肺炎链球菌性脑膜炎小鼠B7-H3蛋白对巨噬细胞炎性蛋白2 mRNA表达的影响

目的 探讨协同信号分子B7-H3对肺炎链球菌性脑膜炎小鼠模型中炎性趋化因子巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)mRNA表达的影响.方法 1.5 ～2.0个月健康雄性BALB/C小鼠48只,随机分为4组:9 g/L盐水组(NS组)、B7-H3蛋白组(B7-H3组)、肺炎链球菌组(SP组)、肺炎链球菌+B7-H3蛋白组(联合组),每组12只;经小鼠侧脑室穿刺分别注入9 g/L盐水、B7-H3蛋白、肺炎链球菌3型、肺炎链球菌3型+B7-H3蛋白建立动物模型.注射后6、24 h依据loeffler 5分制评分方法对各组小鼠进行神经行为评分,然后麻醉处死小鼠,取脑组织,用Real-time PCR方法检测小鼠脑组织内MIP-2 mRNA的相对表达量.应用SPSS 18.0软件进行统计学分析.结果 侧脑室穿刺注射6、24h后各组小鼠神经行为学评分结果:B7-H3组神经行为评分与NS组比较差异无统计学意义(P＞0.05);SP组评分较NS组明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05);联合组较SP组评分更明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).Real-time PCR方法检测结果:SP组在注射6h后MIP-2 mRNA的相对表达量较NS组升高[(1.210 ±0.932)比(1.000±0.008)],但差异无统计学意义(P＞0.05);在注射24 h后SP组MIP-2 mRNA的相对表达明显高于NS组[(12.880±7.792)比(1.000±0.091)],差异具有统计学意义(P＜0.05);联合组与SP组比较:6 h MIP-2相对表达量增高[(1.240±0.804)比(1.210±0.932)],但无统计学差异(P＞0.05),24h相对表达量明显升高[(38.760±6.061)比(12.880±7.792)],差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 在肺炎链球菌性脑膜炎模型中,协同信号分子B7-H3使炎性趋化因子MIP-2 mRNA的表达上调,促进病情进展.     

维生素D对肥胖幼鼠单核／巨噬细胞趋化因子及巨噬细胞浸润脂肪组织的影响北大核心CSCD

目的探讨肥胖幼鼠腹腔内脂肪系数、单核／巨噬细胞趋化蛋白表达和巨噬细胞浸润脂肪组织情况及维生素D（VitD）的干预作用。方法将45只3周龄sD雌幼鼠根据随机数字表法分为对照组、肥胖模型组、VitD干预组,每组15只。对照组予基础饲料喂养,肥胖模型组、VitD干预组予高脂饲料喂养;VitD干预组予VitD灌胃5μg／（kg·d）（相当于婴幼儿每天补充VitD 400 IU）,对照组和肥胖模型组予植物油灌胃,5mL／kg,1次／d,共6周。每周监测幼鼠体质量,计算Lee’s指数,6周后称量腹腔内脂肪重量;酶联免疫吸附法检测血清单核细胞趋化蛋白-1（MCP·1）和巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-1α）表达水平;HE染色后,在显微镜下观察并计数脂肪细胞;免疫组织化学法测定脂肪组织中MCP-1、MIP-1α及F4／80蛋白表达;实时荧光定量PCR（qPCR）测定脂肪组织中MCP-1、MIP-1α及核因子（NF）-KBmRNA表达水平,同时与幼鼠体质量、腹腔内脂肪系数及Lee’s指数进行相关性分析。结果高脂饮食诱导幼鼠肥胖后,第6周肥胖模型组幼鼠体质量、腹腔内脂肪系数、血清MCP-1和MIP-10ll（244．1±16．2）g、（3．25±0．63）％、（2275．2±229．3）ng／L、（190．4±61．9）ng／L]均较对照组[（224．2±10．9）g、（2．43±0．47）％、（1522．1±577．1）ng／L、（63．6±31．6）ng／L1和VitD干预组[（214．0±12．5）g、（2．04±0．64）％、（1863．4＋-477．0）ng／L、（120．3±29．5）ng／L]增高,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。腹腔内脂肪组织HE染色示对照组和VitD干预组脂肪细胞排列较整齐,大小较均-;肥胖模型组脂肪细胞排列较紊乱,大小不一,脂肪细胞过度膨大和许多新生的小脂肪细胞并存。免疫组织化学染色示肥胖模型组脂肪组织中MCP-1、MIP—1α、F4／80蛋白表达（130944．5±10706．1、174354．8±65267．8、51701．9±50105．1）均较对照组（47394．5±9261．9、54376．7±36436．9、23370．3±16613．1）增高,差异均有统计学意义（均P〈0．01）;VitD干预组MCP-1、MIP-101、F4／80蛋白表达（102967．2±9329．3、48659．8±43553．8、25604．9±11411．6）均较肥胖组降低,差异均有统计学意义（均P〈0．01）。qPCR示肥胖模型组脂肪组织中MCP-1、MIP-1仅及NF—κBmRNA表达（2．78±0．90、7．104-1．85、1．504-0．16）均较对照组（0．88±0．18、0．99±0．80、1．00±0．28）增高,差异均有统计学意义（均P〈0．05）;VitD干预组脂肪组织中MCP-1、MIP—let及NF—KBmRNA表达（1．73±0．51、1．59±1．09、0．72±0．30）均较肥胖模型组下降,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。各组间Lee’s指数比较差异无统计学意义（F=0．351,P=0．711）。9周龄时,幼鼠脂肪组织中MCP-1、MIP-1饯、NF—KBmRNA表达水平与幼鼠体质量、腹腔内脂肪系数均呈正相关（r=0．738、0．517、0．762、0．693、0．519、0．557,均P〈0．05）;与Lee’s指数无相关性（r=0．322、0．317、-0．023,均P〉0．05）。结论VitD可抑制饮食诱导的幼年期肥胖,可能与VitD通过NF—κB信号通路抑制脂肪组织／巨噬细胞浸润及单核巨噬细胞趋化因子的表达有关。     

巨噬细胞炎性蛋白1α及其mRNA在哮喘小鼠气道炎症中的作用

目的探讨巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)及其mRNA在哮喘小鼠气道炎症中的作用.方法 70只二级雄性BALB/C小鼠随机分为2大组7小组(1)正常小鼠组,分成灌洗组(A24组)和未灌洗组(A0组);(2)哮喘小鼠组,分成灌洗组(根据末次激发时相不同分成B3组、B8组、B24组和B36组)和未灌洗组(B0组).对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行嗜酸性粒细胞(EOS)计数和分类计数;应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法测定血清和BALF中MIP-1α的浓度;采用免疫组化法和原位杂交法检测MIP-1α蛋白和MIP-1α mRNA的表达.结果 (1)BALF和血清中MIP-1α的浓度B3组[(30.2±4.2)pg/ml,(30.8±4.6)pg/ml]、B8组[(35.3±4.9)pg/ml,(34.9±5.1)pg/ml]、B24组[(42.9±5.8)pg/ml,(41.7±6.3)pg/ml]和B36组[(37.8±4.7)pg/ml,(35.7±4.9)pg/ml]均高于A24组[(20.9±3.8)pg/ml,(22.4±4.3)pg/ml](P均<0.01); MIP-1α浓度3 h开始升高,24 h达峰值,36 h已下降;(2)免疫组化和原位杂交显示,B0组支气管MIP-1α蛋白和MIP-1α mRNA的阳性表达率[(26.4±6.2)%, (23.9±4.2)%]均高于A0组[(10.3±2.5)%, (8.7±1.8)%](P均<0.01),其表达的主要细胞是上皮细胞;(3)哮喘小鼠BALF中MIP-1α的浓度和EOS绝对值之间呈显著正相关(r=0.890, P＜0.01),MIP-1α的浓度和EOS占细胞总数百分比(EOS %)之间呈显著正相关(r=0.897, P＜0.01).结论哮喘小鼠MIP-1α蛋白和mRNA较强表达,上皮细胞是主要表达细胞,MIP-1α动力学特点为3 h开始升高,24 h达峰值,36 h已下降,并与EOS聚集密切相关.     

川芎嗪对慢性高氧肺损伤新生大鼠内源性一氧化氮合酶表达水平的影响

目的观察川芎嗪干预对新生大鼠高氧肺损伤的影响及可能作用机制。方法80只足月新生12h内的清洁级SD大鼠,随机分为空气组（A组）、空气＋川芎嗪组（B组）、高氧（60％）组（C组）、高氧＋川芎嗪组（D组）。B、D两组每日腹腔注射川芎嗪30mg／kg,一日一次,A、C两组每日腹腔注射等量生理盐水,实验第14天每组随机选取8只,测量体重后取肺组织,测量肺质量,HE染色观察肺组织病理改变并计算其放射状肺泡计数（RAC）、RT—PCR方法检测内皮型一氧化氮合酶（eNOS）mRNA表达水平;免疫组织化学染色法检测eNOS蛋白表达水平。结果C组显示明显的肺泡发育受阻,体重（g）、肺质量（g）、RAC值（个）较A、B组均明显减少[体重：（17．4±3．2）比（29．5±1．7）、（29．3±1．6）,肺质量：（0．26±0．04）比（0．41±0．03）、（0．40±0．03）,RAC值：（4．8±0．7）比（9．0±0．8）、（8．8±0．9）,P〈0．05],D组病理改变减轻,体重、肺质量、RAC值高于C组（P〈0．05）,与A组相近（P〉0．05）。与A组（3．54±0．37）相比,C组肺组织eNOS表达水平（2．76±0．23）明显降低,D组（3．80±0．36）表达较C组增加,差异有统计学意义（P〈0．05）,与A组相近（P〉0．05）。结论高氧可导致新生大鼠出现肺损伤,病理改变类似于早产儿新型支气管肺发育不良,川芎嗪干预对其有一定保护作用,其机制可能与川芎嗪促进eNOS的表达并捅过内源性NO生成增多而降低肺微血管压力有美．     

血管内皮生长因子在新生大鼠高氧肺损伤模型中的表达及意义

目的探讨高浓度氧暴露致新生大鼠急性肺损伤时血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其对肺发育的影响,为临床防治支气管肺发育不良提供理论依据。方法生后2—3日龄新生Sprague—Dawley（SD）大鼠48只随机分为空气组和高氧组各24只,分别置于空气及常压氧气（I〉95％）喂养,采用荧光定量PCR和Western Blot方法检测第1、3、7天时各组大鼠肺组织VEGF mRNA和蛋白表达水平,HE染色动态观察新生大鼠肺组织形态结构变化。结果两组大鼠肺组织第1、3、7天VEGF mRNA和蛋白表达水平均逐渐降低,高氧组明显低于空气组,第1天差异无统计学意义（P〉0．05）,第3、7天差异有统计学意义（P〈0．05）[VEGF mRNA：1天（0．86±0．35）比（1．00±0．28）,3天（0．54±0．26）比（0．92±0．34）,7天（0．32±0．20）比（0．61±0．12）;VEGF蛋白：1天（0．78±0．33）比（1．00±0．16）,3天（0．60±0．08）比（0．85±0．27）,7天（0．34±0．12）比（0．56±0．18）]。与空气组相比,高氧组肺组织显著发育不良,肺泡结构简单,肺泡数目减少,肺微血管发育受阻。结论VEGF对肺发育起重要作用,其确切作用机制有待进一步研究。     

PERK/eIF2a／CHOP信号通路在新生大鼠坏死性小肠结肠炎机制中的作用北大核心CSCD

目的建立坏死性小肠结肠炎（NEC）新生大鼠模型,研究肠道组织蛋白激酶受体样内质网激酶／真核翻译起始因子2a／CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（PERK／eIF2a／cHOP）信号通路中PERK、磷酸化PERK（p-PERK）、eIF2a、磷酸化eIF2a（p-eIF2a）、CHOP的动态表达,探讨NEC的发病机制,以期为NEC防治提供理论依据。方法采用随机数字表法将150只1日龄sD大鼠分为3组。NEC组：配方奶喂养＋缺氧＋冷刺激＋脂多糖灌胃建立NEC模型;Salubfinal（SAL）组：建模同时予SAL（1mg／kg）腹腔注射;对照组：腹腔注射等量9g／L盐水。造模0、12、24、48、72h时,采用随机数字表法每组取10只大鼠处死,取肠道组织,观察肠道形态,行病理学检查,经Westernblot检测PERK、P—PERK、eIF2a、P—eIF2a、CHOP蛋白动态表达,采用real—timePCR检测CHOP基因动态表达。结果对照组无NEC发生,NEC组NEC发生率为90％（9／10只）,SAL组NEC发生率为40％（4／10只）。NEC组、SAL组P—PERK、P—eIF2a蛋白表达随建模时间延长上调;与对照组相比,NEC组、SAL组p-PERK、p-eIF2a蛋白表达上调（p-PERK：1．528±0．264、1．402±0,233比0．303±0．036;p-eIF2a：0．969±0．076、1．173±0．066比0．209±0．045;P〈0．05）;与NEC组相比,SAL组P-eIF2a蛋白表达增高（P〈0．05）。NEC组、SAL组CHOP蛋白、mRNA表达均随建模时间延长上调,与对照组相比,NEC组、SAL组CHOP蛋白、mRNA表达上调（CHOP蛋白：1．456±0．223、0．929±0．064比0．165±0．026：CHOPmRNA：0．343±0．035、0．198±0．044比0．017±0．010;P〈0．05）;SAL组CHOP蛋白、mRNA表达较NEC组降低（P〈0．05）。结论PERK／eIF2a／CHOP信号通路参与新生大鼠NEC的发生、发展,而SAL可能通过抑制内质网应激信号通路中p-eIF2a去磷酸化、抑制CHOP基因及蛋白的表达而发挥作用。     

不同剂量牛肺表面活性物质治疗晚期早产儿呼吸窘迫综合征的临床研究

目的比较不同剂量牛肺表面活性物质（Ps）治疗晚期早产儿新生儿呼吸窘迫综合征（RDS）的疗效。方法选择2012年7月至2013年6月淄博市妇幼保健院新生儿重症监护中心收治的晚期早产儿RDS患儿,随机分为2组,均予国产PS（珂立苏）,首剂大剂量组70mg／kg,小剂量组40mg／kg。比较两组血气指标、氧合指数、呼吸机参数、用药后机械通气时间、总用氧时间、肺部x线改变及常见并发症的发生率等。结果大剂量组和小剂量组各纳入16例,两组患儿应用Ps24h后,PO2、PCO2氧合指数及x线胸片表现均较使用前好转,差异有统计学意义（P〈0．05）。两组相比,大剂量组PCO2（mmHg）和氧合指数均低于小剂量组[（41．2±4．2）比（44．9±5．4）,（4．8±0．8）比（7．4±2．0）],x线评分（分）优于小剂量组[（1．0±0．3）比（1．4±0．6）],应用Ps次数、肺炎发生率、氧疗时间、机械通气时间、住院时间均低于小剂量组,差异有统计学意义（P均〈0．05）。两组气胸发生率和治愈率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论对于晚期早产儿RDS给予珂立苏治疗时,剂量应尽量满足70mg／kg。     

缺氧缺血I生脑损伤新生大鼠脑神经细胞凋亡及脑组织中Rho GDP解离抑制因子和Bcl-2表达的变化

目的研究RhoGDP解离抑制因子（Rho GDP dissociation inhibitor 2,RhoGDI2）mRNA及Bcl-2mRNA的表达在缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）中的作用和机制。方法30只新生7日龄SD大鼠按照完全随机化方法分为假手术组及HIBD6h和48h组,每组10只。采用流式细胞仪检测脑细胞凋亡情况,并用Real—timeRT—PCR方法测定脑组织中RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平。结果（1）新生大鼠HIBD后48h结扎侧大脑半球脑水肿明显。（2）HIBD6h出现典型的凋亡细胞峰,细胞凋亡率为（1．40±0．12）％。HIBD48h凋亡峰更为明显,细胞凋亡率达到（15．86±0．98）％。缺氧缺血后与假手术组相比,差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）假手术组大鼠RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平较高（4．12±0．74、2．55±0．65）,在HIBD6h后二者表达开始下降（3．19±0．77、1．96±0．36）,48h降低更加明显（1．04±0．18、1．06±0．17）,与假手术组比较,HIBD各时间点RhoGDI2和Bcl-2mRNA的表达均明显降低,差异有统计学意义（P〈0．01）。（4）缺氧缺血后各时间点RhoGDI2mRNA的表达和Bcl-2mRNA的表达呈正相关（r=0．831,P〈0．05）。结论脑缺氧缺血后,随着凋亡的出现,RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平降低,提示RhoGDI2表达失衡可能通过Bcl-2参与新生大鼠HIBD中凋亡的发生。     

卵清蛋白致敏小鼠肠道黏膜sIgA抗体反应的实验研究

目的 探讨卵清蛋白（OVA）胃肠致敏时,BALB／c小鼠肠黏膜分泌性免疫球蛋白A（sIgA）抗体反应系统特点,以期为临床食物过敏的诊断和治疗提供一定依据。方法选用6周龄无鸡蛋蛋白饲养的BALB／c雌鼠为实验对象,分为激发（Ch）组及正常生理盐水对照（NS）组,每组8只。ELISA法测定小鼠小肠黏液中总IgA、OVA特异性IgA含量;免疫组织化学法检测小鼠小肠固有层（LP）IgA^＋浆细胞,集合淋巴小结中膜表面IgA^＋（smIgA^＋）淋巴细胞数量;RT-PCR法检测小鼠小肠组织白介素4（IL-4）mRNA表达;组织原位杂交法检测小鼠小肠集合淋巴小结（PP）中IL4的mRNA表达。结果Ch组小鼠肠道黏液中总IgA、OVA特异性IgA、肠道固有层IgA^＋浆细胞、PP中smIgA^＋淋巴细胞均较NS组升高（P均〈0．01）,各指标间存在正相关（P均〈O．01）,Ch组小鼠小肠LP及PP中IL-4mRNA表达高于NS组（P均〈0．01）,小鼠小肠LP与PP内IL-4mRNA表达分别与LP内IgA^＋浆细胞、PP内smIgA^＋淋巴细胞数量呈正相关（P均〈0．01）。结论OVA致敏小鼠肠黏膜sIgA抗体系统存在功能亢进现象,其原因可能与炎症状态下肠道黏膜诱导部位和效应部位IL-4转录异常增高有关。     

硫氧还蛋白-2和细胞色素C在高氧暴露下A549细胞中的表达和意义

目的观察高体积分数氧（高氧）暴露后人肺泡Ⅱ型上皮细胞来源的肺腺癌A549细胞中硫氧还蛋白-2（Trx-2）和细胞色素C（Cytc）的动态表达，探讨Trx-2和Cytc表达变化在高氧肺损伤中的作用。方法复苏液氮罐中冻存的人肺腺癌A549细胞系后，加入100g／L胎牛血清的MEM培养基，置于37℃50mL／L二氧化碳（CO2）饱和湿度培养箱中培养。然后体外传代培养A549细胞，待其生长至接近融合状态时，随机分为高氧组和空气组，每组18瓶A549细胞（50mL培养瓶）。高氧组持续暴露于常压高氧中，氧体积分数为900mL／L，CO2体积分数为50mL／L；空气组仍置于50mL／L CO2培养箱中。二组分别于高氧或空气暴露12、24、48h后提取A549细胞总RNA，半定量反转录聚合酶链反应检测Trx-2和Cytc mRNA水平；蛋白印迹法检测A549细胞Trx-2蛋白的表达变化。结果1.与空气组比较，高氧组24h Trx-2 mRNA的表达显著增强（P〈0．05）；48h Trx-2 mRNA的表达减弱，二组比较无显著性差异（P〉0．05）。2．与空气组比较，高氧组12h Cytc mRNA的表达显著增强（P〈0．05）；24h Cytc mRNA的表达减弱，二组比较无显著性差异（P〉0．05）；48h显著减弱（P〈0．05）。3．与空气组比较，高氧组12h Trx-2蛋白的表达显著增强（P〈0．05）；24h仍增强，二组比较无显著差异（P〉0．05）；48h显著减弱（P〈0．05）。结论高氧暴露可诱导A549细胞中Trx-2和Cytc异常表达，提示Trx-2对高氧肺损伤线粒体可能起重要的保护作用，Cytc在高氧肺损伤细胞凋亡发生发展中起重要作用。     

血氧浓度波动致新生大鼠增生性视网膜病变的机制研究

目的制备血氧浓度波动所致新生大鼠增生性视网膜病变的模型,进一步探讨早产儿视网膜病（ROP）的发病机制。方法208只新生SD大鼠,随机分为氧气组和对照组,采用免疫组织化学方法以及RT-PCR技术,观察生后14、18、25d视网膜组织中血管内皮生长因子（VEGF）及Flk-1（VEGFR-2）蛋白和mRNA表达水平。并且在氧气暴露后4d,取幼鼠眼球进行视网膜铺片以及组织石蜡切片HE染色,观察视网膜血管的改变情况。结果（1）氧气组18d幼鼠视网膜无血管面积明显大于空气组（P〈0．05）,且突破内界膜的内皮细胞核数目明显多于空气组（P〈0．05）,表明模型建立成功。（2）氧气组视网膜VEGF及Flk-1在14、18d时表达均明显强于对照组（P〈0．05）,在25d时阳性表达明显减弱,与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。且VEGF及Flk-1在18d时表达最强,与14及25d比较,表达强度差异均有统计学意义（P〈0．05）。（3）氧气组视网膜组织VEGF mRNA及Flk-1 mRNA表达水平在14d、18d均明显高于对照组（P〈0．05）。25d时氧气组VEGF mRNA及Flk-1 mRNA表达水平均下降,与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论反复血氧浓度的波动可导致新生大鼠视网膜血管增生性病变,血管增生性视网膜组织中VEGF及Flk-1表达明显增强。本研究还提出,ROP视网膜血管增生过程中存在一种正反馈机制即VEGF与Flk-1的上调协同作用,共同促进视网膜新生血管的形成。     

肾病儿童外周血单个核细胞活化蛋白1和糖皮质激素受体的DNA结合活性的变化

目的 探讨肾病综合征（NS）儿童外周血单个核细胞（PBMC）中活化蛋白1（AP－1）和糖皮质激素受体（GR）的DNA结合活性的变化,体外实验加入地塞米松（DEX）以及泼尼权治疗后对二者的影响。方法 用凝胶电泳迁移率变化分析法（EMSA）和同位素放射性自显影法分析了NS儿童PMBC中AP－1、GR的DNA结合活性。结果 （1）NS组基础状态AP－1DNA活性为264．1（0．6－351．8）,对照组为0．8（0－1．1）,两组比较差异有非常显著意义（Z＝2．72,P＜0．01）;佛波酯刺激状态下AP－1DNA活性为514．8（1．1－616．7）,对照组为1．1（0－36．6）,两组比较差异有非常显著意义（Z＝2．64,P＜0．01）;经DEX作用后NS组AP－1的DNA活性与对照组比较,差异无显著意义（Z＝0．64,P＞0．05）。（2）NS组基础状态GR的DNA活性为7．6（0．2－11．7）,对照组为45．2（8．1－95．2）,两组比较差异有显著意义（Z＝2．56,P＜0．05）;TPA刺激状态GR的DNA活性为5．3（0．0－10．7）,对照组为78．1（7．8－97．4）,两组比较差异有显著意义（Z＝2．40,P＜0．05）,经DEX作用后GR的DNA活性与对照组比较,差异无显著意义（Z＝0．96,P＞0．05）。（3）经泼尼松治疗尿蛋白转阴1周后,AP－1 DNA活性为1．05（0．95－1．44）,与治疗前[2．87（1．00－4．20）]比较,差异有显著意义（Z＝2．24,P＜0．05）。治疗后GR的DNA活性为3．91（1．00－4．70）,与治疗前[1．04（0．73－1．24）]比较,差异有显著意义（Z＝2．0,P＜0．05）。结论 （1）NS儿童的PBMC中AP－1 DNA结合活性异常升高,而GRDNA结合活性降低;（2）糖皮质激素可抑制AP－1、增强GR的DNA结合活性。     

转铁蛋白受体、铁蛋白及铁调节蛋白-1 mRNA 在铁缺乏胎儿胎盘中的表达

目的探讨铁转运相关蛋白mRNA在胎儿铁缺乏(ID)胎盘中的表达。方法根据脐血血清铁蛋白(SF)水平将研究对象分为ID组和铁充足(IS)组。采用RT-PCR方法测定两组胎盘转铁蛋白受体(TfR)、铁蛋白(Fn)和铁调节蛋白-1(IRP-1)mR- NA表达情况。结果 1．ID组TfR mRNA为1 10±0．26,明显高于IS组(t=0．028 P<0.05);2．ID组Fn mRNA为0．304± 0 095,明显低于IS组(t=0.014 P<0．05);3．ID组IRP-1 mRNA为0．278±0.073,与IS组无统计学差异(t=0．086 P> 0．05);4．胎盘TfR mRNA和脐血SF自然对数呈明显负相关(r=0.558 P<0 05),而Fn mRNA与脐血SF自然对数呈明显正相关(r=0．502 P<0．05)。结论胎儿ID时胎盘TfR mRNA表达升高,Fn mRNA减少,IRP-1 mRNA无明显变化,可最大程度地保证胎儿铁供应的相对恒定。     

抗FasL抗体对小鼠病毒性心肌炎作用机制的研究

目的探讨抗FasL抗体对小鼠柯萨奇病毒性心肌炎的治疗作用及作用机制。方法80只BALB／c小鼠随机分为4组：1组为空白对照组、2组为病毒对照组、3组为IgG对照组、4组为抗FasL抗体治疗组。于接种病毒后第10天每组处死小鼠8只,取心脏,分别采用光镜检查心肌组织的病理变化,原位末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡的情况,免疫组化方法检测活化caspase-3的表达,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测心肌组织中caspase-3和CVB,mRNA表达。结果（1）病毒对照组可见活化的caspase-3表达和心肌细胞的凋亡,且均与心肌病变积分成正相关（r=0．81,P〈0．05;r=0．73,P〈0．05）。（2）抗FasL抗体治疗组小鼠心肌组织病变积分、心肌细胞凋亡率、caspase-3蛋白和mRNA表达及心肌细胞内CVB,mRNA表达均明显低于病毒对照组（P〈0．01,P〈0．01,P〈0．01,P〈0．01,P〈0．05）和IgG对照组（P〈0．01,P〈0．01,P〈0．05,P〈0．01,P〈0．05）。结论凋亡是病毒性心肌炎心肌损伤的重要机制之一,抗FasL抗体可降低caspase-3活化和mRNA表达,减少心肌细胞凋亡,降低心肌细胞内病毒复制,使心肌损伤明显减轻。     

脐血S100B、巨噬细胞炎性蛋白-1α对母亲妊娠高血压病所生新生儿脑损伤的早期诊断价值

目的检测母亲妊娠高血压病(HDCP)新生儿脐血及脐带组织S100B、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)的表达,探讨脐血S100B、MIP-1α对母亲HDCP新生儿脑损伤的早期诊断价值。方法将97例HDCP母亲所生新生儿纳入实验组,并根据其出生后7 d或纠正胎龄40周后7 d的20项新生儿神经行为测定(NBNA)评分分为2组:≤35分为脑损伤组(A组),>35分为非脑损伤组(B组);同时选取20例健康母亲所生健康新生儿作为健康对照组(C组)。免疫组织化学法检测其脐带组织S100B、MIP-1α表达;ELISA检测其脐血S100B蛋白、MIP-1α水平。评估脐血S100B、MIP-1α蛋白对母亲HDCP新生儿脑损伤的早期诊断价值。结果1.A、B、C组脐带组织S100B表达差异无统计学意义(P>0.05);A、B组脐血S100B蛋白水平均较C组增高(Pa<0.05)。2.A、B组脐带组织MIP-1α表达差异无统计学意义(P>0.05),但2组脐带组织MIP-1α表达与C组比较差异均有统计学意义(Pa<0.05);A、B组脐血MIP-1α水平均较C组增高(Pa<0.05)。3.A、B组脐血S100B蛋白水平、MIP-1α蛋白水平均与NBNA评分均呈负相关(Pa<0.05);脐血S100B蛋白水平与MIP-1α蛋白水平呈正相关(P<0.05)。4.脐血S100B蛋白ROC曲线下面积为0.992,以95.04 mg.L-1作为S100B的最佳截取值,诊断脑损伤的特异度为94.0%、灵敏度为95.7%;脐血MIP-1α蛋白ROC曲线下面积为0.928,以101.34 pg.L-1作为MIP-1α的最佳截取值时,诊断脑损伤的特异度为82.0%、灵敏度为87.2%。结论脐血S100B蛋白是母亲HDCP新生儿脑损伤早期诊断的可靠指标,且可反映脑损伤程度。MIP-1α对母亲HDCP新生儿脑损伤的早期诊断有一定意义。     

一次性胃管灌肠对新生儿舒适度的影响

目的探讨应用一次性胃管代替肛管灌肠对新生儿舒适度的影响,以指导临床新生儿护理。方法将100例需要灌肠的新生儿随机分为观察组和对照组各50例,观察组采用一次性胃管灌肠,对照组采用普通肛管灌肠,应用疼痛评估量表（NIPS）对患儿进行评分,同时观察两组新生儿心率变化及一次插管成功率。结果灌肠前观察组（50例）和对照组（50例）心率差异无统计学意义（P〉0．05）,插管时、液体灌入时、灌肠后1min观察组心率均小于对照组（P〈0．05）,观察组心率波动较小,灌肠后2min两组心率差异无统计学意义（P〉0．05）。观察组一次插管成功率高于对照组（84％比64％）,插管时NIPS评分低于对照组[（3．1±0．9）分比（4．2±0．9）分],P均〈0．05。结论应用一次性胃管代替肛管灌肠可提高新生儿舒适度。     

TLR2、TLR9及T细胞亚群在传染性单核细胞增多症患儿中的变化及意义

目的本研究旨在探讨Toll样受体（TLR）2、TLR9及T细胞亚群在传染性单核细胞增多症（IM）患儿中的变化及意义。方法研究对象为2010年4月-2011年1月我院儿科初治急性期IM患儿35例（IM急性期组）,IM恢复期组35例以及健康对照儿童35例（对照组）。采用SYBRGreenI实时荧光定量PCR方法检测外周血单个核细胞TLR2mRNA、TLR9mRNA的表达,运用流式细胞术检测外周血中CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD4＋CD25＋T细胞的阳性表达率。结果（1）IM急性期组TLR2mRNA（4．03±0．56）、TLR9mRNA（8．88±1．56）相对表达水平显著高于对照组TLR2mRNA（2．22±0．57）,TLR9mRNA（3．63±1．30）及恢复期组TLR2rnRNA（2．76±0．83）,TLR9mRNA（5．34±1．60）（P〈0．01）。（2）IM急性期组CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD4＋／CD8＋、CD4＋CD25＋细胞百分比分别为（80．66±4．88）％、（16．53±5．55）％、（62．71±8．76）％、0．26±0．12、（2．38±1．32）％,对照组分别为（63．04±5．51）％、（37．98±4．20）％、（27．71±6．52）％、1．37±0．45、（7．85±1．97）％,二者之间差异有显著性（P〈0．01）;IM恢复期组儿童CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD4＋／CD8＋、CD4＋CD25＋细胞百分比分别为（74．25±7．33）％、（29．89±6．03）％、（42．25±7．33）％、0．71±0．19、（6．81±1．84）％,与IM急性期组比较差异有显著性（P〈0．01）,IM恢复期组CD4＋CD25＋细胞百分比与对照组[（7．85±1．97）％]比较差异无显著性（P〉0．05）。结论（1）IM急性期TLR2mRNA、TLR9mRNA表达相对上调,而IM恢复期二者表达相对下调;（2）IM急性期存在明显的免疫失衡,即CD3＋CD8＋明显增高,CD3＋CD4＋、CD4＋／CD8＋及CD4＋CD25＋Treg明显降低。提示在IM病程不同时期TLR2与TLR9的改变可能通过对T细胞的调节参与了IM发病。     

肺炎支原体肺炎患儿血清神经生长因子和白细胞介素-15的水平变化及其临床意义

目的探讨肺炎支原体肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia, MPP）患儿血清中神经生长因子（nerve growth factor,NGF）、白细胞介素（interleukin,IL）-15的水平变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法对65例MPP患儿（重症组25例,轻症组40例）和50例健康儿童（对照组）的血清NGF和IL-15水平进行测定。结果检测血清NGF、IL-15水平,MPP组急性期分别为（157．62±33．45）pg／ml和（242．51±60．04）pg／ml,恢复期分别为（99．58±21．29）pg／ml和（145．90±50．25）pg／ml,均较对照组明显升高[（29．86±11．74）pg／ml,（108．86±21．14）pg／ml],且急性期NGF、IL-15水平显著高于恢复期,差异有统计学意义（P〈0．05）。在MPP急性期,重症组血清NGF、IL-15水平显著高于轻症组[（204．38±27．52）pg／mlvs（128．39±22．07）pg／ml,（288．58±55．33）pg／mlvs（213．71±42．69）pg／ml],差异有统计学意义（P〈0．05）;在MPP恢复期,重症组血清NGF、IL-15水平高于轻症组,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论肺炎支原体感染后,患儿血清中NGF、IL-15水平明显升高,随着病情的缓解而降低,提示NGF、IL-15参与肺炎支原体感染的发病过程。     

新生期小鼠卡介苗接种和呼吸道合胞病毒感染对肺部炎症和免疫状态的影响

目的研究小鼠新生期卡介苗（BCG）接种对呼吸道合胞病毒（RSV）感染后肺部炎症和免疫状态的影响。方法新生BALB／c小鼠分4组：A组为对照组、B组为BCG接种组、C组为RSV感染组、D组为BCG接种后RSV感染组。RSV感染后1周观察肺泡灌洗液（BALF）中白细胞数及分类，ELISA法检测BALF中IFN-γ、IL-4、IL-10含量，RT-PCR检测肺组织Toll样受体4（TLR4）mRNA表达，HE染色进行肺组织炎症病理评分。结果C、D两组BALF中自细胞总数、淋巴细胞数、中性粒细胞数、IFN．7含量以及肺组织TLR4 mRNA表达量和炎症病理评分显著高于A、B组（P〈0．01或0．05），BALF中IL-4、IL-10含量4组间差异无显著性，C、D两组之间在各项指标上差异无显著性。结论小鼠新生期BCG接种对RSV感染诱发的肺组织炎症和免疫状态无影响。     

毛细支气管炎患儿外周血白细胞介素-12的意义

目的探讨白细胞介素（interleukin,IL）-12在毛细支气管炎发病过程中的意义。方法选取59例2岁以下毛细支气管炎患儿,分为毛支Ⅰ组（n=28）和毛支Ⅱ组（n=31）,其中毛支Ⅰ组为具有特应质高危因素的患儿,毛支Ⅱ组为无特应质高危因素的患儿。同期住院的同年龄段支气管肺炎患儿36例和患有疝气、肾结石等非感染性疾病术前患儿31例分别作为肺炎对照组和正常对照组,分别检测4组患儿外周血IL－12的水平。结果毛支Ⅰ组患儿外周血IL-12为（34．72±7．96）pg／ml;毛支Ⅱ组患儿外周血IL-12为（55．30±6．72）pg／ml;肺炎对照组患儿及正常对照组患儿外周血IL-12分别为（56．79±10．36）pg／ml、（61．23±11．51）pg／ml,其中毛支Ⅰ组与毛支Ⅱ组相比,外周血IL-12水平降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;毛支Ⅰ组与肺炎对照组、正常对照组相比,外周血IL-12水平显著降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;毛支Ⅱ组与肺炎对照组、正常对照组相比,外周血IL-12水平降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;肺炎对照组与正常对照组相比,外周血IL-12水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论血清IL-12降低是毛细支气管炎发病的重要因素,具有特应质高危因素的毛细支气管炎患儿IL-12降低更为明显。