梅岭霉素发酵的温度控制策略研究

以南昌链霉菌为出发菌株，研究了摇瓶发酵过程不同温度控制条件（26－32℃）下，梅岭霉素发酵过程的动力学特性，并分析了不同温度下细胞代谢规律及温度对细胞比生长速度和梅岭霉素合成速率的影响，得出了摇瓶发酵生产梅岭霉素的分阶段温度控制策略，即在发酵中前期（0－76h)，控制温度为30℃，发酵中后期（76h左右）温度切换到28摄氏度，并在15L发酵罐上分批发酵得到验证。     

大孔树脂提纯红霉素的研究

用大孔吸附树脂从红霉素发酵滤液中提取、分离红霉素，研究其吸附、洗脱过程，包括吸附剂、洗脱剂的筛选及吸附条件和洗脱条件的选择等。实验结果表明，筛选到HZ816型吸附树脂对红霉素的静态吸附容量为7．22×10^4u／g抽干吸附树脂（滤液浓度为1290u／ml），吸附等温线属Langmiur型。在pH9．4，流量为3BV／h的条件下对红霉素发酵滤液的动态吸附容量为1．34×10^5u／g抽干吸附树脂（滤液浓度为4500u／ml），选用乙酸丁酯进行洗脱，当洗脱液流量为0．5BV／h，2BV洗脱液情况下洗脱率为94．18％。红霉素A及红霉素C在树脂上的穿透曲线表明，红霉素A在吸附过程中存在着竞争优势。     

利福霉素B发酵放大I．从摇瓶到15L发酵罐的发酵放大

研究了溶氧和剪切力对地中海拟分枝酸菌XC－925发酵产生利福霉素B的影响，并对利福霉素B从摇瓶到15L发酵罐的发酵放大及15L发酵罐流加补料发酵进行了研究。利用摇瓶研究结果表明地中海拟分枝酸菌XC－925发酵产生利福霉素B时对溶氧要求较高，而对剪切力不太敏感。以溶氧为依据，在15L发酵罐间歇发酵过程中，控制溶氧不低于25％，利福霉素B的发酵效价可达到1000u/ml左右，发酵周期（6d）较摇瓶发酵缩短了1d。15L发酵罐如采用流加补料发酵工艺，利福霉素B的发酵效价还会有较大幅度提高。     

假单胞菌发酵制备精氨酸脱亚胺酶

采用假单胞菌（Pseudomonas sp．）发酵制备精氨酸脱亚胺酶，优化发酵培养基配方及培养条件，以葡萄糖为碳源，酵母膏和蛋白胨为氮源，30℃振荡培养20h时，发酵液中精氨酸脱亚胺酶的酶活力可达2．17u／ml。向HepG2肝癌细胞培养液中加入酶粗品0．5u／ml，对肿瘤细胞的生长抑制率为93．4％。     

肝素酶的发酵工艺研究

优化了发酵培养肝素黄杆菌生产肝素酶的半合成培养基配方，种子液种龄48h，接种量10％，装量90ml／（750ml摇瓶），25℃培养32h。采用该优化方案，肝素酶的发酵水平可达1768u／L，较合成发酵培养基提高52％。     

N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶生产菌的选育

以产N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶的恶臭假单胞菌MZ0315为出发菌株，应用紫外和硫酸二乙酯的复合诱变，经底物类似物5-氟尿嘧啶的筛选，获得高产、稳定的优良菌株MF0506。经过发酵培养基优化，诱变株的产酶活力由出发菌株的0．443u／ml提高至0．680u／ml。     

CA19-9放射免疫测定在肺癌诊断中的评价

我院1994年对手术和病理确诊的30例肺癌病人进行CA19－9检测，其中男25例，女5例；年龄28～70岁；鳞癌22例。腺癌、小细胞癌、腺鳞癌各2例．腺样囊性癌和肺泡细胞癌各1例。对照组20例，男15例，女5例；年龄20～65岁；胸外伤占50％，肺炎性假瘤占15％，其余为肺囊肿、肺脓疡、支气管扩张、胸腺瘤等。结果：肺癌组CA19－9为3氖92±15.10u／ml，其中＜25u／ml19例，37～60u／ml8例，＞60u／ml3例。对照组为28．24±11．86u／ml，其中＜25u／ml18例。通常以37u／ml为正常上限，本组以＞37u／ml为阳性．肺癌组占37％；对照组占10％，但无统计学…     

利福霉素B发酵放大Ⅰ.从摇瓶到15L发酵罐的发酵放大

研究了溶氧和剪切力对地中海拟分枝酸菌XC-925发酵产生利福霉素B的影响,并对利福霉素B从摇瓶到15L发酵罐的发酵放大及15L发酵罐流加补料发酵进行了研究.利用摇瓶研究结果表明地中海拟分枝酸菌XC-925发酵产生利福霉素B时对溶氧要求较高,而对剪切力不太敏感.以溶氧为依据,在15L发酵罐间歇发酵过程中,控制溶氧不低于25%,利福霉素B的发酵效价可达到10000u/ml左右,发酵周期(6d)较摇瓶发酵缩短了1d.15L发酵罐如采用流加补料发酵工艺,利福霉素B的发酵效价还会有较大幅度提高.     

一种提高大肠杆菌植酸酶异源表达的巴斯德毕赤氏酵母发酵策略

在AOXl启动子的控制下，大肠杆菌植酸酶基因appA在甲基营养酵母菌巴斯德毕赤氏酵母中得到了高效表达。在甲醇诱导前更换新鲜培养基以除去有阻遏作用的甘油和代谢废物，明显地提高了植酸酶的表达。通过适当调整培养基成分和发酵策略，分别使摇瓶规模的植酸酶活性水平从118提高到204u／ml，高细胞密度发酵的植酸酶从1880提高到4946u／ml。培养上清液中的大部分蛋白都是重组植酸酶，其酶特性与天然大肠杆菌植酸酶相似。     

通过获得链霉素抗性基因(str)突变株筛选梅岭霉素高产菌株

本文通过链霉素对梅岭霉素（meilingmycin）产生菌南昌链霉菌NS－41－80菌株孢子致死浓度的测定，采用诱变剂EMS四种不同诱变剂量对菌株的孢子进行诱变处理，诱变处理的孢子涂布在含链霉素致死浓度的高氏平板上，获得了大量的链霉素抗性基因（str）突变株。然后从链霉素抗性基因突变株进一步筛选到梅岭霉素高产菌株80－5．11－221，在摇瓶条件下，只产梅岭霉素不产南昌霉素，梅岭霉素活性效价达1500μg/ml，比出发菌株NS－41－80的摇瓶发酵效价855μg/ml提高了77．9％，该菌株连续传代六代进行摇瓶发酵，其F2代和F3代梅岭霉素发酵效价稳定，F4代至F6代随着传代数增加，其梅岭霉素发酵效价急速下降。通过EMS诱变剂量分别与抗药性突变率和链霉素抗性基因突变株产梅岭霉素产量的产势统计分析表明，菌株抗药性突变与产抗生素突变密切相关，产抗生素突变的EMS诱变剂量高于链霉素抗性基因突变诱变剂量。在0．03mol/L的EMS剂量作用下，菌株致死率为99．43％，而抗药性突变率为0．0440％，建立了梅岭霉素产生菌链霉素抗性基因突变筛选方法，为南昌链霉菌高产菌种选育研究作了有益的尝试，并有助于其它链霉菌属的抗生素产生菌育种研究。     

2-Amino-5-oxo-2-tetrahydrofuran carboxylic acids,novel γ-lactone antibacterial agents

设计并合成了五种２－酰胺基－５－氧－２－四氢呋喃羧酸类新的抗菌剂。它们的化学结构经ＭＳ、ＩＲ、１Ｈ－ＮＭＲ证实。合成的化合物对所试的２０株革兰氏阳性和阴性细菌中的大多数具有抗菌活性，化合物３ｅ对大多数菌的抗菌活性与头孢曲松相当。     

白细胞介素1α对鼠甲状腺细胞增殖的影响

采用四氮唑蓝（MTT）比色法检测TSH存在和缺乏时白细胞介素1α（IL－1α）对鼠FRTL-5细胞增殖的影响。结果提示，在无TSH条件下IL-1α20～2000kU／L对FRTL－5细胞无明显促增殖作用；在TSH存在时IL－1α20和200kU／L对FRTL－5细胞增殖亦无明显抑制作用，IL－1α2000kU／L则可显著抑制TSH介导的FRTL－5细胞增殖。     

IL-2基因工程菌的发酵及其包含体制备工艺的初探

本文对IL-2基因工程菌的发酵及其包含体制备工艺进行了研究.结果表明在发酵过程中pH的稳定(7.0)、糖的补充(3%)、O_2的及时供给(<10PSIG持续泵入)和发酵密度的控制(OD_(550)=1.9),对提高发酵产量至关重要(12g/L).在包含体制备及溶解工艺中,以4mol/L脲去除脂质及杂蛋白,1%SDS溶解包含体,可获最大IL_2活性单位(2.35×10~7u/ml,即相当于5L发酵可获3.53×10~9u).     

γ-干扰素诱导Jurkat细胞表达B7.1/CD80、B7.2/CD86分子

目的研究观察γ 干扰素 (γ IFN)诱导Jurkat细胞株表达B7.1、B7.2分子的作用。方法不同浓度的γ IFN体外孵育Jurkat细胞 48h后 ,流式细胞仪检测细胞表达B7.1、B7.2的百分率。结果与对照组相比 ,γ IFN在312 .5～ 10 0 0 0u/ml浓度下有轻微提高Jurkat淋巴白血病细胞表达B7.1、B7.2分子的作用。在 2 5 0 0u/ml浓度时达到高峰 ,B7.1的表达比对照组提高 3.47% ,B7.2表达提高 2 .39% ,B7.1与B7.2双表达提高 1.85 %。结论γ IFN可轻度诱导Jurkat细胞表达B7.1、B7.2分子     

Differential Effects of Sulfate and Sulfobutyl Ether of β-Cyclodextrin on Erythrocyte Membranes in Vitro

The hemolytic activity of -cyclodextrin (-CyD) on rabbit erythrocytes was reduced by the introduction of negatively-charged groups onto the hydroxyls of -CyD; the membrane disrupting abilities decreased in the order of -CyD > 2-hydroxypropyl--CyD (HP--CyD) > sulfobutyl--CyD (SB--CyD) >> -CyD sulfate (S--CyD). Under pre-hemolytic concentrations, both -CyD and SB--CyD induced shape changes of membrane invagination on the erythrocytes. In sharp contrast, S--CyD showed biphasic effect on the shape of the erythrocytes; i.e. the crenation at relatively low concentrations and the invagination at higher concentrations. The S--CyD-induced membrane crenation arose from a direct action on the membranes rather than cell metabolism-mediated effects. Unlike -CyD, S--CyD was found to bind to the erythrocytes and may be confined to the outer surface of the membrane bilayer, which may expand the exterior layer relative to the cytoplasmic half, thereby inducing the cells to crenate. On the other hand, the membrane invagination mediated by the three - CyDs was initiated by extracting specific membrane lipids from the cells, depending upon their inclusion abilities, subsequently leading to the lysis of the cells. These results indicate that SB--CyD and S--CyD interact with the erythrocyte membranes in a differential manner and possess lower membrane disrupting abilities than the parent -CyD and HP--CyD.     

外循环气升式生物反应器气含率及其用于井冈霉素发酵的研究

对外循环气升式生物反反应器的气含率进行了试验研究,得出了气含率与操作条件的之间的关系式。在此基础上,进行了井冈纱发酵试验,并与１０Ｌ机械搅拌生物反应器进行了比较;当外循环气升式生物反应器的空气喷嘴直径为１．５和３．０ｍｍ时,井冈霉素的发酵癣价分别为１９９７５和１８９５０ｕ／ｍｌ,而１０Ｌ机械搅拌生物反应器的井冈霉素发酵效价为１９６３０ｕ／ｍｌ。因此,将气升式重托扳 应用于井冈霉素的发酵是一项得研究     

猪血、猪脾白细胞的培养及干扰素的诱生

采用新鲜猪血、猪脾为原料,以D-Hank’s液及Hank’s液和RPMI-1640培养基培养白细胞,以新城疫鸡瘟病毒减毒株（NDV-F）为干扰素诱生剂,在 37℃、pH 7.2条件下培养18 h.制得猪脾干扰素,效价1620 u/ml,猪血干扰素,效价 1360 u/ml。     

产乳糖酶酵母Kluyveromyces marxianus发酵条件的研究

筛选得到一株产乳糖酶的马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus),通过正交试验和单因素试验确定了培养基(%)为乳糖8、尿素0.375、酵母抽提物0.35、KH2PO4 1.5、NaCl 0.01、MnCl2 0.01,并考察了发酵工艺,将产酶水平从21.6u/ml提高到120.5u/mi(500ml摇瓶).     

普那霉素产生菌的推理选育

根据普那霉素的生物合成途径对普那霉索产生菌始旋链霉菌进行推理选育，原始出发菌株Streptomyces pristinaespiralis ATCC25486经过12次单菌落分离，其间经历5次UV诱变并分别筛选0．1％AA^r突变株、0．3％AA^r突变株、0．1％VH^r突变株、200u／ml KTM^R突变株、0．1％DOG^r突变株，获得了突变株S．pristinaespiralis 12-55，其生产能力较原始出发菌株S．pristinaespiralis ATCC25486提高了100倍，达到3000u／ml。传代试验表明普那霉素高产突变株S.pristinaespiralis 12-55的高产性能遗传特性稳定。