Beclin1、LC3B在不同分化胃腺癌组织中的表达及与Hp感染的关系

目的:探讨不同分化胃腺癌组织中自噬相关蛋白Beclin1、LC3B的表达情况及其表达与幽门螺杆菌(Hp)感染的相关性。方法:应用免疫组化法检测胃腺癌及周围慢性非萎缩性胃炎组织中Beclin1、LC3B及Hp的表达。结果:Beclin1、LC3B在胃腺癌组织中的高表达率分别为64.4%(56/87)、62.1%(54/87)，与在慢性胃炎组织中相比差异有统计学意义(P<0.001,P<0.001)。Beclin1、LC3B在高-中分化胃腺癌中有较高的高表达率［70.3%(45/64),73.4%（47/64）］，而在低分化胃腺癌中高表达率［（47.8%(11/23),30.4%（7/23）］则较低，差异有统计学意义(P<0.05，P<0.05)。胃腺癌细胞内出现LC3B蛋白点状阳性表达与对应腺癌细胞自噬高表达之间呈显著正相关（r=0.479，P<0.001）。Beclin1、LC3B在胃腺癌中的表达呈正相关(r=0.408，P<0.001)。Beclin1、LC3B蛋白在Hp(+)胃腺癌组织中的高表达率(79.59%，75.51%)明显高于Hp(-)胃腺癌组织中的高表达率(44.74%，44.74%)，差异有统计学意义(P<0.05，P<0.05)。Hp阳性患者与胃腺癌组织中Beclin1、LC3B的高表达率之间均呈显著正相关(r=0.286，P<0.05；r=0.298，P<0.05)。结论:Beclin1和LC3B在胃腺癌中表达增高，特别在高-中分化胃腺癌中，提示Beclin1和LC3B共同参与了胃黏膜上皮细胞恶性转化、进展及胃腺癌分化的过程；Hp感染和Beclin1、LC3B的高表达率之间呈显著正相关，提示Hp感染可诱导胃腺癌细胞自噬活性升高，它们之间相互作用共同影响了胃腺癌的发生发展。     

胃癌组织Beclin1表达与幽门螺杆菌感染的相关性

目的:探讨胃癌组织自噬相关蛋白Beclin1的表达和临床意义,及与幽门螺杆菌(HP)感染的相关性.方法:应用免疫组化法检测120例胃癌和配对正常胃组织中自噬相关蛋白Beclin1的表达;分析Beclin1的表达和临床病理学参数的关系;分析Beclin1的表达和无疾病进展生存(disease free survival,DFS)的相关性;应用碳14呼气试验检测胃癌患者幽门螺杆菌的感染,并分析Beclin1的表达和HP感染的相关性.结果:Beclin1在胃癌和正常胃组织的高表达率分别为59.2%(71/120)、36.7%(44/120),胃癌组织Beclin1的高表达率显著高于正常胃组织,差异有统计学意义(P=0.004).Beclin1的高表达与胃癌患者pTNM分期(P<0.001)和区域淋巴结转移(P<0.001)有显著负相关性.与Beclin1高表达的患者比较,Beclin1低表达患者的中位DFS显著缩短(21 vs 25个月,P=0.032).HP阳性胃癌组织的Beclin1高表达率显著高于HP阴性者(71.0%vs 43.1%,P=0.002);Spearmen相关性检验显示HP感染和Beclin1表达有显著相关性(γ=0.280,P=0.002);logistic回归分析显示HP感染对Beclin1表达有显著影响(P=0.009).结论:胃癌组织Beclin1表达水平增高;Beclin1高表达提示较好的预后;HP感染与Beclin1表达有显著相关性.     

非小细胞肺癌组织MGMT蛋白的表达

目的:探讨DNA修复酶O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与肺癌发生、发展的关系.方法:免疫组化SABC法检测120例NSCLC及癌旁组织中和30例肺炎MGMT的表达.结果:120例NSCLC组织中,MGMT蛋白的阳性表达率(33%,40/120)显著低于癌旁正常组织(63%,76/120),χ2=21.624,P<0.05;亦显著低于30例肺炎症组织(60%,18/30),χ2=7.196,P<0.05;MGMT蛋白的阳性表达与患者吸烟史、分化程度和淋巴结转移相关,P(0.05.结论:MGMT蛋白的表达与NSCLC的发生、发展相关,监测MG-MT蛋白可能对肺癌的辅助诊断有一定意义.     

自噬相关基因Beclin1在外阴鳞癌中的表达及临床意义

目的:探讨自噬相关基因Beclin1在外阴鳞癌中的表达及其与临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学的方法检测Beclin1蛋白在50例外阴鳞癌、 30例外阴上皮内瘤变及10例正常外阴组织中的表达情况,RT-PCR的方法检测25例外阴鳞癌、13例外阴上皮内瘤变及10例正常外阴组织中Beclin1 mRNA的表达情况.结果:Beclin1蛋白在外阴癌、外阴上皮内瘤变、正常外阴组织中阳性率分别为52.0%、86.6%、90.0%,Beclin1蛋白在外阴癌组织中的表达明显低于外阴上皮内瘤变及正常外阴组织,具有统计学差异(P<0.05).Beclin1 mRNA在外阴癌中的相对表达量为(0.318±0.031),显著低于外阴上皮内瘤变(0.634±0.037)及正常外阴组织(0.702±0.042).Beclin1蛋白在外阴鳞癌中的表达与肿瘤临床分期、分化程度、有无淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄无关(P>0.05).结论:Beclin1在外阴鳞癌组织中表达下调,提示自噬活性的改变可能对外阴鳞癌的发生、发展起一定的作用.     

MadCAM-1表达与胃癌发生相关性的研究

目的:探讨胃癌发生发展中黏膜地址素细胞黏附分子-1(MadCAM-1)的变化对胃癌的影响.方法:采用免疫组织化学SP法,检测50例行胃癌根治术所收集的癌组织、癌旁组织、正常胃黏膜组织中MadCAM-1的表达情况.结果: MadCAM-1表达率在正常胃黏膜、癌旁组织及癌组织中分别为78%(39/50)、64%(32/50)和40%(20/50).癌组织中的阳性表达率明显低于正常组织(χ2=14.924, P=0.000)和癌旁组织(χ2=5.769, P=0.016);而正常组织与癌旁组织之间差异无统计学意义,P>0.05;MadCAM-1阳性表达率低年龄组(<45岁)表达低于高年龄组(>45岁),χ2=4.688, P=0.030;MadCAM-1的阳性表达率与Borrmarn分型、肿瘤部位、肿瘤大小及癌细胞的浸润深度和分化程度无关, P>0.05.结论:MadCAM-1参与肿瘤局部免疫过程,与胃癌发生发展有关.MadCAM-1的低表达可能使机体局部免疫能力降低导致了胃癌的发生.     

LINC00659在胃癌组织中的表达及其对人胃癌细胞侵袭、迁移和自噬的影响

目的:在胃癌组织中检测LINC00659的表达水平,并探讨LINC00659对人胃癌AGS、HGC-27细胞侵袭、迁移和自噬的影响。方法:收集宁夏回族自治区人民医院自2020年01月至11月的17例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁组织标本,qRT-PCR法检测人胃癌组织与癌旁组织中LINC00659的表达,Western blot法和免疫组化检测人胃癌与癌旁组织中自噬相关蛋白LC3、p62的表达;在AGS和HGC-27细胞株中分别构建敲减和过表达LINC00659胃癌稳转株细胞,分为Vector组、sh-LINC00659组、pEX-3组和LINC00659组。慢病毒转染48 h后通过倒置荧光显微镜和qRT-PCR检测转染效率;Transwell、细胞划痕实验法检测各组细胞的侵袭和迁移能力;Western blot、免疫荧光检测各组细胞中自噬相关蛋白LC3、p62的相对表达水平。结果:LINC00659及自噬相关蛋白LC3在胃癌组织中的表达均显著高于癌旁组织,而自噬相关蛋白p62在胃癌组织中的表达要低于癌旁组织（均P＜0.05）。AGS、HGC-27细胞经慢病毒转染后,与空载组相比,敲减组中LINC00659相对表达水平明显降低,过表达组LINC00659相对表达水平明显升高（均P<0.01）;Transwell、细胞划痕实验结果显示,与对照组相比,AGS敲减组细胞的侵袭和迁移能力明显受到抑制,而HGC-27过表达组细胞的侵袭和迁移能力显著增强（均P＜0.05）;Western blot、免疫荧光结果显示,AGS敲减组细胞中自噬相关蛋白LC3的表达有所下调,而p62的表达则明显升高,且在HGC-27过表达组中自噬相关蛋白LC3、p62的表达水平与敲减组完全相反（均P<0.05）。结论:LINC00659在胃癌组织中高表达,且能够促进人胃癌细胞的侵袭、迁移和自噬。     

微管相关蛋白LC3和自噬基因Beclin1在上皮性卵巢癌中的表达及其意义

背景与目的:有研究表明自噬活性的改变与肿瘤的发生、发展有关。诱导自噬性细胞死亡已经成为杀死肿瘤细胞的新策略。本研究检测微管相关蛋白LC3和自噬基因Beclin1在不同卵巢肿瘤组织中的表达情况,探讨其与上皮性卵巢癌发生、发展的相关性及意义。方法:用免疫组化法检测25例良性卵巢肿瘤、25例交界性卵巢肿瘤及75例上皮性卵巢癌组织的LC3和Beclin1表达,并结合临床病理因素进行分析。结果:良性肿瘤组LC3和Beclin1的阳性率(100%、100%)和交界性卵巢肿瘤组LC3和Beclin1的阳性率(96%、84%)都明显高于上皮性卵巢癌组(57%、57%),且差异具有统计学意义(P均<0.001)。LC3在上皮性卵巢癌中的表达与FIGO分期和肿瘤分化程度相关(P=0.017;0.001)。Beclin1表达与上皮性卵巢癌患者FIGO分期相关(P=0.04)。LC3和Beclin1在卵巢上皮癌中的表达无相关性(P=0.875)。结论:LC3和Beclin1在上皮性卵巢癌中的表达下调,自噬活性的改变可能与上皮性卵巢癌的发生、发展相关。     

细胞周期调控因子在胃癌组织中的表达及意义

背景与目的细胞周期调控异常与细胞过度增殖及肿瘤发生密切相关,而细胞周期调控因子与胃癌的关系尚未明确。本研究目的是探讨细胞周期调控因子P16INK4、CyclinD1、P21WAF1、P53在胃癌组织中的表达及意义。方法运用免疫组织化学SP法检测53例胃癌及癌旁组织中细胞周期调控因子P16INK4、CyclinD1、P21WAF1、P53的表达。采用多变量Cox回归模型对影响预后的因素进行分析。结果P53蛋白在胃癌组织中的阳性率为60.4%,显著高于癌旁组织(0%)(P<0.01);P53蛋白表达在粘液癌(0%)与高分化腺癌(65.4%)和低分化腺癌(68.2%)间有显著性差异(P<0.01)。CyclinD1蛋白在胃癌组织中的过表达率为69.8%,显著高于癌旁组织(5.7%)(P<0.01)。P16INK4蛋白在胃癌组织中的阳性率为60.3%,显著低于癌旁组织(88.6%)(P<0.05)。P21WAF1蛋白在胃癌组织中的阳性率为26.4%,显著低于癌旁组织(56.6%)(P<0.01)。P16INK4表达与胃癌浸润深度及淋巴结转移相关(分别为P<0.05,P<0.01)。多因素Cox回归分析表明,淋巴结转移、P16INK4为独立预后因素。结论P16INK4蛋白、P21WAF1蛋白低表达和CyclinD1蛋白、P53过度表达与胃癌发生发展有关;P16INK4蛋白的低表达与胃癌浸润、转移及预后有一定关系。     

TGFβ1与Smad4基因在肝细胞癌中的表达及意义

目的 探讨TGFβ-Smad信号通路中TGFβ1与Co- Smad(Smad 4)与肝细胞癌的发生、发展的关系.方法 采用免疫组化ABC法及原位杂交法(ISH),检测41例肝细胞癌组织与癌旁组织中TGFβ1、Smad 4蛋白、Smad 4 mRNA的表达,以5例外伤性肝破裂手术切除标本作为正常对照.比较HCC组与时照组及HCC癌旁中TGFβ1与Smad 4蛋白、Smad4 mRNA表达的差异,并进行图像分析.结果 正常对照组中TGFβ1呈阴性表达,Smad 4蛋白、Smad 4 mRNA均呈阳性表达;HCC组织中TGFβ1阳性表达率为78.0%(32/41),癌旁组织中为95.1%(39/41),两者比较差异显著(P<0.05);Smad 4蛋白在HCC组织中阳性表达率为48.8%(20/41),在癌旁组织中为78.0%(32/41),两者比较有显著性差异(P<0.01);Smad 4 m RNA在HCC组织中阳性表达率为51.2%(21/41),在癌旁组织中为73.1%(30/41),两者比较有显著性差异(P<0.05);与正常肝组织比较,HCC组织中Smad 4蛋白和Smad 4 mRNA阳性表达率均显著降低(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ级HCC组织与Ⅲ、Ⅳ级HCC组织Smad 4 m RNA阳性表达存在显著差异(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ级阳性表达率较Ⅰ、Ⅱ级降低;Smad 4蛋白的阳性面积百分比、光密度及Smad 4 m RNA的阳性面积百分比癌旁组织均显著高于HCC组织(P均<0.05).HCC组织中Smad 4蛋白、Smad 4 m RNA表达与TGF-β1表达比较均存在显著差异(P<0.05),但均无显著相关性(P>0.05).结论 TGFβ1过表达、Smad4表达缺失可能在肝细胞癌的发生、发展中发挥重要作用.     

ZEB-1、E-cadherin在胃癌组织中的表达及与临床病理因素的关系

目的:研究ZEB-1、E-cadherin 蛋白在胃癌组织中的表达情况及其与临床病理因素之间的相互关系。方法:应用免疫组织化学法（IHC 法）检测ZEB-1 蛋白和E-cadherin 蛋白在171 例胃癌组织和60 例癌旁胃组织中的表达情况,分析两种蛋白在胃癌组织中与临床病理参数之间的关系。结果:ZEB-1在胃癌组织中呈阳性表达,阳性表达率明显高于癌旁胃组织（P<0.05）,且表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和TNM 临床分期有关（P<0.05）;E-cadherin在胃癌组织中阳性表达率明显低于癌旁胃组织,且表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和TNM 临床分期有关（P<0.05）;ZEB-1、E-cadherin 蛋白在胃癌组织中的表达呈负相关性（r=-0.369,P=0.019）。结论:联合检测E-cadherin 和ZEB-1 对判断胃癌患者的预后具有一定的临床价值。     

肺癌组织中桩蛋白和E-钙粘蛋白的表达及其临床意义

目的 :探讨桩蛋白 (Paxillin)、E -钙粘蛋白 (E cadherin)在人肺癌组织中表达及与肺癌病理特征、临床分期、淋巴结转移和预后的关系。方法 :应用免疫组织化学SP方法检测 12 0例肺癌、80例癌旁无癌浸润肺组织、5 3例正常肺组织的Paxillin和E cadherin的表达。结果 :肺癌、癌旁无癌浸润肺组织和正常肺组织Paxillin的阳性表达率分别为3 9 1% ( 4 7/12 0 )、81 3 % ( 65 /80 )、83 3 %( 4 4/5 3 ) ,三者差异有统计学意义 ,P <0 0 1;E cadherin阳性表达率分别为42 5 % ( 5 1/12 0 )、87 5 % ( 70 /80 )、96 2 %( 5 1/5 3 ) ,三者差异也有统计学意义 ,P <0 0 1。肺癌组织中Paxillin和E cadherin的阳性表达与肺癌的临床病理分期、肺癌分化程度、淋巴结转移有关 ,P <0 0 5。Paxillin阳性表达率与肺癌术后 3年生存率之间差异无统计学意义 ,P >0 0 5 ;E cadherin阳性表达率与肺癌术后 3年生存率有关系 ,P <0 0 5。结论 :肺癌组织中Paxillin、E cadherin表达可能与肺癌细胞的侵袭转移有密切联系 ,可作为评价肺癌浸润转移的生物学标志。     

Kaiso及p120ctn在胃癌中的表达及意义

目的:观察Kaiso及p120ctn在胃癌中的表达,并研究它们与胃癌临床病理参数之间的关系。方法:利用免疫组化EnVision二步法检测80例胃癌及20例对应远端切缘正常胃黏膜组织中Kaiso及p120ctn的表达。结果:胃癌中Kaiso的阳性率显著高于正常胃黏膜组织,胃癌中p120ctn的阳性率显著低于正常胃黏膜组织,差异均具有显著统计学意义(P<0.01)。胃癌中Kaiso蛋白表达与肿瘤组织学分级及淋巴结转移有关(P<0.05),胃癌中p120ctn蛋白表达与肿瘤的组织学分级有关(P<0.05),Kaiso和p120ctn在胃癌中表达呈负相关（P<0.001）。结论:Kaiso和p120ctn在胃癌中的表达呈负相关,二者可能共同参与胃癌的发生,并与胃癌的分化有关。     

PTEN,P-AKT,P-ERK蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的：检测PTEN和P—AKT，P—ERK蛋白在胃癌中的表达，并探讨其相互关系。方法：应用免疫组织化学方法检测65例胃癌及癌旁组织中PTEN和P—AKT，P—ERK蛋白的表达情况。结果：PTEN蛋白在胃癌中表达的阳性率（58．46％）明显低于相应正常组织（100％）（P〈0．01），其表达水平与组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0．05）。P—AKT蛋白在胃癌中表达的阳性率（67．69％）明显高于相应正常组织（26．15％）（P〈0．01），其表达与淋巴结转移有关（P〈0．01），与浸润深度、分化程度和TNM分期无关（P〉0．05）。P—ERK蛋白在胃癌中表达的阳性率（86．15％）明显高于相应正常组织（16．92％）（P〈0．01），其表达水平与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0．05），与分化程度无关（P〉0．05）。胃癌组织中PTEN和P—AKT、PTEN和P—ERK蛋白表达之间呈明显负相关（P〈0．01）。结论：PTEN的低表达或失表达，可能与P—AKT、P—ERK的异常激活有一定联系，从而对胃癌的发生、发展起重要作用。     

不同剂量叶酸对宫颈癌SiHa细胞自噬小体形成的影响

目的:探讨不同剂量叶酸对宫颈癌SiHa细胞自噬小体形成的影响。方法:选取处于对数生长期的SiHa细胞,将其分为5组,分别应用不同浓度叶酸（0.1 μg/ml、1.0 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml、1 000 μg/ml）干预72 h,记录干预后各组SiHa细胞自噬小体数量;采用qRT-PCR法测定不同浓度叶酸干预后宫颈癌SiHa细胞自噬蛋白中Beclin1、LC3及p62 mRNA表达情况;采用Western blot法测定不同浓度叶酸干预后宫颈癌SiHa细胞自噬蛋白中Beclin1、LC3和p62蛋白表达情况。结果:不同浓度叶酸干预后自噬小体数量比较,1 000 μg/ml组明显高于其他组（P<0.05）,其中0.1 μg/ml组数量最低,1.0 μg/ml组与10 μg/ml组比较差异无统计学意义（P>0.05）。qRT-PCR法测定结果显示,随干预叶酸浓度升高,宫颈癌SiHa细胞中自噬蛋白Beclin1、LC3的mRNA明显升高（P<0.05）;p62 mRNA表达水平随叶酸浓度升高而降低（P<0.05）。Western blot法测定结果显示,自噬蛋白Beclin1、LC3的蛋白表达水平随叶酸浓度增高而增高（P<0.05）,p62蛋白表达水平随叶酸浓度升高而下降（P<0.05）。结论:不同剂量叶酸对宫颈癌SiHa细胞自噬小体形成的抑制效果不同,剂量越低抑制效果越强,高剂量叶酸还有刺激宫颈癌SiHa细胞自噬小体形成的作用。     

趋化因子受体CCR7与PI3K/Akt通路在胃癌组织中的表达及意义

目的 观察趋化因子受体CCR7和磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（PKB或Akt）在胃癌组织中的表达情况,探讨CCR7与PI3K/Akt通路的关系。方法 采用RT-PCR法检测32例胃癌及相应癌旁对照组织中CCR7mRNA、PI3KmRNA、AktmRNA的表达;Western Blotting法检测CCR7、p-Akt蛋白的表达。结果 胃癌组织中CCR7mRNA、PI3KmRNA、AktmRNA与癌旁对照组织的表达水平相比,差异均有显著性（P〈0.001）,且CCR7mRNA与PI3KmRNA、AktmRNA表达呈正相关（P〈0.05）。CCR7、P-Akt蛋白在胃癌组织中的表达水平明显高于癌旁对照组织（P〈0.05）,两者表达与肿瘤TNM分期、浸润深度、分化程度、淋巴结转移与远处转移有关（P〈0.05）,并且CCR7、P-Akt表达水平呈正相关（P〈0.05）。结论 胃癌组织中高表达的CCR7可能通过PI3K/Akt通路促进胃癌的侵袭转移。