人牙周膜成纤维细胞来源外泌体对大鼠延期牙再植术后牙根吸收的调控作用

目的: 探讨健康的人牙周膜成纤维细胞（hPDLFs）来源外泌体对大鼠延期牙再植术后牙根吸收的作用及其可能机制。方法: 分离提取hPDLFs来源的外泌体并鉴定。选择30只6周龄雄性SD大鼠,随机分为对照组和外泌体组,建立上颌第一磨牙延期牙再植术模型,牙脱位30 min后植回牙槽窝。对照组牙周膜局部注射40 μL汉克斯平衡盐溶液（HBSS）,实验组牙周膜局部注射40 μL含外泌体的HBSS。术后1、2、4周收样,苏木精-伊红（H-E）染色观察牙根表面吸收陷窝,抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察破骨细胞数量,免疫组织化学染色观察牙周膜内骨保护素（OPG）的表达。采用SPSS 17.0软件包对数据进行统计学处理。结果: 鉴定表明提取的细胞外囊泡为外泌体。与对照组相比,hPDLFs来源的外泌体减少了延期牙再植术后牙根吸收陷窝的数量,降低TRAP阳性破骨细胞的表达（P<0.05）,促进牙周膜内OPG的表达（P<0.05）。结论: 延期牙再植术后,hPDLFs来源的外泌体减少了破骨细胞的数量,促进牙周膜内OPG表达,减少了再植术后的牙根吸收。     

破骨细胞在大鼠正畸牙移动性根吸收修复早期中的改变

目的初步研究大鼠正畸牙移动性根吸收修复早期中破骨细胞和骨保护因子(osteoprotegerin,OPG)的变化和规律,探讨破骨细胞在正畸导致的炎性牙根吸收修复中的作用。方法建立大鼠正畸牙移动性根吸收修复早期模型,免疫组化检测OPG的表达,TRAP染色观察破骨细胞的变化。结果实验第1天,OPG表达量下降,第3天以后逐渐恢复至生理水平。实验第1天起,TRAP染色阳性细胞逐渐减少,实验第7、10、14天,TRAP染色阳性数量已逐渐恢复至生理水平。结论施力终止后,大鼠牙根即停止吸收,并于1~3d后开始牙根修复,OPG的量与此过程密切相关。     

阿仑膦酸钠对延期再植干燥狗牙愈合的影响

目的探讨阿仑膦酸钠(alendronate,ALN)溶液浸泡对延期再植干燥狗牙愈合的影响。方法选用成年杂种狗2条,以上颌双侧第1、2、5牙和下颌双侧第2、3、5牙为受试牙,右侧受试牙归入实验组,左侧受试牙归入对照组。所有受试牙均先做根管处理。7d后拔牙,自然干燥60min;实验组牙再植前被置于1mmol/L的阿仑膦酸钠溶液中浸泡5min;对照组牙再植前不被作其他任何处理。再植12周后取出含牙骨块。经脱钙、切片、HE染色后,对牙根的愈合情况进行组织形态学评价。结果实验组牙骨质愈合的百分比均值明显高于对照组者(P<0.01);实验组牙根炎症性吸收与替代性吸收的百分比均值分别低于对照组者(P<0.05)。结论ALN能有效地改善延期再植干燥牙的愈合,增加牙骨质愈合,减少牙根炎症性吸收与替代性吸收。     

根尖周炎低氧微环境下自噬调控骨吸收研究进展

根尖周炎是一种常见的根尖周组织炎症性疾病，多继发于牙髓病。患牙根尖周部位产生炎症因子，诱导分化出大量破骨细胞，导致周围骨组织破坏和吸收。研究显示，根尖周炎时牙根周围组织处于缺氧状态，而缺氧可通过上调缺氧诱导因子的表达激活下游通路，促进破骨细胞自噬。自噬通过多种途径来促进破骨细胞的分化成熟和功能活化。文章就根尖周炎低氧微环境下自噬调控骨吸收的相关研究及其在临床防治中的应用做一综述。     

炎症微环境下可溶性环氧化物酶抑制剂对人根尖牙乳头干细胞增殖及分化的影响

目的:探讨在炎症微环境下,可溶性环氧化物酶抑制剂(TPPU)对人根尖牙乳头干细胞(hSCAPs)增殖和分化的影响.方法:采用流式细胞仪以及成骨诱导后茜素红染色鉴定hSCAPs;1 mg/mL脂多糖(LPS)处理hSCAPs模拟炎症微环境,然后用10μmol/L TPPU作用于hSCAPs,分别在第1、3、5、7天,通过CCK-8法观察TPPU对hSCAPs增殖能力的影响;在第24小时,实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测炎症相关因子表达.在成骨诱导后的第7、12天,通过qRT-PCR检测成骨分化相关基因的表达;第8天通过碱性磷酸酶染色来分析碱性磷酸酶活性,第21天用茜素红染色观察矿化结节形成.结果:流式细胞仪结果与茜素红染色鉴定实验细胞为hSCAPs.用1 mg/mL LPS处理hSCAPs后,在第1、3、5、7天时,TPPU+LPS组、LPS组和vehicle组细胞增殖无差异(P>0.05).在用LPS处理hSCAPs 24 h后,相对于vehicle组,LPS组白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达显著上调(P<0.05),LPS+TPPU组IL-1β、IL-6的表达明显低于LPS组(P<0.05).成骨诱导液培养hSCAPs一定时间后,检测发现相对于LPS组,LPS+TPPU组碱性磷酸酶(ALP)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨钙素(OCN)、Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达显著上调(P<0.05).且TPPU处理组较LPS组碱性磷酸酶染色和茜素红染色均加深.结论:在体外炎症微环境下,TPPU可以抑制hSCAPs炎性因子的表达.其次,在炎症微环境下TPPU对hSCAPs的增殖可能并没有明显的促进作用,但TPPU可在一定程度上促进hSCAPs的成牙/成骨分化.     

过量氟对大鼠HAT-7细胞系自噬的影响

目的:研究过量氟对大鼠HAT-7细胞系自噬的影响.方法:取大鼠HAT-7细胞,分别加入不同浓度的氟化钠培养液,培养48 h后,透射电子显微镜检测过量氟对大鼠成釉细胞自噬泡的影响,Western免疫印迹和定量反转录聚合酶链反应技术检测过量氟诱导大鼠成釉细胞内微管相关蛋白轻链(LC3)和Beclin 1表达的变化.选择40只Wistar大鼠,随机分为A、B、C、D 4组,进行免疫组织化学实验,检测饮水氟对大鼠自噬分子表达的影响.采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:实验组自噬泡明显增多;Western免疫印迹及定量反转录聚合酶链反应结果显示,随着氟浓度的增加,HAT-7细胞自噬相关基因LC3和Beclin 1表达增加.回归分析结果显示,氟化钠与LC3及Beclin 1的表达有线性关系;大鼠体内免疫组织化学染色结果显示,实验组LC3以及Beclin 1为棕褐色,呈阳性表达.结论:过量氟诱导大鼠HAT-7细胞系自噬.     

XBP1s调控炎症诱导的成牙本质细胞自噬

目的:探讨转录因子剪接型X-盒结合蛋白1(spliced X-box binding protein 1,XBP1s)对炎症诱导的成牙本质细胞自噬的作用.方法:免疫组化检测XBP1和自噬指标LC3在健康和炎症牙髓组织中的表达.利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠牙乳头细胞系(mDPC6T)建立体外炎症模型,检测XBP1和自噬指标LC3、ATG5的表达,再分别利用抑制剂KIRA6,和活性氧(Reactive oxygen species,ROS)清除剂NAC处理细胞.通过免疫荧光和蛋白免疫印迹法检测XBP1s、LC3和ATG5等指标的表达.结果:XBP1s和LC3在炎症牙髓的成牙本质细胞层中表达升高.LPS可诱导XBP1s在mDPC6T细胞中表达,与LC3、ATG5等自噬指标的表达趋势相似.抑制XBP1s可降低LC3、ATG5等自噬指标的表达.结论:XBP1s可调控炎症诱导的成牙本质细胞自噬.     

促进撕脱性损伤牙延期再植后牙周愈合的研究进展#br#

牙撕脱性损伤是牙外伤中预后较差的一种,目前对于恒牙撕脱性损伤的治疗一般采用牙再植术,再植时根面牙周组织活性对其预后至关重要。临床调查显示,撕脱性损伤牙再植多为延期再植,离体牙根面牙周膜在干燥状态下脱水坏死是导致术后病理性牙根吸收的主要原因。国际牙外伤协会建议在延期再植时采取适当措施,促进再植牙的牙周愈合再生,减少病理性吸收,延长再植牙使用寿命。文章结合2020版国际牙外伤协会撕脱性损伤牙治疗指南对现有促进撕脱性损伤牙延期再植后牙周愈合相关研究做一综述,包括根面处理、药物及干细胞治疗在牙再植术中的应用。     

沉默Foxp3对牙周膜成纤维细胞在炎症环境下炎症因子的表达及增殖和迁移的影响

目的 探究炎症环境下Foxp3基因对人牙周膜成纤维细胞（hPDLFs）炎症因子表达及细胞增殖、迁移的影响,探索Foxp3基因在牙周炎发生发展中的作用。方法 使用小干扰RNA (siRNA)沉默hPDLFs的Foxp3基因,通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫印迹（Western blotting）实验验证Foxp3沉默效率,筛选Foxp3基因沉默效果最佳的siRNA。使用牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）来源脂多糖（LPS）模拟体外炎症环境,CCK-8检测炎症环境下沉默Foxp3对hPDLFs增殖的影响;划痕实验及transwell细胞迁移实验检测炎症环境下沉默Foxp3对hPDLFs迁移的影响;RT-PCR、Western blotting实验检测炎症环境下hPDLFs炎症因子白细胞介素（IL）-6、IL-8的表达。结果 siRNA转染后,RT-PCR、Western blotting检测显示,Foxp3-si3组Foxp3的mRNA和蛋白表达均显著降低（mRNA表达,t=21.03,P<0.000 1;蛋白表达,t=12.8,P<0.001）。在炎症环...     

低氧对C2C12细胞分化不同阶段自噬和肌细胞生成素表达的影响

目的:研究低氧对C2C12细胞分化不同阶段自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3B)和肌细胞生成素(myogenin)表达的影响。方法:C2C12细胞诱导分化1、2、3、4 d,在常氧和低氧状态下观察细胞分化情况。免疫细胞化学染色法检测自噬相关蛋白LC3B和Beclin1的表达。Western blot检测Beclin1、LC3B和myogenin的蛋白表达水平,采用SPSS 22.0软件对数据进行统计学分析。结果:1.与常氧组比较,低氧组分化形成的肌管数量较少,形态细小;2.免疫细胞化学染色结果显示,分化1、2、3、4 d低氧组细胞LC3B和Beclin1荧光强度均低于常氧组;3.Western blot结果显示分化前中期低氧组Beclin1、LC3B和myogenin蛋白表达水平显著低于常氧组(P<0.05)。随着分化时间的增加,低氧状态下LC3B的表达水平进一步降低,而myogenin表达水平回升。结论:低氧抑制C2C12细胞分化;低氧能降低细胞分化前中期Beclin1、LC3B和myogenin蛋白表达水平。