燃汽油机动车尾气致核酸分子氧化损伤效应研究

目的：通过研究燃汽油机动车尾气成分，及其对DNA分子的氧化损伤，在分子生物学水平上探讨燃汽油机动车尾气污染物的遗传毒性效应与机制。方法：以DNA加合物8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)作为DNA氧化损伤的生物学标志物，用高压液相色谱-电化学检测(HPLC-EC)法对污染物染毒后的DNA中8-OHdG进行定量检测，通过气质联用法(GC-MS)进行有机成分分析和原子吸收法(AAS)对其进行无机元素分析，并从化学组成成分的角度探讨DNA氧化损伤的分子机理。结果：在燃汽油机动车尾气的颗粒物和挥发性有机物中分别检出有机污染物85种和46种，无机元素7种和5种。燃汽油机动车尾气颗粒物和挥发性有机物均可在体外直接诱导DNA氧化损伤，尾气颗粒物还可诱导大鼠肺组织DNA氧化损伤，并呈现一定的剂量—反应关系。结论：污染物直接以及间接的氧化作用，源于含有醌类、多酚等具有自氧化作用的化合物，不需要任何生物活化系统，在体外就可产生大量的活性氧自由基，并在金属离子的催化作用下进攻DNA的碱基形成8-OHdG，产生遗传毒性效应，而8-OHdG是DNA氧化损伤的较好的效应标志物。     

烹调油烟雾诱导核酸氧化损伤及其标志物8-羟基脱氧鸟苷的形成机制

目的 了解烹调油烟雾的遗传毒性效应。方法 以核酸加合物8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)作为DNA氧化损伤的生物学标志物,用高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-EC)对烹调油烟雾染毒的小牛胸腺DNA及Wistar大鼠气管灌注染毒的肺组织DNA中8-OHdG进行定量检测,通过气质联用法(GC-MS)进行有机成分和原子吸收法(AAS)进行无机元素分析,并从混合污染物化学组成成分的角度推断了烹调油烟雾造成DNA氧化损伤的分子机理。结果体外试验表明烹调油烟雾的各组分,包括油烟冷凝物、残留油、油烟颗粒物、油烟挥发性有机物均能能诱导DNA氧化产生8-OHdG,产生量的顺序为残留油>冷凝物>油烟颗粒物>油烟挥发性有机物。体内实验结果表明油烟冷凝物可诱导大鼠肺组织DNA的氧化且具有剂量一反应关系和时间一效应关系。结论烹调油烟雾具有明确的遗传毒性,可诱导核酸氧化产生加合物8-OHdG,其机制可能是烹调油混合污染物中存在痕量金属离子如Fe2+、Cu2+等,介导Fenton反应生成羟自由基,直接进攻DNA造成氧化损伤。     

8-羟基脱氧鸟苷在污染物遗传毒性研究中的应用分析

遗传毒性是环境毒理学研究的一项重要内容。遗传毒性可以由多种环境因素,经过多种生物学机制引起。外源性氧化性环境污染物进入体内所致的生物大分子的氧化损伤,是遗传毒性最为常见的生物学机制之一。主要表现为生物大分子（如DNA、蛋白质、脂类等）氧化损伤,以及随之发生的结构和功能改变,并最终导致基因突变、细胞癌变及生成肿瘤等现象。8-羟基脱氧鸟苷（8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG）是活性氧自由基（如羟自由基、单线态氧等）攻击DNA分子中的鸟嘌呤第8位碳原子而产生的一种氧化性加合物,它是活性氧基团引起的DNA氧化损伤修饰产物之一。     

室内生源性多环芳烃对DNA的氧化损伤

目的 了解室内生活污染来源-吸烟和烹调产生的多环芳烃(PAHs)种类与含量，及其对DNA的氧化损伤作用。方法 采集室内烹调油烟和环境烟草烟雾颗粒物，应用气相色谱-质谱-选择性离子监测技术(GC-MS-SIM)定量检测10种PAHs，并用10种混合PAHs经气管灌注染毒大鼠，用液相色谱结合电化学检测技术测定肺组织DNA中产生的氧化损伤标志物8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)。结果 PAHs广泛存在于烹调油烟冷凝物、油烟颗粒物以及环境烟草烟雾的主、侧流烟雾颗粒物之中。其标准混合物可诱导大鼠肺组织DNA氧化损伤形成8-OHdG，并呈现明确的剂量一反应关系。结论 PAHs的遗传毒性效应和潜在的致癌效应存在着一条氧化代谢产生羟基自由基进攻核酸的途径。     

柴油废气成分分析及对DNA生物氧化能力

目的　通过研究以柴油为燃料的机动车尾气成分 ,及其对DNA分子的生物氧化能力 ,在分子生物学水平上探讨燃柴油机动车尾气污染物的遗传毒性效应与机制。方法　以DNA加合物 8-羟基脱氧乌苷 (8-OHdG)作为DNA氧化损伤的生物学标志物 ,用高压液相色谱 -电化学 (HPLC -EC)法对染毒后的DNA中 8-OHdG进行定量检测 ,通过气质联用法 (GC -MS)进行有机成分分析和原子吸收法 (AAS)对其进行无机元素分析 ,并从化学组成成分的角度探讨DNA分子生物氧化的分子机理。结果　在颗粒物和挥发性有机物中分别检出有机污染物 10 8种和 9种 ,无机元素 8种和 6种。尾气颗粒物和挥发性有机物均可在体外直接诱导DNA的氧化损伤 ,并呈现一定的剂量 -效应关系。结论　污染物直接的生物氧化作用 ,主要是污染物中存在多种痕量金属离子 ,如Fe2 、Cu2 等 ,在有氧环境中Fe2 可以逐渐被氧化为Fe3 ,同时O2 变为O· -2 。在Fe2 和Fe3 存在下 ,超氧阴离子O· -2 通过Fenton反应变为羟自由基·OH ,所产生的羟自由基可直接进攻DNA形成 8-OHdG ,或者进攻污染物中酚类化合物形成多酚或酮类化合物 ,这些化合物具有自氧化作用 ,进而生成大量的超氧自由基和羟自由基 ,构成循环反应。     

8-羟基脱氧鸟苷检测方法研究进展

8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxy-2′-deoxyguan ine,8-OHdG)是活性氧自由基(ROS)引起DNA氧化损伤修饰产物之一,其生成原因很多,主要是电离辐射、化学致癌物代谢活化及细胞正常新陈代谢过程产生大量ROS直接攻击DNA中的鸟嘌呤(dG),使脱氧鸟苷氧化为8-OHdG。8-OHdG可被机体特异性DNA修复酶剪切清除并经肾脏随尿排泄,其含量反映机体氧化损伤程度,既是个体接触标志物,又是效应标志物[1]。它一旦逃避了机体自身修复,就可能成为致突变、致畸、致癌的启动因子[2]。8-OHdG在体内稳定存在,为代谢终产物,且只能通过DNA氧化损伤途径形成,并可通…     

香烟侧流烟雾引起的DNA分子氧化损伤

目的：通过研究环境烟草烟雾的侧流烟雾（ETSS）对DNA分子的氧化损伤，探讨环境烟草烟雾（ETS）的遗传毒性效应及其分子机制。方法：以DNA加合物8－羟基脱氧鸟苷（8－OHdG)作为DNA氧化损伤的生物学标志物，用高压液相色谱－电化学检测（HPLC－EC）法对ETSS染毒后的DNA中8－OHdG进行定量检测，通过气质联用法（GC－MS）对香烟烟雾进行有机成分分析和原子吸收法（AAS）对其进行无机元素分析，并从化学组成成分的角度探讨DNA氧化损伤的分子机理。结果：ETSS的颗粒物和挥发性有机物污染物123种和84种，有机元素7种，其中醌类，多酚等化合物具有自氧化作用，不需要任何生物活性系统，在体外就可产生大量的活性氧自由基，并在金属的催化作用下进攻DNA的碱基，形成加合物8－OHdC ,结论：ETSS对DNA具有氧化能力，体现了直接的遗传毒性效应，8－OHdG是DNA氧化损伤较好的效应标志物。     

微囊藻毒素-LR致HT17细胞毒性及DNA损伤

目的 比较微囊藻毒素-LR(MCLR)对2种人肝癌细胞系HT17和HepG2的细胞毒性差异.研究MCLR对HT17细胞的氧化性DNA损伤作用.方法 应用四甲基偶氮噻唑蓝法检测细胞毒性,免疫酶染色法检测细胞内8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷(8-OHdG)水平.结果 当剂量增加到1μg/ml时,MCLR对HT17细胞产生明显的细胞毒性,细胞存活率随着处理剂量的增加而降低.HT17细胞对MCLR的敏感性高于HepG2细胞.非毒性剂量的MCLR处理HT17细胞引起8-OHdG水平升高,处理剂量与8-OHdG水平之间呈现剂量-反应关系.结论 HT17细胞对MCLR的毒性更敏感,可能与HT17细胞表达有机阴离子转运多肽(OATP)1B1有关.非毒性剂量的MCLR引起氧化性DNA损伤提示长期少量接触MCLR可能对人类健康产生潜在的远期危害.     

高效液相色谱-电喷雾串联质谱测定DNA氧化损伤标志物8-羟基-2'-脱氧鸟苷

8-羟基-2'-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHdG)是活性氧自由基(ROS)引起DNA氧化损伤修饰产物之一.8-OHdG可被机体特异性DNA修复酶剪切清除并经肾脏随尿排泄,其含量反映机体氧化损伤程度[1-4].因此测定机体8-OHdG含量可评估体内氧化损伤和修复程度,对研究衰老机制、癌发生机制、环境毒物等均有重要的意义.     

高效液相色谱-电喷雾串联质谱测定DNA氧化损伤标志物8-羟基-2'-脱氧鸟苷

8-羟基-2'-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHdG)是活性氧自由基(ROS)引起DNA氧化损伤修饰产物之一.8-OHdG可被机体特异性DNA修复酶剪切清除并经肾脏随尿排泄,其含量反映机体氧化损伤程度[1-4].因此测定机体8-OHdG含量可评估体内氧化损伤和修复程度,对研究衰老机制、癌发生机制、环境毒物等均有重要的意义.     

香烟烟雾成分分析及其对DNA生物氧化能力研究

目的 从分子生物学水平上探讨香烟烟雾对DNA的生物氧化能力。方法 以DNA加合物8－羟基脱氧鸟苷（8－OHdG）作为DNA氧化损伤的生物学标志物,用高压液相色谱－电化学检测法对香烟烟雾染毒后的DNA中8－OHdG进行定量。通过气质联用法（GC－MS）对香烟烟雾进行有机分成分析,用原子吸收法（AAS）对其进行无机元素分析。结果 香烟烟雾颗粒物和挥发性有机物可不同程度地引起DNA基损伤产生8－OHdG,并分别检出有机污染物157种和78种,无机元素5种。香烟烟雾对DNA的生物氧化能力主要是由于存在大量有机污染物,其中的醌类、多酚等化合物具有自氧化作用,在体外可产生大量的活性氧自由基,并在金属的催化作用下进攻DNA的碱基,形成加合物8－OHdG。结论 香烟烟雾对DNA具有氧化能力,香烟烟雾具有直接的遗传毒性效应。     

太阳光及紫外线照射诱发M13mp2噬菌体DNA产生8-OHdG的作用

[目的 ]分析太阳光及长波紫外线 (UVA)、中波紫外线 (UVB)诱发Ml3mp2噬菌体DNA产生 8 羟基脱氧鸟苷(8 OHdG)的作用。 [方法 ]用太阳光、UVA和UVB照射处理M13mp2噬菌体样品 ,以HPLC EC检测DNA样品中的 8 OHdG。 [结果 ] 1、3、5h太阳光照射和 2 8、10 8、2 5 0、5 0 0kJ/m2 剂量UVA照射后的样品均可检测到 8 OHdG含量增加 ,并存在与照射剂量的依存关系。较高剂量 (2 6kJ/m2 )UVB照射也可引起 8 OHdG的产生。 [结论 ]太阳光照射致M13mp2噬菌体突变作用中 ,存在DNA的氧化损伤 ,主要是UVA的作用。     

枸杞多糖对小鼠睾丸细胞DNA损伤的保护作用

目的 :研究枸杞多糖 (LBP)对过氧化氢 (H2 O2 )引起的睾丸细胞DNA氧化损伤的保护作用。方法 :睾丸细胞先用不同浓度LBP作用 1h ,再加入 10 0 μmol LH2 O2 共同培养 2 5min ,然后用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)测定DNA链断裂情况 ,分析LBP的抗氧化损伤作用。结果 :H2 O2 作用一定时间后 ,可引起DNA链断裂。 50、10 0、2 0 0、40 0 μg mL的LBP预处理可使H2 O2 染毒细胞的拖尾百分率和尾长显著降低。结论 :LBP本身没有致氧化损伤作用 ,它能够清除自由基 ,对氧化应激所致的睾丸细胞DNA损伤具有抑制作用     

太湖微囊藻毒素对细胞染色体及DNA损伤效应

目的研究太湖蓝藻水华中提取的微囊藻毒素的遗传毒性，探讨其对人类健康的潜在危害。方法应用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和单细胞凝胶电泳技术观察太湖蓝藻水华中微囊藻毒素引起的细胞染色体及DNA损伤效应。结果太湖蓝藻水华中提取的微囊藻毒素可明显增强小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核率，并呈一定的剂量-反应关系；单细胞凝胶电泳技术显示可诱导中国仓鼠(V79)细胞DNA单链断裂，DNA断裂分级及细胞损伤率明显高于对照组。结论太湖蓝藻水华中提取的微囊藻毒素具有明显的遗传毒性，对人类健康存在潜在的远期危害。     

Biological effects of man-made mineral fibers (II)--their genetic damages examined by in vitro assay.

In order to study and compare genetic damage induced by 10 kinds of man-made mineral fibers (JFM fibers) in cells, human lung epithelial cells (A549) were exposed to JFM fibers and chrysotile for 1 h, then single-cell gel electrophoresis (SCGE) assay was used to detect DNA strand breaks, DNA-DNA interstrand crosslink and the ability of DNA to repair; The results showed that all 10 JFM fibers could induce DNA strand breaks, DNA-DNA interstrand crosslinks and inhibit the ability of DNA repair. When human embryo lung (HEL) cells were exposed to JFM fibers and chrysotile for 24 h respectively, the chromosomal aberration was analyzed and the results showed that chrysotile and most of JFM fibers at 5.0 micrograms/ml induced structural chromosomal aberration, but all of these effects were lower than that of chrysotile and were different among them, suggesting that 10 types of JFM fibers had genotoxicity with different degree in vitro, but all of them were lower than that of chrysotile.     

Why and how should we measure oxidative DNA damage in nutritional studies? How far have we come?

Free radicals and other reactive species are constantly generated in vivo and cause oxidative damage to DNA at a rate that is probably a significant contributor to the age-related development of cancer. Agents that decrease oxidative DNA damage should thus decrease the risk of cancer development. That is, oxidative DNA damage is a "biomarker" for identifying persons at risk (for dietary or genetic reasons, or both) of developing cancer and for suggesting how the diets of these persons could be modified to decrease that risk. This biomarker concept presupposes that we can measure oxidative damage accurately in DNA from relevant tissues. Little information is available on whether oxidative DNA damage in blood cells mirrors such damage in tissues at risk of cancer development. Measurement of 8-hydroxylated guanine (eg, as 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine; 8OHdG) is the commonest method of assessing DNA damage, but there is no consensus on what the true levels are in human DNA. If the lowest levels reported are correct, 8OHdG may be only a minor product of oxidative DNA damage. Indeed, 8OHdG may be difficult to measure because of the ease with which it is formed artifactually during isolation, hydrolysis, and analysis of DNA. Mass spectrometry can accurately measure a wide spectrum of DNA base damage products, but the development of liquid chromatography-mass spectrometry techniques and improved DNA hydrolysis procedures is urgently required. The available evidence suggests that in Western populations, intake of certain fruit and vegetables can decrease oxidative DNA damage, whereas ascorbate, vitamin E, and beta-carotene cannot.     

甲醛对豚鼠肺巨噬细胞DNA的损伤作用

为探讨甲醛对呼吸道的遗传性损伤和致肺癌机理，本研究以豚鼠的肺巨噬细胞为研究材料，采用碱洗膜膜过滤荧光分析分析方法，检测了甲醛对ＤＮＡ的损伤作用，结果表明，甲醛的急性细胞毒性较小，但能引起豚鼠巨噬细胞ＤＮＡ－说明甲醛对呼吸系统深部的细胞具有遗传性损伤，并进一步证实了具有遗传毒性。