饥饿大鼠胰岛胰高血糖素和嗜铬颗粒素A变化的定量免疫组织…

用免疫组织化学ＡＢＣ法结合图像分析技术，研究饥饿状态下大鼠胰岛血糖素和嗜铬颗粒素Ａ的含量变化。结果表明，与正常对照组相比，饥饿大鼠胰岛Ａ细胞中Ｇｌｕ含量明显下降，ＣｇＡ含量仅在饥饿５ｄ后显著下降。这提示饥饿可导致Ｇｌｕ释放快速增加，而ＣｇＡ释放增加却较为缓慢，与饥饿５ｄ大鼠组相比较，饥饿５ｄ后静脉注射葡萄糖９０ｍｉｎ后胰岛Ａ细胞，使Ｇｌｕ释放快速减少，但对ＣｇＡ的释放无影响。以上结果表明，我源性葡     

氨基胍对白介素-1β损伤的离体大鼠胰岛细胞的保护作用

目的：观察氨基胍ＡＧ）对白细胞介素－１β（ＩＬ－１β（诱民的胰岛细胞损害的作用。方法：应用体外单层培养的大鼠胰岛细胞，分别检测ＩＬ－１β、ＡＧ及基至胰岛细胞亚硝酸盐生成、胰岛素分泌以及胞内ＤＮＡ、胰岛素含量和细胞活性的影响。结果：以ＩＬ－１β诱导，胰岛细胞亚硝酸盐生成量显著增加，同时胰 素发泌以及葡萄糖刺激的胰遍素释放量均明显减少；胰同细胞内ＤＮＡ、胰钫 含量及细胞活性（ＭＴＴ值）均显著下降；ＡＧ     

降钙素基因相关肽对内皮素释放的影响

本实验在大鼠的整体及离体血管条上观察了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）对内皮素（ＥＴ）释放的影响。结果表明：ＣＧＲＰ静脉注射（５μｇ／ｋｇ）能明显降低大鼠内毒素血症时血浆ＥＴ含量，ＣＧＲＰ孵育（１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ）离体的大鼠主动脉血管条能有效地抑制凝血酶（ｔｈｒｏｍｂｉｎ）引起的ＥＴ释放，但是ＣＧＲＰ静注及孵育不影响血浆ＥＴ的基础含量及离体血管条ＥＴ的基础释放。结果提示ＣＧＲＰ能抑制病理条件下ＥＴ的     

21－羟化酶CYP21B基因Ile~（172）→Asn错义突变

为了解先天性肾上腺皮质增生症患者的２１－羟化酶ＣＹＰ２１Ｂ基因中Ｉｌｅ~（１７２）→Ａｓｎ错义突变的发生率，根据放大受阻突变体系（Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｒｅｆｒａｃｔｏｒｙｍｕｔａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ，ＡＲＭＳ）的要求，设计了３种引物：５＇ｄ（ＴＴＧＧＧＡＧＡＣＴＡＣＴＣＣＣＴＧＣＴＣＴ）３＇（共同引物）、５＇ｄ（ＡＧＧＴＧＡＧＧＴＡＡＣＡＧＡ）３＇（正常引物）、５＇ｄ（ＡＧＧＴＧＡＧＧＴＡＡＣＡＧＴ）３＇（突变引物），在７例患儿中进行了检测，发现具有本突变者３例。对其中一例进行的家系分析，结果提示：这组引物有快速、简便的优点，不需使用同位素就能对具有Ｉｌｅ~（１７２）→Ａｓｎ变异的高危家庭成员作产前诊断。     

脑缺血／再灌注后大鼠海马GABA、AchE水平和迟发性神经元损害关系的研究

为探讨海马ＧＡＢＡ、ＡｃｈＥ和迟发性神经元损害（ｄｅｌａｙｅｄｎｅｕｒｏｎａｌｄａｍａｇｅ，ＤＮＤ）的关系，观察了脑缺血／再灌注后大鼠海马亚区ＧＡＢＡ含量、ＡｃｈＥ活性和海马组织病理改变。发现再灌注５ｍｉｎ，海马亚区ＧＡＢＡ含量显著升高，再灌注１ｈ和６～１２ｈ，ＧＡＢＡ含量明显降低，ＣＡ＿１区更明显。再灌注５ｍｉｎ至１ｈ，海马亚区ＡｃｈＥ活性明显升高。再灌注４８ｈ后，光镜下见海马ＣＡ＿１区神经元出现缺血性改变，提示：（１）再灌注后，ＧＡＢＡ含量减少、海马内源性抑制降低可能是ＣＡ＿１区ＤＮＤ的因素之一。（２）再灌注早期ＡｃｈＥ活性升高，提示Ａｃｈ代谢变化可能和ＤＮＤ有关。（３）再灌注后ＧＡＢＡ和ＡｃｈＥ在海马各亚区的明显改变，提示ＣＡ＿１区选择性易损和递质代谢变化密切相关，而ＣＡ＿１区神经元本身的生理生化特性也起着重要的作用。     

视黄酸对人外周血淋巴细胞CD25分子表达影响的研究

本实验采用分子杂交及流式细胞分析技术研究了视黄酸（ｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ，ＲＡ）对人外周血淋巴细胞ＣＤ２５分子表达和细胞功能的影响，结果显示，大剂量（２．５×１０－４ｍｏｌ／Ｌ）ＲＡ处理ＰＨＡ活化４８ｈ淋巴细胞，其ＣＤ２５ｍＲＮＡ含量、ＣＤ２５阳性细胞百分率和膜表面ＣＤ２５分子数量均显著降低，淋巴细胞大部分受阻于Ｇ０／Ｇ１期，Ｇ２＋Ｍ期细胞仅占７．６％。而适量（２．５×１０－６～２．５×１０－７ｍｏｌ／Ｌ）ＲＡ作用后ＣＤ２５分子表达和Ｇ２＋Ｍ期细胞明显增加。该研究提示ＲＡ对ＣＤ２５分子表达和淋巴细胞功能的影响有一定的剂量依赖性。     

大鼠骶髓后连合核神经元兴奋性氨基酸诱导的反应

应用制霉菌素穿孔全细胞电压钳技术，研究急性分离的大鼠骶髓后连合核（ＳＤＣＮ）神经元对谷氨酸受体激动剂的反应。钳制电压为－４０ｍＶ的条件下，Ｌ－谷氨酸（Ｇｌｕ），Ｎ－甲基－Ｄ－门冬氨酸（ＮＭＤＡ），使君子酸（ＱＡ），α－氨基－３－羟基－５－甲基异倾阶－４－丙酸（ＡＭＰＡ）和红藻氨酸（ＫＡ）均诱导产生内向电流。随着激动剂浓度的增高，这些电流的量效关系曲线呈典型的Ｓ型。ＥＣ５０值分别是Ｇｌｕ３．３×１０－５Ｍ，ＮＭＤＡ９．０×１０－ＳＭ，ＱＡ６．４×１０７Ｍ，ＡＭＰＡ１．３×１０－４及ＫＡｇ．６×ｕ１０－５Ｍ。Ｎｉｌｌ系数分别是Ｇｌｕ０．７４，ＮＭＤＡ０．８３，ＱＡ１．３，ＡＭＰＡ１．１和ＫＡ１．３。代谢型谷氨酸受体激动剂ｔＡＣＰＤ（１０－３Ｍ）未能诱导出电流．Ｃｙｃｌｏｔｈｉａｚｉｄｅ显著增强ＫＡ和ＡＭＰＡ诱导的反应。相反，伴刀豆球蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）对ＫＡ和ＡＭＰＡ反应作用甚微，提示ＳＤＣＮ神经元主要表达ＡＭＰＡ型非ＮＭＤＡ受体。     

脑缺血／再灌注后大鼠海马GABA,AchE水平和迟发性神经元损害…

为探讨海马ＧＡＢＡ，ＡｃｈＥ和迟发性神经元损害的关系，观察了脑缺血／再灌注后大鼠海马亚区ＧＡＢＡ含量，ＡｃｈＥ活性和海马组组织病理改变。发现再灌注５ｍｉｎ，海马亚区ＧＡＢＡ含量显著升高，再灌注１ｈ和６－１２ｈ，ＧＡＢＡ含量明显降低，ＣＡ１区更明显。再灌注５ｍｉｎ至１ｈ，海马亚区ＡｃｈＥ活性明显长高。再注４８ｈ后，光镜下见海马ＣＡ１区神经元出现缺血性改变，提示：（１）再灌注后，ＧＡＢＡ含量减少，海马     

大量谷氨酸钠摄入对小鼠血糖及胰岛素水平的影响

谷氨酸 (Ｌ -Ｇｌｕｔａｍａｔｅ,Ｇｌｕ)经胰岛 β细胞表面Ｇｌｕ受体(ＡＭＰＡ亚型 )加强葡萄糖的促胰岛素分泌作用已为实验证实[1] 。由于高剂量Ｇｌｕ摄入经由Ｇｌｕ受体可以破坏中枢神经细胞 ,那么 ,过量Ｇｌｕ摄入是否会损伤胰岛 β细胞 ,未见任何报道。籍此 ,本文探讨了Ｇｌｕ对小鼠胰岛的可能毒性作用。1　材料和方法雄性昆明种小鼠 ,体重 2 4～ 2 5 ｇ(购自首都医科大学动物中心 ) ,普通饲料饲养 ,随机分为 3组 :对照组、低 (ＬＤＧ)及高(ＨＤＧ)剂量组 ,饮水中含Ｇｌｕ .Ｎａ 2 ｇ/Ｌ及 2 0ｇ/Ｌ ,饲养 7周。停止Ｇｌｕ .Ｎａ摄入…     

微波局部照射小鼠睾丸对睾丸,附睾和精子凝集素受体含量和分…

本实验应用２４５０ＭＨｚ微波，局部照射ＢＡＬＢ／ｃ小鼠睾丸，在肛温达４１±０．５℃后维持１５分钟，分别照射１或３次，以凝集素（ＷＧＡ、ＳＢＡ、Ｃｏｎ－Ａ）作为分子探针，于动物受照后１周、２和５个月观察微波辐射对各级生精细胞、附睾及精子糖脂和糖蛋白含量及分布的影响。结果表明，生精细胞中ＷＧＡ，Ｃｏｎ－Ａ受体的含量均显著下降（Ｐ＜０．０１），形态异常的精子中三种凝集素受体的含量均显著增加，且分布特性有     

人绒毛膜促性腺激素对甲状腺细胞cAMP生成的影响

采用细胞培养方法，研究人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）对甲状腺细胞ｃＡＭＰ生成的调节作用。结果显示：在１０￣１０＾４Ｕ／Ｌ的剂量区间，ｈＣＧ可明显刺激甲状腺细胞释放ｃＡＭＰ，ｈＣＧ浓度与ｃＡＭＰ产值之间存在明显的量效依赖关系。１０＾５Ｕ／Ｌ的ｈＣＧ亦显著促进ｃＡＭＰ的分泌，但其刺激强度低于１０＾４Ｕ／Ｌ的ｈＣＧ。提示ｈＣＧ具有类似ＴＳＨ的作用，是孕期母体甲状腺功能的重要调节因子。     

黄芪多糖、人参茎叶皂甙对创伤小鼠血浆及免疫细胞内cAMP、cGMP的影响

本实验利用小鼠闭合性创伤模型，观察创伤后第４天小鼠血浆、免疫细胞内ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量的变化及黄芪多糖（ＡＰＳ）、人参茎叶皂甙（ＧＳ）的调节作用。结果显示：创伤后小鼠血浆内ｃＡＭＰ水平增高，ｃＧＭＰ水平下降，ＣＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值升高。腹腔巨噬细胞及脾细胞、胸腺细胞、肠系膜淋巴结细胞在静息状态和激活状态时的ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量也显示相似的改变。ＡＰＳ（２５０ｍｇ／ｋｇ）、ＧＳ（５０ｍｇ／ｋｇ）体内应用（每天一次，连续４天）可明显降低创伤小鼠血浆及免疫细胞内ｃＡＭＰ水平，升高其ｃＧＭＰ水平。一定浓度范围内的ＡＰＳ（５０～２５０μｇ／ｍｌ）、ＧＳ（１．０～１００μｇ／ｍｌ）在体外可明显拮抗创伤小鼠激活状态的巨噬细胞及脾细胞内ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值的增高。提示：ＡＰＳ，ＧＳ可纠正创伤小鼠血浆及免疫细胞内ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ的比例失衡。     

山莨菪碱对百草枯致大鼠急性肺损伤的治疗作用

大鼠腹腔注射百草枯（５０ｍｇ／ｋｇ）后２４ｈ，血浆和肺组织匀浆内丙二醛（ＭＤＡ）含量、血浆和支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）酸性磷酸酶（ＡＣＰ）和β－葡萄糖醛酸苷酶（β－Ｇ）活性均显著升高，肺湿／干重比、肺含血量和肺血管外水量（ＥＶＬＷ）也明显增加。组织学检查发现肺有充血、出血、局灶性肺不张和间质水肿。注射百草枯后５ｍｉｎ、６ｈ及１２ｈ腹腔内注射山莨菪碱（５０ｍｇ／ｋｇ），可明显减轻百草枯引起的肺损伤，抑制百草枯引起的ＭＤＡ含量和ＡＣＰ、β－Ｇ活性的升高。肺组织匀浆ＭＤＡ含量与ＢＡＬＦ内β－Ｇ活性之间，ＢＡＬＦ内β－Ｇ活性与ＥＴＬＷ之间均呈显著正相关。上述结果提示，脂质过氧化和溶酶体酶释放在百草枯致肺损伤中起重要作用；山莨菪碱可减轻百草枯引起的脂质过氧化反应和溶酶体酶释放，对百草枯性肺损伤有一定治疗作用。     

PJ－CW对小鼠脾淋巴细胞内环核苷酸含量的影响

济南假单胞菌细胞壁组分（ＰＪ－ＣＷ）是由我院药物所研制的新型微生物制剂。本文就ＰＪ－ＣＷ对小鼠脾细胞总数及脾淋巴细胞内环核苷酸含量的影响作了动态观察。结果显示：小鼠腹腔注射ＰＪ－ＣＷ后，脾细胞总数在第２～６ｄ明显增多，第８ｄ恢复至对照组水平，脾淋巴细胞内的ｃＡＭＰ含量只在第６ｄ出现短暂下降。ｃＧＭＰ含量在第４～６ｄ明显升高（Ｐ＜０．０５）．ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值也只在第６ｄ明显降低（Ｐ＜０．０１）。提示：细胞内ｃＧＭＰ含量升高，ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值下降可能导致了细胞分裂过程的启动，增强了脾淋巴细胞的功能。     

马桑内酯致痫大鼠海马内c－fos原癌基因表达及谷氨酸免疫反应的变化

用免疫细胞化学双重染色法对马桑内酯致痫大鼠齿状回及海马回ＣＡ３区内原癌基因表达、谷氨酸免疫反应的变化及其相互关系进行了研究。一侧侧脑室内注射马桑内酯诱发癫痫后，在双重免疫细胞化学染色的切片上，齿状回及海马回ＣＡ３区内均有３种不同类型的细胞：谷氨酸（Ｇｌｕ）单标细胞、Ｆｏｓ单标细胞和Ｆｏｓ／Ｇｌｕ双标细胞。癫痫发作后１ｈ，注射侧齿状回有大量Ｆｏｓ／Ｇｌｕ双标细胞，而海马回ＣＡ３区仅有散在的双标细胞；癫痫发作后１．５ｈ，海马回ＣＡ３区双标细胞数明显增多。Ｆｏｓ单标细胞数及谷氨酸免疫反应性与双标细胞数是平行的。根据以上结果，本文对马桑内酯致痫的机制进行了讨论。     

低剂量电离辐射对小鼠免疫器官cAMP和儿茶酚胺含量的影响

本文报道，７５ｍＧｙ／（１２．５ｍＧｙ／ｍｉｎ）单次全身Ｘ射线照射后９小时用ＳＲＢＣ免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，在免疫后４天和７天脾脏、胸腺和下丘脑ｃＡＭＰ含量均降低；而在免疫后４天脾脏去甲肾上腺素、肾上腺素和酪氨酸含量均增高，免疫后７天肾上腺素含量仍持续增高；当连接γ射线６５ｍＧｙ（０．０１５ｍＧｙ／ｍｉｎ，６ｈ／ｄ）全身照射小鼠后即刻或２９小时后免疫，脾脏和下丘脑ｃＡＭＰ含量也均降低。提示，低剂量     

NGF对新生大鼠隔神经元的神经营养作用

本实验观察了神经生长因子（ＮＧＦ，２．５ｓ）对无血清培养新生大鼠隔神经元生长发育的作用。结果证明，ＮＧＦ能促进新生大鼠隔神经元的存活，增加神经元胞体面积和直径，增加隔培养神经元中ＡＣｈＥ阳性神经元的数目。流式细胞分析显示，ＮＧＦ使神经元平均蛋白含量增加。以上结果表明：ＮＧＦ对新生大鼠隔神经元的生长发育具有促进作用。Ｐ＜０．０１３．ＮＧＦ增加隔培养神经元胞体面积、最长径和最短径图像分析结果可见：在前７ｄ，在神经元胞体面积、最长径和最短径等方面两组之间无明显差别，但在培养１４、２１和３０ｄ时，ＮＧＦ组培养神经元的平均胞体面积、最长径和最短径均大于对照组，经统计学处理有显著意义（表２）。表２对隔培养神经元胞体面积、最长径和最短径的影响（ｘ±ｓ）注：Ｎ＝３０与同时期对照组相比＊Ｐ＜０．０５Ｐ＜０．０１４．ＮＧＦ促进新生大鼠隔细胞的总量白合成用ＦＡＣＳ４４０流式细胞仪测定隔细胞的平均蛋白含量，结果表明：在培养３、７、１４和２１ｄ时，ＮＧＦ组培养细胞的平均蛋白含量均显著高于对照组（表３，Ｆｉｇ．１）。表３ＮＧＦ对隔神经元蛋白合成的影响（ｘ±ｓ）往：Ｎ＝５与同时期对照组相比　＊Ｐ＜０．０５５．ＮＧＦ提高隔神经元的ＡＣｈＥ?     

蒿甲醚对实验兔弓形虫病的疗效观察

选用兔经腹腔感染ＲＨ株弓形虫速殖子，蒿甲醚（Ａｒｔ）疗效考核包括观察动物存活情况及血清中循环抗原（ＣＡｇ）的动态变化。结果显示，兔感染弓形虫后１ｄ即可测到ＣＡｇ，未治疗组兔血清ＣＡｇ于感染后４ｄ开始升高，７ｄ急剧上升达峰值，而后较快下降至低水平，到３０ｄ，只有部分兔血清ＣＡｇ开始转阴。而经Ａｒｔ治疗的动物，血清ＣＡｇ水平于感染后４ｄ即达高峰，然后很快下降，在７～２３ｄ相继全部转阴。另外，Ａｒｔ可１００％保护急性感染弓形虫兔免于死亡。表明检测ＣＡｇ有助于判断药物疗效，并提示Ａｒｔ可望成为治疗弓形虫病的有效药物     

腺病毒载体介导的lacZ基因在NG细胞系及大鼠黑质的表达

本实验用标记基因ｌａｃＺ５型重组腺病毒（Ａｄ５ＣＭＶｌａｃＺ）转染培养的ＮＧ细胞系，Ｘ－ｇａｌ染色检测转染效率．在培养的ＮＧ细胞系，当病毒滴度为２×１０８时，转集率达到５０％，当滴度为２×１０９时，转染率达１００％，有较好的量效关系；固定病毒液度为１０１０，培养２～１６ｈ，细胞的转染率随时间延长而提高，有较好的时效关系。将Ａｄ５ＣＭＶｌａｃＺ注射到大鼠黑质部位后，分别于注射后３～１２０ｄ取脑、切片、Ｘ－ｇａｌ染色，发现黑质局部从第７ｄ开始有部分蓝染，第１０ｄ达高峰，注射局部感染率１００％；９０ｄ时开始下降，持续至１２０ｄ；纹状体等其它部位无蓝染．上述结果提示，腺病毒载体介导的标记基因可在培养的神经细胞系和中脑黑质部位高效表达，为进一步开展中枢神经系统退变性疾病尤其是帕金森氏病的基因治疗奠定基础。     

大鼠三叉神经节及尾侧亚核内降钙素基因相关肽在面口部伤害性刺激时的动态变化

为了探讨降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）在面口部伤害性刺激条件下合成、运输和释放的规律，将福尔马林注入大鼠一侧口周皮下，分别于刺激后不同时间取材，用原位杂交和免疫组织化学方法观察ＣＧＲＰｍＲＮＡ及ＣＧＲＰ样阳性结构（ＣＧＲＰ－ＬＩ）在三叉神经节（ＴＧ）和三叉神经尾侧亚核（Ｖｃ）内的动态变化。原位杂交结果显示：ＴＧ内表达ＣＧＲＰ的两种亚型α－ＣＧＲＰ和β－ＣＧＲＰｍＲＮＡｓ神经元的数量分别于福尔马林刺激后２ｈ和４ｈ有明显增加，８ｈ达到高峰，然后渐下降，至４８ｈ后恢复至正常。免疫组织化学结果显示：Ｖｃ浅层ＣＧＲＰ－ＬＩ的含量在刺激后１ｈ内明显减少，２ｈ后渐增，１２ｈ达到高峰，２４ｈ后趋向正常。ＴＧ内ＣＧＲＰ－ＬＩ神经元的数量在刺激后１ｈ内也明显减少，此后逐渐回升至正常并有轻度增加，但与正常间无明显差异。