日本血吸虫嘌呤代谢的研究

日木血吸虫匀浆含有ATP、ADP、AMP、尿苷、次黄嘌呤、肌苷、腺苷、腺嘌吟及GTP,并能将ATP迅速转变成次黄嘌呤。血吸虫腺苷磷酸化酶活力为27.3μmole/分/对虫,以台氏液培养24小时后,血吸虫向培养液内排出腺苷磷酸化酶。吡喹酮(8×10~(-4)M)及FormycinA(1.6×10~(-3)M)分别抑制该酶58％及72％。血吸虫雌、雄虫表膜ATP酶活力分别为17.0±2.5与17.3±3.8μ molePi/h/mg膜蛋白。在3mM Mg~(++)存在下,Na~+(100mM)及K~+(20mM)对该酶无激活作用,5×10~(-4)M乌本苷对该酶也无明显的抑制作用。采用聚丙烯酸胺凝胶电泳及等电聚焦法对该酶进行分离和提纯,并在提纯前后测定其Km值。     

一种新抗原--曼氏血吸虫卵ATP二磷酸水解酶的特征及其免疫细胞化学定位

曼氏血吸虫的成虫ATP二磷酸水解酶 (ATP Dase)可以水解核苷二磷酸与核苷三磷酸 ,该酶在哺乳动物可参与一系列的生理反应 ,如血小板凝集抑制、炎症反应和免疫应答等。Faria Pinto等研究了此酶在曼氏血吸虫虫卵中的定位 ,并分析了其抗原性。用尾蚴攻击雄性Swiss大鼠制备感染血清、虫卵匀浆 2 5 0 0 g离心上清 (HES)及可溶性虫卵抗原(SEA) ,并测定HES和SEA的二磷酸水解酶活性 ,ATP、ADP、UTP、UDP、GTP和GDP均可被水解 ,但是对不同的底物活性稍有差异。HES水解UDPGDP、ATP的能力比SEA高 30 %～ 6 0 % ,而水解ADP的能力…     

2型糖尿病患者氧化应激状态与红细胞腺苷酸代谢的关系

目的探讨2型糖尿病（T2DM）患者氧化应激状态与红细胞腺内苷酸代谢的关系。方法应用高效液相色谱法和比色酶法分别测定104例T2DM和32例正常对照者（NC）组红细胞内ATP、ADP、AMP含量和SOD、GSH-Px、CAT、anti-ROS、MDA活性,分析二者的关系。结果（1）T2DM组较NC组,SOD、GSH-Px、CAT、Anti-ROS活力和ATP、ATP/ADP、SOD/MDA下降,MDA、ADP含量升高（P均〈0.05）。（2）T2DM组内,ATP含量与SOD活性、SOD/MDA正相关;ADP与SOD、抗ROS活性负相关;AMP与GSH-Px正相关;ATP/ADP与SOD、GSH-Px、SOD/MDA正相关,（P均〈0.05）。结论T2DM患者体内氧化应激水平的升高与腺苷酸代谢异常相关。     

血浆次黄嘌呤与运动

肌肉收缩运动时,细胞内的 ATP 转为 ADP 与AMP,静止时 ATP 又重新合成。但在大运动量或细胞缺血、缺氧时,肌肉的 ATP 降(?)超过合成,出现血浆次黄嘌呤(hypoxanthine,HX)浓度增高。为研究运动时能量代谢情况,作者检测各种运动量下HX 的变化。研究对象为14例健康男性志愿者,平均年龄31(26～35)岁,运动前从前臂浅静脉导管采血测 HX 基值,然后按标准踏车运动逐渐加大运动量。直至最大耐受运动量为止,运动同时不断检测心率,每分钟通气量((?)E)、氧耗量((?)O_2)和 CO_2产生量((?)CO_2),并每5分钟取血测定 HX 共30分钟。结果见最大运动量结束后15分钟,HX 达峰值18.9±2.6μM,显著高于基值1.1±0.1μM。心率、(?)E、(?)O_2、(?)CO_2随运动量的     

青、老年红细胞内ATP酶及含高能磷酸盐的特性

作者测定了30岁以下和60岁以上人红细胞内ATP酶的活性和ATP、ADP、AMP的含量,并测定了红细胞膜上唾液酸的浓度。所测参数除AMP随年龄增加外,其余参数均减少。由于红细胞自身无增殖,故为研究细胞膜的老化提供了适宜的模型,红细胞生命过程中几种参数的改变及随机体的老化,红细胞酶在活性方面也发生了改变。     

慢性血透病人肌肉中腺嘌呤核苷酸的浓度和能量负荷

慢性肾衰竭血透病人低代谢状态和运动能力低下是一种公认的现象。虽然在腓肠肌中ATP浓度未发现有意义的变化,但这些病人血中ATP浓度是低的。细胞能量代谢在某种程度上可用能量负荷比率来判断,即(ATP+1/2ADP)/(ATP+ADP+AMP)。在研究中,作者观察了肾移植病人肌肉标本中3种腺嘌呤核苷酸的浓度和能量负荷比率,并将其与行类似手术而无肾脏并发症者进行了比较。病人和方法血透组病人7例,对照组3     

几种药物对体外培养日本血吸虫成虫毒性作用的研究

目的观察金诺芬、顺铂、阿霉素及化合物4N、H、B、O对体外培养日本血吸虫的毒性作用,以及对硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶（TGR）活性的抑制作用。方法取日本血吸虫成虫置于RPMI 1640培养基中,培养30～60 min后,加入不同浓度药物,分别于6、24、48、72 h观察虫体活力、形态改变及死亡情况。随后换无药物的新鲜培养基,观察虫体活力的恢复情况,并计算药物半数致死剂量（LD50）。测定药物处理后的成虫匀浆上清液中日本血吸虫TGR的硫氧还蛋白原酶（TrxR）和谷胱苷肽还原酶（GR）的活性。结果 5μg/ml金诺芬作用24 h、20μg/ml 4N作用72 h、60μg/ml H作用72 h、80μg/ml顺铂作用72 h对日本血吸虫成虫致死率分别为100%、60%、66.7%、100%,LD50值分别为2.56、17.59、54.14μg/ml和52.87μg/ml,其他药物对日本血吸虫无作用。金诺芬、4N、顺铂、H对成虫的毒性作用具有不可逆性;金诺芬、顺铂对日本血吸虫的TGR酶活性有抑制作用,其他药物对TGR无作用。5～30μg/ml金诺芬、20～30μg/ml 4N、70～150μg/ml顺铂及60～150μg/ml H作用24 h均可使虫体形态发生改变。结论金诺芬、顺铂、化合物4N和H对体外培养的日本血吸虫成虫具有杀伤作用,其中金诺芬、顺铂杀伤日本血吸虫成虫的作用可能与其抑制TGR活性有关。     

心肌缺血再灌注伤损中别嘌呤醇防治作用的研究进展

<正> 别嘌呤醇最初于50年代用于治疗肿瘤,后用于痛风治疗,70年代以来随着自由基研究的进展,对它在预防缺血再灌注引起的组织损伤方面的作用,开展了广范的研究。现就其在防治心肌缺血再灌注损伤方面的作用加以综述: 一、别嘌呤醇防止缺血再灌注损伤的作用机理:三磷酸腺苷(ATP)是人体大部分组组的主要能量来源。心肌缺血时,心肌组织中的ATP很快降解,由ATP→ADP→AMP     

穴位局部嘌呤物质介导预电针心俞穴改善大鼠急性心肌缺血

目的 探讨穴位局部嘌呤物质在预电针心俞穴改善大鼠急性心肌缺血中的可能作用。方法 选用雄性清洁级SD大鼠18只，随机分成生理盐水对照组、急性心肌缺血组、预电针心俞穴组，每组6只。急性心肌缺血组用背部皮下多点位注射盐酸异丙肾上腺素(ISO)制备急性心肌缺血大鼠模型，预电针心俞穴组在造模前电针双侧心俞穴3 d。全自动生化分析仪测定血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和超氧化物歧化酶(SOD)活性；酶联免疫吸附试验(ELISA)测定心俞穴穴区组织中嘌呤物质三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP)浓度。结果 与生理盐水对照组比较，急性心肌缺血组血清SOD显著下降(P<0.05);心俞穴穴区组织ATP显著降低(P<0.05),ADP降低，但差异无统计学意义(P>0.05),AMP浓度显著增加(P<0.05)。与急性心肌缺血组比较，预电针心俞穴组血清SOD含量显著增加(P<0.05);心俞穴穴区组织ATP、ADP含量升高，但差异无统计学意义(P>0.05),AMP含量显著降低(P<0.05)。结论 预电针心俞穴对大鼠急性心肌缺血损伤具有一...     

川芎嗪、缬沙坦及曲美他嗪对乳鼠肥大心肌细胞线粒体结构和能量代谢的影响

目的通过大鼠原代心肌细胞培养,探讨心肌肥大过程中有关心肌细胞线粒体结构和功能的病理改变以及川芎嗪、缬沙坦和曲美他嗪对其的药理作用。方法分离和培养大鼠原代心肌细胞,并与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)共培养72h、96h。BCA法检测细胞总蛋白含量,倒置显微镜拍摄并测量细胞直径,反映心肌细胞增殖情况;荧光显微镜测量线粒体内膜膜电位(ΔΨm)、酶标仪检测线粒体单胺氧化酶(MAO)活性、分光光度计检测线粒体细胞色素C氧化酶(COX)活性和线粒体损伤百分率,高效液相色谱法检测心肌细胞内ATP、ADP、AMP含量,反映心肌细胞线粒体结构和功能的损伤情况。在此基础上给予川芎嗪、缬沙坦和曲美他嗪,观察对心肌细胞重构中线粒体结构和功能的药理作用。结果在细胞肥大过程中,心肌细胞MAO活性和线粒体外膜损伤百分率均显著升高(P<0.01),线粒体COX活性和线粒体ΔΨm均显著减低(P<0.01),ATP、ADP含量显著减少(P<0.01),AMP含量显著增加(P<0.01)。川芎嗪能抑制AngⅡ引起的心肌细胞蛋白质合成增加和细胞直径增大,改善线粒体外膜损伤,提高线粒体内膜膜电位及COX活性,降低MAO活性(72h时P<0.01,96h时P<0.05),增加ATP、ADP含量、降低AMP含量。缬沙坦能抑制AngⅡ引起的心肌细胞蛋白质合成增加和细胞直径增大,改善线粒体外膜损伤,提高线粒体内膜膜电位(P<0.05)及MAO活性(72h时P<0.01,96h时P<0.05),增加ATP、ADP含量、降低AMP含量(P<0.01)。曲美他嗪能在72h升高线粒体膜电位(P<0.05),增加ATP、ADP含量(P<0.05)。结论在心肌肥大过程中,存在线粒体结构和功能损害。川芎嗪和缬沙坦在逆转心肌细胞肥大过程中具有保护心肌细胞线粒体结构和功能的作用,曲美他嗪无显著逆转心肌细胞重构作用,对能量代谢的改善作用亦有限。     

病毒性心肌炎小鼠心肌线粒体结构和功能变化

目的:探讨病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌线粒体结构和功能变化。方法:雄性Balb/c小鼠随机分为柯萨奇B3病毒(CVB3)感染组和对照组。分别采用电镜和形态计量学方法观察心肌线粒体形态、数量和膜磷脂定位,酶细胞化学法分析线粒体细胞色素氧化酶(CCO)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性,反相高效液相色谱法测定心肌组织腺苷酸(ATP、ADP和AMP)含量。结果:CVB2感染组小鼠心肌线粒体大量破坏,膜磷脂严重缺失、定位改变,CCO和SDH活性降低,腺苷酸(ATP、ADP和AMP)含量下降。结论:VMC心肌线粒体结构严重破坏、功能明显下降,心肌细胞存在产能障碍。     

丙戊酸钠片对老年癫痫患者腺苷酶水平的影响

目的探讨丙戊酸钠片对老年癫痫患者腺苷酸酶水平的影响。方法将69例老年癫痫患者依据是否使用丙戊酸钠分为两组,使用者为观察组,共36例,未用者为对照组,共33例。之后测定癫痫发作间期、发作后5、10、20、30、60 min和12 h血清ATP、ADP、AMP水解率及磷酸二酯酶的基线值,观察各指标的动态变化。结果两组患者癫痫发作间期ATP、ADP、AMP水解率和PDE活性的比较无显著性差异(P均>0.05);癫痫发作5 min后两组ATP、ADP、AMP水解率均快速升高,PDE活性也同时上升,20 min时各指标达到高峰,30 min时有所回落,60 min时仍保持较高水准,但观察组各指标升高更显著,高水平时间维持更长,癫痫发作后5 min⁶0 min各指标各时间段与对照组比较均有显著性差异(P均<0.05);12 h后各指标恢复原有水准,无显著性差异(P均>0.05);各时段观察组与对照组对照组LDH水平比较无显著性差异(P均>0.05)。结论丙戊酸钠可提高腺苷酸酶的水平,对腺苷的形成有促进作用,可能通过此途径也参与了癫痫的控制。     

CD39和CD73与调节性T淋巴细胞研究进展

CD39(ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase-1.NTDPase-1,ENTPD1)是一种钙、镁离子依赖的胞外三磷酸核苷双磷酸水解酶,最早被发现于EB病毒(Epstein-Barr virus)感染的B淋巴细胞,因此最初被认为是EB病毒感染的B淋巴细胞的主要表面标记.它是一个完整的细胞表面膜蛋白,同时具有胞外三磷酸腺苷(ATP)酶和二磷酸腺苷(ADP)酶活性,可将ATP和ADP水解为单磷酸腺苷(AMP),AMP又可在胞外-5'-核苷酸酶CD73的作用下代谢为腺苷.CD39和CD73在体内具有多种功能.CD39和CD73还特异地表达于调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg细胞)表面,构成该细胞免疫抑制功能的一个重要组成部分.     

解毒化瘀方对内毒素血症大鼠肝细胞线粒体能量代谢的影响

目的：观察解毒化瘀方对内毒素血症（endotoxemia，ETM）大鼠肝细胞线粒体能量代谢的影响。方法：将56只大鼠随机分为正常对照组及脂多糖（LPS）注射后6、12、24小时组和解毒化瘀方6、12、24小时组。取肝组织分离线粒体，测定其Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋～Mg^2＋-ATP酶活性。同时行高压液相色谱检测线粒体内腺苷酸含量及能荷（EC）水平。结果：在注射LPS 6小时后，线粒体Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性降低，ATP、ADP含量及EC值减少；24小时后，线粒体Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性明显降低，ATP、ADP、AMP含量及EC值明显减少。与对应的LPS组比较，经解毒化瘀方处理后，肝细胞线粒体Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性增加，ATP、ADP、AMP含量及EC值均升高。结论：解毒化瘀方能增加ETM大鼠肝线粒体Ma^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性，提高线粒体氧化磷酸化水平，增加线粒体腺苷酸EC值，改善能量代谢，具有保护肝细胞的作用。     

血小板减少性紫癜血小板ATP,ADP释放功能探讨

应用生物发光技术检测血小板减少性紫癜（ITP）患者血小板释放功能，利用磷酸醇及丙酮酸激酶（PEP－PK）将血小板ADP转换成ATP。实验表明ITP患者ATP、ADP释放明显减少（P＜0．05）ATP／ADP比值增大。同时使用肾上腺素（Adr）致聚剂促使血小板聚集，观察聚集后ATP、ADP释放功能的变化。结果提示ITP患者ATP、ADP释放功能明显异常。     

豚鼠体内日本血吸虫成虫抗原延迟型超敏反应的转移

正常动物接种致敏动物的外周血白细胞可有效地转移延迟型超敏(DTH)反应。本文报道以日本血吸虫成虫抗原致敏豚鼠的淋巴样细胞亦有同样的功能。以日本血吸虫成虫匀浆作抗原,用Lowry法测定蛋白量后超滤除菌,冻干保存于-20℃备用。用前以PBS恢复至原量,过0.45μm滤膜后,混以弗氏完全佐剂(FCA)注入纯系豚鼠的后足垫,另以10μg同样抗原     

Effect of captopril on myocardial energy metabolism in chronic pressure overload rats

Objective To investigate the effects of captopril on cardiac function and levels of energy-rich phosphates in pressure overload induced left ventricular hypertrophy rats. Methods One hundred and twenty SD rats were randomly divided into three groups： sham operation group （SH group, n=40）,coarctation of abdominal aorta group （CAA group, n=40） and captopril treatment lmg~ 100g1 ~ d-1） group （CAP group, n=40）. Left ventricular end-diastolic pressure （LVEDP）, left venh-icular mass index （LVMI）, levels of energy-rich phosphates and morphological changes of the myocardial mitochondria were compared at the 62 and 82 week after operation. Results At 62 week, in CAA group, LVMI and LVEDP were increased and _ dp/dtmax was decreased, while ATP and ADP were decreased and AMP was increased （P〈0.01）. These changes were much obvious at 8th week （P〈0.01）. Compared with those of CAA group, the parameters of heart function and energy-rich phosphates （ATP, ADP, AMP, TAN） in CAP group were improved significantly（P〈0.01） at the 6th and 8th week. In CAP group, the parameters of heart function and energy-rich phosphates （ADP, AMP, TAN） were much better at 8~ week than those at 6th week. The morphological change of mitochondria was less in CAP group than that in CAA group. Conclusion Captopril significantly improves myocardial energy metabolism in pressure overload rats and protects the function of myocardial mitochondria     

钉螺组织冷浸液免疫小鼠抗日本血吸虫感染的实验报告

为探讨钉螺抗原作免疫原获得抗日本血吸虫感染的可能性,取不含吸虫的钉螺头足部及消化腺分别用洛克氏溶液匀浆,冻融,离心取上清液,其蛋白质含量分别为720μg/ml及780μg/ml。同法制备尾蚴抗原,蛋白质含量370μg/ml。做如下试验:分5组,每组10鼠。 第一组为未处理对照组;第二组为弗氏完全佐剂对照组,0.1ml腹腔注射,隔周1次共2次;第三组为尾蚴抗原免疫对照组;第四及第五组分别为钉螺头足抗原和消化腺抗原免疫组。各种抗原分别     

嘌呤信号在肝脏免疫调节中的作用

嘌呤主要由ATP、NAD⁺和核酸组成，除了具有关键的细胞内功能外，NAD⁺和ATP及其水解产物包括ADP、AMP和腺苷，是参与生理过程和病理状况的重要细胞外信号。嘌呤信号在肝脏微环境的免疫调节中发挥重要作用。本文主要总结了嘌呤信号对肝脏免疫细胞的调控，以及嘌呤信号通过调节肝脏免疫细胞炎性和抗炎性反应影响肝脏疾病进展。     

ELIEDA技术用于诊断曼氏血吸虫低度感染的评价

酶联免疫电扩散法(ELIEDA)是由免疫电扩散法(IEDA)发展而成的一种微量法。作者将ELIEDA用于诊断低度感染曼氏血吸虫的病人,并与其它的血清学方法如间接血凝试验(IHAT),免疫荧光技术(IFT),IEDA作比较。 IFT、IHAT及IEDA试验所用抗原分别为曼氏血吸虫成虫冰冻切片、碱性可溶性成虫抗原及新鲜成虫的组织匀浆经11000g离心的上清蛋白。进行IEDA时将10μl抗原和5μl未稀释血清以1.5cm间隔分别点样在乙酸纤维素膜上并电泳(Tris-甘氨酸磷酸电