几种药物抗弓形虫活性的检测

目的 筛选出有效的抗弓形虫病药物。方法 利用HFF细胞和表达绿色荧光蛋白的弓形虫RH株作为评价系统,选择中药(姜黄素和蒿甲醚)、除草剂(阿特拉津)、其它抗寄生虫药(妥曲珠利、泊那珠利、三氮脒和吡喹酮)及抗癌药(环磷酰胺),初步评价其体外抗弓形虫活性。并通过小鼠急性弓形虫感染治疗试验对姜黄素的体内抗弓形虫效果进行检测。结果 姜黄素、蒿甲醚、妥曲珠利、泊那珠利均可显著抑制弓形虫的增殖(P<0.05),姜黄素还可显著抑制弓形虫的入侵(P<0.05);阿特拉津可抑制弓形虫增殖,但差异无统计学意义(P>0.05);姜黄素、蒿甲醚、妥曲珠利、泊那珠利和阿特拉津对弓形虫生长的半数抑制浓度分别是(0.7±0.2) μg/mL,(0.86±0.2) μg/mL,(14.2±2.8) μg/mL,(16.7±4.0) μg/mL,(59.4±4.1) μg/mL,5种药物均是通过直接作用于虫体而影响弓形虫生长;三氮脒、吡喹酮和环磷酰胺在对细胞最高安全浓度(0.2 μg/mL,100 μg/mL,50 μg/mL)时均无抑制弓形虫的增殖或入侵的作用。姜黄素在50~150 mg/(kg·d)时均无延长急性弓形虫病小鼠生存时间的作用。结论 姜黄素、蒿甲醚、妥曲珠利、泊那珠利体外均有抗弓形虫活性,为进一步研究有效的抗弓形虫药物提供重要的信息。     

蒿甲醚体外抗弓形虫作用的实验研究

目的 :了解蒿甲醚体外抗弓形虫速殖子的作用效果。方法 :采用大鼠肾细胞培养技术 ,观察蒿甲醚 (浓度 0.01- 100 μg/ ml)对虫体侵入细胞及在细胞内增殖的影响 ,选乙酰螺旋霉素作对照。结果 :蒿甲醚抗弓形虫作用的最低有效浓度为 0 .1μg/ml。当其浓度为 4 μg/ ml时 ,作用速殖子 4 8h后 ,光镜下多数虫体变形 ,胞质内出现空泡、颗粒。乙酰螺旋霉素的作用不及相同浓度的蒿甲醚。结论 :蒿甲醚在体外能抑制弓形虫速殖子的侵袭和繁殖力 ,且具有杀虫效果。     

复方一枝蒿颗粒抗小鼠急性弓形虫感染的实验研究

目的观察复方一枝蒿颗粒单用或联合阿奇霉素治疗小鼠急性弓形虫感染效果。方法通过腹腔注射弓形虫RH株速殖子的方法建立KM小鼠急性弓形虫感染动物模型,随机分成4组:急性弓形虫感染模型对照组、复方一枝蒿颗粒治疗组、复方一枝蒿颗粒与阿奇霉素联合治疗组,阿奇霉素对照组。观察小鼠病症及存活情况,采用ELISA法检测小鼠外周血弓形虫循环抗原CAg的表达变化;采用双基因PCR法检测弓形虫RH株速殖子在小鼠腹腔和脑、心、肺、肝、脾、肾等脏器中的增殖变化,并制备病理切片,染色后观察各脏器组织病理学变化。结果复方一枝蒿颗粒能够适当延长小鼠生存时间,延长率17.74%。组织学变化显示药物可减轻小鼠肺脏组织瘀血,并使小鼠脾脏出现大量多核型巨细胞形态。复方一枝蒿颗粒可抑制虫体在腹腔和肝、肾、心、肺组织中的增殖,感染4d时对小鼠腹腔冲洗液中游离速殖子的增殖抑制率可达92.80%,联用阿奇霉素增值抑制率达98.53%。相对定量PCR法显示弓形虫复方一枝蒿颗粒对小鼠肝、肾、心、肺组织中弓形虫增殖抑制率分别为(79.60±0.08)%、(42.00±0.20)%、(50.80±0.08)%、(60.40±0.21)%,作用虽弱于阿奇霉素对照组和联合药物组,但可显著抑制小鼠脑组织中弓形虫的增殖,增值抑制率达(76.80±0.07)%(F=63.08,P0.01);核酸检测弓形虫529基因比B1基因在小鼠脏器中的表达更稳定,适宜作为弓形虫在宿主脏器组织中的监测指标。复方一枝蒿颗粒能降低虫体循环抗原CAg在感染小鼠外周血清中的表达水平,与感染组小鼠相比(3 970.82±20.52)pg/ml,至感染4d时药物组小鼠血清中CAg水平为(3 163.01±15.94)pg/ml。结论复方一枝蒿颗粒单用或联合阿奇霉素使用对小鼠急性弓形虫感染有一定治疗效果。与阿奇霉素对虫体的直接杀伤作用不同,复方一枝蒿颗粒主要通过增强脾脏免疫细胞吞噬作用和抑制虫体向脑能远端脏器的侵袭抑制感染鼠的病情发展,推测可能通过调节小鼠免疫功能起到治疗小鼠急性弓形虫感染的作用。     

蒿甲醚对曼氏血吸虫的作用:剂量与效应的关系和虫的形态学和组织病理学的变化

目的　应用感染曼氏血吸虫 (利比里亚株 )的小鼠观察蒿甲醚单剂量与效应的关系,虫体肝移及蒿甲醚所引起的虫的形态学和组织病理学变化。　方法　感染21d童虫的小鼠一次口服蒿甲醚12.5mg/kg至600mg/kg不同剂量 ,治后28d剖检观察各组虫数。感染46d或70d成虫的小鼠一次口服蒿甲醚40 0mg/kg后8～14d ,观察虫体肝移及其形态和组织病理学变化。　结果　蒿甲醚对21d童虫的最低有效剂量为200mg/kg ,减虫率为 81%。用蒿甲醚治疗后8h成虫开始肝移,3～7d全部肝移,14d有31%的虫返回肠系膜静脉。成虫虫体萎缩,咽部扩大,肠管膨胀及其色素减少。雌虫局部体表受损,白细胞附着,卵巢及卵黄腺变性退化,以及雄虫睾丸萎缩等。在肝内的虫体被嗜酸粒细胞为主的炎细胞包围和浸润。　结论　蒿甲醚对小鼠曼氏血吸虫21d童虫的最低有效剂量为200mg/kg ,可引起曼氏血吸虫成虫萎缩、退化或死亡。在肝内受损的虫体主要是被嗜酸粒细胞包围和侵袭所致。     

弓形虫动物转种条件的研究

弓形虫病是一种人兽共患寄生虫病 ,人群与动物的弓形虫感染率很高。有关弓形虫在实验动物体内传代、虫株分离以及致病力等方面的研究虽有报道 [1～ 3] ,但鼠龄、接种途径对感染小鼠生存时间的影响 ,以及感染时间与收虫数量的关系的报道甚少。为了全面了解弓形虫动物转种的影响因素 ,本文用胰蛋白酶消化与不消化法收集的弓形虫速殖子、不同虫数经不同途径接种 ,以及感染不同龄鼠 ,观察了感染小鼠的存活时间及不同感染时间收虫量的动态变化 ,为弓形虫生物学、免疫学和分子生物学的研究奠定基础。材料与方法1　材料1.1　动物　昆明种小白鼠 ,雌…     

蒿甲醚和青蒿琥酯对感染曼氏血吸虫小鼠治疗作用的初步研究

目的了解蒿甲醚和青蒿琥酯对小鼠曼氏血吸虫作用的效果.方法将小鼠随机分成12个实验组及1个对照组,以皮下注射的方法,每鼠接种约80条尾蚴,接种尾蚴46 d后,分别以蒿甲醚或青蒿琥酯灌胃治疗,第1天,分别以400、300、200 mg/kg的剂量1次灌胃;第2～7天,则每天分别按以上剂量的半量灌胃,7 d灌胃的总剂量分别为1 600、1 200、800 mg/kg.总量1剂组,在第7天,分别按1 600、1 200、800 mg/kg剂量1次灌胃.另设感染阳性对照组,不加治疗. 结果蒿甲醚7日疗法1 600、1 200、800 mg/kg剂量组减虫率分别为53.0%、49.0%和53.0%,减雌率为78.0%～82.0%,总量1剂组效果与7日疗法基本相同.青蒿琥酯7日疗法相应剂量减虫率分别为16.0%、37.0%和49.0%.结论蒿甲醚和青蒿琥酯对小鼠曼氏血吸虫具有一定的杀虫效果,蒿甲醚在疗效和毒性方面稍佳.     

蒿甲醚对小鼠体内日本血吸虫日本株的效果

目前用于治疗日本血吸虫病的最有效药物是吡喹酮和羟氨喹,但新近报道对此药物的抗性血吸虫可能正在产生,因而要求发展新型的药物。蒿甲醚(Artemether)是一种抗疟药青篙素的衍生物,据报道在体内对曼氏血吸虫有杀伤作用。在中国曾将它用于小鼠和狗体内日本血吸虫感染的治疗试验,结果表明有作用。可见蒿甲醚是一种具有抗疟和抗血吸虫潜在作用的药物。本研究对此药物对小鼠体内日本血吸虫日本株的作用效果进行评价。     

扁桃酸治疗小鼠急性弓形虫病的效果

目前对弓形虫病的治疗仍以乙胺嘧啶和磺胺嘧啶联合应用为主 ,但其毒副作用严重 ,且复发率较高[1 ] 。因此 ,寻找高效低毒的抗弓形虫药物是亟待解决的问题。扁桃酸体外抗弓形虫的研究已有报道[2 ] 。本实验详细观察扁桃酸从不同途径给药对小鼠急性弓形虫病的治疗作用。1　材料与方法1 1　弓形虫株　ＲＨ株 ,由中国农业科学院兰州畜牧医研究院寄生虫病科提供。1 2　实验动物　由本校实验动物中心提供 4～ 6周龄昆明株小鼠 ,体重 2 0～ 2 5ｇ ,雌雄不拘。1 3　实验药物　扁桃酸由本校药学院合成 ,乙胺嘧啶片为成都制药二厂产品 ,批号 85 0 30 2…     

氯喹治疗小鼠弓形虫感染的实验观察

目的研究和探索治疗弓形虫病新的有效药物,并揭示其治疗机理。方法用弓形虫Rh株感染昆明小鼠,设计氯喹治疗组、甲硝唑组及对照组,观察对比。扫描电镜及透射电镜下观察对比各种情况下弓形虫的超微结构变化。结果按照疗效判定标准,氯喹治疗小鼠弓形虫感染有效,而甲硝唑无效。扫描电镜观察发现,氯喹治疗组中弓形虫速殖子有聚集、粘连,虫体大小不均,表面皱缩,形态不规则。透射电镜观察对照组大量有核细胞内有弓形虫侵入并增殖,以一个细胞内3～4个弓形虫速殖子者多见。氯喹治疗组中少数组织细胞内有弓形虫侵入,且细胞内仅有1个弓形虫速殖子;大部分弓形虫细胞膜及核膜均有破损,破膜从头、尾两端开始;弓形虫内脂肪空泡及线粒体数量较对照组明显减少,棒状体断裂。结论氯喹是一种非常有效的治疗小鼠弓形虫病药物。其治疗机理是破坏弓形虫的细胞膜及核膜,降低其攻击有核细胞的能力,阻断其在细胞内的增殖,且造成代谢紊乱。     

蒿甲醚诱导日本血吸虫雌虫总抗氧化能力下降(英)

目的 观察蒿甲醚对日本血吸虫成虫总抗氧化能力的影响。 方法 体外将血吸虫在含蒿甲醚和氯化血红素的培养液内培养24 h后,或体内感染小鼠经蒿甲醚300mg/kg治疗6～24 h后,测定虫体的总抗氧化能力。 结果体外50μmol/L的蒿甲醚与氯化血红素伍用引起雌虫总抗氧化能力明显下降。体内蒿甲醚作用血吸虫6 h,即见雌虫的总抗氧化能力明显下降。体内、体外试验中,蒿甲醚对雄虫的总抗氧化能力均无影响。 结论 蒿甲醚诱导雌虫总抗氧化能力下降。