量明显升高(P<0·05)。与模型组比较,0·1、1、10nmol·L-1EX预处理组细胞活力、SOD活性明显升高,LDH、CK-MB活性和MDA含量明显降低(P<0·05),并与剂量成正相关。结论:EX预处理对H9c2心肌细胞的氧化应激损伤有保护作用,并与剂量呈正相关。     

丹酚酸A激活AKT/mTOR/4EBP1通路缓解脂多糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡和氧化应激

目的探究丹酚酸A(Sal A)对脂多糖(LPS)诱导的氧化应激性损伤H9c2心肌细胞增殖、凋亡,以及蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/起始因子4E结合蛋白(4EBP1)通路相关蛋白表达的影响。方法用LPS诱导制备H9c2心肌细胞氧化应激性损伤模型,分别用含Sal A 5,10和20 mg·L^-1的DMEM培养基培养细胞24 h,加LPS 1 mg·L^-1继续孵育24 h。用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色观察H9c2心肌细胞存活;采用流式细胞术检测H9c2心肌细胞凋亡和线粒体膜电位;用试剂盒检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量;Western印迹法检测胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶9、存活蛋白、Bax/Bcl-2,AKT、磷酸化AKT(p-AKT)、mTOR、p-mTOR、4EBP1和p-4EBP1蛋白表达水平。结果与细胞对照组比较,模型组EdU红色标记的细胞减少(P<0.05);与模型组比较,Sal A 5,10和20 mg·L^-1处理组EdU红色标记的细胞增多(P<0.05)。Sal A能降低培养液中LDH活性及细胞内MDA和GSH含量,增加胞内SOD活性(P<0.05),减少心肌细胞的凋亡率(P<0.05),降低心肌细胞线粒体膜电位的下降速度(P<0.05)。Sal A 10和20 mg·L^-1处理后,活化胱天蛋白酶3、活化胱天蛋白酶9和Bax/Bcl-2蛋白水平显著下调(P<0.05),存活蛋白水平显著上调(P<0.05);与细胞对照组比较,模型组AKT/mTOR/4EBP1磷酸化水平均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,Sal A 10和20 mg·L^-1组AKT和mTOR磷酸化水平均显著升高(P<0.05)。结论Sal A通过激活AKT/mTOR/4EBP1通路、减少心肌细胞凋亡并降低心肌细胞线粒体膜电位的下降速度,减缓了LPS诱导的H9c2心肌细胞凋亡和氧化应激,表明Sal A对LPS造成的氧化应激损伤心肌细胞具有保护作用。     

异鼠李素对多柔比星诱导的心肌细胞自噬和凋亡的影响

目的研究异鼠李素(ISO)对多柔比星(DOX)诱导的心肌细胞自噬和凋亡的影响。方法大鼠H9c2心肌细胞分为对照组、模型组和实验组。模型组以15.0μmol·L-1异鼠李素及生理盐水预处理2 h,实验组在模型组的基础上加入1μmol·L-1注射用盐酸多柔比星共培养24 h;对照组以等量生理盐水处理。干预48 h后,以光学倒置显微镜观察细胞形态,以噻唑蓝(MTT)法检测H9c2心肌细胞存活率,以Hoechst 33258染色法检测H9c2心肌细胞凋亡率,以罗丹明(Rh)123染色检测H9c2心肌细胞线粒体膜电位(MMP),以蛋白质印迹(WB)法检测H9c2心肌细胞自噬、凋亡相关蛋白表达情况。结果干预48 h后,对照组、模型组及实验组H9c2心肌细胞存活率分别为(97.41±1.63)%,(65.33±4.53)%,(80.87±3.33)%,心肌细胞凋亡率分别为(4.32±0.35)%,(37.12±5.32)%,(18.01±3.25)%,心肌细胞Rh 123的荧光强度(MFI)分别为30.54±0.64,7.65±2.34,23.32±2.57,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组比较,模型组H9c2心肌细胞上清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)明显升高,但实验组细胞上清中LDH、CK水平明显低于模型组(均P<0.05)。与对照组比较,模型组H9c2心肌细胞LCⅡ、Beclin 1、细胞色素C(Cyt C)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达量升高;实验组上述蛋白表达量均低于模型组(均P<0.05)。结论 ISO通过调控H9c2心肌细胞自噬及凋亡通路蛋白表达,提高细胞存活率,减轻心肌损伤。     

阿魏酸甲酯对缺氧损伤H9c2心肌细胞的线粒体保护作用研究

目的探讨阿魏酸甲酯对H9c2心肌细胞缺氧损伤后线粒体功能的影响。方法将细胞分为正常组(不给药、不造模),缺氧模型组(仅造模),阿魏酸甲酯高、中、低(40、20、10μmol/L)剂量组,阳性对照药组(环孢菌素A,1μmol/L)。各给药组细胞经药物预处理及缺氧损伤造模后,检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、肌酸激酶(CK)、三磷酸腺苷(ATP)水平,采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位、线粒体膜通透性转换孔开放情况的变化。结果与缺氧模型组比较,阿魏酸甲酯高、中、低剂量组H9c2心肌细胞中LDH、MDA、CK水平和ROS荧光强度均显著降低,ATP水平均显著升高(P<0.01或P<0.05);线粒体膜电位红/绿荧光强度比值和线粒体膜通透性转换孔绿色荧光强度均显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论阿魏酸甲酯能逆转缺氧损伤H9c2心肌细胞的生化指标水平,稳定线粒体膜电位,降低线粒体膜通透性转换孔的开放程度,对缺氧损伤H9c2心肌细胞线粒体功能具有明显的保护作用,且这种保护作用呈剂量依赖趋势。     

1-磷酸鞘氨醇后适应对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的 研究1-磷酸鞘氨醇（S1P）后适应对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法 将培养的H9c2心肌细胞随机分为5组,即①正常（Con）组;②缺氧/复氧（H/R）组;③S1P低浓度（L）组;④S1P中浓度（M）组;⑤S1P高浓度（H）组。测定各组H9c2心肌细胞的存活率; 收集细胞培养液测定超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量;流式细胞仪检测心肌细胞凋亡百分率;Fura 2-AM标记细胞内游离钙离子,检测荧光强度以反映细胞内游离钙离子浓度的变化;Western Blot法测定保护性蛋白热休克蛋白70 （HSP70）的表达情况。结果 对于H/R 损伤的H9c2心肌细胞,S1P能够提高细胞的存活率,降低细胞内MDA含量及细胞内钙离子浓度,提高细胞内SOD活力,增强抗凋亡蛋白HSP70的表达,且呈一定的浓度依赖性。结论 S1P可以减轻心肌细胞氧化应激损伤,改善心肌细胞活力并减少凋亡。S1P对心肌细胞的保护作用可能是通过减少Ca2 超负荷,增加抗凋亡蛋白HSP70表达来实现的。     

吡那地尔、美托洛尔、谷氨酰胺、胰岛素单独及联合使用对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制

目的研究吡那地尔(pinacidil,Pin)、美托洛尔(metoprolol,Met)、谷氨酰胺(glutamine,Glu)、胰岛素(insulin,Ins)四药联用对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)所致H9c2心肌细胞损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法将培养的H9c2心肌细胞随机分为7组,即①正常对照(Con)组;②H/R组;③Pin组;④Met组;⑤Glu组;⑥Ins组;⑦四药联用(PMGI)组。测定各组H9c2心肌细胞的存活率;收集培养液测定乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;Western印迹法检测保护性蛋白热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)的表达情况。结果对于H/R损伤的H9c2心肌细胞,四药联用组与药物单用组或H/R组相比能明显提高细胞存活率,保护细胞膜,减少LDH渗漏;增加抗氧化能力,提高SOD含量;增加HSP70的表达。结论联合用药组与药物单用组相比保护作用增强。     

脑源性神经营养因子可减轻 H9c2 心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的 探讨脑源性神经营养因子（BDNF）预处理对 H9c2 心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤的影响及其作用机制。方法 体外培养 H9c2 心肌细胞并以缺氧 （95%N2+5%CO2） 培养 4 h 后复氧 （95%O2+5%CO2） 培养 12 h 建立 H/R 模型, 并分为 Control 组、 H/R 组、 不同浓度 （1、 10、 100 μg/L） BDNF 预处理后 H/R 组、 酪氨酸蛋白激酶受体 B （TrkB）inhibitor 组 （同时加入 100 μg/L BDNF 和 1∶1 000 的 TrkB inhibitor 预处理后 H/R 组）。利用 MTT 方法检测各组心肌细胞的细胞存活率; 并测定各组心肌细胞 H/R 损伤后乳酸脱氢酶（LDH）、 肌酸激酶（CK）、 丙二醛（MDA）、 超氧化物歧化酶（SOD）含量及活性; 流式细胞术测定各组心肌细胞的凋亡率; Western-blot 检测 TrkB、 Bcl-2、 Bax 蛋白表达。结果 与 Control 组相比, H/R 组细胞存活率明显下降, LDH、 CK 和 MDA 含量升高, SOD 活性降低, 细胞凋亡率升高, 抗凋亡 Bcl-2 蛋白表达下降, 促凋亡 Bax 蛋白表达升高（均 P < 0.05）。与 H/R 组相比, 不同浓度 BDNF 预处理H9c2 心肌细胞后 H/R, 各组细胞存活率均明显上升, CK、 LDH、 MDA 含量逐渐下降, SOD 活性升高, 细胞凋亡率下降, TrkB 和 Bcl-2 蛋白表达升高, 而 Bax 蛋白表达降低, 但 BDNF 的作用均受到 TrkB inhibitor 的抑制。结论 BDNF预处理能够提高 H9c2 心肌细胞 H/R 损伤的细胞存活率, 通过降低细胞凋亡率和提升细胞抗氧化能力而发挥保护作用, 并与 BDNF-TrkB 信号通路有关。     

美洛昔康对铝负荷致大鼠海马神经元损伤的保护作用

目的:观察美洛昔康对铝负荷致海马神经元损伤的保护作用。方法:离体培养新生SD大鼠海马神经元7d,分成空白对照组(200μmol·L-1NaCl)、铝模型组(200μmol·L-1AlCl3)、美洛昔康小、中、大剂量(10-8、10-7、10-6mol·L-1)组,给药24h后,检测各组神经元光密度值、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,并观察神经元形态。结果:与空白对照组比较,铝模型组光密度值降低、LDH漏出率升高、SOD活性减弱、MDA含量升高(P<0.01),神经元形态发生明显损伤;与铝模型组比较,美洛昔康各剂量组光密度值升高、LDH漏出率降低、SOD活性增强、MDA含量降低(P<0.01或P<0.05),神经元形态出现明显改善。结论:美洛昔康对于铝负荷致离体海马神经元损伤有一定的保护作用,其机制可能与抑制炎症反应和氧化应激有关。