应用全自动旋转平板接种、计数系统检测食品中菌落总数

菌落总数测定,是食品卫生中常规的检测项目之一,长期以来,对污染严重的食品检样或发酵奶饮品进行菌落总数测定时,通常需要制作一系列的样品稀释液,再进行接种培养。传统的接种方法,不但需要较多的稀释器皿、吸管或其它辅助设备,还容易在操作过程中引入人为误差。据报导,全自动微生物旋转平板接种、计数系统在检测菌落总数时,运用阿基米德原理,通过旋转接种仪以特定的螺旋递减模式将被检样品原液或只经一步稀释的被检样品接种在营养琼脂平板的表面,经培养后,菌落可沿螺旋的轨迹生长,再以带有特定数学模型的全自动菌落计数仪进行菌落计数。本…     

培养条件对海水中菌落总数测定的影响

目的了解平板计数法测定海水中菌落总数时适宜的培养条件:培养基、培养温度和培养时间。方法深圳水域的海水样品在不同培养基、培养温度条件下,经过不同培养时间培养后进行菌落总数计数。结果在培养温度为25℃、30℃、36℃条件下,在相同培养时间内,2216E琼脂的菌落总数明显高于营养琼脂的菌落总数及平板计数琼脂的菌落总数(P<0.05);采用2216E琼脂进行菌落总数测定,在培养温度30℃培养96h后,菌落总数达到最高,且菌落总数高于25℃和36℃培养时的菌落总数(P<0.05)。结论海水中菌落总数测定时应注意培养时间的控制。2216E琼脂适合用于海水菌落总数测定。深圳区域海水中菌落总数测定适宜采用2216E琼脂于30℃培养96h。有关国家标准中海水中菌落总数测定方法所规定的培养温度、培养时间应考虑进行修订完善以准确检测水温较高的南方区域海水。     

变形杆菌污染酒店冷拼间环境的检测分析

[目的]为减少和防止食物中毒等事件的发生,石家庄市卫生防疫站对市内各大、中饭店食品操作间的环境卫生进行了日常监测.[方法]参照《食品卫生检验方法微生物部分》等对所采样品进行沙门氏菌、志贺氏菌、致泻性大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和变形杆菌检验.[结果]从某一冷拼间13份环境样品中检出10种不同来源的奇异变形杆菌.[结论]在变形杆菌检测中,用同一性试验来检测其同源性分布状况,对食物中毒事件确定污染源非常必要.     

菌落选点计数的新方法

目的研制菌落计数卡,探讨菌落选点计数的一种新方法. 方法应用计算机和统计学原理制作菌落计数卡,将金黄色葡萄球菌ATCC25923按103 CFU/ml-1浓度制备菌液,倾注法制作待测平皿,再分别用常法全额计数法和计数卡选点计数法进行菌落计数,将两种方法所得结果进行统计学对比分析. 结果应用自制的菌落计数卡进行选点菌落计数,其结果与应用JLQ-S1型菌落计数器作常法全额菌落计数结果相比较,其差异无显著性. 结论菌落计数卡选点计数的方法可以替代仪器常法全额计数,自制的菌落计数卡,价格低廉、制作简便、实用性强,可推广应用.     

从变形杆菌蔓延生长中分离气单胞菌的方法探讨

目的了解不同培养基对变形杆菌、气单胞菌的生长情况的影响,为2种细菌在混合感染时分离纯化气单胞菌提供方法依据。方法选取实验室常用平板培养基分别划线接种变形杆菌和气单胞菌进行分离培养,观察2种细菌在不同平板上菌落生长形态和生化反应结果。结果实验室常用普通培养基对变形杆菌蔓延生长无抑制作用;接种SS、TCBS、EMB、沙门菌显色培养基、弧菌显色培养基能够抑制变形杆菌蔓延生长,但对气单胞菌生长有抑制作用;XLD平板能够有效抑制变形杆菌蔓延生长,变形杆菌在XLD平板上呈现中等大小、黄色、中心有黑色或无黑色菌落,而XLD平板对气单胞菌无抑制,培养基上出现中等偏大、无色半透明的扁平状菌落。结论变形杆菌和气单胞菌混合生长时,接种XLD平板得到2种不同生长形态的菌落,从而可以有效分离2种菌。     

菌落计数时常见的几个难题

菌落计数是微生物检验工作者的一项最基本的检验项目,该项目最简单也最难做好。同一检样在不同的实验室,或者在同一实验室的几位工作者中得出的结果可以误差几倍至几十倍。即便是同一人对同一样品作多次测定,其结果也不一致。现将菌落计数时常见的几个难题分析如下： １．蔓延生长与操作污染的处理： 蔓延生长常见的有变形杆菌属及某些需氧Ｇ＋大杆菌。这些细菌蔓延生长直接妨碍计数或抑制标本中细菌的生长,影响计数结果的准确性。蔓延生长的细菌有来源于标本的,也有来源于操作过程中所污染的。采用稀释液作空白对照,并与样品同样操作…     

SBI全自动微生物接种计数系统在检测菌落总数中的应用

[目的]探讨SBI全自动微生物接种计数系统在检测菌落总数中的应用。[方法]利用SBI全自动微生物接种计数系统法与国标法分别测定样品中的菌落总数。[结果]利用SBI全自动微生物接种计数系统对各类型样品进行菌落总数测定,与国标法比较,结果类似。[结论]本次验证结果表明,利用SBI全自动微生物接种计数系统对各类型样品进行菌落总数测定,具有减少人员操作误差和减少使用辅助玻璃仪器等优点。     

全自动菌落分析仪计数结果的初步探讨

目的验证国产某品牌全自动菌落分析仪的准确性和稳定性,探讨在日常工作中使用此仪器进行菌落计数的可行性。方法随机抽取28份生活饮用水进行细菌总数检验,分别通过仪器和人工计数,同时随机抽取1份水样用仪器法计数10次,对获得的数据进行对比和分析。结果仪器法与人工计数法计数结果之间具有较高相关性(r等于0.976,P等于0.000),均数间经t检验差异不具有显著性(t等于1.164,P等于0.254)。重复计数10次变异系数CV%=4.07%。结论该型全自动菌落分析仪计数结果与人工计数法没有明显区别,对饮用水菌落计数结果精确性和重复性良好、计数效率较高,在日常工作中具有一定的使用价值。     

用乳酸菌检测酵母浸出粉中VitB的研究

〔目的〕探索用细菌学方法检测酵母浸出粉中维生素B族的存在。〔方法〕采用五种乳酸菌接种于含有被测的五种中外产的酵母粉培养基 ,用细菌学灵敏度、菌落计数和菌落直径测定的方法进行比较。〔结果〕经统计学处理 ,生长浓度、菌落计数和菌落直径试验结果说明五种酵母粉之间有显著性差异 ,而灵敏度试验则未见显著性差异。〔结论〕酵母浸出粉中维生素B族生长因子的细菌学实验方法估计 ,可以参考生长浓度、菌落计数和菌落直径等综合性实验指标。     

PCR快速检测奇异变形杆菌的研究

目的 建立一种检测奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)快速且特异的PCR方法. 方法 针对编码奇异变形杆菌脲酶调节子(ureR)的基因序列设计2条PCR引物,扩增片段长度为225 bp;通过对2株奇异变形杆菌和14株非奇异变形杆菌进行PCR检测、利用该PCR方法和传统分离培养法同时对60份食物中毒送检标本进行检测来评价其特异性;将奇异变形杆菌菌液做一系列10倍稀释后进行PCR检测来对其进行敏感性分析. 结果 2株奇异变形杆菌出现PCR扩增反应,扩增产物经测序鉴定正确,14株非奇异变形杆菌没有出现PCR扩增反应,且PCR检测奇异变形杆菌的结果与传统培养方法一致,PCR方法相比传统培养方法更快速,在4 h内即可完成扩增反应;PCR方法敏感性为30 cfu/ml.结论 建立了一种快速,准确检测奇异变形杆菌的PCR方法,适合奇异变形杆菌日常监测和快速诊断的需要.     

医院空气菌落总数检测的影响因素

目的探讨各种因素对检测空气中菌落总数的影响程度,以确定检测条件,保证检测质量。方法按《医院消毒卫生标准》(GB15982-1995)和《医院消毒技术规范》2002规定的自然沉降法采样。结果采样时间、高度、培养时间、培养基预温和培养皿盖的扣法对菌落总数结果均有影响。结论自然沉降法采样时间以15min、高度以1.0m、培养时间以48h为宜。     

一起人畜炭疽病流行的细菌学分离鉴定

[目的]2009年6月25日四川省甘孜州白玉县昌台区麻邛乡甲旭村和阿察乡发生一起人畜炭疽病流行,通过收集患者结痂及分泌物标本经实验室病原学分离鉴定,查明该次引起流行病的主要病原菌。[方法]将收集的结痂及分泌物标本进行直接培养、增菌培养、分纯培养、血清学鉴定、系统生化鉴定、毒力试验、噬菌体裂解等。[结果]检出炭疽芽孢杆菌。[结论]根据实验室病原学鉴定结果显示,该次疾病流行是由炭疽芽孢杆菌所致。     

金黄色葡萄球菌荧光定量PCR计数法的建立

目的建立一种简便、特异的荧光定量PCR检测方法,用于对金黄色葡萄球菌计数。方法根据金黄色葡萄球菌nuc基因序列(GenBank:DQ399678.1),设计并合成引物和荧光标记探针,建立和优化反应体系,用已知浓度的金黄色葡萄球菌DNA模板作为外部参照,建立标准曲线。用加入金黄色葡萄球菌的模拟牛奶样品,把Baird-Parker平板计数结果和PCR定量检测结果进行比较,以评价体系性能。结果平板计数和荧光定量PCR的检测结果做比较,采用配对t检验,t=0.58,v=32,P0.05,其结果差异无统计学意义。结论所建立的金黄色葡萄球菌荧光定量PCR计数法,操作较传统的方法简单直接,能有效地缩短整个检测的时限,并有较好的灵敏度和特异性,与传统方法相比,有较明显的优势。     

影响医院空气菌落总数检测因素的研究与探讨

[目的]探讨各种因素对检测空气中影响菌落总数的因素。[方法]按《医院消毒卫生标准》GB15982-1995和《医院消毒技术规范》2002规定的自然沉降法采样。[结果]采样时间、高度、培养皿盖的扣法、培养时间和培养基预温对菌落总数结果均有影响。[结论]自然沉降法采样时间以15 min、高度以1.0 m、培养时间以48 h为宜。     

引起食物中毒和传染病疫情的沙门菌群分布及耐药性分析

[目的]了解深圳龙岗地区沙门菌的流行特点和耐药情况。[方法]对从本地区2003～2007年食物中毒和伤寒,副伤寒疫情中分离的67株沙门菌进行纸片扩散法（K-B法）药敏实验。[结果]沙门菌主要流行菌群为D群,以引起食物中毒最常见,食物中毒占总暴发疫情的40.30%,51.85%食物中毒由肠炎沙门菌引起;沙门菌对氟哌酸,氯霉素,氨基糖苷类及第3代头孢类抗生素完全敏感,对青霉素,苯唑西林完全耐药,头孢氨苄的耐药率高达41.79%,对氨苄西林,羧苄西林,哌拉西林,四环素和复方新诺明的耐药率达到了37.31%,37.31%,25.37%,25.37%和2.99%;非伤寒沙门菌对羧苄西林,氨苄西林,强力霉素,四环素,哌拉西林,美满霉素的耐药率显著性的高于伤寒和副伤寒沙门菌;沙门菌多重耐药率为13.00%。[结论]沙门菌引起的暴发疫情在逐年增加,其对除四环素,氨苄西林,羧苄西林,哌拉西林和复方新诺明外其他常用抗生素都敏感,非伤寒沙门菌的耐药性在显著增加。     

不同岗位120名护士手的洗消效果随机监测分析

目的了解内蒙古医学院附属人民医院住院部不同岗位护士手的清洗效果。方法医院住部不同岗位护士120名,分别做洗手前、按日常程序洗手或手消毒后以及工作1 h后手的细菌培养。结果各岗位护士手培养的细菌菌落数洗手前后比较,有统计学意义（P〈0.01）,配药室护士工作1 h后培养的菌落数与洗手或消毒后菌落数相比,差异无统计学意义（P〉0.05）;而从事手术、治疗和护理岗位的护士菌落数明显增多。结论护士在上、下岗时无论从事何种岗位一定要严格执行手的清洗和消毒程度,在工作过程中不仅要做到严格无菌操作,并尽可能做到勤洗手、多洗手。     

市售甲鱼带菌引发霍乱疫情病原学研究

[目的]弄清O139群霍乱弧菌在我市引起突发公共卫生事件的原因及传播来源,找到防控措施。[方法]用碱性胨水对所采样品进行增菌,四号琼脂平板作病原菌分离,Cpi20E作生化学鉴定,O139诊断血清作菌群诊断,同时用PCR作菌株毒力测定,引物是CtxA,用KB法作药物敏感试验。[结果]我市O139群霍乱疫情共作样本215件,检出42株病原性弧菌,并从相关食物链甲鱼中检出3株,生化鉴定率为99.9%,从病人及甲鱼中检出的O139群霍乱弧菌生化反应一致,毒力基因相同。对青霉素等数10种抗生素耐药、先锋类及复哌酸敏感。[结论]我市O139群霍乱疫情由外地输入甲鱼带染所致,病人及甲鱼中检出O139群霍乱弧菌具有同源性。     

一起小学蜡样芽孢杆菌食物中毒的调查报告

[目的]通过对一起小学食物中毒流行病学调查探讨流行因素及病原学。[方法]采集大米、米粑粑、酱、乳腐、呕吐物进行实验室细菌学和有机磷农药检测。[结果]81例食用米粑粑中毒患者,临床表现以恶心、头晕、呕吐、腹痛为主;病原学检查为蜡样芽孢杆菌。[结论]蜡样芽孢杆菌在适宜温度下生长繁殖,污染食品,产生毒素,引起食物中毒。     

2006年西安市感染性腹泻细菌病原学监测结果分析

目的了解并掌握西安市细菌性腹泻病的发生、流行特征及变化趋势，探讨防治对策。方法对西安市4所腹泻病哨点监测医院中就诊的急性腹泻病患者，用肛拭子采集粪便标本进行增菌后，分别接种于4种培养基（碱性蛋白胨水、SS、EMB、中国蓝平板）中作霍乱弧菌、沙门菌、志贺菌以及致病性大肠埃希菌的检验。结果4所腹泻病哨点监测医院中，粪便采样阳性率为7．87％。在检出的阳性菌群中有志贺菌，占70．0％；沙门菌和大肠埃希菌各占15％；阳性标本8月份检出占40％。结论 2006年该市感染性腹泻细菌检出的阳性菌群主要以志贺菌为主。做好腹泻病的防治工作，发挥肠道病监测的“窗口”作用非常重要。     

肿瘤科病房患者呼吸道病原菌的分布及耐药性分析

[目的]探讨肿瘤科病房患者呼吸道病原菌的分布及耐药性。[方法]用VITEK32型全自动细菌分析系统对我院肿瘤科病房2003年12月～2005年12月分离出的240株呼吸道病原菌进行鉴定,药敏试验采用K-B法。[结果]革兰阳性球菌以金黄色葡萄球菌（18.3%）、表皮葡萄球菌（8.8%）和肠球菌（5.4%）为主。革兰阴性杆菌以铜绿假单胞菌（19.2%）、肺炎克雷伯菌（14.6%）和鲍曼不动杆菌（12.9%）为主。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）32株,占金黄色葡萄球菌的72.7%,凝固酶阴性葡萄球菌对苯唑西林的耐药率为58.4%。产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的肺炎克雷伯菌占34.3%,产ESBLs的大肠埃希菌占27.8%。革兰阴性杆菌对大多数抗菌药物的耐药率较高,对亚胺培南的耐药率较低。[结论]肿瘤科病房患者的呼吸道病原菌耐药率有明显上升趋势,及时准确地检测病原菌,并对MRSA菌株和ESBLs菌株进行监测,有利于指导临床医生合理使用抗生素,减少耐药菌株的产生。