豚鼠糖尿病性膀胱病逼尿肌中c-kit mRNA和蛋白的表达变化及意义

目的: 检测豚鼠糖尿病性膀胱病(DCP)逼尿肌中酪氨酸蛋白激酶生长因子受体(c-kit)mRNA和蛋白的表达水平,探讨c-kit表达与DCP的关系及其发病机制。方法: 60只豚鼠随机分成对照组20只,实验组40只,实验组采用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病豚鼠模型,2组豚鼠饲养10周后运用尿动力学检测并将实验组筛选出DCP组和糖尿病性非膀胱病(NDCP)组,应用RT-PCR、激光共聚焦显微镜技术分别检测各组膀胱组织c-kit mRNA和蛋白的表达。结果: DCP组c-kit mRNA表达显著低于对照组(P<0.01)及NDCP组(P<0.05),相对平均吸光度值分别为4.65±0.47、5.66±0.54、5.54±1.28。糖尿病性膀胱病组c-kit蛋白表达明显低于对照组(P<0.01)与NDCP组(P<0.01),c-kit蛋白荧光值分别为548.69±48.51、844.67±59.24、856.52±53.03。结论: 豚鼠DCP逼尿肌中c-kit mRNA、c-kit蛋白表达减少,导致c-kit信号通路异常,从而使Cajal样细胞在膀胱中的功能减弱而导致逼尿肌功能障碍发生DCP,因此c-kit表达异常可能是DCP的发病机制之一。     

基于词块教学法的英语听力考试焦虑实证研究

探索在听力教学中运用词块教学法降低学生听力考试焦虑效果。对照组使用传统的大学英语综合英语和听力教学方法;实验组采用基于词块教学法大学英语综合英语和听力教学方法。利用SPSS13.0软件分析对照组、实验组实验前后听力测试成绩、听力考试焦虑值变化。①对照组平均成绩从（131.9±2.1）分提高到（135.4±2.5）分（t=-4.65,P〈0.01）,增加了2.5%;听力考试焦虑平均值无明显下降（t=0.06,P〉0.05）;②实验组平均成绩从（132.5±2.0）分提高到（142.7±2.8）分（t=-4.19,P〈0.001）,增加了8.2%;听力考试焦虑平均值从（3.56±0.12）下降到（2.74±0.07）,下降了82.5%（t=11.37,P〈0.001）;实验组学生听力成绩提高率高于对照组（t=-2.92,P〈0.01）。③实验组听力成绩提高率和焦虑值下降率与对照班相比差异具有统计学意义（P〈0.01）。词块教学法能够降低听力考试焦虑,提高听力成绩。     

粘蛋白在胆固醇结石和胆囊息肉胆囊组织中的表达和分泌差异

目的：研究粘蛋白（ mucin, Muc）在胆囊胆固醇结石和胆囊息内胆囊组织中的表达和分泌差异。方法纳入2010年6月至2015年6月在我院行胆囊切除术患者117为研究对象,其中单纯胆囊胆固醇结石患者78例,胆囊息肉患者39例,分析和比较两组患者胆囊组织中粘蛋白mRNA的相对表达水平,以及胆汁中粘蛋白的浓度,并进一步分析两者间的相关性。结果胆固醇结石患者胆囊组织中Muc1、 Muc2、Muc5AC和Muc5B mRNA的相对表达水平均明显高于胆囊息肉患者,其差异均具有统计学意义（P＜0．05）。而胆固醇结石患者胆囊组织中Muc3 mRNA的相对表达水平明显低于胆囊息肉患者,其差异具有统计学意义（P＜0．05）。另外,胆固醇结石患者胆汁中粘蛋白浓度明显高于胆囊息肉患者,其差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论粘蛋白参与了胆囊胆固醇结石的形成和发展,可以作为胆囊胆固醇结石的治疗靶点。     

TWEAK和Fn14在腰椎间盘退变髓核组织中的表达及意义

目的 研究TWEAK和Fn14在腰椎间盘退变髓核组织中的表达及其临床意义.方法 用半定量RT-PCR和免疫组织化学法检测实验组(30例退变腰椎间盘)和对照组(10例创伤腰椎间盘)中TWEAK和Fn14 mRNA及蛋白表达.结果 实验组TWEAK mRNA表达显著高于对照组(0.949±0.093 vs 0.653±0.110,P＜0.01),实验组TWEAK蛋白表达显著高于对照组(0.682±0.126 vs 0.397±0.057,P＜0.01),实验组Fn14 mRNA表达显著高于对照组(0.936±0.125vs 0.632±0.059,P＜0.01),Fn14蛋白表达显著高于对照组(0.540±0.051 vs 0.344±0.072,P＜0.01).结论TWEAK和Fn14的表达增加可能参与腰椎间盘退变的进程.     

丝线法制备豚鼠不完全性小肠梗阻模型及对c-kit表达的影响研究

目的　探讨丝线法建立豚鼠不完全性小肠梗阻模型对ICC细胞表达c-kit的影响。 方法　选取43只成年健康豚鼠随机分成正常A组、假手术B组、模型组（C、D、E）。对模型组豚鼠通过丝线法造成不完全性肠梗阻,3 d后取出丝线并关闭腹腔,分别于术后第1d（C组）,第3d（D组）,第7d（E组）对小肠收缩力、肠黏膜损伤程度及小肠c-kit含量变化进行测定。 结果　模型组各项指标的测定与正常组比较均有统计学差异（P<0.05）,但E组肠黏膜损伤程度与A组比较无明显差异（P>0.05）。E组小肠收缩力较D组高（P<0.05）,肠黏膜损伤程度较D组轻（P<0.01）,小肠c-kit含量较D组明显增高（P<0.01）。 结论　丝线法能建立豚鼠不完全性肠梗阻模型,同时可降低c-kit蛋白表达。     

干细胞因子对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞c-kit mRNA及蛋白表达的影响

目的 观察干细胞因子(stem cell factor,SCF)对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞c-kit mRNA及蛋白的表达影响.方法 胶原酶消化法原代分离培养豚鼠膀胱Cajal样间质细胞,培养24 h后分别加入葡萄糖浓度为5 mmol/L(正常对照组)、15 mmol/L(高糖组)培养基培养72 h后,高糖组分为高糖对照组、SCF干预组(50 ng/ml、100 ng/ml),分别继续培养24 h、72 h,应用RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)分别检测膀胱Cajal样间质细胞c-kit mRNA和蛋白表达变化.结果 高糖对照组较正常对照组c-kit mRNA及蛋白表达均明显下降.24 h组中,SCF50 ng/ml较高糖对照组c-kit mRNA(P>0.05)和蛋白表达(P>0.05)差异不大,SCF100 ng/ml较高糖对照组c-kit mRNA(P<0.05)和蛋白表达(P<0.05)升高;72 h组中,SCF50 ng/ml组、SCF100 ng/ml组较高糖对照组c-kit mRNA(P<0.01)和蛋白表达均明显升高(P<0.01).结论 高浓度SCF可促进已发生形态、机能变化的离体膀胱Cajal样间质细胞c-kit表达上调.     

内镜逆行胰胆管造影联合近期腹腔镜胆囊切除治疗胆系结石的可行性分析与体会

目的探讨经内镜逆行胰胆管造影（ERCP）联合近期（3 d内）腹腔镜胆囊切除术（LC）彻底治疗胆系结石的可行性。方法回顾性分析2012年1月至2014年1月首都医科大学附属北京天坛医院普通外科收治的胆囊结石胆囊炎合并胆总管结石及胆道感染的46例患者,ERCP后1-3 d内行LC的患者21例,设为实验组;ERCP后1-3个月行LC的患者25例,设为对照组。对比两组患者LC手术时间,术中出血量,术后腹腔引流量,中转开腹率,胆囊部分切除率,LC手术前后直接胆红素、谷丙转氨酶及血清淀粉酶含量。结果两组患者在手术时间、术中出血量、术后腹腔引流量、中转开腹率、胆囊部分切除率之间比较,差异无统计学意义（P=0.385、0.242、0.796、0.836、1.000）;实验组术前直接胆红素[（16.80±4.38）vs（7.86±3.35）,P=0.000]、谷丙转氨酶[（60.33±21.01）vs（45.66±19.69）,P=0.019]及血清淀粉酶值[（69.61±39.71）vs（45.70±16.67）,P=0.009]均高于对照组,术后两组间直接胆红素、谷丙转氨酶、血清淀粉酶比较,差异无统计学意义（P=0.365、0.114、0.316）。结论 ERCP联合近期内行LC彻底治疗胆系结石是可行的。掌握此时期手术的所需技巧,可以达到安全、尽早彻底治疗患者胆系结石及炎症。     

Cajal间质细胞数量在反复膀胱炎大鼠膀胱中增加

目的研究Cajal间质细胞(ICCs)在大鼠反复膀胱炎相关膀胱过度活动症(OAB)膀胱中的数量变化。方法将大鼠分为对照组和实验组[大肠埃希菌(E.coli)1×10~8～1.2×10~8 CFU/mL,100μL膀胱灌注],通过尿检和尿流动力学测定及HE染色膀胱组织明确OAB建模成功;用免疫荧光法观察膀胱组织c-kit阳性的ICCs,Western blot检测干细胞因子(SCF)及c-kit蛋白表达水平。结果实验组大鼠较对照组ICCs网格状分布紊乱,数量明显增加(P0.05),干细胞因子(SCF)及c-kit蛋白表达明显升高(P0.05)。结论 ICCs在反复膀胱炎膀胱中明显升高。     

受虐待小学生人格的情绪性维度分析

目的研究小学高年级学生人格的情绪性维度及其与受虐待经历的关系。方法采用儿童期虐待史自评量表（PRCA）、中国青少年人格量表（QZPS-Q）和一般情况问卷,对172名小学五、六年级学生进行测评。结果1女生的敏感分高于男生（16.20±2.82vs14.25±3.67,P〈0.01）,急躁和悲观分低于男生（急躁7.68±3.17vs9.66±3.71,P〈0.01;悲观8.23±3.25vs9.62±3.31,P〈0.01）。2性虐待与情绪性维度无相关性,情绪性总分与儿童虐待无相关性,敏感与儿童虐待呈负相关（r=-0.177～-0.228,P〈0.05）,急躁和悲观与儿童虐待呈正相关（r=0.170～0.260,P〈0.05）。3情感虐待和性别对敏感、急躁和悲观具有预测作用（Beta绝对值=0.178～0.280,t绝对值=2.394～3.900,P〈0.05）,性虐待仅对敏感因子具有较弱的正向预测作用（Beta值=0.180,t=2.510,P〈0.05）。结论小学生人格的情绪性特质存在性别差异,人格特质的形成受受虐待经历的影响。     

T-bet mRNA和GATA3 mRNA在子痫前期蜕膜组织中的表达

目的探讨T-bet mRNA和GATA3 mRNA在正常妊娠产妇及子痫前期患者蜕膜组织中的表达差异。方法选取子痫前期和正常妊娠产妇作为实验组和对照组,采用RT-PCR方法,检测各组产妇蜕膜组织中T-bet mRNA和GA-TA3 mRNA表达水平。结果①子痫前期重度组与轻度组相比,子痫前期重度组与正常组相比T-bet mRNA表达量的差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.01）。子痫前期轻度组与正常组T-bet mRNA表达量相比较差异无统计学意义（P=0.089）。②子痫前期重度组与轻度组相比,子痫前期重度与正常组相比,GATA3 mRNA表达量的差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.01）,子痫前期轻度组与正常组相比GATA3 mRNA表达量的差异无统计学意义（P=0.127）。③T-bet mRNA/GATA3 mRNA比值在正常组与子痫前期重度组间、子痫前期轻度组与重度组间差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.01）。二者比值在正常组与子痫前期轻度组间差异无统计学意义（P=0.522）。结论子痫前期Th1漂移可能与T-bet高表达和GATA3低表达有关。     

IL-27对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的研究IL-27对卵白蛋白(OVA)激发哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 24只雌性BALB/c小鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及IL-27组,每组8只。应用OVA建立哮喘模型,IL-27组小鼠应用1μgIL-27(溶于50μlPBS中)滴鼻给药,观察3组小鼠肺组织病理改变,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞;ELISA法测定小鼠BALF中IL-4和IFN-γ浓度,RT-PCR测定肺组织T-bet mRNA的表达量。结果 IL-27组小鼠肺组织炎症反应明显轻于哮喘组小鼠;IL-27组小鼠BALF中嗜酸性粒细胞计数为(2.21±0.33)×107/L明显低于哮喘组的(12.82±2.17)×107/L(P0.01);IL-27组小鼠BALF中IL-4浓度为(20.4±3.2)μg/L,明显低于哮喘组的(61.3±13.1)μg/L(P0.05);IL-27组小鼠BALF中IFN-γ浓度为(50.3±6.3)μg/L,明显高于哮喘组的(11.1±3.3)μg/L(P0.05);IL-27组小鼠肺组织T-bet mRNA表达量(吸光度积分比值)为(0.268±0.048),明显高于哮喘组的(0.130±0.012)(P0.05)。结论 IL-27可能通过增强T-bet mRNA的表达增强Th1反应,减少BALF中嗜酸性粒细胞数量,进而减轻了哮喘小鼠肺组织炎症反应。     

雄激素缺乏对雄性小鼠主动脉增龄性变化的影响

目的探讨雄激素缺乏对C57BL/6J雄鼠主动脉血管壁组织增龄性变化的影响。结论 24只8周龄C57BL/6J小鼠随机分为正常组（n=8）和去势组（n=8）,另外8只C57BL/6J小鼠作为自然衰老组饲养18个月,测定各组血清睾酮浓度,并分离小鼠主动脉测定丙二醛（maleic dialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的浓度,Western-blot测定去磷酸化Rb蛋白表达量以及提取主动脉线粒体DNA,用巢氏PCR技术分析线粒体DNA缺失突变率。结果与正常组相比,去势组血清睾酮浓度明显下降[（1.05±0.53）ng/mlvs（8.67±0.97）ng/ml,P〈0.01];MDA浓度升高[（1.55±0.43）nmol/mgprotvs（2.42±0.41）nmol/mgprot,P〈0.01];SOD浓度降低[（27.92±2.28）U/mlvs（17.09±1.71）U/ml,P〈0.01],线粒体DNA缺失突变的突变率增加[（18.1713±2.4317）%vs（36.8475±3.3365）%,P=0.029];去磷酸化Rb蛋白表达量增加[（0.12±0.06）vs（0.36±0.07）,P=0.001]。去势组与自然衰老组相比,以上衰老标志物差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论雄激素缺乏的小鼠主动脉组织衰老进程加快,内源性生理剂量的睾酮浓度能延缓雄性小鼠主动脉的衰老。     

个体化家属教育对社区康复精神分裂症家属病耻感的影响

目的了解个体化家属教育对社区康复精神分裂症家属病耻感、自我隐瞒、应对方式与社会支持的影响。方法选取参加个体化家属教育的社区康复精神分裂症家属100例为研究组,选取未参加个体化家属教育的社区康复精神分裂症家属100例为对照组,采用病耻感感受问卷、自我隐瞒量表、应对方式问卷及社会支持量表进行调查,收集两组共200例的调查资料,建立数据库,以SPSS19.0进行统计检验分析。结果参加个体化家属教育的社区精神分裂症家属与未参加的家属在病耻感(研究组1.914±0.254,对照组2.304±0.367;t=-8.73,P0.01)、自我隐瞒(研究组17.25±5.200,对照组31.44±7.452;t=-15.61,P0.01)、应对方式(研究组0.790±0.177,对照组0.633±0.226;t=5.50,P0.01)、社会支持(研究组40.41±7.28,对照组33.34±7.24;t=6.89,P0.01)有统计学差异。结论个体化家属教育有利于降低家属病耻感,提高家属的应对方式,降低患者复发率。     

豚鼠胆汁酸盐输出泵（BSEP）基因克隆及其在胆结石豚鼠肝组织中的表达分析

 目的：克隆并分析豚鼠BSEP基因全长cDNA序列,检测BSEP基因在胆结石豚鼠肝组织中的表达。方法：采用3'、5'RACE方法扩增获得豚鼠肝组织BSEP基因全长cDNA,用生物信息学方法对其进行分析鉴定。实时荧光定量PCR检测BSEP基因在胆结石豚鼠肝组织的表达。结果：豚鼠BSEP基因全长cDNA5579bp,共包含28个外显子,开放性阅读框（ORF）长为3963bp,编码蛋白长1320aa。该基因在胆结石豚鼠肝组织的表达较正常豚鼠显著下调（P<0.01）。结论：豚鼠BSEP基因在胆结石豚鼠肝组织中表达下调可能与结石形成有关。     

孕期营养干预和代谢性危险因素对妊娠结局的影响

目的探讨孕期营养干预和孕期代谢性危险因素对妊娠结局的影响。方法研究对象为上海市国际和平妇幼保健院2010年5月至2012年4月接受常规产检并且分娩的孕妇。采用回顾性队列研究,在确诊为妊娠糖尿病（GDM）的孕妇中比较膳食干预组（接受膳食咨询）和对照组（未接受膳食咨询）不良妊娠结局的差异,GDM诊断采用2010年国际糖尿病与妊娠研究组推荐标准。采用Logistics逐步回归分析母亲孕期危险因素对巨大儿发生的影响及作用大小。结果①10421名孕妇的围生期信息进入数据分析。孕妇初诊时平均孕周20．8（19．4—22．4）周,初诊时空腹血糖（FBS）、三酰甘油（TG）和总胆固醇（CHOL）平均水平分别为（4．3±0．4）、（1．3±0．6）和（4．7±0．8）mmol·L^-1,收缩压和舒张压的平均水平分别为（111．3±11．5）和（67．9±13．3）mmHg。高危孕妇的GDM的患病率为15．8％。新生儿平均出生体重（3355．4±426．0）g,巨大儿发生率6．2％。@812名GDM孕妇中,干预组570例,对照组242例。两组孕妇年龄、文化程度、孕20周体重、初诊时血糖、血脂等基线水平均衡可比。干预组的新生儿出生体重、巨大儿发生率和妊娠期高血压发生率均低于对照组,分别为（3347．4±19．6）傩（3450．3±35．6）g（P=0．007）、6．7％vs15．6％（P=0．001）和26．3％w47．9％（P〈0．001）。随着营养干预次数的增加,孕中晚期体重增长量和新生儿出生体重均呈下降趋势（r=-0．126,P=0．003;r=-0．112,P=0．002）,巨大儿的发生率也依次降低。③Logistic逐步回归分析显示,孕20周时体重（OR=1．08,95％CI：1．07—1．09）、孕中晚期体重增长量（OR=1．10,95％CI：1．07～1．12）和GDM（OR=1．63,95％CI：1．22～2．19）是巨大儿发生的危险因素。结论对高危孕妇应考虑进行更早期的孕期危险因素管理以及膳食指导干预,控制孕期体重合理增长,有望减少不良妊娠结局的发生。     

法尼酯X受体在肝硬化大鼠肝切除术后肝再生中的作用

目的 探讨法尼酯X受体(FXR)在肝硬化大鼠肝切除术后肝再生中的作用.方法 30只肝硬化大鼠肝切除术后按完全随机法分为对照组、胆酸组和消胆胺组饲养1周,每组10只.对照组给以标准饲料饲养,胆酸组给以含0.2%胆酸的饲料饲养,消胆胺组以含2%消胆胺的饲料饲养.1周后检测各组大鼠胆汁分泌速度及总胆汁酸(TBA)含量,检测肝功能、有丝分裂指数(MI)、增殖细胞核抗原(PCNA)标记指数和细胞核DNA含量,并应用RT-PCR和Western免疫印迹分别检测肝组织FXR、胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)两者mRNA和蛋白的表达.结果 胆酸组胆汁分泌速度、TBA含量、血清白蛋白(ALB)含量、MI、PCNA标记指数、细胞核DNA含量均高于对照组(P<0.05),血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)均低于对照组(P<0.05).而消胆胺组胆汁分泌速度、胆汁TBA含量、血清ALB含量、MI、PCNA标记指数、细胞核DNA含量均低于对照组和胆酸组(P<0.05),血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)均高于对照组和胆酸组(P<0.05).胆酸组肝组织FXR mRNA和蛋白表达均高于对照组(mRNA:0.671±0.027比0.528±0.017,蛋白:0.702±0.039比0.566±0.020,P<0.05).肝组织CYP7A1mRNA和蛋白表达含量均低于对照组(mRNA:0.237±0.020比0.325±0.076,蛋白:0.264±0.015比0.325±0.084,P<0.05).而消胆胺组肝组织FXR mRNA(0.468±0.023)和蛋白表达(0.502±0.021)均低于对照组和胆酸组(P<0.05),肝组织CYP7A1 mRNA(0.411±0.021)和蛋白表达(0.476±0.018)则高于对照组和胆酸组(P<0.05).结论 胆汁酸与其受体FXR结合激活细胞内信号转导对肝硬化大鼠肝切除术后肝再生起重要作用,升高胆汁酸水平促进肝再生,降低胆汁酸水平则抑制肝再生.     

面神经骨管对失神经支配面神经损伤的影响

目的探讨实验性面瘫面神经骨管对面神经乃至运动终板损伤及开放面神经骨管的意义。方法压榨面神经制作颞骨内绞扼性面瘫实验模型,分为开放面神经骨管组(开放组)和非开放面神经骨管组(非开放组),非实验侧作为正常对照组。分别测定两组面神经膨胀率。应用诱发肌电图仪分别测试两组压榨前后的刺激反应阈值。应用透射电子显微镜观察两组面神经的病理变化。应用"盐酸消化法"制作口轮匝肌的扫描电子显微镜标本,观察次级突触间隙的变化。结果开放组膨胀率平均为42.6%±6.3%,非开放组膨胀率平均为38.1%±2.8%,两组间差异显著(t=5.41,P<0.01)。开放组面神经髓鞘和轴突变性明显比非开放组轻,开放组次级突触间隙隙沟明显多于非开放组。开放组反应阈值恢复到压榨前,平均需32.8±6.4d,而非开放组平均需57.3±9.5d,两组间差异显著(t=6.01,P<0.01)。结论面神经骨管对病变面神经有绞扼性损伤作用,开放面神经骨管能解除骨管对面神经的绞扼性损伤作用,有利于面神经及运动终板功能恢复,提示临床颞骨外伤性面瘫行面神经减压术有利于面神经功能的恢复。     

血糖控制对2型糖尿病患者载脂蛋白A水平的影响

目的 观察分析2型糖尿病患者载脂蛋白A（apoA）水平变化与血糖控制状态关系及其可能的影响机制。方法 采用自动生化仪检测213名2型糖尿病患者血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、极低密度脂蛋白（VLDL）、低密度脂蛋白（LDL）、载脂蛋白A（apoA）、载脂蛋白B（apoB），用离子交换高效液相色谱分析法测定糖化血红蛋白（HbAlc），比较其与血脂指标的相关性。结果 两组HDL-C水平差异无统计学意义[（1．26±0．45）mmol／L vs （1．13±0．35）mmol／L，P〉0．05]；控制满意组apoA水平显著高于非满意组[（1．16±0．31）g／L vs （0．98±0．32）g／L，P〈0．01]，apoB／apoA显著低于非满意组（P〈0．05）。TC、TG、LDL、VLDL水平两组差异无统计学意义（P〉0．05）。直线相关分析显示apoA与HbAlc、FBG呈显著负相关（r=-0．30，P〈0．01；r=-0．24，P〈0．01）：apoA与HDL、TC呈显著正相关（r=0．74，P〈0．01；r=0．39，P〈0．01）。结论 2型糖尿病患者血糖控制状态显著影响apoA水平，这可能是HDL功能紊乱的重要原因。