人血浆毒鼠强气相色谱-氮磷检测器检测及其临床应用

目的:利用气相色谱-氮磷检测器(GC/NPD)建立一种快速检测人血浆中毒鼠强(TET)的方法.方法:血浆中TET用乙酸乙酯作液液提取,毛细管气相色谱柱,GC/NPD法测定血浆中毒鼠强的浓度,以甲基1605为内标,内标法定量.结果:方法学显示毒鼠强与内标分离良好,不受样品中内源性物质干扰,在50～700 ng/mL范围内具有良好的线性关系(r＞0.99),最低检出浓度为5 ng/mL,最低检测限为10 ng/mL.血浆样本回收率的在70%以上.日内、日间精密度分别为RSD 3.5%～12.8%和6.5%～12.0%.结论:该本方法灵敏、稳定,能满足毒鼠强药物代谢动力学研究和临床检测的需要.     

LC-MS/MS法和HPLC法检测人血清中利培酮和九羟利培酮血药浓度的对比研究

目的 验证液质联用质谱(LC-MS/MS)法和高效液相色谱(HPLC)法检测人血清中利培酮和九羟利培酮血药浓度结果的可靠性,并分析两种方法检测结果的差异性.方法 对实验室目前在用的LC-MS/MS法和HPLC法检测人血清中利培酮和九羟利培酮血药浓度的方法学进行验证,合格后再分别对该院住院患者的60份血清标本进行相关检测.采用配对t检验、Pearson相关分析、散点图和Bland-Altman偏差图对其检测结果的相关性及差异进行评价.结果 LC-MS/MS法和HPLC法的方法学验证均符合要求,检测结果呈正相关;LC-MS/MS法和HPLC法检测利培酮和九羟利培酮结果比较,差异有统计学意义(P<0.05);LC-MS/MS法检测利培酮与九羟利培酮的结果分别比HPLC法检测结果高1.97和1.38 ng/mL,95％ 置信区间分别为-5.81～9.74、-10.28～11.66.结论 LC-MS/MS法和HPLC法可同时运用于日常检测人血清中利培酮和九羟利培酮血药浓度,检测结果可靠但存在差异,如果是需要长期监测的患者建议一直选用同一种方法检测.     

一种简便快速的液相色谱串联质谱法用于人体内血尿样品中奈诺沙星浓度的测定

目的建立一种简便快速高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)的方法用于测定人血浆和尿液中奈诺沙星药物浓度。方法色谱柱为Waters Symmetry RP1 8柱(50mm×2.1 mmm,5μm),以加替沙星为内标,血浆和尿液样品测定采用0.1%甲酸乙腈混合溶液为流动相,比例分别为82:1 8和85:1 5,流速均为0.2 mL/min。采用蛋白沉淀法处理血浆样品,以液液萃取法清除尿液样品中杂质。ESI源正离子选择性反应临测(SRM),奈诺沙星检测通道:m/z 372.4→m/z354.1,内标检测通道:m/z376.1→m/z 332.2。结果本方法测定血浆和尿液中的奈诺沙星的线性范围均为5～100ng/mL,最低检测浓度均为5ng/mL血浆和尿液的奈诺沙星提取回收率分别为(98.49±4.69)%和(84.92±6.81)%,且血浆和尿液的RSD)分别小于或等于4.31%和9.76%。奈诺沙星血浆样品的方法日内、日间准确度分别为(99.27～103.75)%和(100.40～106.36)%;而尿液样品的方法日内、日间准确度依次为(103.52～11 5.94)%和(9 9.50～1 10.96)%,且基质效应、精密度、稳定性等均通过方法学验证。并已用于该药的人体药动学研究中药物浓度的测定。结论本方法操作简便、迅速,特异性强,灵敏度高,准确性好,符合奈诺沙星人体药物动力学研究中血尿样测定的方法学要求。     

左羟丙哌嗪的人体药动学研究

【目的】建立HPLC-荧光法测定人血浆中左羟丙哌嗪浓度,研究其在中国健康人体内的药物动力学。【方法】用1-羟基哌嗪为内标,血样经液-液萃取后进样,用HiQsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃。0.1 M磷酸二氢钾(磷酸调pH值至2.51)∶乙腈∶甲醇(82∶3∶15)为流动相,流速0.6 ml/min,检测波长为Ex=240 nm,Em=350 nm。【结果】血浆中杂质不干扰样品测定,线性范围为(3.5~886.0)ng/ml,最低可定量浓度为3.5 ng/ml(S/N=10),萃取回收率大于80%,方法回收率为106.1%~109.1%,日内和日间RSD均小于10%。左羟丙哌嗪的主要药动学参数:T1/2(2.93±0.54)h,Tmax(0.42±0.18)h,Cmax(345.2±113.6)ng/ml,AUC0-t(974.8±386.7)ng/(h.ml),AUC0-∞(1008.2±397.2)ng/(h.ml)。【结论】HPLC-荧光法灵敏、准确、重现性好,适合于左羟丙哌嗪的药动学研究。左羟丙哌嗪在中国健康人体内吸收迅速,消除快,安全性好。     

高效液相色谱法测定兔眼房水中环孢霉素A的含量

目的建立房水中环孢霉素A的高效液相色谱测定方法,并测定兔用药后眼房水中的药物浓度。方法采用WatersC18色谱柱,流动相为乙腈-甲醇-水(66∶25∶20),流速为0.8ml/min,在55℃柱温下,于214nm处检测。结果本方法CsA线性范围10~150ng/ml,最低检测浓度10ng/ml,回收率99.81%,日间和日内RSD均小于8%。结论本法具有简便、灵敏、快速、稳定性好、柱温低的特点,适合用于眼房水中CsA浓度监测。     

RP-HPLC法测定人血浆中齐拉西酮质量浓度

目的建立用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定人血浆中齐拉西酮质量浓度的办法。方法以Acclaim~(TM)12 C_(18)反相柱(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,流动相为0.2%三乙胺-甲醇(15∶85);流速:1.1mL/min;柱温:35℃;检测波长:230nm,以乙酸乙酯为萃取剂。结果齐拉西酮在8.0~300.0ng/mL质量浓度范围内,其质量浓度与峰面积呈良好线性关系;齐拉西酮低、中、高质量浓度(8.0、80.0、350.0ng/mL)相对回收率均大于95%;提取回收率均大于90%。日内、日间相对标准偏差均低于10%(n=5)。分析方法的检测限为5.0ng/mL;齐拉西酮的曲线方程:Y=1.193 X+0.013,r=0.999 7(n=7)。结论该法灵敏、简单、准确、快速,可用于临床齐拉西酮血药浓度的监测。     

高效液相色谱法同时测定人血清中卡马西平及地尔硫(艹卓)浓度

目的 建立反相高效液相色谱(HPLC)法,以安定为内标,同时测定血清中卡马西平(CBZ)和地尔硫(DZ)的浓度.方法 采用Waters产μBondapak C18柱,甲醇-磷酸盐缓冲液(内含0.04%二乙胺,pH 6.82)＝70∶30为流动相,紫外检测波长为237 nm.结果 CBZ两种浓度(5、10 mg/L)的平均回收率及其日内精密度RSD分别为101.6%、100.1%及0.8%、1.0%.DZ两种浓度(100、200 μg/mL)的平均回收率及其日内精密度RSD分别为99.6%、101.1%及2.7%、3.0%.结论 HPLC法较灵敏、准确、简便.可用于两药合用时血药浓度及药动学变化的研究.     

高效液相色谱法测定胎盘灌流液中格列苯脲的浓度

目的建立测定胎盘灌流液中格列苯脲浓度的高效液相色谱(HPLC)检测方法。方法采用的色谱柱为Symmetry Shield RP C18(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温40℃,流动相为NaH2PO4缓冲盐(25 mmol/L,pH值5.2)︰乙腈=1︰1;内标为格列齐特,流速1.0 mL/min,检测波长228 nm,采用液-液萃取预处理方法测定胎盘灌流液中格列苯脲的浓度。结果格列苯脲浓度线性范围为2.0～25.0μg/mL,线性方程为:y=0.226x+0.002,r=0.999 9(n=6),日内相对标准偏差(RSD)<3.1%,日间RSD<9.5%,方法学回收率为95.32%～103.35%。结论 HPLC检测方法灵敏、简便,可用于胎盘灌流液中格列苯脲浓度的检测。     

液相色谱串联质谱法分析血清中脂溶性维生素的性能评价及临床应用

目的 建立液相色谱串联质谱法定量分析血清中脂溶性维生素的方法,并进行性能分析评价以及初步临床应用。方法 采用液相色谱串联质谱法定量检测血清中脂溶性维生素含量,并检测2022年11月至2023年11月在苏州大学附属第一医院产科门诊产检的1 113例孕妇血清中的脂溶性维生素。参照《液相色谱串联质谱临床检测方法的开发与验证》进行血清中脂溶性维生素高效液相色谱串联质谱检测方法的方法学验证。结果 液相色谱串联质谱法定量检测血清中脂溶性维生素,包括维生素A、维生素E、维生素D2、维生素D3、维生素K1,线性范围分别为40～4 000 ng/mL、0.5～50μg/mL、2～200 ng/mL、5～250 ng/mL、0.1～10 ng/mL,检出限分别为2.50 ng/mL、0.10 ng/mL、0.40 ng/mL、1.00 ng/mL、0.02 ng/mL,定量下限分别为10.00 ng/mL、0.50 ng/mL、1.00 ng/mL、5.00 ng/mL、0.10 ng/mL,批内变异系数(CV)和批间CV均小于15%,回收率分别为91.25%～107.18%、90.00%～105.51%...     

奥卡西平对利培酮血药浓度的影响

目的:研究奥卡西平对利培酮及九羟利培酮血药浓度的影响。方法:采用自身对照法,对30例单用利培酮治疗2周后伴有兴奋躁动的精神分裂症患者,再联合奥卡西平治疗4周,分别于联用前与联用4周后采用高效液相色谱法(HPLC)测定利培酮及九羟利培酮血药浓度。结果:联用奥卡西平前与联用4周后利培酮及九羟利培酮血药浓度分别为(36.34±9.62)ng/m L和(35.95±11.12)ng/m L,差异无统计学意义(P0.05)。结论:奥卡西平对利培酮及九羟利培酮血药浓度无明显影响,两药联用安全性高。     

非那西丁和对乙酰氨基酚浓度评估肝脏储备功能

目的对非那西丁和对乙酰氨基酚浓度分析进行方法学研究,并进行应用性验证,以评估肝脏储备功能。方法建立高效液相色谱法(HPLC)测定非那西丁与对乙酰氨基酚浓度,进行标准曲线建立、精密度试验及方法回收率试验,并用健康人血浆进行应用性验证。结果非那西丁与对乙酰氨基酚在浓度为0.8~40.0μg/mL的范围内均呈现良好的线性关系。在5、15、25μg/mL样品浓度下,非那西丁测定的日内精密度分别为0.84%、1.09%和0.53%,日间精密度分别为1.51%、1.10%和1.38%;对乙酰氨基酚测定的日内精密度分别为0.76%、0.89%和0.67%,日间精密度分别为1.02%、1.46%和1.21%,在浓度为1~20μg/mL浓度范围内,利用所建立的分光光度技术测定,相对标准差(RSD)小于10%,当浓度超过5μg/mL,RSD5%。结论 HPLC简便快捷、灵敏度和准确度高,为评估肝脏储备功能提供了一种快捷、准确的方法。     

上海地区儿童快速免疫层析法cTnⅠ参考区间的建立

目的采用快速免疫层析法检测上海地区儿童末梢血心肌肌钙蛋白(cTnⅠ)水平,初步建立儿童末梢血cTnⅠ的参考区间,为临床诊断儿童心肌损伤提供实验室依据。方法选取7个月～12岁儿童240名,采用快速免疫层析法检测其末梢血cTnⅠ。先进行方法学评估(准确性、精密度、最低检测限、线性范围验证、方法比对),然后采用百分位数法确定cTnⅠ的参考区间。结果快速免疫层析法检测高、低值质控品的结果分别为4.73和0.49 ng/mL,均在质控品标示的预期范围内;低值质控品日间和日内精密度[变异系数(CV)]分别为5.97%和5.36%,高值质控品日间和日内精密度(CV)分别为6.35%和7.14%,均符合要求(CV10%);最低检测限为0.02 ng/mL;线性范围为0.028～26.400 ng/mL;与化学发光法的相关性良好(r=0.988),检测cTnⅠ的第99百位数值为0.1 ng/mL,第99百位数值的不精密度为18.5%。采用百分位数法计算99%参考区间上限值为0.5 ng/mL,同时结合试剂说明书中标示的参考区间(0.3 ng/mL),确定基于快速免疫层析技术的儿童末梢血cTnⅠ参考区间:0.3 ng/mL为阴性、0.5 ng/mL为阳性。cTnⅠ为0.3～0.5 ng/mL时需进一步检查,以判断是否有心肌损伤。结论初步建立了基于快速免疫层析法的上海地区儿童末梢血cTnⅠ的参考区间。     

高效液相色谱法及微生物检定法监测奈替米星血药浓度的比较

目的比较高效液相色谱法(HPLC法)和微生物检定法测定奈替米星血药浓度。方法分别用HPLC法和微生物检定法测定血药浓度。结果 HPLC法平均回收率为97.87%,日内、日间相对标准偏差(RSD)分别为4.40%和5.49%;微生物检定法平均回收率为101.13%,日内、日间RSD分别为5.06%和6.88%。结论两种方法回收率和精密度基本一致,受试者血药浓度差异无统计学意义。     

高效液相色谱法测定人血浆中盐酸替扎尼定含量

目的建立用高效液相色谱法快速检测盐酸替扎尼定血药浓度的方法。方法取血浆加1 mol/L NaOH,混匀,加氯仿提取吹干,用流动相复溶进样;色谱柱SUNTEK Krom asiL C185μm粒径,150×4.6 mm;色谱条件:A∶乙睛=100∶25[A:水-甲酸-氨水(28%)=100∶5∶10(V/V,pH 8.50)];流速1.0 m l/m in;紫外检测波长318 nm,内标物为雷尼替丁。结果盐酸替扎尼定的保留时间为6.9 m in,雷尼替丁的保留时间为8.2 m in,检测的线性范围0.3867~49.5000 ng/m l(r=0.9982)方法回收率大于90.78%(n=5)日内RSD=7.74%,日间RSD=3.79%(n=5)。结论本方法简便快速,定量准确,适用于盐酸替扎尼定人体临床药代动力学和生物利用度的研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中头孢地尼的浓度

目的：建立测定人血浆中头孢地尼含量的高效液相色谱（HPLC）方法。方法：血浆样品用高氯酸沉淀蛋白,采用Ulti-mate C18色谱柱（5μm,2 504.6mm）,以乙腈：0.025mol.L-1磷酸二氢钠缓冲盐溶液（pH3.24）=15∶85作为流动相进行分离,检测波长为286nm,流速为1.0mL.min-1。结果：头孢地尼血药浓度30~2 500ng.mL-1范围内线性关系良好,最低检测浓度为30ng.mL-1。方法回收率（n=5）分别为76.41%,63.78%,66.44%,日内和日间精密度均小于15%。结论：该法操作简单、灵敏、准确、重现性好,适用于头孢地尼临床药代动力学研究。     

高效液相色谱法同时测定人血清中卡马西平及地尔硫浓度

目的建立反相高效液相色谱（HPLC）法,以安定为内标,同时测定血清中卡马西平（CBZ）和地尔硫（DZ）的浓度。方法采用Waters产μBondapak C18柱,甲醇-磷酸盐缓冲液（内含0.04%二乙胺,pH 6.82）=70∶30为流动相,紫外检测波长为237 nm。结果CBZ两种浓度（5、10 mg/L）的平均回收率及其日内精密度RSD分别为101.6%、100.1%及0.8%、1.0%。DZ两种浓度（100、200μg/mL）的平均回收率及其日内精密度RSD分别为99.6%、101.1%及2.7%、3.0%。结论HPLC法较灵敏、准确、简便。可用于两药合用时血药浓度及药动学变化的研究。     

吸烟对利培酮药代动力学及疗效的影响

目的探讨吸烟对利培酮药代动力学和血药浓度的影响,以及利培酮血药浓度与临床疗效及不良反应之间的关系。方法采用反相高效液相色谱法测定利培酮及9-羟利培酮血药浓度,并进行药代动力学参数研究,采用简明精神病症状评定量表(BPRS)、阳性和阴性症状量表(SAPS、SANS)和副反应量表(TESS)评定临床疗效和不良反应。结果吸烟者的利培酮和9-羟利培酮的消除速率较非吸烟者快[消除速率常数(K)更高],且其消除半衰期(T1/2)较短,达峰浓度(Cmax)和第2周末稳态浓度谷值均较低(P<0.05或P<0.01)。利培酮血药浓度及利培酮+9-羟利培酮总浓度与TESS增分值呈正相关(r=0.42~0.62,均P<0.01),与BPRS、SANS和SAPS的减分率无显著相关性(P>0.05)。以治疗8周BPRS总分减分率≥25%为界,划分有效组和无效组进行血药浓度比较,无效组利培酮及利培酮+9-羟利培酮血药浓度低于有效组(P<0.05)。结论吸烟可加快利培酮的代谢,利培酮和9-羟利培酮总的血药浓度在20~60μg·L-1范围内较为适宜,疗效较好,不良反应较少。     

高效液相色谱法同时测定人血浆中氟西汀和喹硫平浓度

目的建立同时测定人血浆中氟西汀和喹硫平浓度的高效液相色谱(HPLC)方法。方法采用HPLC同时测定血浆氟西汀和喹硫平浓度。色谱柱为Inertsil ODS-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为0.05 mol/L醋酸铵-甲醇(体积比22∶78),流速为0.8 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为40℃,萃取剂为乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比77∶23),内标物为卡马西平。结果卡马西平和喹硫平、氟西汀色谱峰完全分离,峰形良好,保留时间分别为4.91、6.53和7.48 min,血浆中杂质对测定不产生干扰。氟西汀在10～480μg/L、喹硫平在20～1 600μg/L范围内线性关系良好(r值分别为0.990 5、0.992 9);当信噪比(S/N)=3时,检测限分别为5、8μg/L。氟西汀和喹硫平低、中、高3种浓度绝对回收率均>75%,相对回收率>95%,日内、日间相对标准偏差(RSD)均<10%。结论该方法灵敏、准确、成本低廉,可用于临床氟西汀与喹硫平的血药浓度监测和药物动力学研究。     

结核患者胸水中异烟肼浓度的测定

目的通过实验测定胸水中异烟肼的浓度,提高胸水中的药物浓度,增强抗结核作用。方法于2009年2月-6月采用反相高效液相色谱法测定异烟肼在结核患者胸水中的浓度。色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（5μm,4.6 mm×2.5 mm）,进样20μL;柱温：室温;柱压200×105 Pa;流动相：甲醇（色谱纯）︰高纯水=20︰80;流速：1 mL/min;紫外检测波长：254 nm。结果异烟肼的检测浓度在0.25～10.00μg/mL范围内线性关系良好（r=0.998 9）;其低、中、高3种浓度（0.5、5.0、10.0μg/mL）的回收率分别为97.95%、100.64%、102.84%;日内相对标准偏差（RSD）分别为3.49%、1.45%、2.03%,日间RSD分别为3.85%、5.68%、4.15%。结论采用反相高效液相色谱法测定异烟肼在结核患者胸水中的浓度准确、灵敏度高、重现性好。     

高效液相色谱法测定大鼠坐骨神经组织中山梨醇的浓度

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定大鼠坐骨神经组织中山梨醇浓度的方法。方法采用Angilent ZORBAX SB C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以L-鼠李糖为内标,乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL·min-1;检测波长228nm;进样量20μL;柱温25℃为检测方法,对该方法测定大鼠坐骨神经山梨醇浓度进行包括专属性试验、线性关系检测、精密度试验、加样回收率试验及稳定性试验等在内的方法学考察。结果该方法专属性良好,大鼠坐骨神经山梨醇浓度在7.5~600nmol·mL-1线性范围内线性关系良好(r2=0.999 9),最低定量限为7.5nmol·mL-1。日内、日间精密度小于10%,加样回收率较高,满足生物样品回收率在80%~120%内的要求,RSD均小于9%;方法稳定性好,反复冻融3次、室温放置4h、-20℃冻存28d以及处理好的标本于进样器放置24h的RSD均小于10%。结论该测定方法简便、结果准确、可靠,可用于大鼠坐骨神经组织中山梨醇浓度的测定。