8-硝基白杨素抑制HL-60细胞系增殖及促凋亡

目的 观察8-硝基白杨素(NOChR)抑制人急性髓性白血病细胞株 HL-60 细胞增殖和诱导凋亡作用。方法 用MTT法检测HL-60细胞增殖活性;胎盼蓝染色细胞计数法测定细胞存活率,绘制细胞生长曲线;DNA凝胶电泳观察HL-60细胞凋亡;流式细胞术检测HL-60细胞凋亡率。结果 NOChR对HL-60细胞增殖具有抑制作用,呈浓度依赖性;NOChR显著抑制HL-60细胞生长;NOChR能有效地诱导HL-60细胞凋亡,呈浓度依赖性。结论 NOChR具有抑制HL-60细胞增殖和诱导细胞凋亡作用。     

槲皮素诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的作用

目的:检测槲皮素体外对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用,并探讨线粒体在诱导凋亡机制中的作用.方法:采用酸性磷酸酶法检测细胞增殖抑制率;丫啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)荧光染色观测细胞形态结构变化;流式细胞仪检测线粒体膜电位（△ψm）.结果:槲皮素对人宫颈癌Hela细胞有明显的增殖抑制作用,且呈浓度和时间依赖性.经槲皮素作用48 h后,AO/EB染色可见细胞呈凋亡形态学改变.100 μmol/L槲皮素作用Hela细胞24、48 h后,与对照组相比线粒体膜电位下降.结论:槲皮素体外能抑制人宫颈癌Hela细胞生长,引起线粒体膜电位下降,诱导细胞凋亡.     

茯苓酸对宫颈癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响

目的 探讨茯苓酸对宫颈癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响,并初步探讨其调控机制。方法 体外培养人宫颈癌Hela细胞,分别以5.0、10.0、20.0μmol/L的茯苓酸处理细胞,未进行任何处理的Hela细胞作为对照组。克隆形成实验与MTT实验测定不同浓度茯苓酸对Hela细胞增殖的影响;Transwell实验检测不同浓度茯苓酸对细胞侵袭能力的影响;流式细胞仪检测不同浓度茯苓酸对细胞凋亡情况的影响;Western blot方法检测不同浓度茯苓酸对细胞Wnt、Cyclin D1与基质金属蛋白酶(MMP)-2表达的影响。结果 与对照组相比,5.0、10.0、20.0μmol/L的茯苓酸均能明显抑制宫颈癌Hela细胞的增殖能力与侵袭能力,同时诱导Hela细胞凋亡;不同浓度的茯苓酸均能抑制Hela细胞Wnt、Cyclin D1与MMP-2蛋白的表达水平,且呈浓度依赖性。结论 茯苓酸能够抑制人宫颈癌Hela细胞增殖与侵袭,并促进凋亡。     

松针油诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制研究

目的 研究松针油对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用，探讨Hela细胞发生凋亡的分子机制。方法 采用水蒸气蒸馏法提取松针油，气相色谱一质谱联用仪分析成分。MTT法测定松针油对Hela细胞增殖的影响。流式细胞仪和Hochest 33258检测药物作用前后细胞凋亡的情况。应用Western blotting观察Hela细胞caspase-3酶原的变化。用caspase活性检测试剂盒检测caspase-3，8，9的活性。结果 MTT结果显示松针油对Hela细胞生长有明显的抑制作用，呈显著的时间和浓度依赖性。流式细胞仪分析显示松针油诱导Hela细胞发生凋亡，细胞表现出典型的凋亡特征，并且可见凋亡小体，且凋亡率具有时间依赖性。松针油诱导Hela细胞凋亡过程中caspase．3被激活。Caspase-8，9活性增高，又有时间依赖性，且有时间顺序。结论 松针油对Hela细胞的生长有明显的抑制作用，其作用机制是松针油可诱导Hela细胞发生凋亡。在诱导细胞凋亡的过程中，caspase-3的激活是介导Hela细胞发生凋亡的共同通路。同时，活化的caspase-8，9可能参与了caspase-3的激活，从而诱导凋亡的发生。     

survivin反义寡核苷酸在体外诱导胰癌细胞凋亡

目的：探讨survivin反义核酸对胰腺癌细胞株Panc-1细胞凋亡的影响.方法：用脂质体瞬时转染法介导survivin反义核苷酸处理胰腺癌Panc-1细胞后,MTT试验测定转染细胞的相对存活率,RT-PCR检测survivin mRNA表达,琼脂糖凝胶电泳分析其对Panc-1细胞的凋亡诱导作用.结果：转染survivin反义核酸的Panc-1细胞增殖明显受抑制,与对照进行比较,具有显著性差异（P＜0.05）;经琼脂糖凝胶电泳,转染survivin反义核酸的Panc-1细胞可见到DNA梯形条带,而对照细胞未见到.结论：survivin反义核酸能够诱导Panc-1细胞凋亡.     

雌孕激素对T淋巴细胞生长的调节作用

目的：探讨雌孕激素对T淋巴细胞生K的调节作用。方法：将不同浓度的雌孕激素加到Jurkat细胞中培养72h，用MTT法检测细胞增殖情况；用DNA片断化分析细胞凋亡情况。结果：不同浓度的雌孕激素对T淋巴细胞均有抑制作用，并呈剂量依赖性；凝胶电泳可见明显的梯状条带。结论：雌孕激素对T淋巴细胞有直接的抑制作用并诱导细胞凋亡。     

野菊花总黄酮诱导佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡

目的 研究野菊花有效成分总黄酮(TFC)对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞凋亡的影响,探讨其治疗作用的机理.方法 SD大鼠右后足跖皮内注射0.1ml弗氏完全佐剂复制AA模型;24d后组织块培养法分离培养大鼠膝关节滑膜细胞,用MTT法检测TFC对滑膜细胞增殖的影响;Hoechst 33258荧光染色,观察滑膜细胞核是否出现凋亡小体;琼脂糖凝胶电泳观察DNA碎片.结果 MTT法显示TFC抑制滑膜细胞增殖,并且呈剂量依赖性趋势,药物作用24h的IC50为112mg/L;TFC能诱导滑膜细胞凋亡,电镜观察到典型的凋亡细胞核,电泳呈现出阶梯状条带,Hoechst 33258染色观察到细胞核出现凋亡小体.结论 TFC可能会通过抑制AA大鼠滑膜细胞的增生,促进滑膜细胞的凋亡而达到治疗类风湿性关节炎的作用.     

鲨鱼软骨抽提物诱导人胃癌细胞凋亡并下调Bcl-2表达

目的：探讨鲨鱼软骨抽提物(SCP)诱导人胃癌MGC80—3细胞调亡的作用机制。方法：以不同浓度SCP加入体外培养的MGC80—3细胞中，用MTT比色法检测细胞存活率；Hoeehst33342／PI荧光染色，荧光显微镜分析凋亡细胞百分率；流式细胞术进行细胞凋亡定量；琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯状条带；免疫细胞化学染色法检测Bel-2蛋白的表达。结果：SCP明显抑制(MGC80—3细胞生长，IC50值为1mg／ml；荧光显微镜下可见60％以上细胞为凋亡细胞的形态学改变；琼脂糖凝胶电泳呈现梯状条带(DNA ladder)；免疫细胞化学检测显示Bcl-2表达明显降低。结论：SCP诱导人胃癌MGC80—3细胞凋亡，其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白的表达水平有关。     

一氧化氮对大鼠睾丸生殖细胞凋亡作用的研究

目的：探讨一氧化氮（NO）对大鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响。方法 采用MTT法观察NO对细胞增殖的抑制作用，透射电镜分析细胞结构变化，末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的原位末端标记法（TUNEL）及琼脂糖凝胶电泳检测生殖细胞DNA变化以进一步分析细胞凋亡的特征。结果：MTT法及DNA末端标记法检测表明，NO可抑制细胞增殖，诱导生殖细胞的凋亡，并呈剂量及时间依赖性，NO组细胞凋亡率明显高于对照组（P〈0．01）。透射电镜观察NO处理20h后的生殖细胞，其核染色质凝集、附着于核边缘呈新月形，核固缩、碎裂形成凋亡小体，符合凋亡细胞特征性改变。结论：一氧化氮具有促使生殖细胞凋亡形成的作用，这对不育症的研究有重要的价值。     

海洋珍珠生物提取液对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响

背景：海洋珍珠生物提取液中富含锗、硒等微量元素。 目的：观察海洋珍珠生物提取液对宫颈癌Hela细胞株增殖和凋亡的影响。 方法：MTT法检测0,6,30,45,60,75,150 mg/L海洋珍珠生物提取液对Hela细胞增殖的影响;0,6,30,60 mg/L海洋珍珠生物提取液干预Hela细胞后,流式细胞仪Annexin V和PI双染检测细胞凋亡率,PI单染法测定细胞周期,RT-PCR法测定细胞株内bcl-2,bax基因表达。 结果与结论：6~45 mg/L海洋珍珠生物提取液对Hela细胞增殖有抑制作用,表现出浓度依赖性和时间依赖性(P < 0.05),在60~150 mg/L范围内只表现出了浓度依赖性(P < 0.05),无时间依赖性。6~60 mg/L海洋珍珠生物提取液呈浓度依赖性促进Hela细胞凋亡,使细胞阻滞在G1期;30,60 mg/L海洋珍珠生物提取液可降低细胞内bcl-2 mRNA表达,升高bax mRNA表达。说明海洋珍珠生物提取液以浓度依赖性的方式抑制Hela细胞增殖,并通过降低bcl-2 mRNA,升高bax mRNA来诱导细胞凋亡。关键词：海洋珍珠生物提取液;宫颈肿瘤;细胞增殖;细胞凋亡;bcl-2;bax doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.15.033     

Oridonin-induced apoptosis of Jurkat cells and its mechanism

Jurkat cells in culture medium in vitro were exposed to different concentrations of oridonin. The proliferation rate of the cells was measured by MTT assay, cell apoptotic rate was detected by flow cytometry, morphology of cell apoptosis was observed by Hoechst 33258 fluorescence staining, DNA fragmentation was assayed by agarose gel electrophoresis, caspase-3 and poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) expressions were detected by Western blotting using polyclonal anti-caspase-3 antibody and mouse anti-human PARP monoclonal antibodies, and caspase-3 activity was assayed with a colorimetric assay kit before and after apoptosis had occurred. Oridonin (over 32 mol/l) inhibited the growth of Jurkat cells and caused significant apoptosis. The suppression was both time-dependent and dose-dependent. Marked morphological changes of cell apoptosis, including condensation of chromatin and nuclear fragmentation, were clearly observed by Hoechst 33258 fluorescence staining, as well as by agarose gel electrophoresis. Western blotting showed cleavage of the caspase-3 zymogen protein (32 kDa), with the appearance of its 17 kDa subunit, and a cleaved 89-kDa fragment of 116 kDa PARP was also found, together with a concurrent increase in caspase-3 apoptotic activity. Oridonin can induce apoptosis in Jurkat cells via activation of caspase-3; the results indicate that oridonin might be an important potential anti-leukaemia reagent.     

TRAIL诱导Hela细胞凋亡的线粒体信号通路

 目的 探讨 TRAIL 诱导人宫颈癌 Hela 细胞凋亡的线粒体通路。 方法 琼脂糖凝胶电泳判断细胞凋亡;激光共聚焦、Western blot、荧光免疫和 caspase-3 活性检测测定细胞线粒体膜电位 (∆Ψm) 、Bcl-2 蛋白、细胞色素 c (Cyt c) 和凋亡诱导因子 (AIF) 蛋白在细胞中的定位以及 caspase-3 活性。结果 TRAIL 能诱导 Hela 细胞凋亡,有凋亡细胞特有的 DNA 梯状条带。同时,TRAIL具有时间依赖性致 ∆Ψm 和 Bcl-2 蛋白含量明显下降,线粒体 Cyt c 蛋白释放,AIF 蛋白向细胞质、细胞核转移,caspase-3 活性增强。结论 TRAIL 诱导 Hela 细胞凋亡途径之一是通过线粒体信号通路进行的。     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA

目的 建立检测HBV病毒DNA的荧光定量PCR法（FQ-PCR），并与运用常规凝胶电泳技术观察特异扩增带检测的结果加以比较。方法 合成扩增HBV DNA314bp特异保守序列的1对引物及1条带2个荧光基团的寡核苷酸探针。用PE-5700型定量PCR仪完成PCR反应及产物的荧光定量检测。同是PCR产物经琼脂糖凝胶电泳，EB染色，UVP（凝胶成像仪）检出有314bp带者为阳性或弱阳性。结果 建立了检测HBVDNA的荧光定量PCR技术，用已知HBV阳性模板不同拷贝数的标准溶液测得标准曲线Ct，原始拷贝数在10^5/ml以上者为阳性，用定量及定性PCR2种方法检测698例血清标本的结果表明：用FQ-PCR技术共检测出204例为阳性，阳性率29.2%；用定量及定性PCR2种方法检测698例血清标本的结果表明：用FQ-PCR技术共检测出204例为阳性，阳性率29.2%；用定性PCR观察到193例有阳性特异带，阳性检出率为27.65%。没有发现用定性PCR检测为阳性而用FQ-PCR检测为阴性者。结论 FQ-PCR检测HBVDNA较普通定性PCR技术具有操作简便，灵敏度更高、减少发生污染可导致假阳性结果的可能性及自动化程度高等优点，值得在临床检验中推广应用。     

已烯雌酚诱导T细胞肿瘤Jurkat细胞系凋亡中转录因子Oct-1的表达

研究己烯雌酚对Ｔ细胞肿瘤的细胞凋亡诱导作用,以及凋亡过程中转录因子Ｏｃｔ－１的表达,方法采用ＤＮＡ梯形片段化,荧光染色流式细胞技术分析细胞凋亡,以电泳泳 动度迁移率法检测Ｏｃｔ－１的表达。结果己烯雌酚可诱导Ｔ细胞出现细菌凋亡,并有典型的ＤＮＡ梯形片段化,１０μｇ己烯雌酚诱导１２ｈ后,凋亡过程中细胞数达３０％以上。己烯雌酚诱导Ｔ细胞凋亡过程与Ｏｃｔ－１转录因子的表达有关。结论己烯雌酚可诱导Ｔ细胞肿瘤     

己烯雌酚诱导T细胞肿瘤Jurkat细胞系凋亡中转录因子Oct-1的表达(英文)

目的研究己烯雌酚对 T细胞肿瘤的细胞凋亡诱导作用 ,以及调亡过程中转录因子 Oct- 1的表达。方法采用DNA梯形片段化 ,荧光染色流式细胞技术分析细胞凋亡 ,以电泳泳动度迁移率法 (EMSA)检测 Oct- 1的表达。结果己烯雌酚 (5 .0 mg/L )可诱导 T细胞出现细胞凋亡 ,并有典型的 DNA梯形片段化 ,10μg己烯雌酚诱导 12 h后 ,凋亡过程中细胞数达 30 %以上。己烯雌酚诱导 T细胞凋亡过程与 Oct- 1转录因子的表达有关。结论己烯雌酚可诱导 T细胞肿瘤凋亡 ,并与转录因子 Oct- 1的表达有关。     

DMSO诱导MCF-7细胞凋亡的研究

目的研究二甲基亚砜(DMSO)对MCF-7细胞凋亡的诱导作用。方法用不同浓度DMSO处理体外培养的MCF-7细胞,应用倒置光显微镜观察细胞形态学变化,用MTT比色法检测细胞存活率;Hoechst33258/PI荧光染色,用荧光显微镜分析凋亡细胞比率;琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯状条带。结果在倒置光学显微镜下观察1%DMSO处理细胞12h后细胞形态发生变化。约有50%以上的细胞变圆,细胞内有多泡小体形成。随DMSO浓度增加和作用时间的延长,细胞存活率明显下降,经MTT检测其IC_(50)值为1%;荧光显微镜下可见60%以上细胞核染色质凝集,核碎裂等凋亡细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳呈现梯状条带(DNA ladder)。结论适当浓度的DMSO能够抑制乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡。     

姜黄素诱导永生化人HaCaT细胞凋亡

目的 探讨姜黄素对人永生化上皮细胞凋亡的诱导作用.方法 应用细胞计数、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst33258染色、苏木素-伊红(HE)染色和透射电镜检测经姜黄素诱导处理后人永生化上皮HaCaT细胞的凋亡.结果经7.5mg/L姜黄素诱导处理后,人永生化上皮HaCaT细胞的增殖活动受到明显的抑制,细胞生长抑制率达83.03%;细胞周期检测出现亚二倍体(亚G1期)细胞峰值,细胞凋亡率达13.1%,并发生G2/M期阻滞;琼脂糖凝胶电泳出现细胞凋亡典型的DNA"梯状"条带;细胞核经Hoechst33258染色出现浓染致密的固缩形态和颗粒状荧光;光镜和电镜观察结果显示,姜黄素处理组细胞体积缩小,细胞核固缩,染色质凝聚,线粒体肿胀,有凋亡小体形成等显著的凋亡特征.结论姜黄素对人永生化上皮HaCaT细胞凋亡有显著的诱导作用,从而为进一步研究表皮细胞衰老、凋亡机理提供了重要基础和研究依据.     

褐藻糖胶对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的：研究褐藻糖胶对体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响，并探讨其凋亡机制。方法:不同浓度(100 mg/L、300 mg/L、500 mg/L、1 000 mg/L)褐藻糖胶处理MCF-7细胞48h后，应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的增殖；Hoechst 33258染色、琼脂糖凝胶电泳法观察细胞的凋亡的形态学及生化改变；逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹分别测定细胞〖STBX〗bcl-2〖STBZ〗和bax mRNA及其蛋白的表达。结果:不同实验浓度(100 mg/L、300 mg/L、500 mg/L、1 000 mg/L)的褐藻糖胶均能抑制MCF-7细胞的增殖（P<0.01），抑制率呈浓度依赖性增大；褐藻糖胶诱导MCF-7细胞凋亡数增加，且可见明显的、凋亡特有的DNA梯形条带；在褐藻糖胶存在下，〖STBX〗 bcl-2〖STBZ〗 mRNA和蛋白表达减少，而bax mRNA和蛋白表达增加，Bcl-2/Bax比值下降（P<0.05）。结论:褐藻糖胶可抑制MCF-7细胞增殖，且诱导其凋亡，其凋亡机制是下调Bcl-2和上调Bax蛋白的表达。     

Survivin反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞凋亡的诱导效应

目的：利用骨肉瘤OS-732细胞，探讨survivin反义寡核苷酸（ASODN）对survivin基因表达的影响及其诱导肿瘤细胞凋亡的效应。 方法: 设计合成特异性靶向survivin的ASODN，以不同浓度和时间对OS-732细胞进行转染，并设空白、正义（SODN）对照组进行比较。采用RT-PCR、Western blotting、免疫细胞化学技术检测各组OS-732细胞中survivin mRNA、蛋白表达状态，吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色法、流式细胞仪检测细胞凋亡水平和形态变化，MTT法检测细胞生长抑制情况，激酶活性测定法检测细胞中caspase-3活性程度。 结果: 转染ASODN各组OS-732细胞survivin mRNA和蛋白表达均明显弱于空白对照组、SODN组；细胞凋亡率（AI）显著增加，细胞生长相应受抑，caspase-3活性显著提高；上述效应在ASODN各组存在一定的时间浓度依赖性；而SODN各组与空白对照组间各项指标均无明显差异。 结论: ASODN能够特异性下调OS-732细胞中survivin基因表达，激活凋亡效应蛋白酶caspase-3，在诱导肿瘤细胞凋亡、抑制增殖中发挥重要作用。