荷叶碱对野生型和突变型囊性纤维化跨膜电导调节因子氯离子通道的激活作用

目的：从天然单体化合物中筛选能够激活囊性纤维化跨膜电导调节因子（CFTR）Cl^-通道转运活性的激活剂。方法：利用稳定表达人CFTR和对卤族元素碘离子高度敏感的荧光绿蛋白突变体EYFP—H148Q的Fischer大鼠甲状腺上皮细胞为筛选模型，测定386种中药单体化合物对CFTR介导的I^-内流速度的影响。结果：发现生物碱类化合物荷叶碱对野生型和△F508突变型CFTR Cl^-通道具有激活作用，而对G551D突变型CFTRCl^-通道无激活作用。荷叶碱对野生型和△F508突变型CFTR Cl^-通道的激活作用具有作用迅速、可逆的特点，并且依赖于细胞内cAMP水平。荷叶碱不提高细胞内cAMP水平，当CFTR磷酸化程度达到最大时仍能进一步激活CFTR Cl^-通道激活作用，表明它可能是通过与CFYR直接结合而发挥作用的。结论：首次发现荷叶碱对野生型和△F508突变型CFTR Cl^-通道的激活作用，该天然化合物将在阐明CFR活性机制及作为先导化合物开发与CFTR有关的疾病治疗药物等方面具有重要用途。     

对羟基苯甲酸丁酯激活囊性纤维化跨膜电导调节因子氯离子通道开放

对20种挥发油类化合物中的对羟基苯甲酸丁酯(butyl-p-hydroxybenzoate, Bpb)的CFTR氯离子通道激活作用进行系统的分子药理学研究。利用稳定共表达人CFTR和对卤族元素碘离子高度敏感的荧光绿蛋白突变体(EYFP)的Fischer大鼠甲状腺 (FRT) 上皮细胞为筛选模型, 测定Bpb对CFTR介导的I^- 内流速度的影响。发现了Bpb对野生型CFTR的Cl^- 通道具有显著的激活作用; Bpb不能纠正 ?F508-CFTR蛋白胞内转运的障碍, 但却具有纠正其通道开放障碍的功能; Bpb对G551D突变型CFTR Cl^- 通道无激活作用。激活作用具有可逆和剂量依赖的特点, 初步机制分析结果表明, 它可能是通过与CFTR直接结合而发挥作用的。首次发现了Bpb对CFTR Cl^- 通道有激活作用, 为深入研究Bpb的药理学作用提供了新方向, 使其有可能成为治疗CFTR有关疾病的先导药物。     

木犀草素促进囊性纤维化跨膜电导调节因子氯离子通道开放

目的：研究木犀草素对依赖于3，5-环腺苷酸（cAMP）的囊性纤维化跨膜电导调节因子（CFTR）Cl^-通道的激活作用。方法：利用稳定共表达人CFTR与一种对卤族元素敏感的荧光绿蛋白突变体（EYFP-H148Q）的Fischer大鼠甲状腺（FRT）细胞模型，测定木犀草素对CFTR介导的I^-内流速度。结果：木犀草素能够以剂量依赖的方式激活CFTR的I^-转运，其对CFTR Cl^-通道的激活效应具有作用迅速、可逆的特点。木犀草素在发挥激活作用时依赖于腺苷环化酶激动剂Forskolin的存在，其单独与细胞孵育不提高细胞内cAMP的水平。结论：发现了木犀草素能够以剂量依赖方式激活CFTR，并且初步确定了木犀草素通过直接与CFTR结合发挥作用。     

中草药中有效成分的测定 Ⅰ.牡丹皮和徐长卿中丹皮酚的库伦滴定法

牡丹皮和徐长卿皆为常用中药,均含有丹皮酚。丹皮酚具有降压、镇静等作用,对小鼠的实验性疼痛和由于电刺激或药物引起的惊厥具有止痛作用和抗惊厥作用。测定丹皮酚的方法有薄层-分光法、容量法等,但较费时。根据丹皮酚易为溴取代的性质,我们研究了用库伦滴定法进行测定,同时比较和改进了生药提取方法,简化操作,缩短了分析样品时间,从而建立了较简便的测定牡丹皮和徐长卿中丹皮酚的方法。     

丹皮酚对实验性胃溃疡及幽门螺杆菌的抑制作用

目的:研究中药单体成分丹皮酚对实验性胃溃疡以及幽门螺杆菌(HP)的抑制作用。方法:建立了乙醇致小鼠胃溃疡模型,60只小鼠随机分为6组,正常对照组和模型组给予0.9%氯化钠溶液,丹皮酚组灌胃给予丹皮酚(50mg·kg~(-1),100mg·kg~(-1),200mg·kg~(-1));阳性对照组雷尼替丁灌胃40mg·kg~(-1),连续给药6d。末次给药0.5h后,各组给予无水乙醇0.2mL·只~(-1)(正常对照组除外)。1h后,小鼠脱颈椎处死,取胃,观察胃黏膜的组织学变化,计算溃疡指数和抑制率。并通过幽门螺杆菌体外敏感试验,观察丹皮酚对HP的抑制作用。结果:丹皮酚对乙醇所致小鼠胃溃疡有保护作用,剂量增大溃疡指数减小,丹皮酚低、中、高剂量溃疡抑制率分别为39.0%,58.5%,82.9%,其中高剂量抗溃疡程度与雷尼替丁相似。丹皮酚抗幽门螺杆菌的最小抑菌浓度MIC为4mg·mL~(-1)。结论:丹皮酚可显著减轻乙醇引起的胃黏膜损伤,对实验性胃溃疡具有保护作用并且具有较好的体外抗HP的活性。     

中药水煎剂和免煎颗粒剂牡丹皮中丹皮酚的含量与有效性的比较

目的 比较中药水煎剂与免煎颗粒剂牡丹皮中丹皮酚的含量和有效性并为临床用药提供参考.方法 采用高效液相色谱法测定牡丹皮中丹皮酚的含量,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇-水(45:55)为流动相,检测波长为274nm.结果 免煎颗粒剂牡丹皮中丹皮酚的含量为2.35%,中药饮片的水煎剂中丹皮酚的含量为0.99%.结论 中药水煎剂和免煎颗粒剂牡丹皮中丹皮酚的含量存在差异,但中药水煎剂比免煎颗粒剂的临床疗效更佳.     

丹皮酚与山楂黄酮优化配伍降低胆固醇作用研究

目的研究丹皮酚、山楂黄酮不同剂量配伍对高脂血症小鼠胆固醇(TC)的影响,为优化配伍提供依据。方法采用小鼠腹腔注射蛋黄乳剂造成急性高胆固醇血症模型,用终点法试剂盒测定血清TC含量。观察丹皮酚、山楂黄酮的降血脂作用;用均匀设计法研究丹皮酚、山楂黄酮配伍后对TC的影响;对丹皮酚、山楂黄酮优化配伍组合后的降血脂作用进行重复验证实验。结果丹皮酚、山楂黄酮单用有一定的降血脂作用;丹皮酚与山楂黄酮以2∶1的比例配伍为最佳剂量比,降脂效果最佳。结论丹皮酚600 mg.kg-1与山楂黄酮300 mg.kg-1配伍具有明显的降低胆固醇作用。     

消银片中丹皮酚含量测定方法学研究

目的:研究消银片中丹皮酚含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法测定消银片中丹皮酚的含量。结果:消银片含有一定量的丹皮酚,在重现性和回收率研究中结果均很好,但干扰性试验中发现阴性样品中含有丹皮酚。结论:高效液相色谱法对消银片中丹皮酚测定不具有专属性。     

慢性间歇性低压低氧增强丹皮酚舒张大鼠动脉的作用

目的研究慢性间歇性低压低氧(CIHH)对丹皮酚舒张大鼠离体胸主动脉环作用的影响,并探讨其可能的机制。方法♂SD大鼠,随机分为CIHH组和常氧对照组。CIHH大鼠给予28 d相当于海拔5 000米高度,每天6 h的CIHH处理;制备胸主动脉环,将动脉环置于浴槽内,恒温灌流、并记录其舒缩活动。结果 CIHH对去甲肾上腺素(NE)和KCl引起的大鼠离体血管收缩活动无影响;CIHH增强了丹皮酚舒张大鼠离体胸主动脉环的作用;在CIHH组,丹皮酚舒张大鼠离体血管的作用可被心得安、格列苯脲和L-NAME部分阻断,丹皮酚抑制NE诱发的细胞内钙和外钙性收缩,而在正常氧组,未出现格列苯脲的阻断效应和对细胞内钙性收缩的抑制效应。吲哚美辛对丹皮酚舒张正常氧和CIHH大鼠血管的效应均无阻断作用。结论 CIHH增强了丹皮酚舒张大鼠离体胸主动脉环的作用,推测其机制是增强了与正常氧相同的作用机制,还通过激活ATP敏感性K+通道和抑制内钙释放而发挥作用。     

丹皮酚的研究进展

牡丹皮是一种传统中药,丹皮酚是其主要药效成分。临床上丹皮酚主要外用抗过敏,但近年来研究发现丹皮酚对多种疾病有良好的治疗作用。本文主要综述近年来研究发现的在心血管系统、肝纤维化、抗肿瘤治疗等方面丹皮酚的治疗作用。     

丹皮酚对体外培养乳鼠心肌细胞~(45)Ca摄取的影响

通过测定体外培养乳鼠心肌细胞~(45)Ca摄取及其搏动频率的变化,观察丹皮酚对心肌细胞Ca~(2+)内流的影响。结果50～400μg/ml的丹皮酚,能显著降低心肌细胞搏动频率,对心肌细胞快相(5min)和慢相(120min)~(45)Ca摄取均有显著抑制作用,且400μg/ml丹皮酚与10μmol/L的维拉帕米的作用相似。提示丹皮酚能抑制心肌细胞的Ca~(2+)内流,可能与阻滞慢钙通道有关。     

相转移催化合成丹皮酚

目的研究中药牡丹皮活性成分丹皮酚的合成方法。方法以间苯二酚为原料,通过乙酰化得到2,4-二羟基苯乙酮,应用四丁基碘化铵为相转移催化剂与碘甲烷甲基化得到丹皮酚。结果合成丹皮酚总收率为68.32%,目标化合物通过UV、IR表征。结论以间苯二酚为原料、直接用水蒸气蒸馏得到丹皮酚,该方法操作简便,稳定可靠,适合工业化生产。     

丹皮酚的镇痛作用和无耐受性研究

本文用热板法、扭体法和甲醛致痛法,证实丹皮酚对小鼠有明显的镇痛作用。连续给小鼠皮下注射丹皮酚7d.每日用热板法测试小鼠痛阈,表明其镇痛作用无耐受现象。给小鼠皮下注射丹皮酚.竖尾反应与跳跃反应实验均呈阴性。用热板法测定.丹皮酚的镇痛作用不被纳洛酮翻转。用大鼠光热甩尾法,表明利血平能降低丹皮酚的镇痛效应。     

丹皮酚对急性哮喘模型小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素表达的影响

目的观察丹皮酚对急性哮喘小鼠模型气道炎症以及对胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达的影响。方法 BALB/c小鼠48只随机分成正常对照组、哮喘模型组、丹皮酚组、布地奈德组,每组12只。卵蛋白致敏,气道激发,丹皮酚组给予丹皮酚100 mg/kg灌胃,1次/d,末次激发24 h后,检测各组小鼠气道反应性。HE染色观察气道炎症变化;采用ELISA观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-13和血清总IgE的表达,real-time PCR观察TSLP的表达,Western-blot观察TSLP蛋白表达。结果哮喘组小鼠气道炎症和气道高反应性明显加重,丹皮酚能够显著抑制慢性哮喘小鼠模型的气道炎症和气道高反应性,哮喘BALF中Th2细胞因子IL-4、IL-13和血清总IgE含量显著降低。丹皮酚治疗后哮喘小鼠肺组织高表达的TSLP的mRNA和蛋白水平显著降低。结论丹皮酚能够抑制哮喘小鼠模型的气道炎症和气道高反应性,其机制可能通过抑制TSLP的的表达而实现。     

HPLC法测定愈痫灵颗粒中丹皮酚的含量

目的:建立以HPLC法测定愈痫灵颗粒中丹皮酚含量的方法。方法:色谱柱为Phenomenex C18-ODS,流动相为甲醇-水(60∶40),流速为1.0mL.min-1,检测波长为274nm。结果:丹皮酚在8.24~41.20μg·mL-1浓度范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9997);加样回收率为99.50%(RSD=1.12%)。结论:该方法简便、快速、灵敏、准确,稳定性、重现性好,可作为该制剂中丹皮酚含量的测定方法。     

Nicotine-induced depolarization of cerebral cortical synaptosomes is dependent upon sodium.

Earlier studies from this laboratory demonstrated that activation of nicotinic cholinergic receptors of cerebral cortical synaptosomes of the rat produced a decrease in the accumulation of [3H]tetraphenylphosphonium ([3H]TPP+) as a result of a decreased synaptosomal membrane potential. In the present study, the role of sodium in the effect of nicotine on the accumulation of [3H]TPP+ and the estimated potential difference was explored. Replacement of buffer sodium with either sucrose or N-methyl-D-glucamine (NMDG), attenuated the depolarization produced by the sodium channel activator, veratridine and had no effect on potassium-induced depolarization. The effect of nicotine on accumulation of [3H]TPP+ into cerebral cortical synaptosomes was abolished in sucrose buffer and attenuated in NMDG buffer. 1,1-Dimethyl-4-phenylpiperazinium iodide (DMP; 30 microM) produced a small increase in the influx of 22Na+ into cerebral cortical synaptosomes. The effect of DMPP on the influx of 22 Na+ was not blocked by tetrodotoxin. These results support the hypothesis that the nicotinic cholinergic receptor in the brain, functions as a sodium ionophore and further demonstrate that accumulation of synaptosomal [3H]TPP+ provides a simple tool with which to assess the effect of nicotine on sodium permeability through open nicotinic cholinergic receptor ionophores.     

丹皮酚对HepA荷瘤小鼠免疫调节和抑瘤作用研究

目的　研究丹皮酚 ( paeonol)的抗肿瘤作用及其机制。方法　建立小鼠移植性肝癌HepA肿瘤模型 ,观察丹皮酚对肿瘤生长的影响。应用放射免疫法检测小鼠血清中IL 2及TNF α含量 ,同时观察丹皮酚对小鼠脾细胞产生IL 2及腹腔巨噬细胞产生TNF α的影响。结果　丹皮酚对小鼠Hep A肿瘤的生长有抑制作用 ,对IL 2及TNF α的生成有促进作用。结论　丹皮酚可能通过促进IL 2及TNF α的生成而发挥抗肿瘤作用