HDV/HBV感染树鼠句肝组织中Fas/Fas配体表达的初步研究

目前已有许多实验研究证据直接表明Ｆａｓ／Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）介导了细胞凋亡。采用免疫组化和原位杂交技术检测ＨＤＶ／ＨＢＶ感染树鼠句肝组织中ＨＤＡｇ、Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达;并采用免疫组化双重染色分析病毒抗原表达和Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达之间的关系。１　材料与方法１．１　标本来源　３０份ＨＤＶ／ＨＢＶ感染树鼠句肝组织,取自本院传染科ＨＤＶ／ＨＢＶ感染的树鼠句动物,经ＥＬＩＳＡ、免疫组化和原位杂交技术证实,ＨＤＶ在肝细胞中稳定复制、表达,伴ＡＬＴ升高。１．２　检测方法　①ＨＤＡｇ、Ｆａｓ／ＦａｓＬ检测：…     

慢性乙型肝炎肝组织Fas抗原表达及与HBV抗原的关系

用免疫组织化学技术检测了５２例慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）肝组织内的Ｆａｓ抗原、ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ。结果表明，４８例Ｆａｓ抗原阳性表达（９２．３％），主要在肝细胞浆内，其表达程度与肝组织活动性炎症分度密切相关，提示Ｆａｓ抗原介导的细胞凋亡在肝细胞损伤中起一定作用；肝细胞Ｆａｓ抗原的表达程度与ＨＢｓＡｇ相关而与ＨＢｃＡｇ不相关。     

神经节苷酯对低氧大鼠脑钙,钙调素及蛋白激酶Ⅱ的影响

观察了神经节苷酯对急性低氧组大鼠（Ａ组：模拟海拔７００ｍ，５ｈ；Ｂ组：给神经节苷酯）和常氧对照组大鼠（Ｃ组：常氧；Ｄ组：给神经节苷酯）脑组织Ｃａ￣（２＋）、钙调素（ＣａＭ）及ＣａＭ依赖性蛋白激酶Ⅱ（ＣａＭＰＫⅡ）活性的影响。用Ｆｕｒａ－２测得Ｃａ￣（２＋）水平分别为７２２．１±８１．２．６４０．６±７４．４、２５８。７±３９．２和２６３．８±４１．３ｎｍｏｌ／Ｌ，Ａ组明显高于常氧对照组（Ｐ＜０．０１）；Ｂ组明显低于Ａ组（Ｐ＜＜０．０５）。用流式细胞仪（ＦＡＣＳ）所测ＣａＭ平均荧光强度分别为４０．２±４．７、４４．３±４．８．４６．１±５．１和４５．９±５．０道；Ａ组明显低于常氧对照组。用同位素（ｒ￣（３２）－ＡＴＰ）液闪计数法所测ＣａＭＰＫⅡ活性分别为１８２．９±７．９、１９２．３±８．２、１９７．９±９．２和１９８．２±９．３ｐｍｏｌｐｉ．ｍｉｎ￣（－１）ｍｇ￣（－１）ｐｒｏｔｅｉｎ，Ａ组明显低于其它三组，急性低氧Ｂ组与常氧对照组比无明显差别。表明，低氧时神经节苷酯可以减少胞内Ｃａ￣（２＋）蓄积和稳定ＣａＭ和ＣａＭＫｉｎａｓｅⅡ的变化．     

肝细胞癌组织中Fas抗原表达和分布的初步研究

目的 探讨肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中的Ｆａｓ抗原的表达和分布。方法 采用抗－Ｆａｓ多克隆抗体,以免疫组化法检测２４例ＨＣＣ患尸解的肝癌组织。结果 肝癌及其癌旁组织中Ｆａｓ抗原检出率分别为４１．７％（１０／２４）和８３．３％（２０／２４）;癌组织中Ｆａｓ抗原表达强度显低于癌旁组织。结论 Ｆａｓ抗原在ＨＣＣ组织中有表达,并可以介导肝癌细胞凋亡。     

HBs／CD3双特异性抗体介导LAK对HBVDNA转染细胞的细胞毒作用

应用化学偶联方法合成ＨＢｓ／ＣＤ３双特异性抗体，并观察其对ＬＡＫ细胞的细胞毒性作用的影响。用化学偶联剂ＳＰＤＰ将鼠源的ＣＤ３与ＨＢｓ单克隆抗体连接得到ＨＢｓ／ＣＤ３双特异性抗体；设ＨｅｐＧ－２和Ｋ５６２细胞对照组。实验显示，ＨＢｓ／ＣＤ３双特异性单克隆抗体能显著提高ＬＡＫ细胞与２．２．１５细胞结合率；应用１２５ＩＵｄＲ释放试验检测细胞毒性，发现双特异性抗体能增强ＬＡＫ细胞对２．２．１５细胞的细胞毒性，并与抗体浓度相关，ＢｓＡｂ浓度递增，细胞毒性作用随之增加。对细胞毒性作用的特异性研究表明：加入ＨＢｓ／ＣＤ３ＢｓＡｂ后，ＬＡＫ细胞对２．２．１５细胞毒性显著高于ＨｅｐＧ－２和Ｋ５６２细胞组。结果表明，ＨＢｓ／ＣＤ３双特异性抗体具有双向识别ＬＡＫ细胞和２．２．１５细胞的特性，特异地促进ＬＡＫ细胞与靶细胞结合，发挥选择性细胞毒性作用。     

脑缺血再灌流时［~3H］－三磷酸肌醇放射活性及突触体游离Ca~（2＋）的变化

研究大鼠脑缺血再灌流时［３Ｈ］－ＩＰ３放射活性及突触体（Ｃａ２＋）ｉ的变化，结果示缺血１ｍｉｎ就启动了肌醇脂质信使系统，引起［３Ｈ］－ＩＰ３显著增高，缺血２０ｍｉｎ突触体（Ｃａ２＋）ｉ增高，且持续至再灌流７ｄ，磷脂酶Ｃ抑制剂ＰＭＳＦ治疗能显著地抑制突触体（Ｃａ２＋）ｉ的升高，减轻海马ＣＡ１区缺血性神经元损伤。     

低强度He-Ne激光照射对离体小鼠巨噬细胞Ca2+浓度的影响

为研究低强度Ｈｅ－Ｎｅ激光照射对离体小鼠巨噬细胞内Ｃａ２＋浓度的影响以及其与能量密度（剂量）的关系，用Ｆｌｕｏ－３乙酰甲脂对巨噬细胞Ｃａ２＋作荧光标记，应用图象分析系统检测激光照射后细胞内Ｃａ２＋的荧光强度变化。结果：Ｈｅ－Ｎｅ激光照射引起细胞内Ｃａ２＋浓度改变。照射５ｍｉｎ，激光剂量为０．６７９Ｊ／ｃｍ２，细胞荧光强度出现非常明显的增强；照射１０ｍｉｎ，剂量为１．３５８Ｊ／ｃｍ２，细胞荧光强度增强达到最大值；照射１５ｍｉｎ，剂量为２．０３７Ｊ／ｃｍ２，细胞荧光强度减弱；照射２０ｍｉｎ，剂量为２．７１６Ｊ／ｃｍ２，细胞荧光强度降低至对照组之下。低强度Ｈｅ－Ｎｅ激光照射巨噬细胞可引起细胞内Ｃａ２＋浓度上升，产生细胞内信号传递，进而控制细胞功能。这可作为临床上应用低强度激光照射治疗的参考     

钙化磁共振信号演变规律的实验研究

目的 探讨钙化ＭＲＩ信号的演变规律并解释形成机理。方法 采用实验的方法对钙盐标本进行研究。对碳酸钙（ＣａＣＯ３）、二水磷酸氢钙（ＣａＨＰＯ４．２Ｈ２Ｏ）、磷酸三钙「Ｃａ３（ＰＯ４）２」、二水硫酸钙（ＣａＳＯ４．２Ｈ２Ｏ）、氢氧化钙「Ｃａ（ＯＨ）２」粉末，它们不同浓度的凝胶、０．４ｇ／ｍｌ浓度下Ｃａ３（ＰＯ４）２／ＣａＣＯ３与ＣａＨＰＯ４．２Ｈ２Ｏ／ＣａＣＯ３不同比例的混合物进行ＣＴ和ＭＲ扫描。各种     

吡啶-2,6(1H,3H)二酮生物碱对血小板聚集及血栓素B_2和6-酮-前列腺素_(Iα)的影响

观测ＳＨ１对ＡＤＰ，ＡＡ，Ｃｏｌａｇｅｎ诱导的兔血小板聚集及ＴＸＢ２和６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα生成的影响。用比浊法测定了透骨草提取的单体生物碱结晶ＳＨ１体外对兔血小板聚集的影响，用放免法测定ＴＸＢ２和６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα的含量。结果：ＳＨ１０．８～３．０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内明显抑制ＡＡ，ＡＤＰ，Ｃｏｌａｇｅｎ诱导的兔血小板聚集。ＳＨ１对三种诱导剂的最大抑制率分别为６２．１６％，４５．２５％，５３．６７％。大剂量组明显加快ＡＤＰ诱导的血小板聚集后的解聚速度，ＳＨ１显著延长Ｃｏｌａｇｅｎ的诱导起聚时间。其抑制作用有明显的量效关系，对ＡＡ诱导的ＴＸＢ２产生明显抑制作用，可使６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα的含量略有增加，但６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα／ＴＸＢ２比值显著增大     

脑外伤后外周血淋巴细胞产生白介素-2能力与急性期蛋白变化的相关性研究

对２２例中重型脑外伤病人（ＧＣＳ３～１２分）外周血淋巴细胞产生白介素－２能力（ＰＢＬＩＬ－２Ｐ），急性期蛋白（ＡＰＲＰｓ）包括血浆铜兰蛋白（ＣＰ）、α１－酸性糖蛋白（α１－ＡＧ）、α１－抗胰蛋白酶（α１－ＡＴ）、Ｃ反应蛋白（ＣＲＰ）、纤维结合蛋白（Ｆｎ）和补体Ｃ３成份Ｃ片段（Ｃ３ｃ）等指标进行了观察研究．结果发现：中重型脑外伤后ＰＢＬＩＬ－２Ｐ（代表细胞免疫功能状态）下降，而ＡＰＲＰｓ中ＣＰ、α１－ＡＧ、α１－ＡＴ、ＣＲＰ升高，Ｆｎ和Ｃ３ｃ降低．相关性分析结果：ＰＢＬＩＬ－２Ｐ的降低与ＣＰ、α１－ＡＧ、α１－ＡＴ及ＣＲＰ的增高均呈直线负相关（ｒ＝－０．６５，－０．６３，－０．５８，－０．５７），且均相关显著（Ｐ＜０．０１），与Ｆｎ、Ｃ３ｃ的降低均呈直线正相关（ｒ＝０．６９，０．７１），且相关显著（Ｐ＜０．０１）．表明ＡＰＲＰｓ对细胞免疫功能有一定调控作用．     

~(99m)Tc-ECD SPECT断层影像采血法和非采血法定量测定rCBF和CBF的对照研究

目的：应用９９ｍＴｃＥＣＤＳＰＥＣＴ断层影像采血和非采血法定量测定ｒＣＢＦ和ＣＢＦ。材料和方法：正常对照组１５例,疾病组１０例。采血法用动脉化静脉血样求得血中９９ｍＴｃＥＣＤ的浓度;非采血法用头颈平面像求得血中９９ｍＴｃＥＣＤ浓度。结果：正常对照组采血法ｒＣＢＦ２５０±４０～５９１±７６ｍｌ．ｍｉｎ－１·（１００ｇ）－１,ＣＢＦ４３０±３６ｍｌ．ｍｉｎ－１·（１００ｇ）－１;非采血法ｒＣＢＦ２６１±３２～６０３±６８ｍｌ．ｍｉｎ－１·（１００ｇ）－１,ＣＢＦ４３５±４４ｍｌ．ｍｉｎ－１·（１００ｇ）－１。和其他方法测得的正常值很接近。疾病组两法测定的结果基本一致。结论：用９９ｍＴｃ－ＥＣＤＳＰＥＣＴ断层影像测定ｒＣＢＦ和ＣＢＦ是可行的,可作为评价脑血流灌注的定量指标。     

盐酸维拉帕米对噪音所致脑损害的保护作用

探讨钙拮抗剂－－盐酸维拉帕米（ＶＨ）对噪音刺激诱发心理应激的防护作用。将８６ｄＢ噪音刺激５ｍｉｎ的ＳＤ大鼠分为３组，注射ＶＨ５ｍｇ／ｋｇ，地西泮（安定）１６．６ｍｇ／ｋｇ，蒸馏水１ｍｌ／只，继续噪音刺激２ｈ后处死，脑切片同时进行免疫组化方法染色，观察Ｆｏｓ蛋白在室旁核等处的标记，ＶＨ、安定组同蒸馏水组对比差异有非常显著性意义（Ｐ〈０．１）。动物行为变化也显著不同。结果提示ＶＨ是能抑制噪声所致的心理     

脑缺血再灌流时〔^3H〕—三磷酸肌醇放射活性及突触体游离Ca^2…

研究大鼠脑血再灌流时〔＾３Ｈ〕－ＩＰ３放射活性及突触体（Ｃａ＾２＋）ｉ的变化，结果示缺血１ｍｉｎ就启动了肌醇脂质信使系统，引起〔＾３Ｈ〕－ＩＰ３显著增高，缺血２０ｍｉｎ突触体（Ｃａ＾２＋）ｉ增高，且持续至再灌流７ｄ，磷脂酶Ｃ抑制剂ＰＭＳＦ治疗能显著地抑制突触体（Ｃａ＾２＋）ｉ的升高，减轻海马ＣＡ１区缺血性神经元损伤。     

γ－32P标记反义核苷酸对HBV基因表达的封闭效应

人工构建特异性互补于ＨＢＶ基因ｍＲＮＡＳＰⅡ增强子区的１５－聚反义硫代脱氧核苷酸（１５Ｓ－ａｓＯＮ）并用ｌ－３２Ｐ进行末端标记，以２μＬｍｏ１／Ｌ剂量作用于ＨＢＶ基因转染的ＨｅｐＧ２细胞（２．２．１５细胞），培养２４ｈ及４８ｈ后检测掺入２．２．１５细胞的１５－Ｓ－ａｓＯＮ分别为６９．４ｎｍｏ１／Ｌ和７５．８ｎｍｏ１／Ｌ；对ＨＢ３ｓＡｇ的抑制率分别为５０％和７０％；斑点杂交检测ＨＢＶＤＮＡ，结果表明实验组与对照组无显著性差异，提示本实验所选用的反义核苷酸对ＨＢＶ基因的封闭环节可能发生在翻译水平。实验组与对照组的细胞形态及细胞计数结果表明：我们设计的反义核酸只特异性抑制ＨＢＶ基因表达，而对宿主细胞无明显毒害作用。     

医护人员HBV,HCV感染的血清流行病学研究

对北京解放军总医院２６１名经常接触病人血液的医护人员ＨＢＶ、ＨＣＶ感染的血清流行病学进行了调查，并同河北省固安县某农村自然人群作了比较。结果表明，医护人员ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶＭ和抗ＨＣＶ阳性率分别为３．１％（８／２６１）、４５．６％（１１９／２６１）和０．８％（２／２６１），ＨＢＶ总感染率高于农村自然人群（２９．４％），而抗ＨＣＶ阳性率同我国普通人群相似（低于１％）。说明北京医护人员感染肝炎的职业威     

乙型肝炎病人血清中PreS1／2抗原检测方法的建立及初步应用

目的：建立乙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＢｖｉｒｕｓ，ＨＢＶ）ＰｒｅＳ抗原检测方法。方法：表达与纯化了ＨＢＶＰｒｅＳ１／２抗原，并用纯化蛋白免疫家兔，利用纯化抗血清包被ＥＬＩＳＡ板，吸附病人血清中包含ＰｒｅＳ１／２抗原的ＨＢＶ的病毒颗粒或病毒亚单位，特异吸附颗粒用抗ＨＢｓＡｇ的酶标单抗检测。结果：利用金属螯合柱层析的方法高度纯化了ＰｒｅＳ重组抗原，用复性的重组抗原免疫家兔３次，血清抗体滴度可达１     

Monica质控图用于HBsAg室内质控的探讨

我们在做ＨＢｓＡｇ室内质控的工作中，用Ｍｏｎｉｃａ质控图控制质量收到了既能监测精密度、又能监测准确性的效果，现将方法和结果报告如下。１材料和方法１１材料室内质控血清（ＨＢｓＡｇ）２ｎｇ／ｍｌ，由北京市临床检验中心提供，测定吸光度值为０３左右。Ｈ...     

以HEV合成多肽为抗原制备抗－HEV免疫血清

用对应于戊型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＥｖｉｒｕｓ，ＨＥＶ）开读框架ＯＲＦ１、ＯＲＦ２和ＯＲＦ３部分氨基酸序列的三段多肽为抗原，以鼠伤寒沙门菌体为载体，经静脉免疫家兔和经腹腔免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制备出抗－ＨＥＶ免疫血清。两次加强免疫后，经本室研制的抗－ＨＥＶ　ＩｇＧＥＬＩＳＡ试剂盒检测，１：１０稀释血清Ａ值达１．５０～２．００。用沙门菌和ＨＥＶ多肽分别做中和试验，ＨＥＶ多肽的中和抑制率大于５０％，而沙门菌不能中和血清中的抗体。用此免疫血清与抗－ＨＥＶＩｇＣ阳性的病人血清做阻断试验，阻断率大于５０％。上述结果证明家兔和小鼠产生的抗体为特异性抗－ＨＥＶ抗体。     

高压氧对实验兔海水型呼吸窘迫综合征的预防作用

目的　观察高压氧（ＨＢＯ）对海水淹溺肺水肿（ＰＥ－ＳＷＤ）的预防作用。方法　复制ＰＥ－ＳＷＤ动物模型后,３２ 只兔随机分为ＰＥ－ＳＷＤ对照组、药物治疗组和ＨＢＯ组。对３ 组兔的动脉血气酸碱指标、Ｃａ２＋ 沉淀反应颗粒、ｃ－ｆｏｓ ｍ ＲＮＡ和ｃ－ｊｕｎ ｍ ＲＮＡ 等进行自动检测和定量分析比较,并观察分析３组兔的存活时间和海水型呼吸窘迫综合征（ｓｅａｗ ａｔｅｒ－ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｉｓｔｒｅｓｓ ｓｙｎｄｒｏｍ ｅ,ＳＷ－ＲＤＳ）发生率。结果　ＨＢＯ组兔ＰａＯ２ ,ＳａＯ２ 和ｐＨ ３ 项指标比药物组显著升高（Ｐ＜ ０．０１）,动物存活时间［（４３．０３±７．１９）小时］比药物组［（２３．５８±１．４９）小时］明显延长,Ｃａ２＋ 沉淀反应颗粒,ｃ－ｆｏｓ ｍ ＲＮＡ,ｃ－ｊｕｎ ｍ ＲＮＡ和ＳＷ－ＲＤＳ发生率ＨＢＯ组则明显低于药物组（Ｐ＜ ０．０１）。结论　ＨＢＯ可明显提高ＰａＯ２ 和ＳａＯ２,有效改善低氧血症和代谢性酸中毒,减轻ＰＥ－ＳＷＤ时肺组织的损伤,从而可防止ＰＥ－ＳＷＤ向ＳＷ－ＲＤＳ转化。     

ВКК-15К一体化防护装备不通风时的热负荷评定

目的研究ВКК－１５К一体化高空防护装备（Ｃ组）的热负荷，并将其与普通飞行装备（Ａ组）及ＫＨ－３型抗荷服（Ｂ组）的热负荷作对比。方法６名男性青年受试者分别在舒适环境和４０℃环境中穿着Ａ、Ｂ、Ｃ３组装备各９０ｍｉｎ。测定隔热值、蒸发散热指数和综合热应激指数。结果Ａ、Ｂ、Ｃ组装备的总隔热值（Ｉｔ，ｃｌｏ）分别为１．３３、１．５８和２．０５，相互间有非常显著性差异（Ｆ＝８３．８８，Ｐ＜０．０１）。３组的透湿指数（ｉｍ）在０．４１～０．４６之间，无显著性差异。３组的蒸发散热效能指数（ｉｍ／Ｉｔ）分别为０．３２、０．２６和０．２２，相互间有非常显著性差异（Ｆ＝５９．０９，Ｐ＜０．０１）。受试者在４０℃热环境中穿Ｃ组装备６０ｍｉｎ时综合热应激指数（ＣＩＨＳ）为５．４８，属中度热应激；９０ｍｉｎ时ＣＩＨＳ为６．４０，属重度热应激。均较穿Ａ、Ｂ组装备时明显为高。结论飞行员在热环境下穿ВКК－１５К一体化高空防护装备无通风时，将产生中等到严重程度的热应激