胃溃疡复发模型大鼠胃组织蛋白质组的动态变化及健胃愈疡颗粒干预作用

[目的]通过胃溃疡(GU)复发大鼠胃组织蛋白质差异显示及健胃愈疡颗粒(JWYY)干预,寻找JWYY抗GU复发的相关蛋白。[方法]采用乙酸及白细胞介素1β(IL-1β)复制GU复发动物模型,分别于造模后第8、16、92天,对大鼠GU复发过程进行动态观察,并同时给予JWYY干预,收集各时间点大鼠胃组织,提取胃组织总蛋白质,分别进行双向凝胶电泳(2-DE)分离I、mage Scanner扫描、PDQuest行差异蛋白质分析、凝胶考染,显示差异蛋白质。[结果]模型复发组大鼠出现生命活动整体反应(如体重、活动度等)下降;在各组考染凝胶图谱上,可辨识的蛋白质斑点达900-1 300个;与模型复发组相比,JWYY干预后,其蛋白质表达在不同时间点均有差异。[结论]JWYY抗GU复发的作用机制是多方面的,其干预作用与多种蛋白质相关。     

健胃愈疡颗粒剂对复发胃溃疡大鼠胃黏膜组织中血小板源性生长因子mRNA表达的影响

[目的]观察健胃愈疡颗粒(Jianweiyuyang Granule,JWYY)对复发胃溃疡(GU)大鼠胃黏膜组织中血小板源性生长因子(PDGF)mRNA表达的影响及抗复发机制。[方法]Okabe乙酸涂抹法制作大鼠GU模型。腹腔注射白细胞介素-1β(IL-1β)制作GU复发模型。运用RT-PCR方法检测GU复发大鼠胃黏膜PDGF mRNA的表达。[结果]JWYY能明显升高PDGF mRNA的表达水平,且模型组PDGF mRNA的表达水平明显高于对照组(P<0.01)。[结论]JWYY通过提高PDGF mRNA的表达,提高溃疡愈合质量,降低IL-1β所致的大鼠GU复发率。     

IL-1β致乙酸性胃溃疡复发大鼠的比较蛋白质组学分析

目的:筛选胃溃疡复发相关的蛋白质,进一步揭示胃溃疡复发的分子机制.方法:以乙酸制备胃溃疡模型,并用IL-1β诱导复发.采用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离胃溃疡复发大鼠胃溃疡处组织及正常大鼠相应处胃组织的总蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质量指纹图(PMF),搜索数据库鉴定蛋白质.结果:获得分辨率较高、重复性较好的胃溃疡复发大鼠和正常大鼠胃组织的2-DE图谱,质谱分析共鉴定了12个差异蛋白质点,其中7个表达上调,含热休克蛋白27(HSP27)、葡萄糖调节蛋白(GRP78)、L-乳酸脱氢酶轻链、磷酸甘油醛脱氢酶、血红蛋白β链、过氧化物酶2、过氧化物酶1;5个表达下调,含膜联蛋白A2、热休克蛋白60、氯离子通道蛋白1、黏着斑蛋白、凝溶胶蛋白.随即采用免疫组化法检测差异蛋白质HSP27和GRP78在两类组织中的表达,结果显示胃溃疡复发组HSP27和GRP78阳性细胞百分率均显著高于正常对照组(HSP27:27.90%±5.34% vs 22.10%3.67%,P＜0.05;GRP78:43.00%±4.52% vs 26.30%±3.95%,P＜0.01).结论:差异蛋白如HSP27和GRP78等可能以不同的方式参与了胃溃疡的复发过程,为揭示胃溃疡复发的机制提供了线索.     

IL-1beta致乙酸性胃溃疡复发大鼠的比较蛋白质组学分析

目的筛选胃溃疡复发相关的蛋白质,进一步揭示胃溃疡复发的分子机制.方法以乙酸制备胃溃疡模型,并用IL-1β诱导复发.采用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离胃溃疡复发大鼠胃溃疡处组织及正常大鼠相应处胃组织的总蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质量指纹图(PMF),搜索数据库鉴定蛋白质.结果获得分辨率较高、重复性较好的胃溃疡复发大鼠和正常大鼠胃组织的2-DE图谱,质谱分析共鉴定了12个差异蛋白质点,其中7个表达上调,含热休克蛋白27(HSP27)、葡萄糖调节蛋白(GRP78)、L-乳酸脱氢酶轻链、磷酸甘油醛脱氢酶、血红蛋白β链、过氧化物酶2、过氧化物酶1;5个表达下调,含膜联蛋白A2、热休克蛋白60、氯离子通道蛋白1、黏着斑蛋白、凝溶胶蛋白.随即采用免疫组化法检测差异蛋白质HSP27和GRP78在两类组织中的表达,结果显示胃溃疡复发组HSP27和GRP78阳性细胞百分率均显著高于正常对照组(HSP2727.90%±5.34% vs 22.10%3.67%,P＜0.05;GRP7843.00%±4.52% vs 26.30%±3.95%,P＜0.01).结论差异蛋白如HSP27和GRP78等可能以不同的方式参与了胃溃疡的复发过程,为揭示胃溃疡复发的机制提供了线索.     

半夏泻心汤加减方对胃溃疡大鼠胃组织热休克蛋白27表达的影响

[目的]探讨半夏泻心汤加减方调控热休克蛋白27（HSP27）干预乙酸性胃溃疡（Gu）大鼠的疗效机制。[方法]30只Wista大鼠,随机分为假手术对照（S）组、GU模型对照（M）组及半夏泻心汤加减方干预（Y）组,每组10只。M及Y组采用胃窦部乙酸注射复制大鼠乙酸性GU模型,s组注射同剂量的0．85％氯化钠。于术后第2天Y组经灌胃给予半夏泻心汤加减方每日1次,共7d,S、M组给予等量0．85％氯化钠,于术后第8天处死全部大鼠取材,观察胃大体情况,采用GU指数（GUD对溃疡进行评定,苏木精一伊红染色观察胃组织病理变化,实时荧光定量PCR法检测大鼠胃窦部HSP27mRNA表达。[结果]S组大鼠胃腔无溃疡形成,M及Y组大鼠胃腔乙酸注射部位均见溃疡形成,但Y组GUI显著低于M组（P〈0．01）;Y组胃组织HSP27mRNA较S、M组表达显著升高（均P〈0．01）[结论]半夏泻心汤加减方可上调HSP27mRNA表达,这可能是其有效干预乙酸性GU大鼠的病理机制。     

燃煤污染型砷中毒肝损伤患者血清差异蛋白质的筛选

目的 对比分析燃煤污染型砷中毒肝损伤患者和健康人血清中差异表达的蛋白,筛选与燃煤污染型砷中毒致肝损伤发生密切相关的血清蛋白质.方法 6例血清标本来自于贵州省兴仁县交乐病区燃煤型砷中毒肝损伤患者及病区健康人(对照组),采用双向凝胶电泳(2-DE)分离血清中总蛋白,硝酸银染色后经图像分析识别差异表达的蛋白质,基质辅助激光解吸电离飞行时问质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质点,寻找与燃煤污染型砷中毒致肝损伤有关的蛋白质.结果成功地建立了血清2-DE图谱.差异蛋白分析显示,砷中毒肝损伤组平均蛋白点数为(824±31)个,对照组为(782±42)个,两组血清2-DE图谱的匹配率为94.9%(782/824).筛选出两组间的差异蛋白点49个,对其中表达量差异3倍以上的30个蛋白点进行MALDI-TOF-MS分析,鉴定出相关蛋白10个.与对照组比较,其中α2-巨球蛋白、B细胞受体相关蛋白31、细胞角蛋白1、载脂蛋白A-I在砷中毒肝损伤组表达上调,触珠蛋白、α2-HS-糖蛋白、细胞外信号调节激酶4、锌指蛋白323、ZAP-70、SP40表达下调.结论成功地建立了分辨率高、重复性较好的燃煤污染型砷中毒肝损伤患者血清2-DE图谱,并筛选出一些与健康人血清中差异表达的蛋白质,这些蛋白质能否作为燃煤污染型砷中毒肝损伤诊断的血清标志物还有待于进一步验证.     

胃康胶囊对胃溃疡患者T细胞亚群及白细胞介素2和6水平的影响

[目的]观察胃康胶囊对胃溃疡(GU)患者T细胞亚群及血液和组织中白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)水平的影响,进一步探讨其抗溃疡的作用机制。[方法]将符合诊断标准的88例GU患者,采用双盲双模拟研究方法随机分为治疗组(胃康胶囊)45例和对照组(丽珠得乐)43例,用流式细胞术、放射免疫法、ELISA法分别检测血液T细胞亚群、血清及溃疡灶周围黏膜组织中IL-2、IL-6的水平,并与15例健康人作比较。[结果]GU患者IL-2水平低下,IL-6水平升高,与健康人比较P<0.01。胃康胶囊治疗后能使患者CD3 、CD4 、CD4 /CD8 比值恢复正常,明显优于对照组。2组治疗后血清IL-2、IL-6均有较好改善,但不及溃疡灶周围黏膜组织中IL-2、IL-6的改善明显(P<0.01);治疗后治疗组血清及组织改善优于对照组(P<0.05、<0.01)。[结论]GU患者免疫功能低下,存在IL-2的欠表达和IL-6的过表达。胃康胶囊能有效地抑制溃疡及溃疡复发,可能与其提高患者免疫功能,调节血清及溃疡灶周围黏膜组织中IL-2、IL-6的水平有关。     

大鼠乙酸性胃溃疡复发模型的复制及健胃愈疡颗粒的干预作用

[目的]复制大鼠乙酸性胃溃疡复发模型并观察健胃愈疡颗粒（JWYY）的干预作用。[方法]采用改良Okabe乙酸涂抹法制作大鼠胃溃疡模型，腹腔注射白细胞介素1β（IL-1β）致愈合溃疡复发。44只大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型复发组、模型未复发组、JWYY组、奥美拉唑（OMLZ）组，观察各组胃溃疡复发率、胃蜜大体改变、胃窦组织病理学改变、炎症细胞密度计数。[结果]模型复发组胃溃疡复发率为87．50％，呈溃疡病理结构改变，溃疡边缘见残留之再生黏膜，再生黏膜较薄，有较多炎症细胞浸润。JwYY能改善胃溃疡愈合，减低IL-1β所诱导的瘢痕黏膜炎症细胞浸润的密度，降低溃疡复发率，与OMLZ无显著差别。[结论]IL-1β可能通过炎症细胞浸润诱导愈合的乙酸性胃溃疡复发；抑制炎症反应可能是JWYY抗溃疡复发的疗效机制之一。     

益智健脑颗粒对SAMP8小鼠海马蛋白质表达的影响

目的 运用蛋白质组学技术观察益智健脑颗粒对SAMP8小鼠海马蛋白质表达的影响,从而探讨益智健脑颗粒治疗阿尔茨海默病(AD)的部分作用机制.方法 将6月龄SAMP8 20只随机分为治疗组(n=10)和对照组(n=10),治疗组以益智健脑颗粒浓缩液灌胃,对照组以等剂量双蒸水灌胃.8 w后,应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分别分离治疗组和对照组SAMP8海马区组织总蛋白,经胶体考马斯亮蓝染色,利用ImageScanner图像扫描仪及ImageMaster双向凝胶电泳软件对图像进行扫描分析,将有意义的差异蛋白质点经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析得到肽质量指纹图谱(PMF),经 MSDB和NCBI数据库查询,鉴定差异蛋白质点.结果 鉴定出治疗组13个差异表达大于2倍的蛋白质,其中有8个上调,5个下调.结论 益智健脑颗粒可调节SAMP8小鼠海马组织的多种蛋白质表达,提示该药具有多靶点治疗的作用.     

特发性间质性肺炎蛋白质组学研究及Annexin Ⅱ表达验证

目的 应用蛋白质组学方法筛选出特发性间质性肺炎(idiopathic interstitial pneumonia,IIP)相关蛋白质,为阐明IIP的发病机制和预后提供理论依据.方法 收集8例通过局部麻醉小切口开胸肺活检获取的新鲜肺组织及5例远离肺部良性病变的肺组织,采用双向凝胶电泳(2-DE)分离组织总蛋白,运用Imagemaster 2D 5.0图像分析软件识别差异表达的蛋白质点,应用基质辅助电离解析飞行时间质谱获取肽质量指纹图谱,检索数据库鉴定差异表达的蛋白质点,明确其生物学功能.利用Western blot和RT-PCR技术检测差异蛋白在IIP患者肺组织和正常肺组织的表达.结果 建立双向电泳图谱,鉴定出7个表达量有明显差异的蛋白质点,包括热休克蛋白70、AnnexinⅡ和Haptoglobin等.Western blot和RT-PCR技术证实IIP组AnnexinⅡ表达下调,与2-DE结果一致.结论 建立重复性较好的IIP患者肺组织与正常肺组织双向电泳图谱,并鉴定出一些与IIP发病机制相关的蛋白质.本实验所证实的AnnexinⅡ差异表达蛋白质可能通过引起纤溶系统的失衡来参与IIP的发生和发展,从而为进一步阐明IIP的发病机制提供重要方法和新线索.     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.