α7神经型尼古丁受体的神经保护作用及其与阿尔茨海默病发病的关系

目的探讨α7神经型尼古丁受体（nAChR）表达改变与淀粉样蛋白前体蛋白（APP）代谢、细胞存活率及脂质过氧化水平的关系,以了解α7 nAChR的神经保护作用,以及该受体水平与阿尔茨海默病发病的关系。方法设计并合成α7 nAChR基因特异性小分子干扰RNA（siRNA）,转染SH-SY5Y细胞;用20μmol／LDMXB处理细胞;培养48h后收集细胞,分别应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot方法检测转染细胞及DMXB处理后的细胞α7 nAChR mRNA及蛋白表达水平的变化;并用1μmol／L β-淀粉样肽25-35（Aβ25-35处理细胞,测定分泌型APP、总APP蛋白表达的变化;比色法测定脂质过氧化产物含量;MTT方法测定细胞活力。结果转染siRNA后,与对照组相比,α7 nAChR mRNA及蛋白表达量降低（抑制率分别为80％和69％）、脂质过氧化产物丙二醛含量明显增加、分泌型APP表达下降、细胞活力明显低于对照组,且能增强Aβ的细胞毒性作用;用DMXB处理细胞后能使α7 nAChR的表达增加23％、增加分泌型APP的表达、并能对抗Aβ引起的细胞活力下降及脂质过氧化水平的增强。结论α7 nAChR可能通过增强α-分泌酶对APP的切割、增强细胞抗氧化能力及对抗Aβ的神经毒性作用来发挥神经保护作用,其表达减少与阿尔茨海默病的发病机制有密切的关系。     

MG132对SH-SY5Y细胞Aβ水平的影响

目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132诱导SH-SY5Y细胞凋亡及调节β-淀粉样蛋白(beta-amyloid protein,Aβ)生成的作用,并对其机制进行探讨。方法:培养SH-SY5Y细胞,MG132对细胞进行处理,浓度分别为2.5μmol/L、5μmol/L和10μmol/L,24 h后检测各项指标。MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)水平;Western blot检测淀粉样蛋白前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、β-分泌酶(BACE1)、早老蛋白1(presenilins 1,PS1)、早老蛋白2(presenilins 2,PS2)、nicastrin(NCT)和α-分泌酶(ADAM10)蛋白表达。结果:经MG132处理后,细胞活力明显下降,诱导细胞凋亡,随剂量增加凋亡率分别为36.97%、46.20%、50.50%;细胞Aβ_(1-42)和Aβ_(1-40)蛋白水平明显上升;APP及Aβ代谢相关蛋白PS1、PS2和BACE1表达均出现剂量依赖性的增加,而ADAM10表达呈剂量依赖性降低;NCT水平变化不明显。结论:MG132能诱导神经细胞凋亡,通过影响Aβ生成途径关键蛋白而促进Aβ的产生,说明蛋白酶体活性下降可通过调节Aβ途径参与阿尔茨海默病的发生。     

雷公藤甲素抑制APP/PS1双转基因AD模型小鼠海马内Aβ沉积和老年斑形成

目的 研究雷公藤甲素(T10)对APP/PS1双转基因AD模型小鼠(APP/PS1dtg)β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积与老年斑(SP)形成的影响。 方法 取18只45月龄健康雄性APP/PS1dtg, 随机分为3组,分别以T10灌胃：5μg/(kg&#8226;d) (T10 H组)、1μg/(kg&#8226;d) (T10 L组)和等容量的溶媒灌胃（PLC组）,共计45d。45d后取材,左侧半大脑切片,6E10免疫组织化学方法染色和刚果红染色结合无偏性体视学定量分析,研究T10对海马Aβ沉积和SP形成的影响;分离右侧半海马,免疫印迹法分析海马Aβ蛋白水平的变化。 结果 与PLC组比较, T10 H组海马6E10阳性的Aβ沉积总面积减少了35％(P<0.001),SP总面积减少了32％(P<0.001); T10 L组海马Aβ斑总面积减少了18％(P<0.05), SP总面积减了21％(P<0.05); T10呈剂量依赖性抑制Aβ在APP/PS1dtg 海马的沉积和SP的形成,减少海马内Aβ蛋白水平; 免疫印迹分析也显示,T10 H组海马Aβ蛋白水平最低,PLC组Aβ蛋白水平最高,T10 L组Aβ蛋白水平介于两者之间。     

阿尔茨海默病发病机制中β淀粉样蛋白对星形胶质细胞和神经细胞α7尼古丁受体的影响

目的 探讨阿尔茨海默病（Alzheimer’sdisease,AD）患者脑组织和高表达β淀粉样蛋白前质蛋白（APP）转基因小鼠脑组织中α7尼古丁受体亚型的改变,以及β淀粉样蛋白（Aβ）对体外培养的星形胶质细胞和神经细胞中α7尼古丁受体亚型蛋白表达的影响。方法 选取尸解后AD患者脑组织和高表达APP转基因小鼠脑组织,用免疫组织化学方法（ABC法）检测人脑组织中胶质细胞和神经细胞α7尼古丁受体的表达,用Westernblot方法测定小鼠脑组织中α7尼古丁受体蛋白含量;体外培养星形胶质细胞和神经细胞,用不同浓度的A1325-35进行处理,然后用Westernblot方法测定细胞中α7尼古丁受体蛋白水平。结果 AD患者脑组织中星形胶质细胞数量增多,并密集于老年斑周围;AD患者脑组织表达d7尼古丁受体的星形胶质细胞增多,而表达α7尼古丁受体的神经元减少;高表达APP转基因小鼠脑组织中胡尼古丁受体蛋白水平升高49％;用不同浓度的Aβ25-35处理培养细胞后,星形胶质细胞中胡尼古丁受体蛋白水平增高（达38％）,而神经细胞中胡尼古丁受体蛋白水平减少可达32％。结论 神经元α7尼古丁受体减少可能与AD患者智力障碍的发生有关,而过多Aβ刺激星形胶质细胞后所引起的胶质细胞胡尼古丁受体表达增多则可能是一种神经保护性代偿方式。     

β-淀粉样蛋白对体外培养的神经干细胞作用研究

目的：观察β-淀粉样蛋白(Aβ)对体外培养的大鼠神经干细胞的作用。方法：取E13 d的Wistar胚胎大鼠脑组织，体外进行培养、传代、鉴定后，加入β-淀粉样蛋白，利用台盼兰拒染法细胞计数及MTT法观察细胞增殖及细胞活力，利用流式细胞术观察凋亡程度，同时观察加入β-淀粉样蛋白后，分化状态神经干细胞（加入10％胎牛血清）的变化。结果：当Aβ浓度大于25μmol/L时，能明显抑制神经干细胞的增殖及活力，同时引起神经干细胞的明显凋亡。而在12.5 μmol/L时就能抑制分化状态神经干细胞突起的延伸。结论：Aβ抑制神经干细胞的增殖分化并可致神经干细胞凋亡，可能是Alzheimer’s病的发病原因之一。     

ZnT3与Aβ在APP/PS1转基因小鼠脑血管及脉络丛的一致性分布

目的研究锌转运蛋白3(Zinc Transporter 3,ZnT3)与β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)在APP/PS1转基因小鼠大脑血管壁及脉络丛上皮的定位分布,探讨ZnT3影响脑锌平衡从而参与AD发病的可能机制。方法应用免疫荧光技术和共聚焦激光扫描显微镜观察ZnT3和Aβ在APP/PS1转基因小鼠大脑血管壁及脉络丛上皮的共存情况。结果APP/PS1转基因小鼠侧脑室及第三、四脑室的脉络丛上皮细胞均呈ZnT3和Aβ染色阳性,二者共同表达于上皮细胞的胞质内,而细胞核未见任何着色。在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层中,几乎所有Aβ阳性的血管壁上均有ZnT3的表达,二者的分布同样具有一致性。结论ZnT3与Aβ在APP/PS1转基因小鼠大脑血管及脉络丛上皮的一致性分布,提示ZnT3可能参与Aβ在大脑血管及脉络丛上皮的沉积。     

早老素1基因在转染CHO细胞中的表达及其与γ-分泌酶的关系

目的 研究早老素1(PS1)在淀粉样前体蛋白(APP)加工生成β-淀粉样多肽(Ap)过程中的作用及其与γ-分泌酶的关系。方法构建APP和PSI双基因稳定转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株,应用免疫沉淀和印迹、脉冲追踪及ELISA方法,检测PS1的表达和代谢半衰期,分析对Aβ分泌的影响及与γ-分泌酶功能的关系。结果PS1转染的CHO细胞(APP-PSI)表达的主要是相对分子质量为45000的全长PS1蛋白,其半衰期短于1h,而其活性片段的N-末端片段和C-末端片段则相对稳定,半衰期接近16h。突变型PS1(M146L)转染细胞分泌的Ap总量与野生型PS1转染细胞没有明显差别,但分泌的Aβ亚型Ap142是未转染PS1或野生型PS1转染细胞分泌的将近2倍。结论 PS1参与了APP加工生成Aβ的过程,突变型PS1(M16L)导致Aβ142的分泌增加,提示PS1可能就是预期的γ-分泌酶。     

β-淀粉样肽对人SH-SY5Y神经细胞膜性脂质和胆碱能受体的影响

目的研究β-淀粉样肽对人SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞膜性脂质和胆碱能受体的影响及其意义。方法选择不同浓度B一淀粉样肽。处理SH—SY5Y细胞,用比色法测定细胞四甲基偶氮唑盐（MTT）还原率、脂质过氧化产物（丙二醛）、蛋白氧化产物（蛋白羰基）及磷脂含量,高效液相色谱法测定细胞胆固醇及辅酶Q水平,放射性配体一受体结合实验测定胆碱能受体．配体结合率,Western印迹方法测定细胞膜神经型尼古丁受体亚单位α3及α7蛋白表达水平,并对照研究维生素E的抗氧化作用。结果用低浓度（0．1μmol／L）β-淀粉样肽处理细胞后即出现MTT还原率和磷脂水平的下降,丙二醛及蛋白羰基水平升高,用较高浓度（1μmol／L）β-淀粉样肽处理细胞后胆碱能受体．配体结合密度、尼古丁受体亚单位α3,胡蛋白水平及辅酶Q含量降低,但未引起细胞胆固醇含量的改变。维生素E能明显对抗B-淀粉样肽的细胞毒性作用。结论β-淀粉样肽引起细胞膜脂质成分改变以及胆碱能受体水平降低,这些改变可能与其诱导的氧化应激增强有关。     

淀粉样前体蛋白基因的分子遗传学和分子生物学

淀粉样前体蛋白 (amyloid precusor protein,APP)是 Aβ(β- am yloid peptide,Aβ)的前体蛋白。后者是阿尔茨海默疾病 (Alzheimer's disease,AD)最主要的病理标志。 APP突变后增加神经毒性蛋白 Aβ42 / 43的表达量 ,从而导致家族性 AD(FAD)的发生。本文综述了 APP的基因结构、功能、突变体的类型及基因突变的病理学后果 ,同时追踪了如下两方面的研究进展 :1Aβ产生的途径 ;2 APP代谢的调控机制     

β-淀粉样蛋白和drebrin在培养的APP/PS1转基因小鼠神经元中的表达

目的: 探讨阿尔茨海默病(AD)脑内β-淀粉样蛋白(Aβ)积聚与树突棘蛋白drebrin表达变化之间的关系.方法: 采用免疫细胞化学、ELISA和免疫印迹法等方法检测大脑皮层原代培养的APP/PS1转基因小鼠的神经元和同种野生型(WT)小鼠的神经元Aβ和drebrin的表达.结果: 培养至12d (days in vitro)时,可见Aβ在APP/PS1神经元胞体内聚集,培养基内的Aβ水平也同时升高;此期神经元内drebrin斑点状免疫反应产物分布较为稀疏,drebrin的表达水平下降.18d时,Aβ在胞体内聚集的基础上,向突起内延伸,培养基内的Aβ水平进一步升高;drebrin的表达则明显下降.结论: 原代培养的APP/PS1小鼠神经元内Aβ积聚的同时,树突棘蛋白drebrin的表达下降.提示AD脑内Aβ积聚可能是影响树突棘蛋白drebrin表达的因素之一.     

P38 MAPK信号通路的激活促进SH-SY5Y细胞内Aβ生成

目的研究P38 MAPK信号通路的激活对SH-SY5Y细胞内β-淀粉样肽(Aβ)生成的影响。方法 P38 MAPK信号通路激动剂茴香霉素处理神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞1和72 h,ELISA方法检测细胞内Aβ含量;实时定量PCR和Western blot分别检测APP、PS1和BACE1基因mRNA和蛋白的表达。结果经茴香霉素处理1和72 h的SH-SY5Y细胞磷酸化的P38 MAPK表达均明显增加;茴香霉素处理72 h后细胞内Aβ1-40含量约为(46.88±3.60)pg/mL,对照组为(39.09±1.60)pg/mL(P<0.05);茴香霉素处理1 h后细胞内APP和PS1mRNA表达明显增多,而处理72 h后APP、PS1和BACE1mRNA表达均明显增多;茴香霉素处理1 h后细胞内APP、PS1和BACE1蛋白表达无明显改变,而处理72 h后APP、PS1和BACE1蛋白表达均明显增多,分别为对照组的1.45倍、1.38倍和1.60倍。结论 P38 MAPK信号通路的激活可促使Aβ生成增加,在阿尔茨海默病的发病过程中起一定作用。     

鹿茸多肽在阿尔茨海默病模型小鼠中抗氧化应激的作用机制

目的 探讨鹿茸多肽（VAP）在阿尔茨海默病（AD）模型中抗氧化应激的作用机制。 方法 选用 8 月龄雄性淀粉样前体蛋白（APP）/早老素1（PS1）双转基因小鼠随机分为模型组、VAP组,另以同窝阴性小鼠设立为对照组,每组12只。连续灌胃给药6个月后进行行为学、形态学和氧化应激相关指标检测。Western blotting 检测小鼠海马组织中APP及β-分泌酶 1（BACE1）蛋白的表达水平。另外以β-淀粉样蛋（Aβ）25～35（25 μmol/L）诱导 SH-SY5Y 细胞损伤建立AD细胞模型组,VAP组（VAP 500 mg/L+ Aβ25～35 25 μmol/L）和对照组。检测细胞凋亡、膜电位、活性氧簇（ROS）水平和氧化应激相关指标。 结果 动物实验发现,与模型组比较,VAP组小鼠逃避潜伏期缩短（P＜0.05）。模型组小鼠海马 CA1 区神经元减少且排列紊乱,VAP组排列较规则,形态有明显改善。与模型组比较,VAP组老年斑数量减少;与模型组比较,VAP组丙二醛（MDA）含量下降,超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶 （GSH-Px）含量上升,差异有统计学意义（P＜0.05）。与对照组比较,模型组APP 和BACE1含量上升,与模型组比较,VAP组APP和BACE1含量下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。细胞培养实验发现,VAP组细胞凋亡率下降。与模型组比较,VAP组线粒体膜电位上升,ROS含量明显下降,MDA含量下降,SOD和GSH-Px含量上升,差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 VAP对AD模型动物和细胞的氧化应激损伤具有保护作用,可能是通过降低ROS产生,且提高抗氧化酶系活性,减少Aβ的沉积而实现的。     

DMT1在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内的定位研究

目的研究二价金属离子转运体1(divalent metal transporter 1,DMT1)在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层内的定位分布,探讨DMT1异常表达影响脑铁代谢平衡从而参与AD发病的可能机制。方法应用免疫组织化学方法观察DMT1在9月龄APPsw/PS1小鼠大脑皮层的阳性分布;应用免疫荧光双标技术和共聚焦激光扫描显微镜观察DMT1蛋白和β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内的一致性分布和位置关系。结果APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内均有DMT1阳性表达;DMT1和Aβ免疫双标发现DMT1免疫阳性产物与Aβ共存于老年斑,二者分布具有一致性。结论DMT1在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内大量表达,其分布与Aβ具有一致性,提示DMT1可能参与AD脑内Aβ沉积和老年斑形成。     

β淀粉样蛋白及代谢酶类在阿尔茨海默病和糖尿病模型小鼠脑内的表达

目的观察阿尔茨海默病(AD)和糖尿病模型小鼠脑内β淀粉样蛋白(Aβ)及代谢相关酶类的表达情况,以便从分子水平找到糖尿病并发AD的实验室依据。方法 5月龄双转基因痴呆症模型小鼠(APP/PS1双转基因小鼠)、ob/ob T2DM肥胖模型小鼠和野生型C57BL/6J小鼠为对照,分别用免疫组化染色、ELISA和Western blot检测脑内老年斑(SP)、Aβ含量及Aβ代谢酶类的表达情况。结果 APP/PS1小鼠大脑皮质及海马均可见一定数量的SP;ob/ob小鼠大脑皮质内偶可见SP,而对照组未见SP。与对照小鼠相比,APP/PS1与ob/ob小鼠脑内Aβ40、Aβ42的含量明显升高(P0.05);但APP/PS1小鼠脑内Aβ水平显著高于ob/ob小鼠(P0.05)。APP在APP/PS1小鼠脑内的表达显著高于其他两组小鼠;在ob/ob小鼠脑内的表达要强于对照小鼠(P0.05)。Aβ生成的关键酶BACE1在APP/PS1与ob/ob小鼠脑内的表达显著高于对照小鼠(P0.05),但其在APP/PS1小鼠脑内的表达要强于ob/ob小鼠(P0.05)。Aβ降解的关键酶IDE在APP/PS1与ob/ob小鼠脑内的表达显著低于对照小鼠(P0.05),且在ob/ob小鼠脑内表达最低。结论 Aβ生成与降解的异常以及其异常聚集沉积不仅发生在早期AD脑内,同时也发生在T2DM脑内,提示Aβ过表达可能是促进2型糖尿病并发AD的重要原因之一。     

C5a及其受体拮抗剂在Aβ1-42处理的BV2细胞TNF-α和CD88表达中的作用

目的 探讨C5a在阿尔茨海默病(AD)小胶质细胞病变模型中释放炎性因子的作用及其机制,明确C5a受体拮抗剂对上述病变过程的干预作用.方法 制备Aβ1-42寡聚体,用Aβ1-42寡聚体刺激BV-2小胶质细胞建立AD小胶质细胞病变模型.实验组分为Aβ1-42干预组、Aβ1-42+ C5a组、Aβ1-42+ C5aRA组、Aβ1-42+ C5a+ C5aRA组,分别加入不同浓度的C5a、C5aRA、C5a+ C5aRA进行干预,以小胶质细胞无干预组为空白对照.通过流式细胞术测定细胞表面C5a受体(CD88)的表达、ELISA法检测上清液中炎症因子TNF-α的浓度.结果 Aβ1-42刺激小胶质细胞分泌TNF-α,Aβ1-42组TNF-α浓度与空白对照组相比明显增加(P＜0.05),该组CD88表达高于空白对照组(P ＜0.01);Aβ1-42+ C5a组的TNF-α浓度高于单纯Aβ1-42组(P＜0.05),Aβ1-42+ C5aRA组TNF-α浓度低于单纯Aβ1-42组(P＜0.01),而Aβ1-42+ C5a组及Aβ1-42+ C5aRA组的CD88表达与单纯Aβ1-42组相比无显著差异(P＞0.05).结论 C5a能刺激小胶质细胞分泌炎症因子TNF-α,且与Aβ1-42有协同作用,而C5aRA则能有效抑制该通路.     

白藜芦醇对β淀粉样蛋白诱导星形胶质细胞氧化损伤的保护作用

目的研究白藜芦醇对β淀粉样蛋白诱导星形胶质细胞氧化损伤的保护作用,从而探索其对中枢神经保护作用的可能机制。方法采用不同浓度的白藜芦醇预处理星形胶质细胞12h,继之用25μmol/L浓度的β淀粉样蛋白进行损伤,然后检测细胞存活率、乳酸脱氢酶（LDH）以及采用DHE探针测定荧光强度间接反映胞内活性氧（ROS）含量,以评价白藜芦醇对细胞氧化损伤的保护作用。结果受β淀粉样损伤的细胞存活率明显下降（P〈0.05）,而用10、100μmol/L白藜芦醇预处理则能提高该细胞的存活率（P〈0.05）,但1μmol/L白藜芦醇预处理的细胞存活率并无明显变化;荧光检测显示,蛋白损伤使得荧光强度增高（P〈0.05）,1μmol/L白藜芦醇处理组荧光强度大于阳性对照组,其余各组荧光强度均小于阳性对照组（P〈0.05）;蛋白损伤可导致细胞LDH漏出量增加（P〈0.05）,1μmol/L白藜芦醇使得LDH漏出增加（P〈0.05）,而10、100μmol/L白藜芦醇处理组,细胞LDH漏出量明显减少（P〈0.05）。结论星形胶质细胞受到β淀粉样蛋白损伤后,白藜芦醇能减少LDH的漏出及有效降低胞内ROS水平,从而显示对星形胶质细胞具有保护作用。     

不同剂量白藜芦醇对星形胶质细胞Aβ损伤的影响

目的研究白藜芦醇对β淀粉样蛋白诱导星形胶质细胞的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）及丙二醛（MDA）释放的影响和其对氧化损伤的保护作用,从而探索其对中枢神经保护作用的可能机制。方法采用不同浓度的白藜芦醇预处理星形胶质细胞12h,继之用25μmol/L浓度的β淀粉样蛋白进行损伤,然后检测细胞SOD、GSH-PX及MDA释放的含量,并对数据进行统计学分析。结果β淀粉样蛋白损伤后,细胞SOD、GSH-PX的释放量明显下降（P〈0.05）,MDA的释放量升高（P〈0.05）,而用1、10、100μmol/L白藜芦醇预处理则能升高损伤细胞的GSH-PX的释放量（P〈0.05）,并能降低损伤细胞MDA的释放量（P〈0.05）;10、100μmol/L白藜芦醇预处理则能升高损伤细胞的SOD的释放量（P〈0.05）。结论星形胶质细胞受到β淀粉样蛋白损伤后,白藜芦醇能增加SOD和GSH-PX的释放量,降低MDA的释放量,提示白藜芦醇对星形胶质细胞具有保护作用。     

神经生长因子对Aβ_(1-40)诱导海马神经元周期蛋白异常表达的影响

为了探讨神经生长因子(NGF)对β-淀粉样蛋白诱导海马神经元周期蛋白表达的影响。本研究取新生3d内大鼠海马细胞行体外培养7d,分别在加入Aβ1-40前后加入NGF和等体积培养液,采用β-tubulin、ChAT免疫组化、cyclin免疫荧光进行检测。β-tubulin免疫组化证实所培养的为特异性结构完整的海马神经元;cyclin免疫荧光检测、ChAT免疫组化显示Aβ1-40导致cy-clin A、cyclin B1水平显著增高及ChAT免疫阳性细胞明显减少;而给予NGF可在不同程度上降低cyclin A、cyclin B1蛋白水平,增加ChAT免疫阳性细胞。结果提示,NGF能有效地阻止和轻度地修复Aβ1-40诱导的海马细胞损伤,对Aβ引起的海马神经元内异常表达细胞周期蛋白有一定的抑制作用。     

Genistin对Aβ1-42诱发的PC12细胞损伤的神经保护作用

目的探讨Genistin对β淀粉样蛋白片段(Aβ1-42)诱导的PC12细胞损伤的神经保护作用。方法将培养的PC12细胞分为:正常对照组、Aβ1-42处理组和Genistin预处理组。Aβ1-42处理组用Aβ1-42处理细胞,Genistin预处理组在用Aβ1-42处理前2h加入Genistin。使用细胞形态学方法、LDH法和MTT法观察Genistin的神经保护作用。结果单纯Aβ1-4210滋mol/L处理细胞24h,MTT吸光值减小,LDH释放量明显增加,与正常对组比较差异有显著性(P<0.01);细胞形态发生明显改变。用25mmol/LGenistin预处理PC12细胞2h,MTT吸光值与Aβ1-42处理相比明显增加,LDH释放量显著降低,与Aβ1-42处理组相比差异有显著性意义(P<0.01)。结论Genistin在体外抑制Aβ1鄄42对细胞的毒性作用。     

二十二碳六烯酸降低β淀粉样蛋白25-35致大鼠皮质神经元损伤

目的观察二十二碳六烯酸(DHA)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)致原代培养大鼠皮质神经元损伤的保护作用。方法原代培养Wistar大鼠皮质神经元,先后给予不同剂量的DHA(20、50和100μmol/L)及Aβ25-35(25μmol/L),用CCK-8比色法观察神经元存活率,用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度。结果 1)与对照组相比,Aβ25-35使细胞存活率明显下降(31%±6%,P<0.05);使细胞内游离钙离子浓度明显升高(249%±12%,P<0.05);2)孵育DHA可降低Aβ25-35引起的神经元存活率明显下降及细胞内游离钙离子浓度升高。结论 Aβ致细胞内钙超载是Aβ产生神经毒作用的一个方面,而DHA可部分拮抗Aβ25-35的神经毒作用。