慢性乙型肝炎患者血清TGF-β_1水平与肝纤维化的关系

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清中转化生长因子β1（TGF-β1）水平与肝纤维化的关系。方法分别采用ELISA、R IA法对慢性乙型肝炎（CHB）、乙肝肝硬化（LC）共73例患者血清中TGF-β1、透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原蛋白（PCⅢ）、层粘连蛋白（LN）水平进行检测,并对其中42例CHB患者行肝穿刺病理活检,观察不同肝纤维化分期患者以上指标的变化。结果 CHB患者血清中TGF-β1、HA、PCⅢ、LN水平随病情发展逐渐增高（P均〈0.05）;TGF-β1与HA、PCⅢ水平均呈正相关（r=0.457、0.363,P均〈0.05）。肝纤维化分期S1~2、S3~4期血清中TGF-β1、HA水平明显高于S0期（P均〈0.05）,且S3~4期明显高于S1~2期（P〈0.05）。结论血清TGF-β1水平与肝纤维化有密切相关性,血清HA及PCⅢ是判断肝纤维化程度的良好指标。     

慢性乙型肝炎和肝炎肝硬化患者血浆内皮素-1水平与血清肝纤维化指标和门静脉宽度的关系

目的探讨慢性乙型肝炎和肝炎肝硬化患者血浆内皮素-1（ET-1）水平的变化及其与肝纤维化血清指标和门静脉宽度的关系。方法采用放射免疫法测定急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎和肝炎肝硬化患者血浆ET-1、血清透明质酸（HA）、层粘蛋白（LN）、Ⅲ型胶原肽（PⅢP）和Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）水平。结果23例急性乙型肝炎肝纤维化血清指标中仅HA水平较正常对照组明显升高；81例慢性乙型肝炎和64例肝炎肝硬化患者。血浆ET-1、血清HA、LN、PⅢP和Ⅳ-C水平均较正常对照组明显升高。在慢性乙型肝炎中血浆ET-1、血清HA、LN、PⅢP和Ⅳ-C水平随着肝脏损害程度（轻、中、重度）的加重而逐步升高。在慢性乙型肝炎和肝炎肝硬化患者中。血浆ET-1水平与血清HA、LN、PⅢP和Ⅳ-C水平明显相关；同时ET-1还与患者门静脉宽度明显相关。结论ET-1、HA、LN、PⅢP和Ⅳ-C与慢性乙型肝炎肝脏损害相关：ET-1与慢性乙型肝炎和肝炎肝硬化患者肝纤维化程度和门静脉高压有一定的关系。     

血清转化生长因子β1水平在慢性乙型肝炎与乙型肝炎肝硬化患者中差异的意义

目的:观察血清转化生长因子β1(TGFβ1)水平是否与肝脏炎症、纤维化程度相关及其在慢性乙型肝炎与乙肝肝硬化患者中的差异.方法:慢性乙肝(慢性肝炎组)65例,乙肝肝硬化(肝硬化组)56例,体检健康、乙肝标志物阴性者(正常对照组)50例,均空腹采血,肝纤维化指标(HA、CⅣ、PCⅢ、LN)采用放免法测定,血清TGFβ1检测采用ELISA.结果:慢性肝炎组血清TGFβ1水平明显高于肝硬化组和正常对照组(22±13μg/L vs 10±9μg/L,11±9μg/L,P<0.01),肝硬化组血清TGFβ1水平与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05).肝硬化组PCⅢ与血清TGFβ1水平相关(r=0.269,P=0.045),慢性肝炎和肝硬化组血清TGFβ1水平与肝功能、肝纤维化指标无明显相关性(P>0.05).结论:血清TGFβ1水平可协助诊断肝脏炎症程度与纤维化程度,但不能作为他们的判断标准.     

血清转化生长因子β1水平在慢性乙型肝炎与乙型肝炎肝硬化患者中差异的意义

目的: 观察血清转化生长因子beta1(TGFbeta1)水平是否与肝脏炎症、纤维化程度相关及其在慢性乙型肝炎与乙肝肝硬化患者中的差异. 方法: 慢性乙肝(慢性肝炎组)65例, 乙肝肝硬化(肝硬化组)56例, 体检健康、乙肝标志物阴性者(正常对照组)50例, 均空腹采血, 肝纤维化指标(HA、CⅣ、PCⅢ、LN)采用放免法测定, 血清TGFbeta1检测采用ELISA. 结果: 慢性肝炎组血清TGFbeta1水平明显高于肝硬化组和正常对照组(22±13 mug/L vs 10±9 mug/L, 11±9 mug/L, P<0.01), 肝硬化组血清TGFbeta1水平与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05). 肝硬化组PCⅢ与血清TGFbeta1水平相关(r = 0.269, P = 0.045), 慢性肝炎和肝硬化组血清TGFbeta1水平与肝功能、肝纤维化指标无明显相关性(P>0.05). 结论: 血清TGFbeta1水平可协助诊断肝脏炎症程度与纤维化程度, 但不能作为他们的判断标准.     

乙肝相关疾病患者血清HBV DNA和IL-6、IL-8水平分析

目的探讨乙肝相关疾病患者血清中IL-6及IL-8含量变化及其意义及IL-6、IL-8与乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBVDNA）载量的相关性，寻找HBV感染的相关疾病的炎症活动指标。方法采用ELISA法检测慢性乙型肝炎（CHB）29例、乙肝后肝硬化（LC）31例、原发性肝癌（PHC）33例及正常对照30例血清中IL-6、IL-8的水平；并采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测上述93例乙肝相关疾病患者血清HBVDNA的含量。结果CHB、LC及PHC患者血清IL-6、IL-8水平均显著高于对照组（P〈0．01）．但3组之间相比较无明显差异；HBVDNA阳性组和HBVDNA阴性组的IL-6、IL-8的含量均显著高于对照组（P〈0．01），而且HBVDNA阳性组显著高于HBVDNA阴性组（P〈0．01）。结论乙肝相关疾病患者存在着免疫调节的紊乱，IL-6、IL-8在其中起着重要的作用，而且IL-6、IL-8与HBVDNA载量存在正相关关系，可作为乙肝相关疾病炎症活动的观察指标。     

慢性病毒性肝炎患者血清中瘦素与肝纤维化指标的关系

研究血清瘦素水平与慢性病毒性肝炎和肝纤维化之间的关系。用放射免疫法检测 4 5例慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中的瘦素和肝纤维化指标的水平。发现CHB患者血清瘦素水平 (7 6 3± 2 19)ng/ml显著高于正常对照组 (3 82± 1 0 9)ng/ml,其瘦素 /BMI值也显著高于正常对照组 ,CHB患者的血清瘦素水平与肝纤维化指标层粘蛋白 (LN)、透明质酸 (HA)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )和Ⅳ胶原 (ⅣC)的水平呈正相关。瘦素与慢性病毒性肝炎肝纤维化的形成密切相关     

乙型肝炎肝硬化患者血清APPL1水平与Child-Pugh分级的关系

目的：观察乙型肝炎肝硬化患者血清APPL1水平与Child-Pugh分级和肝生化指标的关系。方法62例乙肝肝硬化患者按照Child-Pugh分级,采用ELISA法测定血清APPL1水平,同时测定肝功能,以30例健康体检者对照组作比较。结果乙型肝炎肝硬化患者血清APPL1水平明显高于正常对照组（P＜0．05）,脂联素水平随Child-Pugh分级的增加而逐渐升高（P＜0．05）,与ALT、AST无关。结论血清 APPL1水平在乙型肝炎肝硬化时明显升高,且与病情有一定的相关性,有助于乙型肝炎肝硬化的疗效及预后的判断,有重要的临床价值。     

慢性乙型肝炎、肝硬化患者肝组织病毒载量与肝组织损伤程度的关系

目的了解慢性乙型肝炎（CHB）、肝硬化患者肝内HBV载量的变化与肝组织损伤程度的关系及其对该类患者的预后意义。方法经血清学及肝穿刺病理组织学证实为CHB 46例,经血清学及影像学确诊、手术获得的肝硬化标本17例。采用实时荧光载量系统检测血清及肝组织HBV DNA载量,并观察肝组织炎症及纤维化程度。结果 （1）肝硬化组血清HBV DNA载量低于HBeAg阳性CHB组（P〈0.01）、高于HBeAg阴性CHB组（P〈0.001）;肝硬化组肝组织HBV DNA载量低于HBeAg阳性及HBeAg阴性CHB组（P〈0.001、P〈0.01）;HBeAg阳性及阴性CHB组的肝组织HBV DNA载量均高于血清HBV DNA载量（P〈0.05、P〈0.01）,肝硬化组肝组织HBV DNA载量低于血清（P〈0.001）。（2）CHB、肝硬化血清HBV DNA载量与肝组织的炎症及纤维化程度呈正相关（P〈0.05）,肝组织HBV DNA载量则与肝组织的炎症及纤维化程度呈明显负相关（P〈0.05）。结论肝组织HBV DNA较血清HBV DNA载量更能准确反映肝内HBV复制水平、肝组织损伤程度以及CHB、CHB肝硬化的进展程度。     

慢性肝病患者血清sICAM-1、ACTA水平及临床意义

探讨可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）、激活素A（ACTA）与慢性肝脏疾病的关系。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测128例慢性肝炎（CHB）患者及20例健康对照组血清sICAM-1、ACTA含量，同时测定其肝功能相关指标并进行相关性分析。慢性肝病患者血清sICAM-1、ACTA水平明显高于对照组，差异性显著（P〈0．05或P〈0．01）。与TBil、AST、GLB呈正相关，与ALB呈负相关（P〈0．05或P〈0．01）。血清sICAM-1、ACTA与透明质酸（HA）呈显著正相关（P〈0．05），SICAM-1与ACTA也呈显著正相关（P〈0．05）。sICAM-1、ACTA与HA水平呈正相关，提示sICAM-1、ACTA可做为反映慢性肝病患者肝纤维化以及肝损伤程度的指标。     

川芎嗪与肝复肽联用对慢性乙型肝炎患者血清肝纤维化指标的影响

目的：观察川芎嗪与肝复肽（肝细胞生长与刺激因子，HSS）联用对慢性乙型肝炎（CHB）患者血清肝纤维化指标的影响。方法：169例血清肝纤维化指标异常的CHB患者，随机分为治疗组89例，对照组80例。治疗组采用川芎嗪与肝复肽；对照组采用丹参注射液。30天为1个疗程，两组患者均用药3个疗程。于治疗前后检测血清肝纤维化指标。结果：治疗组患者治疗后肝纤维化指标（PⅢP、LN、C-Ⅳ、HA）显著低于治疗前及对照组治疗后（P〈0．01）；治疗组总有效率为87．64％，对照组则为70．00％，治疗组疗效显著优于对照组（P〈0．05）。结论：川芎嗪与肝复肽两者联用具有纠正CHB患者血清肝纤维化指标异常的作用，两药联用可起到有效的抗肝纤维化作用。     

多指（趾）-肥胖-肾-眼综合征2例并文献复习分析

目的 总结Laurance—Moon—Bardet—Biedl综合征（LMBBS）（多指-肥胖-肾-眼综合征）的发病情况及临床表现，并与国外文献报道进行比较。以提高临床医生对该综合征的认识。方法 对1987—2003年对汕头大学医学院附属第二医院的2例LMBBS报告，以及国外462例、国内94例文献，进行分析。结果 LMBBS有较高的血缘率及阳性家族史，视网膜色素变性、智力低下、肥胖、性发育不良和多指（趾）畸形五大主症，临床表现复杂多变。结论 应避免近亲结婚。国外新近提出的诊断标准及调查方法，有利于患者儿童期的早期诊断。     

奈非那韦耐性细胞株对其它抗艾滋病药、抗肿瘤药的交叉耐性及多药耐药表型分析

目的在体外进行细胞对抗艾滋病药产生耐性的相关因子研究.方法通过将成人T细胞白血病细胞系MT-4培养于含有奈非那韦浓度不断增加直至14μmol/L的培养液中培养30天以获得耐奈非那韦的亚系细胞株MT-4rN.用细胞增殖分析系统四唑嗡染色法测定存活细胞数并用流式细胞仪及荧光化合物罗丹明-123和P-糖蛋白阻遏物维拉帕米分析多药耐药蛋白P-gp的存在.结果发现MT-4rN细胞对新近报道的抗艾滋病药K-37产生出比母本细胞多20倍的耐性.对其它抗肿瘤药的交叉耐性也有不同程度的提高.并且,耐性细胞的荧光密度在维拉帕米存在下有些不同,意味着P-gp在MT-4rN中的表达略有增多.结论在用HIV-1蛋白酶抑制物奈非那韦作用后,MT-4细胞对其它抗艾滋病药及抗肿瘤药产生了交叉耐性并且多药耐药蛋白P-gp的表达有所增加.     

中医参芪归甲汤治疗血吸虫病的效果观察

目的观察参芪归甲汤治疗血吸虫病的效果。方法选取2011—2012年血吸虫病现场防治中发现的血吸虫病患者,按同时使用吡喹酮杀虫和中医治疗的患者列为实验组,只进行吡喹酮杀虫的患者列为对照组。于治疗后1、3月跟踪随访。比较2组患者治疗后的病情改变,并比较实验组治疗前后的病情改变。结果实验组24例,其中白蛋白／球蛋白比值倒置者8例。治疗3月后,总蛋白、白蛋白、球蛋白和总胆红素均值分别比治疗前增加6．7g／L、9．5g／L、-2．8g／L和-4．4μmol／L,白蛋白／球蛋白比值倒置者1例。对照组6例中,白蛋白／球蛋白比值倒置者2例。治疗3月后,总蛋白、白蛋白、球蛋白和总胆红素均值分别比治疗前增加1．8g/L、-5．1g／L、3．3g／L和1．0μmol／L,白蛋白／球蛋白比值倒置者未见改变。参芪归甲汤治疗24例血吸虫病,疗后1月,症状明显改善和改善15例,总有效率为62．50％;肝功能改善16例,改善率66．67％;疗后3月,显效和有效21例,总有效率为87．50％;肝功能改善20例,改善率83．33％;各期症状体征变化例数其差异有统计学意义（x2=2．94,P〈0．05）,各期肝功能变化例数其差异有统计学意义（x2=3．64,P〈0．05）。结论单纯性吡喹酮杀虫对血吸虫病患者疗效较差,用吡喹酮杀虫结合参芪归甲汤基础方治疗血吸虫病患者,能有效地保护并改善肝脏功能,减轻血吸虫病症状,阻止血吸虫病程的发展,效果显著。     

日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3疫苗免疫保护性的观察

目的　研究日本血吸虫(中国大陆株)重组信号蛋白1433(rSj1433)作为血吸虫病疫苗分子的潜能,并探讨rSj1433、rSjGST两种重组蛋白作为疫苗的协同作用及结核杆菌低分子量耐热多肽(Mtb)激活的γδT细胞在抗血吸虫病中的作用。　方法　用SDSPAGE、电洗脱和透析的方法制备rSj1433和rSjGST抗原,将两种抗原(分别用福氏佐剂和Mtb为佐剂)分别免疫BALB/c小鼠后,进行尾蚴攻击感染实验。在攻击感染6wk后,剖杀小鼠计算各组的减虫率。　结果　各组的减虫率为rSj1433+福氏佐剂组32.20%,rSj1433+rSjGST+福氏佐剂组31.10%,rSj1433+Mtb佐剂组27.96%,rSj1433+rSjGST+Mtb佐剂组26.00%,rSjGST+Mtb佐剂组27.10%;各组的减卵率分别为(按以上组序)50.40%、53.30%、51.10%、58.60%和51.30%。　结论　rSj1433具有一定的抗血吸虫潜能,有可能成为抗日本血吸虫疫苗,但未见rSj1433和rSjGST的协同作用;Mtb激活扩增的γδT细胞在抗血吸虫免疫中的效果与福氏佐剂产生的免疫作用类似。     

Association of 14-3-3 Proteins with Centrosomes

ABSTRACT: The 14-3-3 proteins are involved in diverse signal transduction pathways and interact physically with a wide variety of proteins. Here, we report the partial sequence analysis of a human spleen 14-3-3 protein, which was identified as a variant form of the ? isoform. A peptide antibody generated to the variant 14-3-3 localizes in the centrosome and spindle apparatus of mouse leukemic FDCP cells by immunofluorescence microscopy. Immunoblots of centrosomes isolated by sucrose density gradient centrifugation of cell lysates disclose only the ? and γ isoforms, while total cellular lysates contain the ?, γ, β and ζ isoforms of 14-3-3. These data suggest that a subset of total cellular 14-3-3 proteins are localized in the centrosomes and spindle apparatus. A differential localization of the centrosomal 14-3-3 was observed in mouse 3T3 cells. Serum-starved (quiescent) cells lack the centrosomal 14-3-3, but upon serum-stimulation of these quiescent cells, the centrosomal 14-3-3 reappears. We propose that a subset of intracellular 14-3-3 proteins are localized in the centrosome and spindle apparatus, and may in fact, link mitogenic signaling, the cell cycle, and perhaps the centrosome duplication cycle as well.     

日本血吸虫Sj14-3-3疫苗研究进展

日本血吸虫病是由日本血吸虫引起的一类严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,研制疫苗防治该病是目前的研究热点.Sj14-3-3蛋白是一种有效的疫苗分子,该文就Sj14-3-3蛋白疫苗和核酸疫苗的研究进展进行综述.     

Discovery and structural characterization of a small molecule 14-3-3 protein-protein interaction inhibitor

The 14-3-3 family of phosphoserine/threonine-recognition proteins engage multiple nodes in signaling networks that control diverse physiological and pathophysiological functions and have emerged as promising therapeutic targets for such diseases as cancer and neurodegenerative disorders. Thus, small molecule modulators of 14-3-3 are much needed agents for chemical biology investigations and therapeutic development. To analyze 14-3-3 function and modulate its activity, we conducted a chemical screen and identified 4-[(2Z)-2-[4-formyl-6-methyl-5-oxo-3-(phosphonatooxymethyl)pyridin-2-ylidene]hydrazinyl]benzoate as a 14-3-3 inhibitor, which we termed FOBISIN (FOurteen-three-three BInding Small molecule INhibitor) 101. FOBISIN101 effectively blocked the binding of 14-3-3 with Raf-1 and proline-rich AKT substrate, 40 kD(a) and neutralized the ability of 14-3-3 to activate exoenzyme S ADP-ribosyltransferase. To provide a mechanistic basis for 14-3-3 inhibition, the crystal structure of 14-3-3ζ in complex with FOBISIN101 was solved. Unexpectedly, the double bond linking the pyridoxal-phosphate and benzoate moieties was reduced by X-rays to create a covalent linkage of the pyridoxal-phosphate moiety to lysine 120 in the binding groove of 14-3-3, leading to persistent 14-3-3 inactivation. We suggest that FOBISIN101-like molecules could be developed as an entirely unique class of 14-3-3 inhibitors, which may serve as radiation-triggered therapeutic agents for the treatment of 14-3-3-mediated diseases, such as cancer.     

rSj14-3-3和rSj14-3-3/SjGST对日本血吸虫虫卵肉芽肿形成的影响

目的　探讨日本血吸虫信号蛋白 14 - 3- 3基因重组蛋白 (rSj14 - 3- 3)及其与谷胱甘肽S转移酶融合蛋白(rSj14 - 3- 3/SjGST)对宿主肝虫卵肉芽肿形成的影响。 方法　用rSj14 - 3- 3和rSj14 - 3- 3/SjGST免疫雌性BALB/c小鼠 ,末次免疫后 5d ,各组小鼠均感染日本血吸虫尾蚴 4 0± 1条 /鼠 ,6周后 ,剖杀 ,取肝组织计数肝表面虫卵结节密度和肝切片上单个虫卵肉芽肿直径大小。结果　免疫组 (14 - 3- 3组和 14 - 3- 3/GST组 )和对照组肝表面虫卵结节数分别为 6 72±1 14、5 89± 1 0 3和 2 1 0 5± 1 2 6 ,前两者比后者分别减少了 6 8 0 8%和 72 0 2 % ;肝肉芽肿平均直径免疫组为 178 12±32 18μm和 14 8 13± 2 9 6 5 μm ,与对照组 2 75 0 0± 38 2 1μm相比分别减少了 35 2 3%和 4 6 13%。结论　重组抗原rSj14 - 3- 3和rSj14 - 3- 3/SjGST对日本血吸虫具有较好的抗病效果。     

14-3-3蛋白在心肌细胞缺氧预处理中的表达及意义

目的:研究14-3-3蛋白在心肌细胞缺氧预处理中的表达及意义。方法:实验用SD新生大鼠(1～3d龄),雌雄不拘,无菌取出乳鼠心脏,经分离附着组织,胰蛋白酶消化,纯化制成心肌细胞。在培养的第4天随机分为3组:正常对照组、缺氧/复氧(A/R)组、缺氧预处理(APC)组。各组分别进行以下指标观察:①心肌细胞搏动频率;②细胞存活率(MTT法);③培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;④透射电镜观察细胞超微结构;⑤Western Blotting法检测14-3-3蛋白的表达变化。RT-PCR法检测14-3-3蛋白η、σmRNA的表达变化。结果:A/R组和APC组的14-3-3蛋白表达均上调,分别是正常对照组的(3.61±0.37)倍和(5.52±0.49)倍,A/R组和APC组与正常对照组比较、A/R组与APC组比较,均P<0.01。A/R组、APC组心肌细胞14-3-3η亚型mRNA分别为正常对照组的(1.82±0.30)倍、(2.93±0.52)倍,差异均有统计学意义(P<0.01);APC组与A/R组比较,差异亦有统计学意义(P<0.01)。A/R组、APC组心肌细胞14-3-3σ亚型mRNA表达量分别为正常对照组的...     

肝癌组织中14-3-3基因差异表达的意义

目的:检测肝癌组织中,4-3-3基因家族成员表达差异的临床意义.方法:用TRIzol一步法提取肝癌组织、硬化肝组织及正常肝组织的总RNA并纯化mRNA.逆转录合成荧光分子(Cy3/Cy5)标记的cDNA探针与含有14-3-3基因家族成员的基因芯片杂交,用GenePix Pro3.0图像分析软件分析不同病变肝组织中该基因家族成员的表达差异,行半定量RT-PCR对结果进行验证并探讨差异表达基因的临床意义.结果:在肝癌组织中14-3-3基因家族成员呈差异表达,其中14-3-3γ在肝癌组织中明显下调,与肿瘤包膜的完整性相关.14-3-3η在肝癌组织中明显上调,与肿瘤患者的临床分期相关.14-3-3γ与14-3-3ηmRNA的表达强度呈负相关(γ=-0.403,P<0.05).结论:14-3-3基因家族调控机制的紊乱参与肝癌的发生、发展,其中14-3-3γ和14-3-3η与肝癌的关系最为密切.