骨肉瘤组织中ephrinB2和EphB4蛋白表达与临床病理及血管生成的关系

目的:探讨ephrinB2 及其受体EphB4在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤发生、发展以及血管生成的关系。方法:采用免疫组化SP法检测三种骨肉瘤细胞株(SAOS、U2 OS、HOS)、10例正常骨、10 例良性骨肿瘤和80例骨肉瘤组织中EphB4、ephrinB2、CD34和FⅧRag 等蛋白表达,并根据CD34和FⅧRag染色结果计数微血管密度。结果:EphB4 及ephrinB2 在骨肉瘤细胞株中呈阳性表达,骨肉瘤中EphB4 及ephrinB2显著高于正常骨,P=0 .000 6。EphB4 及ephrinB2的蛋白表达定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞胞质, 呈异质性分布;两种蛋白在Ⅲ级骨肉瘤中的表达均明显高于Ⅰ、Ⅱ级,P=0. 003和P=0 .013。EphB4 和eph rinB2强表达组中的MVD 分别为44. 4±14 .7和46. 8±16. 0,均显著高于EphB4 和ephrinB2 弱表达组相应的MVD . 32. 3±22. 2 和31 .0 ±15. 5, P = 0 .008 和P=0 .000 7。结论: EphB4/ephrinB2 在骨肉瘤发生、演进过程中起着重要作用,并与肿瘤血管生成密切相关。     

Noteh1、Dll4蛋白在骨肉瘤的表达及临床意义

目的 探讨Notch1及其配体Dll4在骨肉瘤的表达及其和血管牛成的关系.方法 采用免疫组化SP法检测62例骨肉瘤Notch1和Dll4蛋白的表达,并根据CD34染色结果 计数微血管密度(MVD).43例骨软骨瘤标本作为对照.结果 (1)Notchl和Dll4在骨肉瘤表达的阳性率为85.5%、88.7%,骨软骨瘤表达阳性率为21.2%、23.6%,差异具有显著性(P<0.05);且Notch1和Dll4表达存在正相关(P<0.05,r=0.842).(2)Notch1和Dll4蛋白的阳性表达与骨肉瘤组织分化程度、Ennecking分期和有无转移密切相关(p<0.05).(3)Notch1或Dll4高表达组MVD显著高于低表达组)P<0.05).结论 Notch1、Dll4在骨肉瘤组织中的表达上调与血管生成密切相关,可能在骨肉瘤发生、发展中起重要作用.     

IMP3蛋白在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤微血管密度的关系

目的:研究胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3(IMP3)在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤微血管密度（MVD）的相关性,探讨二者与骨肉瘤发生发展的关系。 方法:选取骨肉瘤患者62例,以骨软骨瘤患者术后石蜡切片20例为对照,采用免疫组化SP法分别检测IMP3和MVD在骨肉瘤和骨软骨瘤组织中的表达。 结果:IMP3蛋白在骨肉瘤组织中的表达高于骨软骨瘤(P<0.05);IMP3蛋白在骨肉瘤的Enneking分期、肺转移、肿瘤复发和肿瘤直径中的表达差异具有统计学意义(均P<0.05);骨肉瘤微血管生成高于骨软骨瘤(P<0.05);CD34标记的MVD值在骨肉瘤的Enneking分期、肺转移、肿瘤复发和肿瘤直径中差异具有统计学意义(均P<0.05);IMP3蛋白表达和MVD值在骨肉瘤组织中呈正相关（r=0.259,P<0.05）。 结论:IMP3、MVD与骨肉瘤的发生及侵袭转移密切相关,可作为骨肉瘤恶性程度及预后的良好指标。     

Notch1、Dll4蛋白在骨肉瘤的表达及临床意义

目的探讨Notch1及其配体Dll4在骨肉瘤的表达及其和血管生成的关系。方法采用免疫组化SP法检测62例骨肉瘤Notch1和Dll4蛋白的表达,并根据CD34染色结果计数微血管密度（MVD）。43例骨软骨瘤标本作为对照。结果（1）Notch1和Dll4在骨肉瘤表达的阳性率为85．5％、88．7％,骨软骨瘤表达阳性率为21．2％、23．6％,差异具有显著性（P〈0．05）;且Notch1和Dll4表达存在正相关（P〈0．05,r=0．842）。（2）Notch1和Dll4蛋白的阳性表达与骨肉瘤组织分化程度、Ennecking分期和有无转移密切相关（P〈0．05）。（3）Notch1或Dll4高表达组MVD显著高于低表达组（P〈0．05）。结论Notch1、Dll4在骨肉瘤组织中的表达上调与血管生成密切相关,可能在骨肉瘤发生、发展中起重要作用。     

促血管生成素表达与人脑胶质瘤血管生成的关系研究

目的:研究促血管生成素(angiopoie-tins,Angs)蛋白表达水平与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factar,VEGF)和肿瘤内微血管密度(microvascular density,MVD)的关系,探讨其在人脑胶质瘤血管生成中的作用。方法:采用免疫组化方法检测42例人脑胶质瘤组织中Ang-1、Ang-2和VEGF的蛋白表达水平,并以抗CD34单克隆抗体显示血管内皮细胞,根据CD34阳性的血管计数来判定MVD。结果:42例人脑胶质瘤中,Ang-1+肿瘤的MVD比Ang-1-肿瘤高,但两者差异无统计学意义,P=0·156;Ang-2-和Ang-2+平均MVD分别是27·67和49·63,Ang-2+肿瘤MVD显著高于Ang-2-肿瘤,P=0·000。VEGF阳性表达时,Ang-2+肿瘤平均MVD显著高于Ang-2-肿瘤,分别为56·00和36·75,P=0·001;而VEGF阴性组中,Ang-2+肿瘤平均MVD与Ang-2-肿瘤几乎相等,分别为53·17和47·36,P=0·109。随胶质瘤恶性程度增加,Ang-1和Ang-2阳性表达率均升高,但Ang-2升高更明显,不同级别间Ang-2表达水平差异有统计学意义。结论:Ang-2高表达与人脑胶质瘤血管新生密切相关,Ang-2可以作为评价胶质瘤血管生成及恶性程度的一个重要指标。VEGF存在时,Ang-2过表达可促使肿瘤血管生成。肿瘤防治杂志,2005,12(19):1472-1475     

N-钙黏附素和β-环连蛋白在骨肉瘤中的表达及其意义

目的 探讨N-钙黏附素(N-cadherin)和β-环连蛋白(β-catenin)在骨肉瘤组织中的表达及其与骨肉瘤临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化法,检测54例骨肉瘤组织、11例骨样骨瘤、7例骨母细胞瘤和8例反应性新生骨组织中N-cadherin和β-catenin的蛋白表达水平,并结合临床病理资料进行相关分析.结果 N-cadherin蛋白在反应性新生骨、骨母细胞瘤、骨样骨瘤和骨肉瘤组织中的阳性表达率分别为75.0%、71.4%、63.6%和35.2%,其在骨肉瘤组织中的阳性表达率明显低于骨样骨瘤、骨母细胞瘤和反应性新生骨组织(P=0.035);N-cadherin蛋白在伴有肺转移的骨肉瘤患者组织中的阳性表达率(21.7%)明显低于无肺转移者(56.3%,P=0.027),在2年内死亡患者组织中的阳性表达率(18.2%)明显低于生存2年以上者(50.0%,P=0.024).β-catenin蛋白在反应性新生骨、骨母细胞瘤、骨样骨瘤及骨肉瘤组织中的异常表达率分别为12.5%、28.6%、27.3%和66.7%,其在骨肉瘤组织中的异常表达率明显高于骨样骨瘤、骨母细胞瘤和反应性新生骨组织(P=0.002);β-catenin蛋白在肺转移的骨肉瘤患者组织中的异常表达率(82.6%)明显高于无肺转移组(43.8%,P=0.011).骨肉瘤组织中,N-cadherin蛋白的阳性表达与β-catenin蛋白的异常表达呈负相关(r=-0.302,P=0.027).结论 骨肉瘤组织中,N-cadherin蛋白的阳性表达率降低,β-catenin蛋白的异常表达率增高.N-cadherin蛋白表达与骨肉瘤的转移和预后密切相关,而β-catenin蛋白的表达仅与骨肉瘤的转移相关.     

骨肉瘤组织FLIP和FADD及Caspase-8蛋白表达与细胞凋亡相关性的研究

目的:探讨FLIP、FADD和Caspase-8在人骨肉瘤组织及骨软骨瘤组织中的表达及其与骨肉瘤细胞凋亡的关系.方法:应用免疫组化法检测FLIP、FADD和Caspase-8蛋白在43例骨肉瘤组织及30例骨软骨瘤组织中的表达,并经图像分析系统检测FLIP、FADD和Caspase-8蛋白的平均光密度(OD)值.用激光扫描共聚焦显微镜检测骨肉瘤及骨软骨瘤中细胞凋亡分布情况并对各因子之间进行相关性分析.结果:FLIP蛋白阳性物质在骨肉瘤中的表达高于骨软骨瘤,P<0.05;而FADD 和 Caspase-8蛋白在骨肉瘤中的表达低于骨软骨瘤,P<0.05.FLIP和Caspase-8蛋白在骨肉瘤中表达呈负相关,r=-0.843,P<0.05;而FLIP、FADD蛋白在骨肉瘤中表达无相关性.骨肉瘤组细胞凋亡指数(AI) 显著低于骨软骨瘤组,P<0.05;FLIP蛋白表达与细胞凋亡指数呈负相关,r=-0.726,P<0.05;而Caspase-8蛋白表达与骨肉瘤细胞凋亡呈正相关,r=0.446,P<0.05; FADD蛋白表达与与凋亡指数无相关性.结论:FLIP蛋白对骨肉瘤细胞凋亡有抑制作用,Caspase-8蛋白在骨肉瘤中呈低表达,抑制了肿瘤细胞凋亡.如能抑制FLIP的表达,促进Caspase-8的表达,可提高骨肉瘤细胞对凋亡的敏感性.     

p53和血管内皮生长因子表达与胃癌血管生成的关系

目的 :探讨p5 3和血管内皮生长因子表达与胃癌血管生成的关系。方法 :应用免疫组织化学方法检测 76例胃癌组织的p5 3蛋白、血管内皮生长因子 (VEGF)与微血管密度 (MVD)表达 ,分析p5 3蛋白、VEGF及MVD表达与临床病理指标之间的关系。结果 :胃癌组织p5 3蛋白与VEGF阳性表达率分别为 4 2 1% (32 76)和 38 2 % (2 9 76) ,MVD平均计数为 36 6± 17 2 ( x±s) ;p5 3、VEGF、MVD表达与肿瘤浸润深度 (P <0 0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 5 )、淋巴结转移 (P <0 0 1,P <0 0 5 ,P <0 0 1)和远处转移 (P <0 0 1,P <0 0 1,P <0 0 1)密切相关 ;p5 3蛋白与VEGF表达密切相关 (χ2 =35 3916,P <0 0 1,P <0 0 1)。结论 :VEGF与MVD表达是反映胃癌生物学行为的重要标志 ,p5 3表达可能通过上调VEGF而促进胃癌血管生成     

TRAIL、Ki-67蛋白在人骨肉瘤中表达及其与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系

目的:通过观察TRAIL、Ki-67在人骨肉瘤组织中的表达规律及其相互关系,探讨二者与骨肉瘤细胞增殖、凋亡的相关性.方法:用免疫组织化学方化法检测TRAIL、Ki-67蛋白在骨肉瘤及骨软骨瘤中的表达,用TUNEL方法通过激光扫描共聚焦显微镜检测骨肉瘤及骨软骨瘤组织中的细胞凋亡分布情况并计算增殖和凋亡指数.结果:骨肉瘤组织TRAIL蛋白表达强度低于骨软骨瘤(t=-5.51,P＜0.05);而Ki-67蛋白表达高于骨软骨瘤(t=17.69,P＜0.05).TRAIL和Ki-67在骨肉瘤中的表达呈负相关(r=-0.8444,P＜0.01).骨肉瘤中细胞凋亡指数(AI)显著低于骨软骨瘤(P＜0.01);而增殖指数(PI)显著高于骨软骨瘤(P＜0.01).骨肉瘤中Ki-67蛋白表达与细胞凋亡指数之间呈负相关(r=-0.562 2,P＜0.01);而TRAIL蛋白表达与细胞凋亡指数呈正相关(r=0.6350,19<0.01),而与增殖指数呈负相关(r=-0.553 0,19<0.01).结论:TRAIL参与细胞凋亡的调控,可能是诱导骨肉瘤细胞凋亡的分子基础之一;Ki-67在肿瘤细胞的增殖与凋亡中具有重要作用,骨肉瘤组织中Ki-67明显过表达,而TRAIL蛋白表达明显下调,表明两者在骨肉瘤的发生、发展中起拮抗作用.如能抑制Ki-67的表达,促进TRAIL的表达,有可能提高骨肉瘤细胞的凋亡敏感性.     

TSP-1及TP的表达与骨肉瘤新生血管生成的相关性

目的研究血小板反应蛋白-1(TSP-1)和胸苷磷酸化酶(TP)在骨肉瘤组织中的表达情况,探讨两者的平衡状态在新生血管生成中的作用。方法收集54例骨肉瘤手术切除标本,应用免疫组织化学法检测骨肉瘤组织中TSP-1及TP的表达,CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞,计数骨肉瘤微血管密度(microvessel density,MVD)。结果骨肉瘤TSP-1的表达程度与MVD呈负相关(Spearman秩和检验:rs=-0.241,P=0.000);TP的表达与MVD计数呈正相关(Spearman秩和检验:rs=0.511,P=0.000);TSP-1、TP的表达与骨肉瘤临床病理因素无统计学意义(均P0.05),但都与肺转移显著相关(P0.05)。结论 TSP-1及TP在骨肉瘤发生发展中起重要作用,并影响血管形成及肿瘤侵袭性,两者表达的不平衡是骨肉瘤组织中新生血管生成的关键因素之一。     

DNA的损伤与修复

细胞的生物信息储存在DNA中。在真核细胞中,绝大多数（98％）DNA与蛋白质结合形成染色质存在于细胞核内,一小部分存在于其他细胞器中,如线粒体内。DNA由鸟嘌呤、腺嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶、戊糖和磷酸组成,碱基不同的排列顺序编码了不同的生物信息。在细胞的生存过程中,DNA会遭到内源性和外源性的损伤（表1）,例如放射线和化学物质。正常细胞的DNA损伤是诱发疾病的原     

The DNA2 nuclease/helicase is an estrogen-dependent gene mutated in breast and ovarian cancers

Genomic instability, a hallmark of cancer, is commonly caused by failures in the DNA damage response. Here we conducted a bioinformatical screen to reveal DNA damage response genes that are upregulated by estrogen and highly mutated in breast and ovarian cancers. This screen identified 53 estrogen-dependent cancer genes, some of which are novel. Notably, the screen retrieved 9 DNA helicases as well as 5 nucleases. DNA2, which functions as both a helicase and a nuclease and plays a role in DNA repair and replication, was retrieved in the screen. Mutations in DNA2, found in estrogen-dependent cancers, are clustered in the helicase and nuclease domains, suggesting activity impairment. Indeed, we show that mutations found in ovarian cancers impair DNA2 activity. Depletion of DNA2 in cells reduces their tumorogenicity in mice. In human, high expression of DNA2 correlates with poor survival of estrogen receptor-positive patients but not of estrogen receptor-negative patients. We also demonstrate that depletion of DNA2 in cells reduces proliferation, while addition of estrogen restores proliferation. These findings suggest that cells responding to estrogen will proliferate despite being impaired in DNA2 activity, potentially promoting genomic instability and triggering cancer development.     

DNA倍体分析对乳腺癌恶性程度及预后评估的临床意义

目的 探讨DNA倍体分析对乳腺癌恶性程度及预后评估的临床意义。方法 用HPIAS-1000高清晰度彩色病理分析系统对有5年以上随访资料的120例乳腺癌患者进行组织学分级，高分化（Ⅰ级）48例，中等分化（Ⅱ级）44例，低分化（Ⅲ级）28例；并进行DNA倍体分析，即2倍体（2C）、3-4倍体（3-4C）、非整倍体（aneuploid，AN）。结果 120例乳腺癌患者Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅱ级与Ⅲ级、Ⅰ级与Ⅲ级之间，除3-4倍体外，2倍体及AN差异均有非常显著意义（P〈0．01）。观察各级乳腺癌5年以上存活率与DNA倍体含量AN的出现率呈负相关，与2倍体的出现率呈正相关，与3-4倍体的出现率无相关意义。r=-0．9942，差异有非常显著意义（P〈0．01）。结论 DNA倍体分析对乳腺癌恶性程度及预后的评估有较高的临床意义。     

鼻咽癌患者血浆EBV DNA﹑血清CYFRA21-1和VCA-IgA的检测及临床应用

目的:探讨血浆EB病毒DNA、血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)和EB病毒壳抗原IgA(VCA-IgA)三种肿瘤标记物对鼻咽癌诊断、疗效监测和预后判断的临床应用价值. 方法: 分别采用荧光定量PCR法、电化学发光法和免疫酶法检测62例鼻咽癌患者治疗前、后及62例健康对照者血浆EBV DNA、血清CYFRA21-1和VCA-IgA含量,并进行对比分析. 结果: 治疗前血浆EBV DNA、血清CYFRA21-1和VCA-IgA的阳性率明显高于健康对照组(P<0.01);治疗后血浆EBV DNA、血清CYFRA21-1和VCA-IgA含量高者,在随访中发现肿瘤残存、复发或远处转移. 结论: 血浆EBV DNA、血清CYFRA21-1和VCA-IgA的检测对鼻咽癌早期诊断、高危人群筛查、以疗效监测和预后判断有重要临床应用价值,三种肿瘤标记物联合检测有互补作用.     

游离DNA检测对肿瘤诊断的意义

肿瘤患者血液、胸腹腔积液、脑脊液等体液中可以检测到游离DNA含量远大于正常人,并且游离DNA表现出与肿瘤组织相同的生物学特性.本文综述游离DNA的部分肿瘤特性,主要是游离DNA甲基化、基因突变和微卫星改变等,介绍游离DNA检测对肿瘤患者的诊断、预后跟判断复发等方面的作用.     

26例喉鳞状细胞癌微卫星不稳定性及杂合性丢失研究

[目的]在喉癌易感染色体区域8p23.2、9p21.1、3p24.3筛查肿瘤相关基因,探讨CSMD1基因与喉鳞癌的相关性.[方法]在8p23.2、9p21.1、3p24.3区域选择D8S518、D8S264、D9S251、D3S2303四个微卫星多态性标记,应用聚合酶链反应(PCR)-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染法对26例喉鳞癌进行微卫星不稳定性及杂合性丢失分析.[结果]4个多态性标记中的3个有不同程度的微卫星不稳定性及杂合性丢失.其中D9S251位点MSI检出率为19%.D8S518位点LOH发生率为5%,MSI的发生率为10%,总的突变率为15%.D8S264位点MSI发生率为9.5%.[结论]8p23.2、9p21.1区域可能存在与喉鳞癌发生有关的基因,CSMD1基因可能是一个与喉鳞癌有关的抑癌基因.     

DNA双链断裂NHEJ修复及其与肿瘤的研究

非同源末端连接是哺乳动物最主要的DNA双链断裂(DSB)连接方式.肿瘤细胞非同源末端连接能力的提高与其放化疗抵抗有关,抑制肿瘤细胞非同源末端连接能力,可能增加其对放化疗的敏感性.因此,参与非同源末端连接的修复因子可能成为肿瘤分子靶向治疗及放化疗增敏的新治疗点.     

PTEN in DNA damage repair

The ability of DNA repair in a cell is vital to its genomic integrity and thus to the normal functioning of an organism. Phosphatase and tensin homolog (PTEN) is a well-established tumor suppressor gene that induces apoptosis and controls cell growth by inhibiting the PI3K/AKT pathway. In various human cancers, PTEN is frequently found to be mutated, deleted, or epigenetically silenced. Recent new findings have demonstrated that PTEN also plays a critical role in DNA damage repair and DNA damage response. This review summarizes the recent progress in the function of PTEN in DNA damage repair, especially in double strand break repair and nucleotide excision repair. In addition, we will discuss the role of PTEN in DNA damage response through its interaction with the Chk1 and p53 pathways. We will focus on the newly discovered mechanisms and the potential implications in cancer prevention and therapeutic intervention.     

肿瘤病人外周血DNA检测的意义

肿瘤病人血循环中DNA的量较一般人明显增多,而且从中可检测到肿瘤相关基因的特征性改变,可用于协助诊断,并作为预测预后及疗效观察的指标,具有重要的临床意义.     

大肠癌和大肠腺瘤DNA含量与细胞增殖活性检测的临床意义

分子生物学及细胞生物学的研究表明,恶性肿瘤最重要的生物学特征为肿瘤细胞异常增殖和分化不良、浸润性生长和远处转移以及细胞恶性特征的遗传性.以上3点癌细胞共同生物学特征的出现,均以细胞核DNA含量和(或)染色体倍体与功能等微细异常为物质基础.因此,测量和分析癌前病变及癌组织中细胞核DNA含量与倍体对恶性肿瘤的病理诊断、恶性程度判定、疗效评估、预测预后均具有重要价值.本研究应用流式细胞术(FCM)检测了经手术或肠镜取得的对照组(正常大肠黏膜)、大肠腺瘤(绒毛状腺瘤、管状腺瘤)和大肠癌组织,检测了它们的DNA倍体、DNA含量和细胞的增殖活性,并进行了临床分析.