邻苯二酚和邻苯二醌与牛血清白蛋白的相互作用

[目的]探讨邻苯二酚、邻苯二醌与血清白蛋白的相互作用。[方法]在Na2HPO_40.05 mol/L-NaH_2PO_4 0.05 mol/L-NaCl 0.10mol/L缓冲溶液(pH 7.30)中研究牛血清白蛋白与邻苯二酚结合后在L-胱氨酸修饰金电极上的电化学行为。[结果]牛血清白蛋白与邻苯二酚结合后可使邻苯二酚的氧化峰峰电位正移、邻苯二醌还原峰电位负移,且峰电流减小,根据邻苯二酚、邻苯二醌和血清白蛋白结合的饱和度,计算邻苯二酚、邻苯二醌和血清白蛋白结合比分别为71:1和115:1。[结论]牛血清白蛋白与邻苯二酚以较强的氢键结合,邻苯二醌与血清白蛋白结合力较大。     

用灿烂甲酚蓝测定人血清白蛋白的电化学研究

目的：建立一种测定人血清白蛋白的新方法。方法：线性扫描伏安法。结果：在pH6．5的B—R缓冲溶液中，灿烂甲酚蓝在-0．18V（vs．SCE）有一个良好的二阶导数伏安还原峰，加入人血清白蛋白（HSA）后，其峰电位负移且峰电流下降，峰电流的下降值同HSA的浓度呈良好的线性关系，用于实际人血清样品的测定，结果令人满意。结论：该方法具有较好的选择性、较宽的线性范围和较高的灵敏度，适用于临床检测。     

溴乙锭与脱氧核糖核酸的相互作用

[目的]探讨溴乙锭（EB）与脱氧核糖核酸（DNA）的相互作用。[方法]在0．05mol／LNa2HPO4-0．05mol/LNaH2PO4-0.10mol／LNaCl缓冲溶液（pH=7．30）中，研究EB在核苷三磷酸修饰电极及单链DNA（ssDNA）和双链DNA（dsDNA）修饰电极上的电化学行为。[结果]在dsDNA和ssDNA均可使EB的氧化峰负移，核苷三磷酸对峰电位改变与dsDNA和ssDNA相似。[结论]EB与DNA的相互作用是EB接受碱基的电子形成П-П共轭造成的。     

有机紫外防晒剂与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱特征

目的研究三种常见的有机紫外防晒剂与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的荧光光谱特征。方法利用荧光光谱法,观察扫描温度分别为300、305、310 K时牛血清白蛋白与不同浓度的有机紫外防晒剂相互作用的荧光光谱,判断荧光猝灭类型并分析结合能力和结合模式。结果三种有机紫外防晒剂均对BSA有荧光猝灭作用,猝灭类型为静态猝灭;均与BSA有较强的结合能力,结合能力大小为丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷(BM-DBM)二苯酮-3(BP-3)3-(4-甲基苯亚甲基)-樟脑(4-MBC),且均与BSA可形成一个结合位点;BP-3和4-MBC与BSA之间的主要作用力类型为氢键和范德华力,BM-DBM与BSA之间的主要作用力类型为疏水作用力。结论 BP-3、4-MBC、BM-DBM均能与牛血清白蛋白发生结合作用。     

对硫磷人工抗原合成及其鉴定

目的 制备对硫磷人工抗原和抗血清，为建立酶联免疫吸附法提供技术储备。方法 还原对硫磷硝基成为氨基，合成半抗原氨基对硫磷；重氮化偶联大分子载体牛血清白蛋白制备人工抗原；免疫新西兰白兔。进行多抗制备。结果 合成的半抗原核磁共振图谱鉴定结果为6：6．9～7(m，2H，CH2)6．4～6．5(m，2H，CH2)4．1～4．2(q，4H-CH2)3．4(s，2H，NH2)1．3～1．4(t，6H，CH3)；氨基对硫磷与牛血清白蛋白的结合比为35～36：1；抗血清经间接酶联免疫吸附法检测，效价达1：128000，双向免疫扩散实验测得抗血清与人工抗原形成沉淀；间接竞争酶联免疫吸附法测得抗血清对对硫磷最低抑制浓度为0．16ng／mL；经间接酶联免疫吸附法检测人工抗原与羊抗人血清、兔抗人血清、正常兔血清无交叉反应。结论 合成对硫磷半抗原及人工抗原纯度高、结合比高。具有较好的免疫原性。     

尿样中氢醌和邻苯二酚的高效液相色谱-电化学检测法

目的建立一种快速灵敏测定尿样中苯代谢物氢醌和邻苯二酚含量的高效液相色谱一电化学检测方法（HPLC-ECD）。方法采用ODS柱，流动相为pH5．84缓冲液（0．01mol／L柠檬酸三钠和0．01mol／L磷酸氢二钠：乙腈（V／V）=850：150的溶液，流速1．0ml／min；结合气质联用技术，复核结果的可靠性。结果氢醌和邻苯二酚线性范围分别为1．25～100．20ng/ml和2．50-125．20ng/ml，氢醌和邻苯二酚回收率分别为92．3％-102．4％和90．6％-106．2％，氢醌和邻苯二酚检出限的为0．05ng／ml。结论方法简单、快速、灵敏，可用于尿样中苯代谢物氢醌和邻苯二酚的检测。     

固体汞合金电极电位溶出法测定血铅

目的：研究了银汞合金电极的制作方法及结合静止微分电位溶出法测定血清中痕量铅的方法。方法：在pH=5的HAc-NaAc缓冲液中，富集电位为-0．8V，Pb^2 在汞合金电极表面还原成金属沉积在电极上。结果：以溶解氧做氧化剂，沉积在电极上的铅产生溶出，于-0．49V出现一个灵敏的电位溶出峰，富集时间td=60s时，Pb^2 测定的线性范围为0～100μg／L。当电沉积时间为2min时，检出限为0．22μg／L。结论：利用此方法测定了血清样品中的铅含量。     

热休克蛋白70的表达在二氢二醇环氧苯并(a)芘致DNA损伤中的作用

目的研究热休克蛋白70（HSP70）的表达在二氢二醇环氧苯并（a）芘（BPDE）致DNA损伤中的作用。方法培养人肺腺癌A549细胞，作如下处理：BPDE染毒组：以不同剂量BPDE（0、2、4、8pmol／L）染毒2h；预热＋BPDE染毒组：细胞预热（42℃ 2h，37℃恢复1h）后，再按BPDE染毒组同样处理，各组均设溶剂对照。采用单细胞凝胶电泳技术和Western blot法分别检测DNA的损伤情况与HSP70的表达。结果（1）DNA损伤情况：BPDE染毒组DNA损伤程度随BPDE染毒剂量增加而加强，明显高于溶剂对照，差异有统计学意义（P〈0．01），组间相互比较，差异亦有统计学意义（P〈0．01），且DNA损伤程度与BPDE染毒剂量呈正相关（r=0．96，P〈0．05）；预热＋BPDE染毒组DNA损伤程度随BPDE染毒浓度递增，与预热溶剂对照相比，差异有统计学意义（P〈0．01），但在4、8μmol／L的BPDE组间，DNA损伤程度的差异无统计学意义（P〉0．05），与BPDE染毒组比较，各剂量下DNA损伤程度均明显增加。（2）HSP70表达情况：BPDE染毒组在2、4μmol／L的BPDE作用时HSP70表达逐渐升高，与溶剂对照相比，差异有统计学意义（P〈0．05），但在8μmol／L剂量时，表达下调，与溶剂对照组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）；预热＋BPDE染毒组HSP70的表达均比预热溶剂对照明增加，在4μmol／L的BPDE作用时HSP70表达水平最高，与2、8μmol／L剂量组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。与BPDE染毒组相比，各剂量下HSP70的表达水平均明显增加，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论HSP70对BPDE所致A549细胞DNA损伤的保护作用并不明显。     

缬沙坦联合灯盏花素对糖尿病肾病微量蛋白尿及血清CRP的影响

目的探讨缬沙坦联合灯盏花索对早期糖尿病肾病的疗效。方法采用随机平行分组对照方法将40例患者分为2组，对照组20例，给予缬沙坦80mg／d；治疗组20例，在缬沙坦80mg／d的基础上给予灯盏花索50mg加入生理盐水250ml静脉滴注，1次／d，2周为一疗程，每3个月给予一个疗程治疗，共治疗18个月。观察治疗前后尿白蛋白排出量、血清C反应蛋白（CRP）水平的变化。结果2组治疗后尿白蛋白排出量均下降（P〈0．05），且2组间差异有统计学意义（P〈0．01）。疗程结束后，治疗组血清CRP降低（P〈0．01），对照组降低不明显（P〉0．05），2组间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论缬沙坦与灯盏花素联合应用减少尿白蛋白排出量、降低血清C反应蛋白水平。对早期糖尿病肾病有更强肾脏保护作用。     

单扫描极谱法测定保健食品中绿原酸

目的：研制保健食品中绿原酸的单扫描极谱分析方法。方法：样品经50％的乙醇溶液超声振荡提取，用拟定的极谱方法进行定性和定量测定。结果：在0．05mol／L硫酸、3mol／L亚硝酸钠、2．5mol／L乙酸钠介质中，绿原酸峰电位为-172mV（vs．SCE）。绿原酸浓度在5．0-50．0μg之间线性关系良好，相关系数r=0．9993，回归方程Y：2．6923X-2.365。相对标准偏差（RSD）为1．70％～6．66％（n=5）。加标回收率为94．3％～97．1％（n=9）。结论：建立的单扫描极谱法测定绿原酸的方法简便快速、结果准确、灵敏度高、仪器廉价、易于普及。适于实验室检测样品中绿原酸的含量。     

DNA聚合酶β表达水平对苯代谢物氢醌致细胞凋亡及线粒体膜电位的影响

目的 探讨DNA聚合酶β(DNA polymerase beta,polβ)对氢醌(HQ)所致细胞凋亡的影响及其可能的分子机制.方法 以polβ野生型(polβ+/+)、polβ缺陷型(polβ-/-)及polβ高表达型(polβoe)小鼠胚胎成纤维细胞为研究对象,以不同浓度的HQ溶液染毒后,采用流式细胞术分别检测HQ对细胞凋亡和线粒体膜电位( △Ψm)的影响,试剂盒法测定细胞内活性氧(ROS)和羟自由基(·OH)含量;化学发光法分析细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力.结果 与对照组相比,各染毒组凋亡细胞率和△Ψm降低的细胞比例明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).与polβ+/+细胞比较,20.00、40.00、80.00 μmol/L染毒组polβ-/-细胞凋亡率明显增高,10.00、20.00、40.00、80.00μmol/L染毒组polβ oe细胞凋亡率明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与polβ+/+细胞(20.60％±0.57％、37.95％+0.64％、44.50％±1.27％、57.55％+1.06％)比较,10.00、20.00、40.00、80.00 μmol/L染毒组polβ-/-细胞△Ψm降低的细胞比例(33.60％±1.55％ 、46.05％±1.77％、52.75％±2.05％、75.20％±0.56％)明显增高,polβ oe细胞△Ψm降低的细胞比例(16.05％±1.20％、29.80％±1.21％、35.15％±1.06％、53.80％±0.85％)明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与polβ+/+细胞比较,各染毒组polβ-/-细胞产生的荧光强度明显增高,polβ oe细胞的荧光强度明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与polβ+/+细胞相比,20.00、40.00 μmol/L染毒组polβ-/-细胞内·OH含量明显增高,polβ oe细胞内·OH含量明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).在相同浓度HQ染毒剂量下,polβ-/-细胞内SOD和GSH-Px消耗最快,polβ oe细胞内的SOD和GSH-Px消耗速度缓慢.结论 HQ可诱导细胞产生ROS,降低△Ψm,从而介导凋亡的发生;polβ可以帮助细胞对抗ROS的产生,降低线粒体发生去极化的几率,从而对HQ介导的凋亡起到一定的保护作用.     

体外培养下氢醌诱导骨髓单个核细胞凋亡的研究

目的　研究体外培养条件下氢醌对正常人骨髓单个核细胞凋亡的影响 ,以探讨苯对造血干细胞的毒性作用。方法　采用HT荧光染色观察形态学变化 ,DNA片段的琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 ,流式细胞术ANNEXINV FITC加碘化丙啶 (PI)双染定量检测细胞凋亡率和坏死率的变化。结果　加入不同浓度氢醌培养 6h后出现细胞核荧光强度增强 ,核着色加深 ,核着色不均匀 ,染色质浓集 ,染色质沿核周分布现象。DNA电泳呈典型的“梯形”条带。流式细胞术检测结果发现 ,不同浓度氢醌作用后 ,细胞凋亡率明显高于空白对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。随着浓度的增加 ,凋亡率明显增加 ,氢醌诱导细胞凋亡的最佳浓度为 5 0 μmol L ,而当氢醌浓度为≥ 75 μmol L时 ,细胞坏死率明显增高。浓度为 5 0 μmol L氢醌诱导的细胞凋亡 ,随着作用时间的延长 ,凋亡率明显增高 ,作用 10h达高峰 ,而后细胞凋亡率下降 ,坏死率增加。结论　体外培养条件下氢醌能诱导骨髓单个核细胞凋亡 ,并存在量 -效与时 -效关系。     

hOGG1基因低表达对氢醌的细胞毒性及遗传毒性的影响

目的 探讨hOGG1基因低表达对氢醌(HQ)的细胞毒性及遗传毒性的影响.方法 0、5、10、20、40、80μmol/L浓度的(HQ)染毒A549细胞和hOGG1基因低表达的A549-R细胞,噻唑蓝比色法检测2种细胞存活率,荧光法测定2种细胞内活性氧(ROS)含量,微核试验分析2种细胞染色体损伤,彗星试验观察细胞的DNA损伤和修复.结果 随着HQ染毒浓度的增加,2种细胞的存活率均下降,A549-R细胞和A549细胞IC50分别为160.49和228.42 μmol/L,且差异有统计学意义(P＜0.05).0、5、10、20、40、80 μmol/L HQ染毒组A549-R细胞ROS含量、微核率均明显高于A549细胞,差异有统计学意义(P＜0.05);各浓度HQ染毒组A549-R细胞拖尾率和Olive尾距(OTM)值均明显大于A549细胞,并有剂量-反应关系,差异有统计学意义(P＜0.05).hOGG1基因低表达的A549-R细胞比A549细胞对HQ引起的DNA损伤修复更慢,修复2.0 h后才出现拖尾率和OTM值的明显降低,3.0 h后仍未完全修复.结论 氧化损伤可能是HQ毒作用的机制之一,hOGG1基因低表达可增加A549-R细胞对HQ的敏感性.     

17β-雌二醇对子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞趋化因子SDF-1/CXCR4 mRNA及蛋白表达的影响

目的:研究17β-雌二醇(17β-E2)对子宫内膜异位症(内异症)患者在位子宫内膜间质细胞趋化因子SDF-1及其受体CXCR4 mRNA及蛋白表达的影响,探讨SDF-1/CXCR4在介导雌激素促进内异症发生发展中的作用。方法:体外分离、培养内异症患者在位子宫内膜间质细胞。用不同浓度17β-E2(10-12、10-10、10-8、10-6mol/L)处理子宫内膜间质细胞12 h、24 h、48 h,利用实时定量PCR(RQ-PCR)技术和流式细胞检测技术分别检测17β-E2处理前后子宫内膜间质细胞趋化因子SDF-1/CXCR4 mRNA及蛋白的表达;同法分析雌激素受体拮抗剂IC I182780(10-8mol/L)对SDF-1/CXCR4 mRNA和蛋白表达的影响。结果:不同浓度17β-E2作用于内异症患者在位子宫内膜间质细胞12 h、24 h、48 h后,SDF-1/CXCR4 mR-NA及蛋白的表达呈不同程度增高,于10-10mol/L作用最明显。雌激素受体拮抗剂IC I182780能明显抑制17β-E2的作用。结论:雌激素可促进内异症患者在位子宫内膜间质细胞SDF-1/CXCR4 mRNA及蛋白的表达,SDF-1/CXCR4可能参与了内异症的形成和发展。     

兴奋性氨基酸递质系统在乐果诱导星形胶质细胞活化中的作用

目的 探讨兴奋性氨基酸递质系统在乐果染毒后皮层星形胶质细胞活化中的作用.方法 新生大鼠皮层神经细胞传代3次后获得纯化的星形胶质细胞,分别加入终浓度为10-6、10-5、10-4mol/[的乐果,并用50和100 μmol/LN-甲基-N-天门冬氨酸(NMDA)受体非竞争性拮抗剂MK801对10-4mol/L乐果染毒组进行干预.染毒后48 h收获细胞,高效液相色谱-荧光检测系统(HPLC-FLD)方法测定细胞内兴奋性氨基酸递质含量,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测NMDA受体NR2B亚基、谷氨酸(Glu)、谷氨酸转运体(GLT-1)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及S100β mRNA表达的变化,免疫荧光染色半定量检测GFAP以及S100β的蛋白表达.结果 各剂量染毒组GLASTmRNA表达下降为对照组的67.8%、68.6%和76.2%,差异有统计学意义(P＜0.05);10-4 mol/L染毒组Glu、Asp含量与对照组相比明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01);与对照组比较,10-4mol/L染毒组GFAP和10-5mol/L染毒组S100βmRNA表达,10-5、10-4mol/L染毒组GFAP蛋白表达,10-4mol/L染毒组S100β蛋白表达明显上升,差异有统计学意义(P＜0.01),有剂量依赖趋势.对10-4mol/L染毒组给予50和100 μmol/L MK801干预后,GLT-1、GLAST mRNA表达水平较10-4 mol/L染毒组明显上升,差异有统计学意义(P＜0.01),NR2B mRNA表达进一步升高,与未干预前相比,差异无统计学意义(P＞0.05),但均明显高于对照组水平,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);100 μmol/L MK801干预后,Glu的含量升高为10-4mol/L染毒组的1.81倍,差异有统计学意义(P＜0.01);50和100μmol/LMK801干预后,GFAP转录及蛋白水平较未干预前明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01),50 μmol/L干预组S100β蛋白表达水平仍然高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 乐果对兴奋性氨基酸递质系统的影响参与了星形胶质细胞的活化;NMDA受体阻断剂MK801有助于控制星形胶质细胞胶质化.

Abstract：

Objective To study the involvement of excitatory amino acid system in astrocytes activation caused by dimethoate. Methods Pure-cultured astrocytes were gained by three passages from primary cultured rat nerve cells, then treated with 10-6,10-5,10-4 mol/L dimethoate for 48 h, 50 μmol/L and 100μmol/L MK801, a NMDA receptor blocker, was used to intervene the effects induced by 10-4 mol/L dimethoate.HPLC-FLD was utilized to measure the concentrations of excitatory amino acid (EAA), RT-PCR was used to detect the expression levels of NR2B, GLT-1, GLAST, GFAP and S100β mRNA, and immunofluresence staining method was applied to measure the expression levels of GFAP and S100β proteins. Results The expression levels of GLAST mRNA in all exposure groups were 67.8% ,68.6% and 76.2% of control level,respectively, which were significantly lower than that of control group (P＜0.05); The concentrations of EAA significantly decreased in 10-4 mol/L dimethoate group, as compared with control group (P＜0.01); the expression levels of GFAP mRNA in 10-4 mol/L dimethoate group, of S100β mRNA in 10-5 mol/L dimethoate group, of GFAP protein in 10-4 mol/L and 10-5 mol/L dimethoate groups and S100β protein in 10-4 mol/L dimethoate group were significantly higher than those in control group (P＜0.01). The expression levels of GLT-1 and GLAST mRNA in 10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μ mol/L MK801 groups increased significantly, as compared with 10-4 mol/L dimethoate group (P＜0.01), the expression levels of NR2B mRNA in 10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μmol/L MK801 groups increased significantly, as compared with control group (P＜0.05 or P＜0.01); the concentration of Glu in 10-4 mol/L dimethoate plus 100 μ mol/L MK801 group increased significantly, as compared with 10-4 mol/L dimethoate group (P＜0.01); the expression levels of GFAP mRNA and protein in10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μ mol/L MK801 groups decreased significantly (P＜0.01); S100β protein expression level in 50 μ mol/L MK801 intervention group was significantly higher than thatl in control group (P＜0.01). Conclusion Excitatory amino acid system involved in astrocytes activation caused by dimethoate. MK801 was useful to control astrocytes gliosis.     

胆红素对早产儿T淋巴细胞功能的影响及相关机制的研究

目的:探讨不同血清胆红素水平对早产儿T淋巴细胞功能的影响。方法:应用流式细胞仪法测定不同胎龄、不同胆红素水平下CD4+、CD8+、白细胞介素-4(Interleukin-4、IL-4)、肿瘤坏死因子-γ(Tumor necrosis factor-γ、IFN-γ)、Fas基因表达。结果:①胎龄≥32周早产儿的CD4+和CD8+表达量>胎龄<32周早产儿,差异有统计学意义(P<0.05)。②不同胆红素浓度对早产儿T淋巴细胞功能的影响:胆红素153.9～220.6μmol/L组和胆红素>220.6μmol/L组早产儿CD4+的表达水平均明显低于无黄疸组和胆红素<153.9μmol/L组(P<0.05);胆红素>220.6μmol/L组早产儿CD8+的表达水平低于无黄疸组、胆红素<153.9μmol/L组和胆红素153.9～220.6μmol/L组(P<0.05)。IL-4的表达量与4组比较无差异(P>0.05)。IFN-γ的表达量于胆红素153.9～220.6μmol/L组和胆红素>220.6μmol/L组均<无黄疸组和胆红素<153.9μmol/L组(P<0.05)。Fas基因的表达量于胆红素153.9～220.6μmol/L组和胆红素>220.6μmol/L组均高于无黄疸组和胆红素<153.9μmol/L组(P<0.05)。结论:①胎龄是影响早产儿T淋巴细胞功能的重要因素之一,胎龄越小免疫功能越低。②黄疸对早产儿T淋巴细胞功能有显著抑制作用,随胆红素浓度的增加抑制作用越显著,同时Fas基因的表达量逐渐增高,提示此种抑制作用与淋巴细胞凋亡增多有关。     

广西壮汉族正常足月新生儿血清胆红素的测定研究

目的:确定广西壮汉族正常足月新生儿生后1～7天血清胆红素的动态变化值,为临床诊断奠定基础。方法:①用微量法测定广西地区正常足月新生儿生后第1～7天血清胆红素,分别记录其测定值。②应用生化法与微量法相结合方法,即用静脉生化法与微量法同步测定72例新生儿血清胆红素,用微量法测定值代入生化法与微量法测定值建立的直线回归方程,获取胆红素校正值。结果:①正常足月新生儿1～7天血清胆红素分别为(72.17±14.39)μmol/L、(128.93±28.92)μmol/L、(174.69±33.07)μmol/L、(186.46±34.23)μmol/L、(174.25±37.60)μmol/L、(154.49±42.76)μmol/L、(141.41±44.97)μmol/L,平均峰值(186.46±34.23)μmol/L。②壮族新生儿血清胆红素平均峰值比汉族略高,壮汉两族1～7天血清胆红素的比较差异无统计学意义(P>0.05)。③微量法与静脉生化法胆红素测定值有高度的相关性,两法测定值比较差异无统计学意义(P>0.05);校正后的胆红素值与静脉生化法测定值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:广西地区壮汉族足月新生儿生理性黄疸生后1～7天血清胆红素动态变化值,为临床对新生儿黄疸的合理干预提供科学依据。生化法与微量法相结合的方法测定血清胆红素准确、便捷,是一种动态监测新生儿血清胆红素的理想方法。     

Hcy对脐静脉内皮细胞eNOS和caveolin-1表达影响

目的研究不同浓度同型半胱氨酸(Hcy)对静息和钙离子导体(A23187)激活状态下人脐静脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和小凹蛋白-1(caveolin-1)mRNA和蛋白表达的影响。方法人脐静脉内皮细胞(HU-VECs)随机分4组:对照组、Hcy组(20、50、100、300μmol/L)、A23187(1μmol/L)组及上述浓度Hcy分别与A23187(1μmol/L)共同孵育组,测定各组eNOS和caveolin-1蛋白及mRNA表达情况,同时检测各组一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量和eNOS、超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果对照组caveolin-1蛋白表达为1.13,Hcy各组该蛋白为0.21～2.05,呈浓度依赖性增高,差异有统计学意义(F=30.163,P<0.05);各组eNOS mRNA表达为1.80～2.08,差异无统计学意义;对照组eNOS活力和NO含量分别为1.20 U/mL和122.41μmol/L,Hcy组eNOS活力和NO含量分别为0.65～0.74 U/mL和65.33～98.91μmol/L,均呈浓度依赖性降低,差异均有统计学意义(F=5.12、18.91,P<0.05)。结论 Hcy可能通过增强caveolin-1蛋白表达,使其与eNOS藕联增加,进而抑制了eNOS活力。