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１１００名新兵ＨＣＶ感染的血清学调查武警北京总队医院封太昌，张树修，王桂芝（北京１０００２７）近年来对丙型肝炎的研究有突破性进展［１］。１９８９年研制出丙型肝炎的特异性诊断试剂，开展了丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）抗体（抗－ＨＣＶ）的检测。不同人群ＨＣＶ感染... 相似文献
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ＨＣＶ核心区与ＮＳ３区抗原表位分析及融合基因表达逯好英徐东刚朱分禄孟文华孟庆华军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心（Ｃ）区及ＮＳ３区抗原是第二代抗－ＨＣＶ抗体诊断试剂的主要组分。核心蛋白（Ｃ２２）含有１９１个氨基酸，... 相似文献
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丙型肝炎病毒 (ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ)克隆的成功 ,使ＨＣＶ感染的实验室诊断得以迅速发展 ,临床多检测抗ＨＣＶ ＩｇＧ ,并将其作为献血员筛选的一个指标 ,但由于抗ＨＣＶ ＩｇＧ为非中和性抗体 ,它的存在仅反映有过ＨＣＶ的感染 ,与病毒复制及有无病毒血症无关 ,也不能反映肝病是否处于活动期。而ＩｇＭ抗体在慢性病毒感染中常持续阳性 ,并提示病毒存在且继续复制[1] 。为探讨ＨＣＶ ＩｇＭ抗体存在的意义 ,我们研究了抗ＨＣＶ ＩｇＭ抗体与ＨＣＶ存在及肝病活动的关系。1 材料与方法1.1 主要试剂逆转录酶 (ＡＭＶ )、Ｔａｑ… 相似文献
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ＨＣＶＣ蛋白基因在Ｅ．ｃｏｌｉ中的表达及其抗原表位分析逯好英徐东刚肖定华潘和平王春杰＊军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是单股正链ＲＮＡ病毒，不同分离株之间其基因组序列变异较大，不同区段变异程度也各不相同，相比之下Ｃ区... 相似文献
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抗 丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)是机体感染ＨＣＶ后出现的非中和性特异抗体 ,是ＨＣＶ感染的标志 ,具有重要的临床意义。笔者利用时间分辨荧光分析 (ＴＲＦＩ Ａ)技术[1] 建立了抗 ＨＣＶ时间分辨免疫荧光分析法 (ＩＦＭＡ) ,并在此基础上利用生物素 亲和素系统 (ＢＡＳ)建立了抗 ＨＣＶＢＡＳ ＩＦＭＡ ,现报道如下。材料与方法1.材料与仪器。ＨＣＶ抗原 (ＨＣＶＡｇ)、羊抗人ＩｇＧ单抗由上海科华公司提供。Ｎ 羟琥珀酰亚氨活化生物素 (ＮＨＳＢ)、链亲和素 (Ａｖｉｄｉｎ)、ＥｕＣｌ3 和二乙烯三胺五乙酸 (ＤＴＰＡ)为Ｓｉｇｍａ产品。Ｓｅ… 相似文献
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丙型肝炎病毒ＮＳ３丝氨酸蛋白酶基因的克隆和表达邓小艺朱千政杨佩英军事医学科学院微生物学流行病学研究所北京１００８５０丙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ，ＨＣＶ）是输血后非甲非乙肝炎的主要病原体，约有４０％～５０％的丙型肝炎病人可发展成为慢性... 相似文献
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不同HCV优势抗原嵌合基因在大肠杆菌中的表达及其？… 总被引：2，自引：1，他引：1
目的：为满足丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＥＩＡ检测的需要，构建含优势抗原表位的ＨＣＶ嵌合重组抗原。方法：利用基因工程重组技术，获得了不同的ＨＣＶ嵌合抗原ＮＣ１和ＮＣ２。含嵌合基因的表达质粒在大肠杆菌中表达了目的抗原，其中包括结构区核壳蛋白Ｃ２２和不同长度的非结构区蛋白ＮＳ３；表达产物经离子交换和盐析纯化。结果：用针对Ｃ２２或ＮＳ３抗原表位特异 血清及系列血清进行了检测，表明ＮＣ１和ＮＣ２均同时具有Ｃ２２ 相似文献
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不同HCV优势抗原嵌合基因在大肠杆菌中的表达及其产物的分析 总被引：1，自引：0，他引：1
目的：为满足丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＥＩＡ检测的需要，构建含优势抗原表位的ＨＣＶ嵌合重组抗原。方法：利用基因工程重组技术，获得了不同的ＨＣＶ嵌合抗原ＮＣ１和ＮＣ２。含嵌合基因的表达质粒在大肠杆菌中表达了目的抗原，其中包括结构区核壳蛋白Ｃ２２和不同长度的非结构区蛋白ＮＳ３；表达产物经离子交换和盐析纯化。结果：用针对Ｃ２２或ＮＳ３抗原表位特异性血清及系列血清进行了检测，表明ＮＣ１和ＮＣ２均同时具有Ｃ２２和ＮＳ３抗原的免疫反应性。以嵌合抗原制备的抗ＨＣＶＥＩＡ试剂检测中国药品生物制品检定所的第三代Ｐａｎｅｌ血清时，其阳性、阴性通过率都符合要求。结论：构建的嵌合抗原有多个优势抗原表位，可用于ＨＣＶＥＩＡ检测 相似文献
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重组ＨＣＶＮＳ５区抗原在丙型肝炎检测中的应用牛建章徐东刚＊孟宗达逯好英＊陈淑芬于秋丽河北省卫生防疫站保定０７１０００丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ５蛋白位于１９７３～３０１１氨基酸残基，含有ＧＤＤ序列，编码依赖ＲＮＡ的ＲＮＡ聚合酶，参与病毒的复制。因此检... 相似文献
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采用反转录ＰＣＲ方法从河北定州地区献血员血清中克隆了丙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ，ＨＣＶ）的Ｃ３３ｃ抗原基因，序列分析结果表明，该株的Ｃ３３ｃ基因和中国泰安株的同源性为９１．０％，氨基酸序列同源性为９２．２％；与ＨＣＶ河北株的同源性分别为９１．３％和９６．２％；和日本ＪＫ１株的同源性分别为９１．６％和９４．８％。克隆的基因在大肠杆菌中得到表达和纯化，并可用作抗ＨＣＶＥＬＩＳＡ试剂的抗原组分 相似文献
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重型肝炎患者丙型肝炎病毒抗体的存在状态及其意义 总被引：1，自引：0，他引：1
采用合成肽酶免疫分析法和美国Ｏｒｔｈｏ公司第２代ＥＬＩＳＡ检测重型肝炎患者血清丙型肝炎病毒抗体，阳性率分别为２２％；阳性轿清经重组免疫印迹鉴定仅５９％阳性，用逆转录聚合酶链反应检测ＨＣＶ ＲＮＡ阳性率仅６０％；动态观察，约１／３抗ＨＣＶ阳性患者抗体持续２－４周消失。 相似文献
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丙型肝炎病毒感染的血清学试验５１０５１５广州第一军医大学南方医院骆抗先关键词肝炎病毒，丙型；核酸；聚合酶链反应；血清学中国图书资料分类号Ｒ７３５．９７年来，对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的分离和克隆与该病毒感染的血清学诊断研究已有许多进展。但因有些试剂的质... 相似文献
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丙型肝炎病毒核心蛋白可溶性单链可变区抗体在大肠杆菌中的表达 总被引：12，自引：3，他引：9
利用分子生物学技术,构建表达丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白的人源单链可变区抗体（ＳｃＦｖ）的原核表达载体,并在大肠杆菌ＪＭ１０９中表达可溶性的ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ。以重组的ＨＣＶ核心蛋白为包被抗原,利用噬菌体抗体库的表面展示技术,筛选到含有ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ基因的噬菌体克隆。从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒,经ＮｃｏⅠ／Ｎｏｔ Ⅰ酶切鉴定,该ＳｃＦｖ基因由７５０ｂｐ组成。将其亚克隆到ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ表达载体中,转化大肠杆菌ＪＭ１０９,提取质粒进行ＤＮＡ序列测定,符合ＳｃＦｖ的重链可变区和轻链可变区基因结构特点。ＩＰＴＧ诱导转化的大肠杆菌ＪＭ１０９,在其培养上清中获得了可溶性ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ的表达。酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）证实表达的ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡ 相似文献
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应用套式ＰＣＲ检测了８８例丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶＲＮＡ；结果发现：慢性丙肝患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ检出率显著高于急性丙肝患者（Ｐ＜０．００１）；急、慢性丙肝患者血清和慢性丙肝患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ检出率显著高于ＡＬＴ正常的抗－ＨＣＶ阳性者（Ｐ＜０．００１）；少数患者血清中ＨＣＶＲＮＡ阴性，ＰＢＭＣ中可测及，部分患者血清抗一ＨＣＶ阴性，而血清ＨＣＶＲＮＡ阳性．提示：血清ＨＣＶＲＮＡ检测有助于抗－ＨＣＶ阴性丙肝的诊断和早期诊断；丙肝的肝损害可能与ＨＣＶＲＮＡ血症有关；ＰＢＭＣ中ＨＣＶ感染在丙肝的慢性化和慢性肝损害中可能起一定作用；ＰＢＭＣ中可贮存ＨＣＶＲＮＡ。 相似文献
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丙型肝炎肝组织中病毒抗原的检测及其意义１０００３９北京解放军第３０２医院王福生，王松山，皇甫玉珊关键词肝炎．病毒性；抗原；病毒；基因表达中国图书资料分类号Ｒ５１２．６丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染后，可表现为急性肝炎也可表现为慢性携带状态或慢性肝炎（ＣＡ... 相似文献
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在大肠杆菌中以非融合蛋白形式高效表达丙型肝炎核心蛋白 总被引：1，自引：0，他引：1
应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，扩增出完整的丙型肝炎病毒核心蛋白基因，将其克隆于表达载体ｐＢＶ２２０ ＰＲＰＬ启动子的下游，构建了重组质粒ｐＢＶ－ＨＣＶ；转化大肠杆菌后，以非融合蛋白方式表达了丙型肝炎病毒核心蛋白。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳显示，此蛋白的分子量约为２０ｋＤａ，表达量约占菌体蛋白的１１％；Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹实验证明，此蛋白能与慢性丙型肝炎患者血清发生特异反应。序列分析结果表明，克隆于ｐＢＶ 相似文献
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饮酒、营养不良、中毒、糖尿病、妊娠等是促进肝脏脂肪性变的主要因素 ,而肝炎病毒的作用极少被提及。我们发现 ,病毒性肝炎恰恰是脂肪性变的最常见因素。为证实病毒性肝炎与肝脏脂肪性变的关系 ,我们探讨了由ＲＮＡ病毒[1～ 4 ] 引起的丙型、丁型、庚型肝炎 10 7例肝穿活检肝脏脂肪性变的病理特点及其临床意义 ,以便为临床治疗和预后判断提供依据。1 对象和方法1.1 对象 血清抗ＨＣＶ和 (或 )ＨＣＶＲＮＡ阳性 ,而其他病毒标志阴性的丙型肝炎 67例 ,男 61例 ,女6例 ,平均 4 1 4岁。血清抗ＨＤＶ阳性和乙肝病毒标志物中至少ＨＢｓＡｇ阳… 相似文献