间接免疫荧光染色法快速鉴定产气荚膜梭菌的应用

一、方法与结果取伤口分泌物或坏死组织涂片,火焰固定。滴加1:10稀释的正常非免疫血清(兔、羊、小牛血清均可),置湿盆内,放37℃温箱30分钟.取出用水漂洗5分钟.然后滴加兔抗产气荚膜棱菌血清,放37℃温箱30分钟,再     

胶乳法测抗O血清灭能方法改进

笔者根据EDTA能够络会血清中的Ca2+、Mg2+离子，进而阻断补体经传统或旁路途经活化这一原理．在实验中的稀释液内加入适量EDTA－Na。，使科体灭活。以胶乳法测抗“O”为例，并与原法进行了对比，现介绍如下。1试剂与方法血清标本用1．0g／LEDTA－Na2l：50稀释混匀，以每分钟2000转离心2分钟，取上清液一滴加在反应极格子内；再加溶血亲一滴轻轻摇动2分钟，后滴加ASO胶乳试剂一滴，摇动8分钟，同时做阴阳对照，有清晰凝集颗粒出现为阳性，反之为阴性。阳性标本可进一步稀释测定。所用胶乳试剂由上海医用化验所提供，EDTA－Na。溶…     

间接血凝试验应用于伤寒诊断

间接血凝试验(简称IHA)检测伤寒,其敏感性及特异性均优于肥达氏反应。为比较IHA及肥达氏反应两者方法的差异,今将两者平行试验的结果报告如下。材料及方法一、IHA 1.试剂:用人“O”型红细胞,经戊二醛固定,然后以伤寒“O”抗原致敏,加入保护剂后冷冻干燥而成。2.方法:待检血清稀释度依次为1:10,最后1孔为1:640,致敏血球为1%,每孔各加1滴(0.025毫     

用U型血凝板法作血型鉴定

本文采用“U型血凝板法”作血型鉴定,通过1742例试验,效果很好。方法:取U型血凝板一块,在各孔中分别加3.13%柠檬酸钠生理盐水0.05ml,分别贴上A、B、O标签,并标上编号,按标签分放A、B、O标准血清2滴(16弓针头)。3孔各加被检者全血1滴摇     

用末梢血同时检测抗链球菌溶血素O与类风湿因子

采手指(耳垂)血40μl,注入盛有0.38ml 生理盐水的小试管内(血清稀释度为1∶20)混合:2500r/min离心3分钟。吸取上清液一滴(约0.05ml),置玻片上加入约等量RF 免疫胶乳试剂,搅匀,作RF 测定。     

用末稍血溶血液直接测定HBsAg

取耳垂血或指血20μl,加至350μl 蒸馏水中,使溶血(相当于血清标本1:32稀释).再按常规反向间接血凝技术于V 型孔血凝反应板上操作,第1孔加不稀释溶血液1滴,第2孔加溶血液1滴和稀释液1     

用ELISA法AB显色剂测定粪便隐血分析

本文介绍笔者在临床试验中利用弃物—酶联免疫吸附试验 ( ELISA)法的 A、B显色剂来测定粪便隐血 ,效果甚佳。现介绍如下 :1　材料与方法1 .1　试剂　 ELISA法 A、B显色剂由上海荣盛生物技术有限公司提供。 1 %联苯胺冰醋酸溶液 :自配。 3%过氧化氢( H2 O2 )溶液由厦门市东风制药厂提供。1 .2　方法　取 0 .9%生理盐水二滴于玻片上 ,将粪便标本涂在玻片生理盐水中 ,各加 ELISA法 A、B液二滴立即观察结果 ,显蓝色者为阳性。1 .3　敏感度试验　取全血用 0 .2 mol/ L盐酸依次稀释 ,各稀释管加入正常粪便标本少许 ,取混合液按上法操作…     

人全血C-反应性蛋白含量的测定

大量临床和实验研究结果表明,健康人血清中并不含有C-反应性蛋白(CRP),它仅在炎症与损伤性病变的急性期(即发病后8-12小时)才出现。作者用敏感的免疫荧光法作全血检查表明:①全血含有比血清多的CRP;②红细胞吸附CRP。用下述直接血凝反应测定全血CRP含量,具有操作简单和敏感度高的特点。方法将干燥的抗CRP血清用5%枸椽酸钠稀释成1∶2、1∶4、1∶8、1∶16及1∶32浓度。在划线的洁净白磁板上,每格分别滴入上述稀释抗血清2滴后,再滴入一滴自然流出的指端末稍血,并以洁净载玻片角细心混匀之。2-3分钟后肉眼观察红细胞     

用香红O染色的抗原微量凝集试验检测布氏菌抗体

本文介绍用番红O(Safranine O)染色的抗原微量凝集试验(MAT)来检测布氏菌抗体,并与试管凝集试验(TAT)作了比较。 TAT是检测人体抗布氏菌抗体的应用最广泛的试验方法。使用的抗原浓度是,将原液用0.5%石碳酸盐水作1∶50稀释。将血清在含0.85%盐水的试管内作2倍稀释,从1∶10稀释开始,至1∶5120为止,包括已知高、低滴度和阴性参考血清对照。每管含0.5ml稀释血清,加入等量的1∶50稀释抗原(0.5ml),混匀后置37℃水浴孵育48小时,观察结果。 MAT法系采用Ganltney等改良法使用的抗原浓度是将原液用pH7.2的磷酸盐缓冲盐水(含最终浓度为0.005%的番红O)作1∶50稀释。番红O-磷酸盐缓冲盐水稀释液是取1 ml 0.5%番红O水溶液     

聚凝胺试验用于致敏红细胞和不完全抗体初筛的探讨

目的：探索MPT用于致敏红细胞和不完全抗体初筛的可能性。方法：设计了用MPT测定致敏红细胞的方法，即先吸取3％～5％的待检红细胞悬液2滴和健康献血员AB型血浆(血清)1滴混合，AB型血浆作为一种抗红细胞“粘壁”现象的惰性介质；设计了用MPT测定血清中有无不完全抗体的方法，即先吸取待检血清2滴加入3%～5%的Rh(D)阳性混合健康献血员O型红细胞悬液1滴，O型红细胞作为检测不完全抗体是否存在的栽体；接下去按一般的MPT步骤操作。通过模拟试验和临床应用来论证MPT的这一新用途。结果多量蛋白质的存在不影响MPT结果，蛋白质过少会导致MPT中红细胞“粘壁”现象，通过加入适量血浆(血清)能消除；MPT能检测最高稀释度为1：256的抗D(IgG)和1：64的免疫性抗A血清制备的模拟致敏红细胞和不完全抗体。MPT检测凝胶法抗球蛋白试验阳性15例，MPT结果比试管法敏感，和凝胶法一致；检测试管法阴性20例临床标本，MPT结果与试管法符合。结论：MPT可用于致敏红细胞和相应不完全抗体的初筛，比试管法抗球蛋白试验敏感、快捷。     

来稿摘登

162次脑压测量与穿刺滴数相关分析(解放军152南阳分院贾正义许春祥常自光)一般腰穿多用9号针。为减轻病人痛苦,我院1976年8月～1988年4月,用7号针作腰穿162次,计算每分钟流出脑脊液的滴数,同时用脑压测定管测定脑压,以探求用7号针腰穿每分钟流出脑脊液数与脑压的关系。现报告如下: 162次测得脑压的范围是45～470mmH_2O。滴数是4～44滴/分。低颅压:45～69mmH_2O,4～5滴/分:正常脑压:76～180mm H_2O,4～23滴/分。高颅压:181～470mmH_2O,14～44滴/分。     

一种检测TgA缺乏的快速筛选试验

本文介绍筛选IgA缺乏的一种快速固相红细胞吸附试验(SPRCA)。方法:用蒸镏水稀释亲和纯化羊抗人IgA 至20μg/ml.然后取100μl 加于聚苯乙烯U型孔底微量反应板孔内.置37C 孵育4小时后保存于4℃备用。试验前反应板孔用0.85%生理盐水洗5次,加1滴被检血清包被反应孔,置37℃孵育5■,再用0.85%盐水洗5次,于每孔加1滴IgA 致敏指示红细胞,600×g 离心(?),观察反应结果。指示红细胞全部或部分复盖在孔的表面为阳性(IgA 水平<1mg/dl),红细胞形成小而分散扣于孔底为阴性(IgA水平>1mg/dl)。22例住院病人血清先用比浊法确定样本IgA水平,再将每份血清样本用6%白蛋白稀释成IgA     

低离子抗球蛋白试验

作者通过相容和筛选试验,对7种血清学方法作了评价,认为低离子抗球蛋白试验(LIAGT)明显优于其它方法。材料:冷冻20年以上的抗-RHI血清,以及新鲜和冷冻15年的其它抗血清。方法:1.无花果蛋白酶(Ficin)法:Ficin处理细胞1滴加入同种抗血清1滴或4滴,37℃孵育20分钟,离心分析结果。2.Ficin-聚乙烯吡咯烷酮(PVP)法:Ficin试验完后,离心弃上清液,加1滴PVP-BSV,37℃孵育5分钟,离心后加2滴新鲜盐水,观察凝集。3.Ficin-抗球蛋白试验(AGT)法:观察Ficin-PVP法结果后,细胞经盐     

微波快速免疫荧光染色法检测抗核抗体

随着免疫荧光技术的发展，测定抗核抗体已成为有用的临床工具”’。本文将微波辐射方法引入抗核抗体免疫荧光染色，这种方法与间接免疫荧光常规染色法相比耗时短，背景清楚，操作简便，结果令人满意。观介绍如下：1材料和方法1.1材料小鼠肝组织切片。购自北京医科大学，－20”C冰冻保存。羊抗人FITC标记的IgG（北京生物制品所出品），微波炉（日本National，700W）1·2间接免疫荧光常规染色法取各用的肝印片滴加20μl：10倍稀释的血清均匀地铺在肝印片上，置入温盒内37℃孵育30分钟，洗涤，滴加最适稀释度的FITC标记的IgG20μl，置入…     

固相抗球蛋白试验

本文介绍一种借助于机器读数的固相抗球蛋白试验(SPT)。方法:①间接抗球蛋白试验(IAHG);在试管中加3滴血清和1滴3-5%洗涤红细胞悬液,37℃孵育30分钟,生理盐水洗3次,再加滴抗球蛋白试剂,混匀、离心、低倍显微镜看结果。以0-12积分评价结果,0为阴性,12为明显看到最强凝集。②固相物的制备:每支试管加纤维蛋白原溶液0.2ml至管底完全复盖为止。室温(21℃)放置5分钟,用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗3次,再加免疫球蛋白溶液0.1 ml,随后加1%戍二醛(?)滴(约50μl)。室温放置30分钟,再以PBS冲洗2次,以牛血清白蛋白(10g/L)冲洗5分钟以上。然后每管加多特异性抗人球蛋白0.1ml,室温放置5     

"4"在护理工作中的应用

在临床护理工作中,无时不与公式、数值打交道,诸如输液速度的计算,氧浓度与氧流量的换算,应用呼吸机给氧、氧气管道的压力,吸痰、洗胃的负压等,就教科书的模式而言不乏繁琐,且不便记忆。笔者发现以上数值,很巧合地均与数字4有关,记住一个“4”字,可以此类推,举一反三,可谓节时又节力,巧妙又易记,不妨一试,其方法如下。1　输液滴注速度计算法11　已知每小时输液量,计算每分钟滴数:传统公式:每分钟滴数=每小时输入量×每毫升相当滴数(15滴)60(ｍｉｎ)改进公式:每分钟滴数=每小时输入量÷412　已知每分钟滴数,计算每小时输入量:传统公式:每小时…     

曲克芦丁配制过程中出现红色块状物1例的报告

资料报告:2005年1月5日,我们应用诺氏制药(吉林)有限公司生产的曲克芦丁10ml(500mg)加入5%葡萄糖注射液稀释后准备给病人滴注。结果发现配制瓶中出现许多红色块状物。该配制液未给病人使用,并留置观察。讨论:在整个护理操作过程中严格执行操作规程。配制该药的注射器未接触过其他任何药液。用碘酒消毒瓶盖后直接将曲克芦丁注入5%葡萄糖液瓶中。此外,除瓶中出现红色斑块外,瓶盖颜色呈深红色,疑该药液反应是由于消毒液引起的。遂取曲克芦丁一滴,加入2%碘酒一滴,药液立刻呈深红色。取曲克芦丁一滴,加入75%酒精一滴,肉眼未见反应。故建议在药液…     

抗链球菌溶血素“O”胶乳法补体灭活改进

抗链球菌溶血素“O”(ASO)胶乳颗粒凝集试验,快速简便,不受高脂血症、黄疸等干扰。不足之处血清标本须56℃灭活30分钟。笔者就此作了改     

血清(浆)及尿中肌酸直接测定法

一、试剂及原理(见本刊1984;2(4):37).二、操作1.血清(浆)肌酸测定:血清(浆)0.5ml 置于试管内,加蒸馏水4ml,加氢氧化钡溶液0.25ml,混匀;加硫酸锌溶液0.25ml,充分振摇;2000rpm 离心10分钟.取上清液3.5ml 于另一试管内,加漂白土100mg,振摇1分钟;2000rpm 离心5分钟,吸出上     

简易测定补体效价及抗补体活性的微板法

自身免疫疾病、胶原病及其他疾患,其症状的进展与免疫机制有关。补体效价及免疫复合物的探索在临床上的重要性已日渐明确。目前广泛使用Mayer改良法测定补体效价,但所需器材多,操作繁锁。本文提出了使用微板的补体效价简易测定法,全部测定用微量操作,稀释定量准确,羊红细胞的均方根差少,和Mayer改良法有良好的相关(r=0.79,P<0.01),正常值也与原法一致。补体效价的测定取U型微板二排,一排加原血清50μl,另一排加70%稀释血清50μl,各孔内加明胶巴比妥钠缓冲液(GVB)作等倍稀释(2~(-1)～2~(-2)),加GVB 50μl,充分混和后,再加1%致敏羊红细胞25μl,37℃保温30分钟。然后将板用1000rpm离心5分钟。根据上清液有无溶血及管底血球的残余量自身免疫疾病、胶原病及其他疾患,其症状的进展与免疫机制有关。补体效价及免疫复合物的探索在临床上的重要性已日渐明确。目前广泛使用Mayer改良法测定补体效价,但所需器材多,操作繁锁。本文提出了使用微板的补体效价简易测定法,全部测定用微量操作,稀释定量准确,羊红细胞的均方根差少,和Mayer改良法有良好的相关(r=0.79,P<0.01),正常值也与原法一致。补体效价的测定取U型微板二排,一排加原血清50μl,另一排加70%稀释血清50μl,各孔内加明胶巴比妥钠缓冲液(GVB)作等倍稀释(2~(-1)～2~(-2));加GVB 50μl,充分混和后,再加1%致敏羊红细胞25μl,37℃保温30分钟。然后将板用1000rpm离心5分钟。根据上清液有无溶血及管底血球的残余量