子痫前期患者胎盘滋养细胞血管生长抑素、血管内皮因子表达的临床意义

目的检测胎盘部位血管生长抑素（AS）、血管内皮生长因子（VEGF）表达的水平,探讨在子痫前期患者发病中的临床意义。方法取84例孕妇胎盘绒毛组织,其中正常妊娠组30例,轻度子痫前期23例,重度子痫前期组31例。采用免疫组织化学方法检测在AS、VEGF胎盘部位的表达,光镜下观察表达的分布特点、细胞染色强度和阳性细胞数。结果在子痫前期组绒毛滋养细胞AS表达强度与正常对照组比较显著增强（P〈0.05）,表达强度与子痫前期病情呈正相关（r=0.371 P〈0．05）。子痫前期组与正常对照组胎盘VEGF的表达分布特点相同,子痫前期组较正常对照组显著降低,差异有统计学意义（P〈0．05）,表达强度与子痫前期病情呈负相关（rs=-0．473P〈0．05）。对正常对照组及子痫前期组的AS、VEGF的表达进行组内相关性分析,显示As与VEGF之间存在关联关系,呈负相关。相关系数分别为r=-0．476P〈0．05,r=-0．419P〈0．05。结论AS和VEGF在子痫前期患者胎盘部位的表达有显著变化,两者之间呈显著负相关,可能是子痫前期发病的重要因素之一。     

生长分化因子15在子痫前期胎盘滋养细胞中的表达及意义

目的探讨生长分化因子-15（GDF-15）在子痫前期患者胎盘滋养细胞中的表达,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法选择2009年12月至2010年10月在青岛市市立医院住院分娩的子痫前期孕妇140例,其中早发型轻度子痫前期孕妇35例（早发轻度组）,晚发型轻度子痫前期孕妇35例（晚发轻度组）,早发型重度子痫前期孕妇35例（早发重度组）,晚发型重度子痫前期孕妇35例（晚发重度组）;另选同期健康孕妇35例为对照组。采用RT—PCR检测胎盘滋养细胞中GDF-15mRNA的表达量;采用免疫组化方法检测胎盘滋养细胞中GDF-15蛋白的表达。结果RT—PCR显示子痫前期各组胎盘滋养细胞中GDF-15mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组化显示GDF-15表达于胎盘滋养细胞的细胞浆和细胞外基质中,并在各组胎盘滋养细胞中均表达。子痫前期各组胎盘滋养细胞中GDF-15蛋白表达水平均高于对照组组,差异有统计学意义（P〈0．05）;但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论GDF-15在子痫前期胎盘滋养细胞中表达升高,GDF-15的表达水平变化可能与子痫前期发病有关。     

TGF-β1／Smad信号转导通路在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其临床意义

目的检测子痫前期患者胎盘组织中TGF—β1／Smad的表达,探求TGF—β1／Smad信号转导通路在子痫前期发病中的作用。方法采用免疫组织化学法检测40例子痫前期（轻、重度）和正常孕妇15例正常妊娠妇女胎盘中TGF-β1以及Smad3、Smad4、Smad7的分布和表达,采用TUNEL法检测三组胎盘滋养细胞凋亡的情况。结果TGF-β以及Smad2、Smad3、Smad4、Smad7在正常妊娠和子痫前期患者胎盘的滋养细胞、内皮细胞、基质细胞中均有表达,以滋养细胞表达为主。TGF-β1以及Smad3、Smad4在正常妊娠组、子痫前期轻度组和重度组的表达强度及范围均呈逐渐升高趋势,Smad7在正常妊娠组、子痫前期轻度和重度组表达强度及范围依次呈逐渐下降趋势。正常妊娠和子痫前期患者胎盘的滋养细胞、内皮细胞、基质细胞均存在凋亡,以滋养细胞凋亡为主。重度子痫前期组胎盘滋养细胞凋亡（1．02）％显著高于子痫前期轻度组（0．73）％,子痫前期轻度组显著高于正常妊娠组（0．38）％,P〈0．05。滋养细胞TGF—β1的表达与滋养细胞凋亡具有相关性（r=0．96,P〈0．05）。结论子痫前期患者胎盘组织中的TGF—β1可能是通过Smad信号转导蛋白抑制滋养细胞浸润,诱导细胞凋亡。     

胎盘中HGF和IGF-1的表达及与妊娠期高血压疾病发病的关系

目的探讨肝细胞生长因子（Hepatocyte growth factor,HGF）与胰岛素样生长因子-1（Insu lin like growth fac-tor-1,IGF-1）在正常晚孕妇女及妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达以及在妊娠期高血压疾病发病中的作用。方法采用免疫组织学方法检测62例妊娠期高血压疾病患者（妊娠期高血压疾病组,其中妊娠期高血压21例。轻度子痫前期19例,重度子痫前期22例）及20例正常晚孕妇女（对照组）的胎盘组织中HGF及IGF-1的表达强度,同时HE染色,选取5个高倍视野,计数绒毛血管数。结果（1）HGF主要表达于绒毛间质细胞胞浆,蜕膜细胞有少量表达。重度子痫前期患者胎盘绒毛间质细胞HGF的表达强度显著低于对照组（H=8.548,P=0.003）,而妊娠期高血压及轻度子痫前期患者与对照组比较,差异无显著性（H=0.018,P=0.892;H=3.739,P=0.053）;（2）IGF-1主要表达于胎盘合体滋养细胞、细胞滋养细胞及蜕膜细胞的胞膜及胞质中。胎盘组织中IGF-1的表达,轻、重度子痫前期患者明显低于对照组（H=4.948,P=0.026;H=15.245,P=0.001）而妊娠期高血压与对照组比较,差异无显著性（H=0.118,P=0.731）;（3）不同程度妊娠期高血压疾病组胎盘绒毛血管密度均较对照组减少,重度子痫前期患者胎盘绒毛血管密度为（59.69±3.86）个/×400,与对照组（67.67±4.55）个/×400相比,差异有显著性（P〈0.01）;（4）相关性分析显示两组孕妇胎盘组织中HGF、IGF-1表达强度分别与绒毛血管密度、新生儿出生体重呈正相关（r=0.695,r=0.386;r=0.270,r=0.782）;对照组及妊娠期高血压患者胎盘组织中HGF与IGF-1的表达强度呈强正相关性（r=0.950,P〈0.01;r=0.864,P〈0.01）。结论胎盘组织中HGF、IGF-1分泌减少与妊娠期高血压疾病发病及病情发展有关,IGF-1可能参与了HGF水平的调节。     

基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的 检测子痫前期患者胎盘组织中RECK、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）的基因表达,探讨它们与胎盘滋养细胞浸润过程的调控关系。 方法 采用RT-PCR、Western blotting、免疫组织化学检测120例妊娠足月剖宫产（正常妊娠、轻度子痫前期、中度子痫前期、重度子痫前期各30例）胎盘组织中RECK、MMP-9、VEGF的基因表达。结果 3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF的mRNA表达水平均显著低于正常妊娠组（P<0.05）;重度子痫前期组中RECK mRNA的表达显著高于正常妊娠组（P<0.05）;3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF蛋白表达均显著低于正常妊娠组（P<0.05）,中度和重度子痫前期组中RECK蛋白表达显著高于正常妊娠组（P<0.05）。结论 子痫前期患者胎盘中RECK与MMP-9、VEGF之间存在负相关性,它们可能参与了胎盘滋养细胞浅浸润过程的调控。     

子痫前期患者白细胞介素-8和胎盘生长因子的表达及其意义

目的通过检测子痫前期患者羊水中白细胞介素-8（IL-8）和胎盘组织中胎盘生长因子（PLGF）的水平．以探讨IL-8和PLGF在子痫前期发病中的作用。方法采用酶联免疫吸附法和免疫组化法分别测定20例轻度子痫前期患者,22例重度子痫前期患者和30例正常妊娠妇女（对照组）的羊水中IL-8和胎盘组织中的PLGF的表达。结果子痫前期轻度组及重度组羊水IL-8均高于对照组,重度组羊水IL-8显著高于轻度组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。子痫前期轻度组及重度组胎盘组织中PLGF表达量均低于对照组（P〈0．01）,而重度组低于轻度组（P〈0．01）。子痫前期轻、重度组及对照组胎盘组织中PLGF表达量与羊水IL-8水平均呈高度负相关（P〈0．01）。结论子痫前期患者羊水中IL-8增高,而胎盘组织中PLGF表达下降,可能与子痫前期的发生、发展有关。     

RECK、基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的检测子痫前期患者胎盘组织中RECK、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)的基因表达,探讨它们与胎盘滋养细胞浸润过程的调控关系。方法采用RT-PCR、Western blotting、免疫组织化学检测120例妊娠足月剖宫产(正常妊娠、轻度子痫前期、中度子痫前期、重度子痫前期各30例)胎盘组织中RECK、MMP-9、VEGF的基因表达。结果 3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF的mRNA表达水平均显著低于正常妊娠组(P0.05);重度子痫前期组中RECK mRNA的表达显著高于正常妊娠组(P0.05);3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF蛋白表达均显著低于正常妊娠组(P0.05),中度和重度子痫前期组中RECK蛋白表达显著高于正常妊娠组(P0.05)。结论子痫前期患者胎盘中RECK与MMP-9、VEGF之间存在负相关性,它们可能参与了胎盘滋养细胞浅浸润过程的调控。     

子痫前期患者胎盘中MMP-9、TIMP-1、TGFβ1和Endoglin的表达及意义

目的探讨MMP-9、TIMP-1、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1)和Endoglin在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测正常妊娠晚期(对照组)、轻度子痫前期、重度子痫前期各30例患者胎盘组织中MMP-9、TIMP-1、TGFβ1和Endoglin的表达。结果 MMP-9在对照组、轻度子痫前期、重度子痫前期中的表达呈逐渐减弱趋势,各组间差异有显著性(P 0. 05)。TGFβ1、TIMP-1在重度子痫前期组中的表达显著升高,与对照组和轻度子痫前期组比较差异有显著性(P 0. 05);Endoglin在对照组、轻度子痫前期、重度子痫前期的表达呈逐渐增强趋势,各组间差异有显著性(P 0. 05)。结论子痫前期患者胎盘组织中MMP-9、TIMP-1、Endoglin和TGFβ1的异常表达可能与滋养细胞浸润障碍有关,且共同参与子痫前期的发病。     

血清学及胎盘上血管内皮细胞生长因子表达与子痫前期的相关性

目的研究子痫前期患者血清和胎盘组织中VEGF的表达情况。方法血清VEGF测定采ELISA法,采用SP免疫组化法检测VEGF石蜡包埋的胎盘组织,切片,HE染色,光镜观察。将制好切片置显微镜下观察。结果判定：每张切片至少观察10个高倍视野,观测胎盘绒毛滋养细胞及间质细胞VEGF的表达。结果子痫前期患者血清和胎盘组织中VEGF的表达均明显的低于对照组（P〈0.05）,且与疾病的严重程度相一致。结论 VEGF可能通过直接或者间接途径影响滋养细胞的侵袭能力,参与子痫前期的发生发展,研究VEGF可能为子痫前期的早期诊断和治疗提供新的方法。     

TGFβ1和MMP-9 mRNA在子痫前期胎盘中的表达及意义

目的通过检测子痫前期患者胎盘组织中TGFβ1和MMP-9 mRNA的表达，探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测正常妊娠（15例），子痫前期（24例）剖宫产后胎盘组织中TGFβ1和MMP-9基因在转录水平的表达。结果在重度子痫前期胎盘中TGFβ1 mRNA表达量升高；MMP-9 mRNA表达降低，与轻度子痫前期及正常组比较有明显意义。胎盘组织中TGFβ1的表达水平和MMP-9的表达水平呈负相关（P〈0．05）。结论子痫前期胎盘组织中TGFβ1、MMP-9在基因转录水平就发生异常而引起滋养细胞浸润不足，提示两者可能并共同参与子痫前期的发生和发展。     

妊娠期高血压疾病患者胎盘中肝X受体α的表达及其临床意义

目的探讨妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中肝X受体α(LXRα)的水平变化及其在妊娠期高血压病发病中的作用。方法运用免疫组化法检测71例妊娠期高血压疾病患者(实验组,其中妊娠期高血压25例,轻度子痫前期23例,重度子痫前期23例)及20例正常妊娠孕妇(对照组)胎盘组织中的肝X受体α(LXRα)表达。结果 LXRα主要表达于两组孕妇胎盘蜕膜细胞及部分绒毛滋养细胞中,表达部位在细胞膜和细胞质,绒毛间质有少量阳性表达。妊娠期高血压疾病与对照组比较胎盘组织中LXRα表达明显升高(P<0.05)。妊娠期高血压、轻、重度子痫前期患者胎盘组织中LXRα表达逐渐升高,各组间比较差异有显著性(P<0.05)。妊娠期高血压与对照组比较胎盘组织中LXRα表达强度略有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论孕妇胎盘组织中LXRα表达水平的变化与妊娠期高血压病的发病及病情发展有关。     

子痫前期患者胎盘组织PLGF表达及血清HGF和VEGF测定

目的：探讨子痫前期患者血清肝细胞生长因子（HGF）、胎盘生长因子（PLGF）表达水平和血管内皮生长因子（VEGF）水平的变化及意义。方法：分别采用放射免疫分析、酶联免疫分析和免疫组化法测定32例子痫前期孕妇（子痫前期组）和35名正常孕妇（对照组）血清VEGF、HGF和PLGF表达水平。结果：子痫前期患者无论轻度子痫前期组和重度组血清HGF含量均显著低于对照组（P均〈0.01）;但轻度和重度组之间水平无显著性差异（P〉0.05）。胎盘中PLGF表达水平也显示轻度和重度两组均显著低于对照组（P均〈0.01）;且重度组又显著低于轻度组（P〈0.01）。血清VEGF水平轻度组显著低于对照组（P〈0.05）;重度组水平较对照组降低更为显著（P〈0.01）,且重度组显著低于轻度组（P〈0.01）。相关分析显示,HGF含量与PLGF具有显著相关性（r=0.6012,P〈0.01）;而与VEGF水平则无明显相关性（r=0.3010,P〉0.05）。结论：测定结果证实,患者血清三项标志物均参与了子痫前期的病理进程,其测定对于了解病情和预后评估有帮助。     

血管内皮生长因子与血管细胞粘附分子在妊高征发病中的作用

目的探讨血管内皮生长因子及血管细胞粘附分子-1在妊高征发病中的作用。方法选取49例妊高征妇女(其中轻度15例、中度16例及重度18例),35例正常晚期妊娠妇女为研究对象,采用ELISA方法测定其血精VEGF、VCAM-1的水平。结果妊高征组血清VEGF浓度明显低于正常妊娠组(P<0.01).而VCAM-1浓度则明显高于正常妊娠组(P<0.01),轻度妊高征组血清VEGF、VCAM-1浓度与正常妊娠组无明显差别(P>0.05),中、重度妊高征组血清VEGF浓度明显低于正常妊娠组(P<0.01).而血清VCAM-1浓度明显高于正常妊娠组(P<0.01)。结论血清VEGF浓度的降低可能与胎盘浅着床有关,血清VCAM-1的升高参与了妊高征血管内皮损伤过程,VEGF、VCAM-1均可能与妊高征的发病机制有关。     

IFN-γ、IL-4在子痫前期患者血清中的表达水平及平衡变化

目的通过观察子痫前期患者血清中IFN-γ、IL-4水平,来探讨Th1、Th2型细胞因子在子痫前期疾病发病中所起的作用。方法用ELISA法分别测定正常孕妇15例、重度子痫前期患者15例、轻度子痫前期患者15例血清中IFN-γ、IL-4水平及计算IFN-γ/IL-4的比值。结果①血清中IFN-γ:轻度子痫前期组与正常妊娠组差异无统计学意义(P>0.05);重度子痫前期组明显高于正常妊娠组、轻度子痫前期组,差异有统计学意义(P<0.05)。②血清中IL-4:轻度子痫前期组与正常妊娠组相比差异无统计学意义(P>0.05);重度子痫前期组与轻度子痫前期组相比差异无统计学意义(P>0.05);重度子痫前期组低于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05)。③血清中IFN-γ/IL-4:轻度子痫前期组与正常妊娠组相比差异无统计学意义(P>0.05);重度子痫前期组与轻度子痫前期组相比差异无统计学意义(P>0.05);重度子痫前期组明显高于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IFN-γ和IL-4的表达失衡和紊乱可能是子痫前期免疫学发病机制中的重要环节,Th1/Th2的失衡可能是妊娠期高血压疾病发生机制之一。     

Increased cystatin C expression in the pre-eclamptic placenta

Trophoblast invasion is regulated by proteinases and their inhibitors. Cystatin C inhibits cysteine proteinases. The serum concentration of cystatin C is increased in late pregnancy and pre-eclampsia. We aimed to investigate whether the expression of cystatin C is increased in the pre-eclamptic placenta and to investigate the expression pattern of cystatin C mRNA and protein in placental tissue. Tissue samples from the central part of the placenta from 13 normal and 22 pre-eclamptic pregnancies were included. We used real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) and in situ hybridization for mRNA expression analysis and immunohistochemistry and Western blotting for protein expression analysis. RT-PCR showed a significantly higher expression of cystatin C mRNA in pre-eclampsia than in normal pregnancy, with the highest expression in cases with severe pre-eclampsia. In situ hybridization revealed a distinct pattern of high expression in the extravillous trophoblast cells of the basal plate and low expression in the syncytiotrophoblast covering villi. The cystatin C protein distribution matched the mRNA expression pattern. Western blot analysis revealed an increased protein expression in cases with severe pre-eclampsia and confirmed the presence of cystatin C in amniotic fluid samples. The high expression of cystatin C mRNA in the extravillous trophoblast cells of the basal plate suggests a role for cystatin C in the regulation of proteases in placentation. Placental expression and secretion of cystatin C could contribute to the elevated maternal plasma levels seen in pre-eclampsia.     

ERBB4/HER4在子痫前期胎盘中的表达

目的探讨子痫前期患者胎盘滋养细胞人表皮生长因子受体4(ERBB4/HER4)的表达及意义。方法采用RT-PCR法检测35例子痫前期患者(子痫前期组)胎盘ERBB4的表达及其与胎盘重量及新生儿出生体重的关系,并与20例正常妊娠妇女(正常妊娠组)比较。结果在子痫前期患者胎盘中,ERBB4 mRNA表达明显高于正常妊娠胎盘,两者有显著性差异(P<0.05)。结论子痫前期患者胎盘ERBB4表达显著增高,与子痫前期的发病密切相关。     

Serum levels of macrophage colony stimulating, vascular endothelial, and placenta growth factor in relation to later clinical onset of pre-eclampsia and a small-for-gestational age birth

PROBLEM: The multisystem disorder of pre-eclampsia (PE) becomes manifest in late gestation, but the pathology originates in early pregnancy by the deleterious action of placental substances to the maternal endothelial system. These factors were searched for in the attempt to identify, as early as possible, the pregnancies with an increased risk of developing pre-eclampsia. The literature is equivocal regarding the usefulness of various markers including vascular endothelial growth factor (VEGF) and macrophage colony-stimulating factor (M-CSF). Results are often confounded by a varying fraction of pregnancies affected by foetal growth restriction (FGR) amongst the case and control groups. METHOD OF STUDY: In a nested case-control study we compared the serum levels of M-CSF, VEGF, and placenta growth factor (PLGF) in 23 pregnancies with subsequent mild PE without FGR and nine FGR pregnancies without PE with 40 matched controls at 17, 25, and 33 weeks of gestation cross-sectionally and longitudinally. RESULTS: VEGF levels were reduced in FGR but not in subsequently pre-eclamptic pregnancies at 17, 25, and 33 weeks. In contrast, PLGF was reduced in the PE but not in the FGR group. M-CSF did not differ between the three groups. CONCLUSION: Depending on which growth factor is found to be reduced, an early distinction can be made in terms of an increased risk for PE or FGR. Inconsistencies in the literature may reflect differences in PE disease severity between studies and the presence of a varying fraction of cases with FGR.     

Expression of vascular endothelial growth factor receptors 1, 2 and 3 in placentas from normal and complicated pregnancies

Extensive angiogenesis and invasion of the maternal decidua by trophoblasts are essential for the development and function of the placenta. Vascular endothelial growth factors (VEGF), placenta growth factor (PlGF) and their receptors VEGFR-1/Flt-1, VEGFR-2/KDR and VEGFR-3/Flt4 have important roles in vasculogenesis and angiogenesis. We have studied the localization of these proteins by immunohistochemistry and Western blotting in the placenta and of PlGF in maternal serum, and their association with diabetes, pre-eclampsia, fetal growth restriction (FGR) and fetal alcohol syndrome (FAS). VEGFR-1 and VEGFR-3 were detected mainly in the syncytiotrophoblastic layer whereas VEGFR-2 was detected in the vascular endothelial cells of the placenta. VEGFR-1, but not the other receptors, showed increased expression in placental syncytiotrophoblasts from 50% of patients with severe pre-eclampsia and FGR when compared with normal placentas. PlGF was undetectable in 38 of 44 samples of amniotic fluid of mothers with normal and complicated pregnancies. However, maternal serum PlGF concentrations were significantly lower in pre-eclamptic patients and in those with FGR when compared to diabetic women or healthy controls. These results suggest that low maternal serum PlGF and increased placental expression of its receptor VEGFR-1 are associated with pre-eclampsia and FGR.     

子痫前期及子痫期患者联合检测血小板膜糖蛋白及凝血酶原的临床意义

目的研究子痫前期及子痫期患者血管内皮损伤和血小板活化状态及凝血系统活跃程度。方法采用全血流式细胞术分别检测32例重度子痫前期／子痫患者、16例轻度子痫前期患者、22例孕晚期妇女剖宫产术前及剖宫产术后72h内血小板膜糖蛋白Ⅰbα（GPⅠbot）、Ⅱb（GPⅡb）水平变化,采用血凝仪同期检测血浆凝血酶原时间（PT）和活化部分凝血活酶时间（APTT）。结果剖宫产术前,与轻度子痫前期组、正常孕晚期组比较,重度子痫前期及子痫组GPⅠbα和PT明显降低（P〈0．01）,术后两者72h内恢复至正常孕晚期水平,与术前比较差异显著（P〈0．01）;各组间剖宫产术前或术后GPⅡb变化无显著性差异（P〉0．05）;正常孕晚期组、轻度子痫前期组及重度子痫前期子痫组APTT递次延长但无统计学差异（P〉0．05）;术后上述三组APTT递次降低,但无显著性差异（P〉0．05）。GPⅠbα与PT呈正相关（r=0．371,P〈0．01）。结论孕晚期子痫前期及子痫患者存在血管内皮细胞损伤及血小板活化状态,引起外源性凝血系统活跃,而内源性凝血系统由于肝脏产生的凝血因子相对减少而活跃性相对降低。