特应性皮炎患者外周血和皮损miR-155的表达及其与Th17细胞相关性研究

【摘要】 目的 探讨特应性皮炎（AD）患者外周血与皮损组织中miR-155、Th17细胞、Th17细胞特异性转录因子RORγt及效应性细胞因子IL-17的表达及其相关性。 方法 用实时荧光定量RT-PCR检测37例AD患者外周血单一核细胞（PBMC）中miR-155、RORγt及IL-17的mRNA表达水平,流式细胞仪检测Th17细胞比例,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆中IL-17的含量;并以33例性别、年龄匹配的健康儿童做对照。检测5例重度AD患者皮损与皮损周围组织中miR-155、RORγt及IL-17 mRNA的表达水平,并以5例正常皮肤组织标本为对照。 结果 AD患者PBMC中miR-155、RORγt及IL-17的mRNA表达水平均明显高于健康对照（分别为5.78 ± 1.78比1.82 ± 0.46,6.08 ± 1.04比1.64 ± 0.52,7.09 ± 1.75比1.71 ± 0.46,均P <0.01）;AD患者PBMC中Th17细胞比例及IL-17血浆含量均明显高于健康对照,分别为（1.78 ± 0.52）%比（0.47 ± 0.15）%,（32.51 ± 6.15） pg/ml比（11.80 ± 2.24） pg/ml,均P < 0.01。AD患者皮损、皮损周围组织及正常皮肤组织中miR-155、RORγt及IL-17 mRNA表达水平间比较,差异均具有统计学意义;皮损 > 皮损周围组织 > 正常皮肤组织,F值分别为41.803、17.040和37.064,均P < 0.01。AD患者PBMC中miR-155 mRNA表达水平与疾病严重程度评分、Th17细胞比例、RORγt mRNA表达水平、IL-17 mRNA表达水平及IL-17血浆含量呈正相关,r值分别为0.405、0.426、0.402、0.410、0.408,均P < 0.05;皮损及皮损周围组织中miR-155 mRNA表达水平与RORγt、IL-17的mRNA表达水平呈正相关,r值分别为0.428和0.435,均P < 0.05。 结论 AD患者miR-155、Th17细胞及其效应性细胞因子高表达可能与AD发病有关。     

寻常性银屑病患者Th17细胞与相关转导因子的表达

目的探讨Th17细胞与相关转导因子在银屑病中的表达及意义。方法采用ELISA法检测寻常性银屑病患者及对照组血清IL-17,IL-23和IL-6水平;收集寻常性银屑病患者皮损及正常人皮肤作为对照,用免疫组化法检测STAT3和ROR_γt的表达;通过蛋白印迹法测定STAT3和RORγt含量;实时荧光定量PCR法检测STAT3 mRNA和ROR_γtmRNA的表达。结果银屑病患者血清IL-17,IL-23和IL-6的表达水平明显高于对照组,银屑病患者皮损STAT3和ROR_γt阳性率及蛋白含量和STAT3mRNA的表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.01),ROR_γt mRNA的表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Th17细胞在患者血清与相关转导因子在皮损中表达上调,STAT3和ROR_γt可能参与诱导Th17细胞的产生,这可能是Th17细胞与相关转导因子参与银屑病发生和发展的机制之一。     

Notch1信号对银屑病患者外周血Th17细胞分化和功能的影响

目的 探讨Notch1信号对银屑病患者外周血Th17细胞分化和功能的影响。方法 取35例寻常性银屑病患者与32例健康对照外周血,流式细胞仪检测单个核细胞（PBMC）中Th17细胞占CD4+ T淋巴细胞的比例,实时荧光定量反转录PCR检测PBMC中维A酸相关孤儿核受体γt（RORγt）、白介素17（IL-17）、Notch1及发状分裂相关增强子1（Hes-1）mRNA表达水平,酶联免疫吸附试验检测血清及培养上清液中IL-17含量。分析Notch1 mRNA的表达与银屑病皮损面积和疾病严重程度评分（PASI）、Th17细胞比例、RORγt mRNA、IL-17 mRNA及蛋白表达水平的相关性。将银屑病患者PBMC分为0（对照组）、2.5、5.0、10.0、20.0 μmol/L γ分泌酶抑制剂（DAPT）处理组,检测DAPT阻断Notch1信号对PBMC中Th17细胞比例、RORγt及IL-17表达水平的影响。结果 银屑病患者PBMC中Th17细胞占CD4+ T细胞比例为2.863% ± 0.969%,RORγt、Notch1、Hes-1、IL-17 mRNA表达水平分别为5.255 ± 0.998、6.743 ± 1.756、6.384 ± 1.665、6.944 ± 1.626,IL-17血清含量为（36.444 ± 5.936） ng/L,均高于健康对照组［分别为0.604% ± 0.124%、1.530 ± 0.485、1.731 ± 0.456、1.627 ± 0.485、1.698 ± 0.329、（11.762 ± 2.260） ng/L,P < 0.01］。银屑病患者Notch1 mRNA表达水平与PASI、Th17细胞比例、RORγt mRNA表达水平、IL-17 mRNA表达水平及血清含量均呈正相关（r值分别为0.584、0.544、0.518、0.549、0.511,均P < 0.05）。5种不同浓度DAPT处理组银屑病患者PBMC中Th17细胞比例、RORγt mRNA表达水平、IL-17 mRNA表达水平及培养上清液含量差异有统计学意义（F值分别为79.527、82.239、78.086、80.558,均P < 0.01）,2.5、5.0、10.0、20.0 μmol/L DAPT组上述指标均低于对照组（均P < 0.05）,且随着DAPT作用浓度的增加,各指标呈降低趋势。结论 Notch1信号可促进银屑病患者外周血Th17细胞的分化及RORγt 、IL-17、Hes-1的表达。     

扁平苔藓皮损中microRNA-155的表达及与Th17/Treg失衡的相关性

目的:检测microRNA-155(miR-155)在皮肤扁平苔藓(CLP)中的表达,明确其与辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)失衡的相关性。方法:应用TaqMan探针法检测33例CLP患者和25名健康对照者外周血中miR-155,孤儿受体-γt(RORγt),白细胞介素-17A(IL-17A),叉状头/翼状螺旋转录因子P3(Foxp3)和IL-10的基因表达水平。结果:CLP中miR-155,RORγt、Foxp3和IL-17A的表达较对照组显著升高,而IL-10的表达显著降低(均P0.05);CLP组中,miR-155分别与RORγt、Foxp3和IL-17A的含量显著正相关(均P0.001),与IL-10的含量无明显相关性(P0.05)。结论:CLP中的miR-155过表达可能与Th17/Treg失衡有关。     

NB-UVB对寻常性银屑病患者外周血Th17/Treg细胞转录因子RORγt和Foxp3表达的影响

目的观察窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗寻常性银屑病的疗效以及对患者外周血单一核细胞RORγt和Foxp3 mRNA表达的影响,探讨NB-UVB治疗寻常性银屑病的作用机制。方法选取90例中、重度寻常性银屑病患者(进行期45例,稳定期45例),使用NB-UVB照射治疗8周,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)方法,检测光疗前后外周血转录因子RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平。以银屑病皮损面积和严重程度(PASI)评分评价临床疗效。同时选50例健康体检者作为正常对照组。结果治疗前,进行期及稳定期银屑病患者外周血RORγt mRNA表达量(9.12±1.46,8.77±1.25)显著高于正常对照组(3.01±0.71),差异有统计学意义(P0.01);患者RORγt/Foxp3的比值(5.79±1.86,5.21±1.73)也显著高于正常对照组(0.91±0.42)(P0.01);而Foxp3 mRNA的表达量(1.56±0.92,1.70±0.89)则显著低于正常对照组(3.26±1.05)(P0.01)。NB-UVB照射治疗8周后外周血RORγt mRNA的表达量及RORγt/Foxp3的比值较治疗前明显下降,而Foxp3 mRNA的表达量较治疗前明显升高,与治疗前相比差异均有统计学意义(P0.01)。NB-UVB治疗后PASI评分明显下降,与治疗前相比,差异有统计学意义(P0.01)。总有效率达85.56%。患者治疗前、后PASI评分与RORγt mRNA表达量和RORγt/Foxp3比值呈正相关,而与Foxp3 mRNA的表达量呈负相关(P均0.01)。结论寻常性银屑病的发生及病情严重程度可能与外周血RORγt mRNA的高表达及Foxp3mRNA的低水平有关;NB-UVB可明显下调外周血RORγt mRNA的表达,上调Foxp3 mRNA的表达,从而调节RORγt/Foxp3比值的失衡,这可能是NB-UVB治疗银屑病的机制之一。NB-UVB治疗各期寻常性银屑病疗效好,安全性高。     

寻常性银屑病患者皮损白介素17、干扰素γ及巨噬细胞炎性蛋白3α mRNA的表达

目的 探讨寻常性银屑病患者皮损中白介素17(IL-17)、干扰素γ(IFN-γ)以及巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α)mRNA的表达与发病的关系.方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了31例寻常性银屑病患者皮损和16例正常人皮肤中IL-17、IFN-γ和MIP-3αmRNA的表达.结果寻常性银屑病患者皮损及正常人皮肤组织中均有IL-17、IFN-γ和MIP-3α mRNA的表达.在寻常性银屑病患者皮损中IL-17 mRNA的表达水平为1.142±0.059(A值,下同),较正常人对照组(0.879±0.034)明显增高(P＜0.001);IFN-γ mRNA的表达水平在皮损和正常人对照分别为1.114±0.056和0.905±0.026,差异有显著性(P＜0.001);MIP-3αmRNA的表达水平为1.140±0.052,亦明显高于正常人对照组(0.868±0.031)(P＜0.001).结论寻常性银屑病患者皮损中IL-17、IFN-γ及MIP-3αmRNA表达水平的上调可能与银屑病的发病相关。     

Th17细胞相关因子与寻常性进行期银屑病的相关性研究

目的探讨Th17细胞相关因子白细胞介素(IL)-17A、IL-17F、IL-21、IL-22与寻常性进行期银屑病发病的相关性。方法通过实时定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测30例患者和20名正常人外周血单个核细胞(PBMC)、12例患者皮损、12名正常皮肤组织中上述4种细胞因子的mRNA表达水平。结果患者组PBMC中IL-17A、IL-17F、IL-21和IL-22的mRNA表达水平较正常组显著升高(P均0.05),患者组皮损中4种细胞因子的mRNA表达明显高于正常组(P均0.05)。结论 Th17细胞因子IL-17A、IL-17F、IL-21和IL-22的mRNA水平在患者组PBMC及皮肤组织中明显升高,提示Th17细胞因子可能与寻常性银屑病的发病有一定相关性。     

miR-17-3p在寻常型银屑病患者中的表达研究

目的:研究miR-17-3p在寻常型银屑病皮损及外周血中的表达情况,探讨其参与寻常型银屑病的发病机制。方法:收集寻常型银屑病患者(17例)的皮损组织和外周血及正常对照组(4例)皮肤组织和外周血,提取miRNA。采用Real-time PCR技术检测miR-17-3p miRNA的表达并进行比较。免疫组化法检测寻常型银屑病皮损组织(25例)和正常皮肤组织(15例)中miR-17-3p的可能靶基因FNIP1蛋白的表达,Pearson相关分析银屑病患者外周血中miR-17-3p的表达水平与患者PASI评分的相关性。结果:Real-time PCR显示miR-17-3p miRNA在寻常型银屑病患者组皮损及外周血中表达量较正常对照组均明显降低(t值分别为34.62、9.16,P值均<0.05)。miR-17-3p外周血中表达量与患者PASI评分呈负相关(r=-0.56,P=0.019)。寻常型银屑病患者皮损中FNIP1蛋白表达阳性率明显高于对照组(X~2=9.72,P<0.05)。结论:寻常型银屑病患者皮损及外周血中miR-17-3p表达下调可能与银屑病的发病有关,miR-17-3p可能通过调节靶基因FNIP1参与银屑病发病。通过检测外周血中miR-17-3p的表达量可能可以评估患者病情严重程度。     

寻常性银屑病患者外周血和皮损中Th17细胞及相关因子的表达

目的 探讨寻常性银屑病患者外周血和皮损中Th17细胞及相关因子IL-17、IL-22表达,分析其与疾病严重程度及病程的相关性。方法 抽取44例寻常性银屑病患者和28例正常人对照者外周血,用三色法流式细胞仪检测外周血Th17细胞,ELISA法检测血清中IL-17、IL-22表达。取20例寻常性银屑病患者皮损和8例正常人对照者皮肤,用量子点免疫荧光双标法检测Th17细胞表达。结果 寻常性银屑病患者外周血Th17细胞百分比（4.71% ± 2.55%）高于正常人对照组（0.55% ± 0.39%）,两组差异有统计学意义（P < 0.01）。银屑病患者Th17细胞与银屑病病情严重度评分（PASI）呈显著正相关（r = 0.53,P < 0.01）,但与病程无相关性（r = 0.09,P > 0.05）。银屑病患者血清中IL-17（24.02 ± 12.31 ng/L）、IL-22（18.32 ± 8.14 ng/L）表达均高于正常人对照组（IL-17为7.16 ± 4.04 ng/L,IL-22为6.52 ± 4.15 ng/L）,差异均有统计学意义（P < 0.01和 < 0.05）。银屑病患者血清IL-17、IL-22表达与PASI呈显著正相关（r = 0.47,P < 0.01;r = 0.53,P < 0.01）,与病程无相关性（r = 0.03,P > 0.05;r = 0.19,P > 0.05）。银屑病患者皮损中可见Th17细胞浸润,主要集中在真皮浅层血管周围;而正常人皮肤中仅有微量CD4+ T细胞表达,未见Th17细胞。 结论 Th17细胞参与银屑病的发病,提示阻断相关因子IL-17、IL-22的药物可成为治疗银屑病的又一新靶点。     

养阴凉血中药对咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮损模型Th相关细胞因子的影响

目的 研究养阴凉血中药对咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮损模型Th相关细胞因子的影响,探讨养阴凉血方治疗寻常型银屑病的免疫机制。方法 将BALB/c雄性小鼠随机分为正常对照组(N组)、银屑病模型组(IMQ组)及养阴凉血中药干预高、中、低剂量组(H组、M组、L组),采用咪喹莫特乳膏外涂表皮的方法制备银屑病模型。参考银屑病皮损面积及严重程度指数(PASI)评分观察银屑病样小鼠模型皮损动态变化;光镜观察皮损组织病理变化;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)、实时荧光定量PCR检测(Q-PCR)、蛋白免疫印迹分析技术(Western blot)检测小鼠血清中细胞因子含量及皮损中mRNA、蛋白的表达水平。结果 养阴凉血中药高、中、低剂量组小鼠皮肤红斑的出现、鳞屑厚度、皮肤增厚均小于同期的IMQ组改变(P0.05)。HE染色显示:养阴凉血中药干预组小鼠皮肤表皮层较平整,角化不全的细胞明显减少,表皮层厚度低于IMQ组(P0.05)。血清ELISA检测显示:养阴凉血中药干预组小鼠血清干扰素(IFN)-γ及白细胞介素(IL)-17A表达较模型组降低(P0.01,P0.05);IL-4的表达在模型组中较空白组增高(P0.01),但养阴凉血中药组与IMQ组表达差异无统计学意义(P0.05)。皮损蛋白及mRNA检测显示,N组与IMQ组、IMQ组与各治疗组小鼠皮肤组织T-bet、维甲酸相关孤核受体(ROR)γt、IFN-γmRNA的表达水平差异均有统计学意义(P0.05),上述指标在IMQ组小鼠皮损中表达明显升高(P0.01或P0.05),而养阴凉血中药干预组皮损中IL-4、GATA-3 mRNA的表达量与IMQ组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 养阴凉血中药可抑制咪喹莫特诱导的银屑病样炎性反应的强度及银屑病样皮损的形成,在转录水平通过下调T-bet、RORγt 2个转录因子的表达从而降低Th1、Th17相关细胞因子IFN-γ、IL-17A的表达,对Th1/Th17细胞的分化进行调节,发挥抗炎作用;而与Th2细胞分化转录因子GATA-3的表达无关。     

他克莫司及金黄色葡萄球菌肠毒素B对特应性皮炎外周血Th17细胞的影响

【摘要】 目的 探讨Th17细胞在急性期特应性皮炎（AD）患儿外周血单一核细胞（PBMC）中的表达,他克莫司和金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）对AD患儿外周血Th17细胞的影响。 方法 分离急性期中、重度AD患儿及健康对照儿童PBMC,分别加入佛波酯和离子霉素、他克莫司、金黄色葡萄球菌肠毒素B培养,流式细胞仪检测Th17、Th1、Th2细胞比例,ELISA检测培养上清中IL-17、IFN-γ、IL-4表达,RT-PCR法检测Th17特异性核转录因子RORγt mRNA表达。 结果 佛波酯和离子霉素处理后,AD患儿外周血Th17、Th2细胞比例及相关细胞因子IL-17、IL-4水平明显高于健康对照组（P < 0.01）。Th1细胞比例及IFN-γ水平低于健康对照组（P < 0.01）,ROR γt mRNA高于健康对照组（P < 0.01）。他克莫司处理后,AD组和对照组IL-17、IFN-γ、IL-4及ROR γt mRNA水平均显著降低（P < 0.01）。SEB处理后,AD组 Th17细胞比例,IL-17和 RORγt mRNA水平显著高于对照组（P < 0.01）,Th1细胞比例及IFN-γ水平低于对照组（P < 0.01）,Th2细胞比例及IL-4水平高于对照组（P < 0.01）。 结论 他克莫司对AD患儿和健康对照PBMC分泌IL-17、IFN-γ、IL-4均有明显的抑制作用。SEB增强AD患儿外周血Th17细胞表达。     

窄谱中波紫外线治疗对寻常性银屑病患者Th17/Treg失衡的影响

目的探讨窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗前后寻常性银屑病患者外周血辅助性T细胞17(Th17)和调节性T(Treg)细胞及其相关细胞因子表达变化,分析NB-UVB治疗前后寻常性银屑病患者Th17/Treg细胞免疫失衡的变化及临床意义。方法流式细胞仪检测67例寻常性银屑病患者NB-UVB治疗前后及20例健康对照者Th17细胞和Treg细胞的比例,同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者血清中白细胞介素(IL)-17及转化生长因子β1(TGF-β1)的水平。结果寻常性银屑病患者使用NB-UVB治疗前外周血Th17细胞比例、 Th17/Treg、IL-17的水平均显著高于健康对照组(P 0.01);Treg细胞比例、TGF-β1水平明显低于健康对照组(P 0.01)。寻常性银屑病患者使用NB-UVB治疗后外周血Th17细胞比例、Th17/Treg、IL-17水平均显著低于治疗前(P 0.01),Treg细胞比例、TGF-β1水平明显高于治疗前(P 0.01)。与健康对照组相比较,NB-UVB治疗后寻常性银屑病患者Th17、Treg细胞比例、Th17/Treg、IL-17和TGF-β1的水平差异无统计学意义(P 0.05)。寻常性银屑病患者银屑病皮损面积及严重度指数(PASI)评分与Th17细胞比例、Th17/Treg及IL-17的水平呈正相关(P 0.01)。Treg细胞比例及TGF-β1的水平与寻常性银屑病患者PASI评分呈负相关(P 0.01)。结论 Th17、Treg细胞及其细胞因子可能对寻常性银屑病的发生及发展起重要作用。NB-UVB治疗可能通过调节Th17、Treg细胞及其细胞因子的表达来治疗寻常性银屑病。     

变应性接触性皮炎模型鼠体内Th17细胞活性变化

目的:研究变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD)模型鼠外周血及皮损处Th17细胞活性变化情况及其意义。方法:利用2,4-二硝氟苯(DNFB)诱导构建ACD小鼠模型,分别于激发前及激发后的第3、6、9、12、24 h取小鼠耳组织及外周血,评估小鼠耳组织炎症情况,采用实时荧光定量PCR法检测小鼠皮损处IL-17及RORγt mRNA的表达水平,利用酶联免疫吸附试验检测血清中IL-17水平。结果:激发后24 h内小鼠耳组织肿胀程度逐渐加重,皮损中IL-17和RORγt mRNA表达量也逐渐升高,激发后各组与激发前组比较差异有统计学意义(均P<0.05);耳组织IL-17和RORγt mRNA表达量与其肿胀程度呈正相关;激发后小鼠血清中IL-17水平升高,在6小时达到最高,随后逐渐下降。结论:在ACD小鼠的急性炎症期,皮损及外周血中Th17细胞活性增强,并且局部皮损处的Th17细胞活性与炎症程度密切正相关。     

寻常型银屑病皮损中Th17细胞相关因子的表达

目的:研究Th17细胞相关因子在银屑病发病机制中的作用.方法:用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)半定量分析寻常型银屑病患者皮损区、非皮损区及正常人皮肤组织中Th17细胞相关因子IL-17和IL-23(p19/p40)、IL-6 mRNA的表达.结果:银屑病患者皮损中IL-17、IL-23p19、IL-23p40和IL-6的 mRNA平均相对表达量分别为1.231±0.843、1.166±0.142、1.125±0.104和1.186±0.222.皮损组织中该4种细胞因子mRNA表达水平均高于非皮损组和正常皮肤组,非皮损组四者表达高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论:Th17细胞相关因子在银屑病患者皮损中过度表达,提示Th17型细胞因子在银屑病的免疫发病机制中可能起着非常重要的作用.     

miR-320及下游靶基因survivin在银屑病皮损中的表达

目的检测寻常性银屑病皮损中miR-320及其下游靶基因survivin mRNA的表达水平。方法采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例寻常性银屑病患者皮损及40名健康对照皮肤中miR-320、survivin mRNA的表达水平,运用双荧光素酶报告实验验证survivin是miR-320的靶基因。miR-320和survivin表达水平两组间比较采用t检验,寻常性银屑病皮损中miR-320与survivin表达的相关性采用Pearson相关分析。结果与健康对照皮肤相比,寻常性银屑病皮损中miR-320表达量为对照组的(0.561±0.11)倍,表达明显下调(t=3.06,P0.05);survivin mRNA表达量为对照组的(2.034±0.26)倍,表达水平明显上调(t=3.35,P0.05);双荧光素酶报告实验结果提示survivin是miR-320的靶基因,寻常性银屑病皮损中miR-320与survivin mRNA呈负相关(r2=0.634,P0.05)。结论 miR-320可能通过调控其下游靶基因survivin的异常表达参与寻常性银屑病皮损的形成过程。     

寻常型银屑病患者miR-124与Th17 Treg细胞及相关细胞因子表达的关系

 目的探讨寻常型银屑病患者miR-124与Th17 Treg细胞及相关细胞因子表达的相关性。方法选取寻常型银屑病患者100例作为实验组（进行期47例,稳定期53例）,同时选取50例体检健康者作为对照组,采集外周血样本;用PCR法检测各组miR-124表达水平;用流式细胞仪检测Th17和Treg细胞数量;用双抗体夹心ELISA法检测各组细胞因子TNF-α、IFN-γ、TGF-β、IL-6、IL-17、IL-21、IL-23水平;采用RT-PCR法检测各组ROR-γt mRNA和Foxp3 mRNA转录水平,同时分析miR-124表达与Th17 Treg细胞及相关细胞因子表达的相关性。结果银屑病进行期组和稳定期组miR-124表达水平均低于对照组（均P<0.05）。对照组Th17、Treg和Th17/Treg水平分别为（0.64±0.31）%、（5.11±1.45）%和（0.13±0.05）,均低于银屑病进行期组和稳定期组患者（均P<0.05）。寻常型银屑病进行期和稳定期患者TGF-β的浓度分别为（476.52±34.42）、（471.10±52.39） pg/L,均低于对照组（均P<0.05）;而其他细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-17、IL-21和IL-23水平均高于对照组（均P<0.05）。对照组患者ROR-γt mRNA和Foxp3 mRNA值分别为9.14±2.98、2.45±0.97,均高于银屑病进行期组和稳定期组患者（均P<0.05）。对照组miR-124水平与Th17和Treg之间无相关性（r=0.30,P=0.542;r=0.35,P=0.612）,而银屑病进行期组和稳定期组患者miR-124水平与Th17和Treg之间均存在相关性（P<0.05）。IFN-γ、TGF-β、IL-17、IL-21和IL-23与miR-124表达之间均存在相关性（均P<0.05）。结论寻常型银屑病患者Th17和Treg细胞的分化失衡与miR-124表达有关,miR-124表达异常减少可能是寻常型银屑病患者发生发展的因素之一。     

NB-UVB治疗前后特应性皮炎患者外周血Th17/Treg细胞及其转录因子的变化

目的观察窄谱中波紫外线(NB-UVB)对特应性皮炎(AD)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)和转录因子RORγt,Foxp3 mRNA水平的影响,探讨NB-UVB治疗AD的作用机制。方法选取52例AD患者,使用NB-UVB照射治疗8周,采用流式细胞术检测光疗前后外周血Th17细胞和Treg细胞百分比,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)方法,检测光疗前后外周血单一核细胞中转录因子RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平。采用欧洲AD评分标准(SCORAD)判断疾病严重程度。另选35例健康体检者作为正常对照组。结果治疗前,AD患者外周血Th17细胞百分比、Th17/Treg比值及RORγt mRNA水平高于正常对照组,而Treg百分比及Foxp3 mRNA的表达低于正常对照组,差异均有统计学意义(P0.01)。治疗后,Th17百分比、Th17/Treg比值及RORγt mRNA水平明显降低,与治疗前相比差异有统计学意义(P0.01);而Treg百分比及Foxp3 mRNA的水平明显升高,与治疗前相比差异也有统计学意义(P0.01)。经NB-UVB治疗8周后,SCORAD评分明显下降(P0.01)。结论 AD的发生及病情严重程度与外周血Th17细胞、RORγt mRNA水平的高表达及Treg细胞、Foxp3 mRNA水平的低表达有关;NB-UVB可能通过调节患者外周血Th17/Treg细胞失衡及其特异性转录因子表达水平而发挥其治疗作用,这可能是NB-UVB治疗AD的机制之一。NB-UVB治疗AD安全有效。     

红斑、丘疹及鳞屑性皮肤病

20063143白介素20 mRNA在寻常性银屑病患者皮损的表达/翟宁(中国医大一附院皮肤科),张庆瑞,李波…∥中华皮肤科杂志.-2006,39(7).-409~410采用原位杂交技术检测35例寻常性银屑病患者皮损和20例正常人皮肤组织中IL-20 mRNA表达。结果显示正常人皮肤组织中的阳性率为10.0%,着色强度为( );寻常性银屑病皮损组织中的阳性率为100%,且绝大部分着色强度为( ~ )。提示IL-20 mRNA在寻常性银屑病皮损形成过程中起重要的作用。参6(惠海英)20063144卡介菌多糖核酸对寻常型银屑病患者外周血单一核细胞产生干扰素-γ和白细胞介素-4的影响/李永喜(…     

寻常性银屑病患者皮损及外周血单一核细胞中IL-17A的表达

目的研究Th17细胞及Th17细胞特异性因子IL-17A在寻常性银屑病发病中的作用。方法收集30例寻常性银屑病患者以及18例正常人对照的外周血单一核细胞(PBMC)和皮肤组织,通过实时定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测IL-17AmRNA的表达水平;免疫组化法分析IL-17A的蛋白表达及IL-17A阳性细胞数百分比。结果银屑病组PBMC与皮损中IL-17AmRNA的相对表达量分别为2.962±1.398和2.023±1.890,对照组分别为0.807±0.839和0.262±0.104,t血IL-17A=-2.133,P<0.05;t皮IL-17A=-2.575,P<0.05;患者组和正常对照PBMC中IL-17A的蛋白表达强度分别为0.467±0.050,0.368±0.065(t=4.495,P<0.05);PBMC中IL-17A+细胞的百分率分别为0.143±0.090和0.090±0.039(t=2.159,P<0.05);患者组皮肤组织IL-17A阳性表达的平均光密度值为0.320±0.038,对照组为0.257±0.041(t=-4.357,P<0.05)。结论银屑病患者外周血及皮损内Thl7细胞因子IL-17A的mRNA与蛋白水平均明显升高,Thl7细胞数目增多,提示其可能与银屑病的发生有一定的相关性。     

雄激素对体外分化Th17细胞IL-17a、IL-17f、RORγt表达的影响

目的研究雄激素对小鼠Th17细胞诱导分化模型中IL-17a、IL-17f、RORγt、mRNA表达的影响及其临床意义。方法提取小鼠脾脏淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化CD4~+ CD62L~+T细胞,将其分为对照组、雄激素组、Th17分化组、雄激素组+Th17分化组。Th17分化条件采用对照组培养条件下加用anti-CD3ε、anti-CD28、antiIFN-γ、anti-IL-4抗体及IL-6、TGF-β1、IL-23等细胞因子培育,诱导原始T细胞向Th17细胞分化。雄激素+Th17分化组在Th17分化组的培养条件下加用雄激素。4组细胞经上述条件分别培养72h后,采用Realtime-PCR检测两组IL-17a、IL-17f、RORγt mRNA的表达验证Th17细胞分化的效果,探讨雄激素在Th17细胞分化中的作用。结果与对照组比较雄激素组IL-17a、IL-17f、RORγt mRNA增高,Th17分化组细胞经相关抗体及细胞因子刺激诱导分化后IL-17a、IL-17f、RORγt mRNA(P0.01)表达明显增高,而雄激素+Th17分化组的IL-17a、IL-17f、RORγt mRNA表达最高(P0.01)。结论雄激素可通过促进RORγt表达,增加IL-17a、IL-17f炎症因子释放起到促进炎症的作用。