HIV蛋白酶抑制剂研究新进展

AIDS对人类的威胁日趋严重,在众多抗病毒药物中,蛋白酶抑制剂是重要的一员.在临床应用中,蛋白酶抑制剂能延长患者的生命,也不可避免的产生副作用和耐药性.近几年来,对其作用机理的认识在不断深入,并在此基础上开发出了一些新药,提出了一些有突破性的新思路.本文拟对此作一简要总结.     

α_1-抗胰蛋白酶和丝氨酸蛋白酶抑制剂——变异和反变异

人的血浆含有几种蛋白酶抑制剂,这些蛋白酶抑制剂约占血浆总蛋白含量的10%.如广谱抑制剂α_2-巨球蛋白即为重要一例.但这类抑制剂中研究最多、血浆含量最高的是具有特异性的α_1-抗胰蛋白酶,虽然它可以抑制大部分的丝氨酸蛋白酶,但它主要是抑制弹性蛋白酶特别是抑制嗜中性白细胞释放的弹性蛋白酶.现已证明α_1-抗胰蛋白酶是一族新的同源蛋白的主要成员.这一族同源蛋白可以抑制丝氨酸蛋白酶,故统称为丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin).研究α_1-抗胰蛋白酶所获     

基质金属蛋白酶抑制剂与肿瘤关系研究进展

基质金属蛋白酶抑制剂是一组特异性抑制基质金属蛋白酶活性的多功能细胞因子家族,在多种肿瘤中均存在高表达,且与肿瘤的侵袭和转移密切相关,在肿瘤治疗方面是一大研究热点。本文就近年来基质金属蛋白酶抑制剂与肿瘤的相关性研究进展进行综述。     

肿瘤相关胰蛋白酶抑制剂的研究概况

肿瘤相关胰蛋白酶抑制剂(tumor-associated trypsin inhibitor,TATI)又被称为胰腺分泌胰蛋白酶抑制剂(pancreatic secretory trypsin inhibitor,PSTI)或丝氨酸蛋白酶抑制因子Kazal type 1型(SPINK1),是一种由56个氨基酸残基组成的分泌性多肽,主要作用是抑制胰蛋白酶等多种丝氨酸蛋白酶活性.除此之外,还具有一些其他作用,如类生长因子作用、拮抗细胞杀伤作用等.TAT I在肿瘤中可以作为一种生物标志物.本文将对现阶段关于TAT I在肿瘤中作用的相关热点研究进行综述.     

血清蛋白酶抑制剂超家族：结构，功能和调节

血清蛋白酶抑制剂是组织中调节蛋白水解酶作用的重要抑制剂，在维护机体内环境稳定方面起着重要作用．这个家族的成员都是由单链蛋白组成，反应中心位点附近序列保持一致或相近。在与蛋白酶作用时发生结构转换，这有利于蛋白酶──抑制剂复合体的稳定性并对抑制剂功能的发挥有重要意义。在机体内，蛋白酶抑制剂的作用受多种因素调节，它的激活或稳定还需要辅助因子的作用。它的缺陷与许多种疾病的发生相关。     

血清蛋白酶抑制剂超家族：结构,功能和调节

血清蛋白酶抑制剂是组织中调节蛋白水解酶作用的重要抑制剂，在维护机体内环境稳定方面起着重要作用。这个家族的成员都是由单链蛋白组成，反应中心位点附近序列保持一致或相近。在与蛋白酶作用时发生结构转换，这有利于蛋白酶－抑制剂复合体的稳定性并对抑制剂功能的发挥有重要意义。在机体内，蛋白酶抑制剂的作用受多种因素调节，它的激活或稳定还需要辅助因子的作用。它的缺陷与许多种疾病的发生相关。     

人乳蛋白酶抑制剂

Laskowski等(1951)证明人和牛的初乳中有胰蛋白酶抑制剂。后来分离出牛初乳胰蛋白酶抑制剂,并作了定性分析。还发现了同类抑制剂(isoinhibi-tor)。这些抑制剂在猪和鼠的初乳中也存在。关于人乳的胰蛋白酶抑制剂的研究尚少。在不同的哺乳期,人乳中蛋白酶抑制剂的存在、含量及其特性的资料也不完全,其生理作用也不清楚。本文作者报告了从出生前到分娩后4个月期间,人乳中某些蛋白酶抑制剂的存在、含量及电泳特性(分娩后不同时期人乳蛋白酶抑制活性情况见     

Caspase抑制剂联合Cocktail蛋白酶抑制剂对胰岛细胞凋亡的保护

背景：目前关于联合应用Caspase抑制剂及Cocktail蛋白酶抑制剂在胰岛细胞分离纯化过程中对胰岛细胞的影响的研究还较少有报道。 目的：比较Caspase抑制剂及Cocktail蛋白酶抑制剂对胰岛细胞在分离纯化及培养过程中的保护作用。 方法：取新生猪,体外分离、纯化和培养猪胰岛,培养24 h后分为3组：①空白对照组。②消化时加抑制剂组仅在消化过程中加入Caspase抑制剂及Cocktail蛋白酶抑制剂。③消化及培养时加抑制剂组在消化及培养的过程中均加入Caspase抑制剂及Cocktail蛋白酶抑制剂。AO-EB染色定性观察细胞形态及凋亡情况,流式细胞术定量检测细胞活力及凋亡。 结果与结论：空白对照组β细胞所占百分比为66.91%,消化时加抑制剂组为84.58%,消化及培养时加抑制剂组为87.15%;空白对照组活细胞、凋亡细胞及死亡细胞的比例分别为56.52%、16.15%、21.25%,消化时加抑制剂组分别为62.27%、14.66%、14.47%,消化及培养时加抑制剂组分比为73.09%、6.83%、10.28%。结果表明,在消化以及体外培养的过程中均加入Caspase抑制剂及Cocktail蛋白酶抑制剂可明显减少细胞的损失,并且可以增加胰岛β细胞的百分比。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

比利时研制对付抗药性艾滋病毒新药

比利时法玛西亚—普强生物技术公司，研制成一种新的艾滋病药物——Ｔｒｉｐｒａｎａｖｉｒ。实验表明，这种新药能够杀伤多种对现有治疗艾滋病的药物能够产生抗药性的艾滋病毒变异体。据《华尔街日报》报道，Ｔｒｉｐｒａｎａｖｉｒ也是一种蛋白酶抑制剂。试管实验表明，它能够对目前广泛使用的４种用于治疗艾滋病的药物——蛋白酶抑制剂产生抗药性的多种艾滋病毒变异体的活动具有抑制作用。艾滋病药物——蛋白酶抑制剂通过附着在蛋白酶的所谓的活跃部位上而抑制艾滋病毒的繁殖，这种蛋白酶是由艾滋病毒产生的一种天然蛋白，它对于病毒的繁…     

α_1-抗胰蛋白酶和丝氨酸蛋白酶抑制剂——变异和反变异

人的血浆有几种蛋白酶抑制剂,这些蛋白酶抑制剂约占血浆总蛋白含量的10％。如广谱抑制剂α_2-巨球蛋白即为重要一例。但这类抑制剂中研究最多、血浆含量最高的是具有特异性的α_1-抗胰蛋白酶,虽然它可以抑制大部分的丝氨酸蛋白酶,但它主要是抑制弹性蛋白酶特别是抑制嗜中性白细胞释放的弹性蛋白酶。α_1-抗胰蛋白酶的功能是通过其基因缺陷导致结缔组织过早破坏使肺失去弹性引起肺气肿的过程而了解的。这种基因缺陷分子病理的广泛研究最近在完成正常和变异分子结构的研究时达到了高峰。现已证明α_1-抗胰蛋白酶是一族新的同源蛋白     

HIV-1病人体内出现多种蛋白酶抑制剂抗性变异株

蛋白酶抑制剂作为抗HIV-1感染的治疗药物已进入临床研究阶段。临床使用逆转录酶抑制剂由于耐药毒株的出现而受到限制,体外试验已表明使用蛋白酶抑制剂也可产生耐药毒株。本文报道从4位HIV感染病人体内分离到5个对蛋白酶抑制剂MK-639等耐受的变异株。在病人接受MK-639治疗的过程中,定期从体内分离病毒,利用培养细胞检测这些分离株对6种蛋白酶抑制剂(MK-639,XM323,A-80987,R031-8959,VX-478 和SC52151)的敏感性,同时用RT-PCR法扩增这些分离株的蛋白酶基因,并进行克隆和测序,然后用各种     

血浆蛋白酶抑制剂α_2-巨球蛋白(α2M)和α2M蛋白酶复合物对自然杀伤和抗体依赖性细胞介导细胞毒的抑制作用

近来的一些报导已经指出细胞免疫机制能被自然发生的蛋白酶抑制剂所抑制,而且蛋白酶和蛋白酶抑制剂之间的平衡在免疫调节上起一定作用.两种主要的血清蛋白酶抑制剂是α_1-蛋白酶抑制剂(α_1-抗胰蛋白酶)和α2M.已知α2M存在于淋巴细胞和单核细胞表面而且由单核细胞和B细胞亚群产生.α2M在体外可抑制包括混合淋巴细胞反应(MLR)、有丝分裂原刺激和母细胞化的免疫反应.α2M可分成快的α2M和慢     

弹性蛋白酶及其在肺损伤中的作用

弹性蛋白酶的作用底物极广,弹性蛋白酶及其抑制剂的失平衡使弹性蛋白酶有损伤正常组织的可能性。影响蛋白酶抑制剂的各种因子对弹性蛋白酶损伤作用有重要影响。本文分下述几部分进行介绍。 一、正常人体弹性蛋白酶的分类及特点 (一)根据酶的作用特点分为丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶两大类,丝氨酸蛋白酶类主要有中性粒细胞弹性蛋白酶、胰弹性蛋白酶等。金属蛋白酶类弹性蛋白酶主要有巨噬细胞弹性蛋白酶等。 (二)根据弹性蛋白酶产生的部位,可分以下几种:1.胰弹性蛋白酶:为丝氨酸蛋白     

胱抑素C与细胞外基质

半胱氨酸蛋白酶是一类重要的细胞外基质降解酶。半胱氨酸蛋白酶抑制剂C ,简称胱抑素C(CC)是这一蛋白酶抑制剂超家族主要成员之一。近来研究发现 ,CC通过对半胱氨酸蛋白酶活性的调节及其它可能的途径 ,参与了多种组织ECM代谢 ,与组织纤维化的发生、发展可能有密切关系。     

血胱蛋白酶抑制剂C在监测窒息新生儿早期肾功能损伤中的应用

目的探讨血胱蛋白酶抑制剂C（Cystatin C）在窒息新生儿中的变化及意义,评价其在窒息新生儿早期肾功能损伤中的应用。方法按Apgar评分标准将观察对象分为正常对照组、轻度窒息和重度窒息组。入选新生儿生后48h～72h间采集标本测定血：胱蛋白酶抑制剂C、Cr、CCr及BUN,并进行分析观察。结果正常对照组50例,轻度窒息140例,重度窒息60例。（1）窒息新生儿的血胱蛋白酶抑制剂C,BUN及Cr显著高于正常对照组（P〈0.01）;重度窒息组血胱蛋白酶抑制剂C,BUN及Cr高于轻度窒息（P〈0.01）。（2）有少尿症状的窒息新生儿中测定血胱蛋白酶抑制剂C较Scr,BUN灵敏。（3）血胱蛋白酶抑制剂C推算GFR与内生肌酐清除率相关性好。结论血胱蛋白酶抑制剂C可以反应窒息新生儿肾功中的早期损害,其敏感性优于BUN及Cr;并且血胱蛋白酶抑制剂C可较精确计算GFR。     

关节腔内注射透明质酸钠可以延缓创伤性骨关节炎的软骨退变

背景：透明质酸钠是一种治疗骨关节炎的有效手段,但其机制尚不清楚。有研究表明基质金属蛋白酶1,3,9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2表达失调对骨关节炎有重要影响。目的：观察关节腔内注射透明质酸钠对兔创伤性骨关节炎模型软骨中基质金属蛋白酶1,3,9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2表达的影响。方法：采用单侧前交叉韧带切断法构建创伤性骨关节炎模型兔,造模后4周关节腔注射体积分数1%透明质酸钠0.3 mL,每周1次,连续5周,设为透明质酸钠组,同时设模型组和正常对照组作对比。术后11周麻醉处死动物,获取软骨并提取总RNA,用实时聚合酶链反应分析各组软骨内基质金属蛋白酶1,3,9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2 mRNA表达。结果与结论：与模型组相比,透明质酸钠组经关节腔内注射透明质酸钠软骨损伤范围和程度均减轻(P < 0.01),软骨组织学评分明显降低(P < 0.05)。模型组软骨内基质金属蛋白酶1,3,9 mRNA表达增强,基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2 mRNA表达下调,而透明质酸钠组软骨中基质金属蛋白酶1,3,9,基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2 mRNA的表达并无显著变化。结果说明,基质金属蛋白酶1,3,9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2参与了创伤性骨关节炎软骨退变过程,虽然关节腔内注射透明质酸钠可以延缓创伤性骨关节炎软骨退变,但透明质酸钠并不是通过调节上述因子的表达来发挥修复作用的,具体机制有待进一步研究证实。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

维药买朱尼对骨关节炎大鼠模型关节软骨中基质金属蛋白酶1和基质金属蛋白酶抑制剂1的影响

背景：骨关节炎患者关节软骨的损害与基质金属蛋白酶1和基质金属蛋白酶抑制剂失平衡有关。 目的：观察基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1在关节软骨中的表达及维药买朱尼对其影响。 方法：将20只SD大鼠采用改良Hulth造模法建立大鼠膝骨关节炎模型,按随机数字表法随机等分为买朱尼组和模型组,建模第2周开始分别灌胃维药买朱尼和生理盐水,连续4周。 结果与结论：相比于模型组,买朱尼组大鼠膝关节软骨退变程度减轻,软骨大体评分及Mankin评分降低(P < 0.05),且膝关节软骨细胞中基质金属蛋白酶1的表达降低,基质金属蛋白酶抑制剂1的表达增加(P < 0.05)。说明维药买朱尼可以通过下调基质金属蛋白酶1的表达水平、上调抑制剂的表达水平,对软骨产生保护作用。     

丝氨酸蛋白酶抑制剂B9与相关免疫细胞

丝氨酸蛋白酶抑制剂B9(Serpin B9)是蛋白酶抑制剂超家族成员,包括人丝氨酸蛋白酶抑制剂(PI-9)及鼠丝氨酸蛋白酶抑制剂同源蛋白(SPI-6),是主要针对颗粒蛋白酶B(GrB)的内源性蛋白酶抑制剂.Serpin B9的调节在T淋巴细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞、中性粒细胞、间充质干细胞、肿瘤细胞有抑制凋亡、维持细胞平衡、调节免疫反应、增强DNA疫苗能力等功能.研究Serpin B9的作用机理,将有利于相关免疫疾病发生机制的探索,并为临床干细胞治疗、抗肿瘤治疗等提供新的理论依据.     

半胱氨酸蛋白酶抑制剂与眼科疾病的关系

半胱氨酸蛋白酶抑制剂是一种广泛存在于人体各种组织中的天然蛋白酶抑制剂,其检测已经在肾脏疾病、糖尿病、心脏病、肿瘤等领域得到广泛应用,而在眼科疾病方面的研究还很少,本文就该蛋白因子在眼科疾病的研究进行综述。     

成骨细胞旁分泌影响软骨细胞中MMPs与TIMPs的表达

背景：细胞之间体外共培养能最大限度的模拟体内真实的微环境,细胞划痕实验及炎症因子白细胞介素1β刺激后基质金属蛋白酶及基质金属蛋白酶抑制剂之间的平衡可能破坏,从而导致关节软骨细胞外基质的降解,软骨细胞功能的失调,关节软骨的退变。目的：在成骨细胞上清液与软骨细胞体外共培养下,观察炎症因子白细胞介素1β对体外培养的软骨细胞的迁移、基质金属蛋白酶及组织金属蛋白酶抑制剂表达的影响。方法：实验分为软骨细胞单培养组﹑软骨细胞与成骨细胞上清液共培养组和软骨细胞与成骨细胞上清液共培养+白细胞介素1β组,划痕实验观察3组24 h软骨细胞的迁移变化;半定量PCR实验分析以上3组24 h软骨细胞中基质金属蛋白酶1,2,3,9及组织金属蛋白酶抑制剂1,2,3,4的变化情况。结果与结论：与单培养组比较,共培养组和共培养+白细胞介素1β组细胞迁移率显著增加(P < 0.01);与单培养组比较,共培养组中基质金属蛋白酶1,2,3,9基因表达明显增高(P < 0.05),共培养+白细胞介素1β组基质金属蛋白酶1,3,9基因表达明显增高(P < 0.01);与单培养组比较,共培养组和共培养+白细胞介素1β组中组织金属蛋白酶抑制剂1基因表达明显升高(P < 0.01),组织金属蛋白酶抑制剂3,4基因表达明显下降(P < 0.05)。提示成骨细胞上清液与软骨细胞共培养促进软骨细胞的迁移,增强软骨细胞中基质金属蛋白酶1,2,3,9的基因表达且调节组织金属蛋白酶抑制剂家族的基因表达。白细胞介素1β抑制共培养的软骨细胞迁移及组织金属蛋白酶抑制剂家族的基因表达。        中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程