结核病实验室诊断技术进展

早期确诊和提高治愈率是控制结核病的现实目标。结核病患者的发现率基本反映结核病发病趋势,而诊断技术决定了结核病患者的发现率水平。当前对结核病的诊断主要依赖于患者的临床表现、影像学、病原学、血清抗体检测等技术。近年来,结核病实验室诊断技术发展突飞猛进,然而,目前很多实验室对于结核病的诊断仍停留在痰涂片镜检、痰结核菌培养及PPD皮试等传统方法。本文现将具有代表性的几项结核病实验室诊断新技术的进展进行综述。     

结核病的诊断

结核病是全身性疾病，以肺结核为多见，全身各系统、各器官均可被侵及。早期、正确地诊断、治疗结核病是防止结核病传播的基础。结核病的诊断是以细菌学为基础的综合诊断，必须全面了解患者的临床表现、X线影像学和实验室检查结果，进行综合分析，才能作出正确诊断。     

宏基因组二代测序在涂阴性肺结核中的应用进展

结核病是全球关注的公共卫生问题,全球结核病、耐药结核病以及结核病死亡患者数量都在逐步增长,我国结核病形势也不容乐观。早期准确的病原学诊断是有效治疗的关键,但我国大多数的结核患者病原学检测阴性或缺乏病原学检测结果。对于病原学阴性肺结核,目前常用病原学检测方法尚不能满足临床的诊断需求。宏基因组二代测序（m NGS）的出现颠覆了传统的结核杆菌检测技术以及病原学诊断方法,为涂阴性肺结核的早期诊断、早期治疗提供了可靠参考。本文就现有结核分枝杆菌（MTB）检测方法及国内外开展的m NGS技术的应用作一个综述,重点分析m NGS在涂阴性肺结核诊断中的优势与局限性,为临床有效诊断涂阴性肺结核及合理应用m NGS提供参考。     

我国结核病实验室诊断的现状

实验室诊断是结核病诊断、治疗及预防控制过程中所必需的。在结核病疫情严峻的发展中国家，痰涂片显微镜检查仍然是发现传染源的最主要手段。快速便捷、准确可靠、经济实用的实验室诊断方法有助于结核病患者的早期发现、治疗与管理。本文介绍结核病控制对结核病实验室的要求、结核病实验室诊断现状、以及我国的应对策略。     

非结核分枝杆菌的感染现状与诊断方法研究进展

近年来，随着检测技术的发展与环境的变化，非结核分枝杆菌（NTM）的检出率持续升高，在一些地区甚至超过了结核分枝杆菌(MTB)。NTM能感染人体各部位，其中以肺部感染最多见，称为NTM肺病。由于该病常引起与结核病相似的中毒症状，故常被误诊为结核病。然而两者的治疗方案不同。因此，快速准确地鉴定NTM对疾病的早期诊断和早期治疗十分重要。细菌涂片及细菌培养灵敏度低且耗时长。随着分子诊断技术的发展，实时荧光聚合酶链反应（RT-PCR）、DNA测序、基因芯片技术（GCT）等新兴技术被用于NTM的鉴定。本文主要就NTM的感染现状与诊断方法的研究进展作一综述。     

恒温扩增-防污染核酸试纸条在快速检测结核分枝杆菌中的应用

结核分枝杆菌生长缓慢的特性一直以来限制了临床对患者的诊断及治疗.为了快速准确的鉴定结核分枝杆菌,为临床诊断提供有效依据,基于分子生物学技术的诊断方法越来越多的应用到日常的检测工作中,核酸扩增试验(nucleic acid amplification tests,NAAT)自应用到结核病的早期诊断以来,就显示出其强大的优越性.它比培养的速度快,特异性高,可以在3～6 h得到结果[1].商业化的检测试剂盒更是让早期快速诊断结核病成为可能[2-3].高通量的自动检测装置虽然提高了工作效率,但是高昂的价格和实验室配套设备的要求限制了方法的使用范围.为更好的控制结核病的蔓延,临床迫切需求一种简便、快速、准确的结核病早期诊断方法.     

T.SPOT-TB试验与PPD试验对结核病患者诊断价值相关性比较

结核病严重危害人类健康,全世界结核病每年发病830万人,死亡180万人[1]。开展早期、快速、准确诊断结核病的实验技术十分重要。结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）是传统结核病辅助诊断试验,PPD是多种抗原混合物,卡介苗、环境中分枝杆菌及致病性结核分枝杆菌所共有,诊断特异性、敏感性较低。     

PCR技术在结核病诊断中的临床意义

PCR技术自1989年用于结核病研究以来已有Ic年。人们对PCR在结核病诊断上的意义仍有很大分歧，大体有三种类型的看法：正、PCR是特异、敏感和快速的结核病诊断方法，并提出以PCR阳性为菌阳、活动性结核病的标准。2、PCR技术缺乏敏感性、特异性和可信性，至少目前不可作为诊断和判断疗效的标准［1-4］。3、PCR技术可发展成结核病可信的快速诊断方法，但技术有待完善，还有许多问题需要阐明，目前可以在限定的范围内作为结核病综合诊断的方法之一［5-11］。1.结核病诊断还没有金标准结核病的诊断仍是综合诊断，至今没有找到一个既无假…     

结核病免疫学实验室检测技术新进展

每年有数百万人罹患结核病,早期诊断和治疗可以避免大量患者死亡。当前结核病的诊断方法存在许多局限性。对于所有形式的结核病,即肺结核、肺外结核、结核病-艾滋病联合感染和潜伏结核感染等,仍然缺乏可靠和准确的快速诊断技术。随着基础免疫学的发展和多学科诊断技术的交融,具有简单、快速和低成本等优势的结核病免疫学实验室检测技术不断出现。该文主要回顾近几年国内外结核病免疫学实验室检测新技术,包括以结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)为代表的体外免疫检测技术、重组蛋白体内皮试试验为代表的体内免疫检测技术以及采用多学科交融手段检测结核分枝杆菌特异性抗原(TBAg)的体液免疫检测技术等。     

结核病实验室诊断及存在的难题

对结核病早期、有效的诊断,特别是对涂阴结核病和MDR-TB的诊断,是全球结核病控制工作的优先领域.传统实验室检测方法由于耗时长等原因,不能满足对MDR-TB进行早期诊断和及时有效治疗的需要.近年来涌现了许多有应用前景的新诊断技术,有望给结核病特别是耐药结核病的诊断带来新的机遇.

Abstract：

The early and effective diagnosis is crucial to efficacious treatment of pulmonary tuberculosis, especially for smear negative cases and MDR-TB, and is one of the priorities of global tuberculosis control and prevention. The traditional methods which have been used for decades of years, show many well-known drawbacks, in terms of fast speed and time consuming. Recently, some new promising diagnostic methods emerged, which have been expected to optimize the diagnosis of tuberculosis, especially for MDR-TB.     

肺结核病的诊断和控制耐药结核的新思维

结核病是严重危害公众健康的全球性公共卫生问题,我国是全球第二大结核病高负担国家。第5次全国流行病学调查显示,我国约5.5亿人口曾感染结核,每年新发生活动性肺结核110万~150万例,其中传染性肺结核65万例。耐药结核仍较严重,耐多药结核(MDR-TB)患者12万例,耐多药(MDR)率6.8%,广泛耐药(XDR)率2.1%。对结核病的早期诊断、规范治疗及控制耐药结核是降低结核发病率的有效措施。由于临床表现不典型、潜伏性结核感染及结核耐药问题导致我国的结核疫情防控形势依然严峻。实验室检查是诊断结核的重要手段,常用的实验室诊断技术包括细菌学检测方法、分子生物学检测方法、免疫学检测方法等。在治疗过程中,需要考虑的重要因素有:早期正确的治疗、督导用药及耐药的尽早发现。对于MDR-TB患者治疗期间,建议使用痰涂片和培养检查进行治疗监测。对耐药结核患者应及早异烟肼和利福平耐药基因检测及快速结核菌培养药物敏感性试验。     

基因芯片技术检测结核杆菌耐药的临床研究

目的 评价基因芯片技术在结核病防治工作中对结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药性的检测效果.方法 利用基因芯片技术对38例涂阳肺结核患者的痰标本进行异烟肼和利福平耐药检测,以传统罗氏药敏试验为金标准,对基因芯片技术的检测效果进行评价.结果 在38例菌株中,用基因芯片法进行异烟肼耐药基因检测,与罗氏药敏的符合率为84.2％,对38例进行利福平耐药基因检测,符合率为89.5％.结论 基因芯片检测异烟肼和利福平的耐药性与罗氏药敏方法具有很好的一致性,具有简便快速,灵敏度高,特异性好的优点,对临床及时准确进行抗结核治疗具有重要意义.     

肺结核影像学诊断进展

立足于肺结核的基本影像学特征,重视影像表现不典型的肺结核、耐药肺结核、免疫低下患者的肺结核及伴发病变等的诊断及鉴别诊断的研究,合理应用和评价影像诊断新技术,秉承征象与临床相结合的综合分析仍是肺结核影像诊断的重要方法。     

183例胸水标本两种方法结核分枝杆菌培养及药物敏感性检测结果分析

目的 探讨胸膜炎患者胸水两种方法培养结核分枝杆菌的效果和耐药情况,为临床诊断和治疗提供依据.方法 分别采用BacT/ALERT@3D系统和罗氏法进行结核分枝杆菌的培养及药物敏感性测定.结果 183例胸水标本采用两种方法检测,共38例培养阳性,总阳性率20.8%;3D法优于罗氏法(P<0.05),25株菌株药敏测定结果有3株出现耐药,耐药率为12%.结论 3D法在胸水培养方面优于罗氏法,但两种方法联合检测能提高效率.胸水结核菌培养和药敏实验可为临床诊断和指导用药提供重要依据.     

耐多药结核分枝杆菌临床株耐药性分析

目的探讨贵阳市肺科医院住院结核病患者中的耐药情况,为临床诊断和治疗耐多药结核病（MDR-TB）提供可靠的科学依据。方法对2004年1月至2009年8月期间住院患者的临床分离株进行菌型鉴定后,进行药物敏感性试验,分析不同类型结核病患者的耐药情况。结果 2 318株结核分枝杆菌总的耐多药率为23.8%,初始耐多药率为12.1%,获得性耐多药率为63.8%。结论贵阳市肺科医院收治的结核病患者耐药率较高,应尽快加强耐药结核病患者的防治工作,减少和避免MDR-TB患者的产生。     

淋巴结结核并发丘疹坏死性结核疹一例

丘疹坏死性结核疹（PNT）是身体对其他部位（皮肤）结核分枝杆菌感染的一种免疫、过敏反应,其早期极易与变应性血管炎混淆,可依据病理活组织检查（活检）鉴别,也可行PCR检测明确诊断。该文报道1例淋巴结结核、药物性肝损害合并PNT患者,以双足皮疹为首发表现,予脱敏、对症治疗效果欠佳,追问患者既往病史并行病理活检后临床确诊。调整抗结核药及对症治疗,门诊随访未见新发皮疹。该例提示,对疑有结核分枝杆菌感染并发皮疹的患者,应警惕并发各型皮肤结核及其鉴别诊断,对无法耐受常规治疗的患者应合理调整药物配伍方案。     

News in Brief

Infection with HIV is one of the strongest drivers of the incidence of tuberculosis. The use of potent combination antiretroviral therapy (cART) decreases the incidence of tuberculosis in HIV-infected patients. Data on whether this effect differs by type of initial antiretroviral drug or regimen are scarce. Studies are often not designed to address the potential effect of cART on tuberculosis incidence, and/or the diagnosis of tuberculosis is poorly validated. The paucity of data precludes recommendation on the initial cART regimen with respect to the incidence tuberculosis. Other well-described intervention like preventive therapy, and early start with cART are likely to have more effect on the prevention on tuberculosis in HIV-infected patients.     

26例中晚期不典型肾结核临床诊治分析

目的探讨中晚期不典型肾结核的诊断和治疗方法。方法回顾性分析26例中晚期不典型肾结核患者的临床资料。结果 19例行肾切除手术的患者,术后病理均确诊为肾结核。2例行膀胱扩大术的患者,术后容量达到180～220 mL。手术及药物治疗的患者腰部不适及排尿疼痛、尿频症状均明显改善。结论尿液检查联合多种影像学检查可以提高肾结核的确诊率,抗痨治疗和患侧肾切除术能够明显改善排尿异常表现。     

女性生殖器结核15例临床诊断与治疗

目的对女性生殖器结核临床诊断与治疗的体会进行总结。方法回顾性分析2003年6月至2008年6月期间在我院收治的15例女性生殖器结核患者的临床资料,通过妇科检查、B超检查、X线检查、诊刮、宫颈活检、红细胞沉降率等方法进行临床诊断。结果10例患者给予常规药物治疗,5例进行手术治疗,患者恢复良好。结论女性生殖器结核患者要通过全方面的检查进行确诊,治疗主要采用抗结核常规药物治疗和手术治疗,可以获得较满意的效果。     

DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用

目的探讨DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用。方法采用抗酸杆菌涂片法、罗氏培养法、比例法药敏试验及DNA微阵列芯片法对海南地区的2069例疑似结核病患者痰标本进行检测,并对结核分枝杆菌检出率、耐药性及耐药基因突变特征进行分析。结果DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌检出率为明显高于罗氏培养法和抗酸杆菌涂片法(P<0.05)。以比例法药敏试验为金标准,DNA微阵列芯片法与比例法药敏试验检测耐利福平、耐异烟肼结核分枝杆菌及耐多药结核分杆菌的效果比较,差异有统计学意义(P<0.05),但均有较好的一致性(Kappa≥0.75)。耐利福平基因突变类型主要为rpoB531(C→T),占56.3%;耐异烟肼基因突变类型主要为KatG315(G→C),占84.6%;耐多药结核分杆菌基因突变类型主要为rpoB531+KatG315占54.6%。结论DNA微阵列芯片法可快速、准确地对海南地区疑似结核病患者的痰标本进行结核分枝杆菌及其耐药性检测,从而指导临床用药。