肿瘤坏死因子α诱导人髓核细胞凋亡的作用途径

背景:在与细胞凋亡有关的众多因素中,肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)超家族成员发挥了重要的作用。但TNF是通过何种途径诱导椎间盘髓核细胞凋亡的机制尚未阐明。目的:探讨TNF-α激活后,丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)信号转导通路中P38MAPK和应激活化蛋白激酶/c-Jun氨基末端激酶(stress-activated protein kinase/c-Jun NH2-terminal kinase,JNK/SAPK)两条途径对人髓核细胞凋亡的作用。方法:体外培养人髓核细胞,将细胞随机分成4组:TNF-α刺激组,P38MAPK阻断组,P-JNK/SAPK阻断组和对照组。采用TUNEL法检测髓核细胞凋亡情况,免疫荧光法检测P-P38MAPK和P-JNK/SAPK的表达及定位;Western Blot法检测P38MAPK,JNK/SAPK及其磷酸化形式的表达。结果与结论:TUNEL法检测凋亡结果中,TNF-α刺激组较其他各组的凋亡细胞密度大(P0.01);免疫荧光结果显示TNF-α刺激组P-P38MAPK和JNK/SAPK在细胞质和细胞核的表达高于各阻断组和对照组(P0.01);Western Blot结果显示P38MAPK,P-JNK/SAPK在各组髓核细胞内均有表达,但无活化形式,TNF-α刺激组可见P-P38MAPK,P-JNK/SAPK表达,但相应阻断组无表达。结果表明,外源性TNF-α可通过P38MAPK和P-JNK/SAPK途径导致人髓核细胞凋亡。     

细胞DNA损伤应激反应中丝裂原活化蛋白激酶的信号通路

丝裂原活化蛋白激酶 (MAPKs)途径是细胞遗传毒性应激反应中主要的信号转导途径之一 ,它主要包括ERK ,JNK/SAPK ,p38等通路。各条通路都通过特异的MAPK信号级联放大反应使细胞形成应对DNA损伤的应激反应 ,从而保证细胞的正常生长和DNA复制的保真度。综述DNA损伤应激反应中的各条MAPK信号通路的激活机制     

缺血——再灌注损伤与丝裂素活化蛋白激酶信号传导

信号传导是细胞外剌激信号在细胞膜及细胞内的传递过程。丝裂素活化蛋白激酶(MitogenactivatedProteinkinase,MAPK)是一族胞浆内广泛分布具有丝氨酸双重磷酸化能力的蛋白激酶。凡是兴奋G蛋白偶联受体的物质等损伤因素剌激细胞时,都要通过MAPK激活。因此,MAPK途径是细胞外信号引起细胞反应的共同通路。MAPK家族主要有三个成员,即细胞外信号蛋白激酶(Extracellularsignal-regulatedproteinkinase,ERK),ERK又分离出2个亚型P44ERK/ERK1,P42ERK/ERK2;应激活化蛋白激酶(stress-activatedproteinkinase,SAPK),又称JNK(C-JunN-t…     

JNK信号通路

c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)家族是促分裂原活化蛋白激酶超家族的成员之一,JNK信号通路可被细胞因子、生长因子、应激等多种因素激活,在细胞增殖与分化、细胞凋亡、应激反应等多种细胞调控方面起着至关重要的作用,许多实验证实JNK与许多疾病有密切联系.本文综述JNK信号通路的基本构成、调节方式及在疾病中的作用.     

多发性骨髓瘤中MAPK信号通路对BLyS表达的调控研究

目的 研究多发性骨髓瘤(MM)细胞中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的表达及活化情况,探讨MAPK信号通路对MM细胞B淋巴细胞刺激因子(BLyS)表达变化的影响及对MM细胞增殖与存活的影响,并初步探讨MAPK信号通路在IFN-γ(MM重要的促生长因子)上调MM细胞BLyS表达过程中的作用.方法 应用Western blot方法检测MM细胞中蛋白ERK、p-ERK、JNK、p-JNK、p38及p-p38的表达情况;应用RT-PCR及Western blot检测MAPK信号通路对BLyS表达的影响;应用WST-1法检测靶向JNK的MAPK信号通路抑制剂SP600125对MM细胞增殖与存活的影响.结果 MM细胞株中,除了ERK、JNK及p38的表达外,还有活化蛋白p-JNK的表达;靶向JNK的MAPK信号通路抑制剂SP600125可下调MM细胞BLyS的表达,其激动剂茴香霉素(anisomycin)可上调BLyS的表达;IFN-γ可上调MM细胞BLyS的表达,SP600125可部分抵消IFN-γ对BLyS的上调作用;SP600125可抑制MM细胞的增殖与存活.结论 MM细胞中有JNK/SAPK信号通路的活化;JNK/SAPK信号通路的活化程度与BLyS的表达高低呈正相关;JNK/SAPK信号通路在IFN-γ上调MM细胞BLyS表达过程中发挥重要作用.     

PSMA对JNK/SAPK通路的激活及对前列腺癌细胞凋亡的调控*

 目的：探讨前列腺特异性膜抗原(PSMA)是否通过c-Jun氨基末端激酶/应激激活的蛋白激酶(JNK/SAPK)通路对前列腺癌细胞凋亡进行调控。方法：利用前期研究中建立的高效阻断PSMA表达的shRNA慢病毒载体,阻断前列腺癌细胞中PSMA的表达作为实验的干扰组;同时利用构建的PSMA载体转染前列腺癌细胞,促进前列腺癌细胞中PSMA的表达作为阳性实验组;不做任何处理的细胞株作为空白组;加入JNK/SAPK抑制剂SP600125作为阴性对照。Western blotting及免疫细胞化学方法观察各组细胞p-JNK/SAPK的表达量,CCK-8法检测细胞生长情况、流式细胞术检测细胞周期及凋亡。结果：Western blotting及细胞免疫化学提示抑制PSMA表达后,p-JNK/SAPK表达水平下降;增强PSMA表达后p-JNK/SAPK表达水平上升;在SP600125作用下,3组细胞p-JNK/SAPK均处于较低水平,且彼此无明显差异。CCK-8法和流式细胞术检测细胞周期提示PSMA表达受抑制后细胞增殖能力下降,细胞S期百分比减少;增加PSMA表达,细胞增殖能力增强,S期百分比增加;在SP600125作用下,3组细胞增殖和S期百分比均处于低水平,无明显差异。在抑制PSMA表达组中,前列腺癌细胞的凋亡率明显升高;而在增强PSMA表达组,细胞凋亡率明显降低;加入SP600125后,细胞凋亡率均低于常规培养组。结论：PSMA通过上调JNK/SAPK信号通路对前列腺癌细胞的增殖、细胞周期及凋亡产生影响,但JNK/SAPK并不是唯一通路。     

应激活化的蛋白激酶在神经酰胺介导细胞凋亡中的作用

第二信使神经酰胺激活SAPK/JNK,活化的SAPK/JNK导致AP-1转录因子磷酸化,AP-1刺激自身表达,增强自身活性,介导细胞凋亡。神经酰胺及其代谢产物鞘氨醇和鞘氨醇-1磷酸酯分别激活JNK-p38路径和ERK路径,调节细胞增殖、分化或凋亡。     

MNNG对哺乳类细胞JNK/SAPK及p38MAPK作用及其信号源研究

目的:研究低浓度烷化剂N-甲基-N' -硝基-N-亚硝基胍(MNNG)对JNK/SAPK及p38 MAPK通路的作用及其信号源。方法: 分别测定完整Vero细胞和脱核Vero细胞的JNK/SAPK及p38 MAPK酶活性,并比较其结果。 结果:低浓度MNNG在完整Vero细胞和脱核Vero细胞中均抑制JNK/SAPK酶活性;在p38 MAPK通路中,完整Vero细胞表现酶活性升高,而脱核Vero细胞该激活作用消失。 结论: 低浓度MNNG抑制JNK/SAPK的作用不依赖于核内信号,而对p38 MAPK的激活作用依赖与于核内信号。     

MAPK信号通路与骨关节炎

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)是真核细胞信号传递的重要途径之一,在调节控制细胞结构和功能活动中发挥关键作用。MAPK包括多个亚家族,与骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞损伤,凋亡,诱导产生基质金属蛋白酶密切相关的有p38、JNK、ERK三条通路,MAPK通路的异常激活可加速OA的进展。     

丝裂原活化蛋白激酶在疼痛信号调制中的作用

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是哺乳动物体内参与胞内信号传导的重要激酶。主要有3条激活途径:ERK/MAPK、JNK/SAPK和P38MAPK。研究表明,这3条信号通路在疼痛,尤其是病理性疼痛的产生和维持中发挥重要作用。本文综述这方面的研究进展,进一步阐明了其详细的作用机制,很可能为疼痛性疾病的治疗提供一个良好的前景。     

神经酰胺:细胞凋亡信号转导的第二信使分子

神经酰胺是细胞凋亡信号调控中的一个第二信使分子,许多应激刺激能激活神经鞘磷脂循环产生神经酰胺诱导多种细胞体系发生凋亡。神经酰胺介导细胞凋亡的机理尚未完全明了,可能是通过多个下游靶分子包括CAPK、CAPP、PKC、SAPK/JNK、CPP32、Bcl-2以及Ras→Racl JNK/p38-K→GADD153信号传导链等作用于不同的信号转导途径而诱导细胞凋亡的。     

c-Jun氨基末端激酶与caspase在细胞凋亡中的作用及相互关系

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是信号从细胞表面转导到细胞核内部的重要传递者.在真核细胞中,已确定出4条MAPK信号转导通路[1],即细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK) 通路、c-Jun 氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路、P38通路及ERK5通路.JNK也称为应激蛋白激酶,参与应激反应和细胞死亡[2].     

TNF,p38 MAPK与细胞凋亡

丝裂素活化的蛋白激酶(MAPK)是细胞内主要的信号转导系统之一.细胞运用这一系统将胞外信号传递给胞核,参与和影响细胞的多种生理病理过程.近年来发现一类新的MAPK通路--p38 MAPK信号通路,它不仅在炎症、应激反应中具有重要作用,还参与细胞的存活、分化和凋亡等过程.p38 MAPK信号通路与TNF共同参与了对细胞凋亡的调控.p38 MAPK可以上调TNF的表达,进而诱导细胞凋亡;同时TNF可以激活p38 MAPK通路,但活化后的p38 MAPK在细胞凋亡中的作用还不明确.此通路为临床治疗疾病提供了新思路.     

CD2途径T细胞激活与PTK

同T淋巴细胞激活后Ser/Thr蛋白激酶(PKC,PKA)作用一样,Tyr蛋白激酶(PTK)在激活T细胞中也有重要作用,参与T细胞活化的PTK主要有两种,分子量为56KD的P56~(LCK)和分子量为59KD的P59~(fyn).它们结合于胞膜内表面接受抗原激活后传递来的信号而活化,使得底物蛋白质上的Tyr磷酸化,从而激活或抑制这些活性蛋白质而发挥作用,本文重点论述PTK的生物学特性及其参与CD2途径活化T细胞的三种信号传递模式.     

凋亡调节蛋白BIM的研究进展

Bim(Bcl 2interactingmediatorofcelldeath)是Bcl 2家族中BH3 only亚家族的成员 ,是一种重要的凋亡调节蛋白 ,在造血细胞的内环境稳定、防止自身免疫及肿瘤的发生中有着极其重要的作用。Bim广泛表达于正常细胞 ,存在多种异构体 ,一定的凋亡刺激能通过各种信号途径激活Bim分子 ,活化的Bim分子通过与Bcl 2 /Bax的相互作用激活Bax ,引起线粒体途径的细胞凋亡。而Bim分子本身受到严格的转录水平和翻译后水平的调节。     

c-Jun氨基末端激酶在脑缺血再灌注损伤中的作用

在生物体内,丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是信号从细胞表面转导至细胞核内部的重要传递者,是一类丝/苏氨酸残基的蛋白激酶。目前在真核生物细胞中,已明确了4条MAPK信号转导通路,即细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated protein kinases,ERK)通路、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路、p38通路及ERK5通路。JNK信号通路作为MAPK信号通路中重要的通路之一,参与了多种生理、病理过程,目前诸多研究表明其在脑缺血/再灌注损伤过程中尤其是程序性细胞死亡过程中起着重要的调控作用,本文就近年来对JNK通路的研究及JNK在脑缺血再灌注诱导的细胞凋亡中的作用及机制作一综述。     

Anti-IgM诱导人B淋巴瘤Daudi细胞凋亡的信号传导通路

目的 研究B细胞抗原受体（BCR）介导的细胞凋亡,探索其可能的信号传导通路。阐明B细胞凋亡的分子机制。方法 ^3H掺入法检测细胞生长,应用FACS方法分析细胞周期和细胞凋亡,Western blot检测anti-IgM刺激引起Daudi细胞信号分子的变化。结果 anti-IgM可导致人B淋巴瘤Daudi细胞发生凋亡。细胞凋亡的数量与anti-IgM浓度呈正相关,Western blot结果显示,anti-IgM刺激引起Daudi细胞内氨酸蛋白分子磷酸化水平的变化速度与浓度相关;但随时间的延长,变化状况趋于稳定;在48-72h,许多被激活的,呈现磷酸化的栈氨酸蛋白分子又回复到低磷酸化或去磷酸化的静止状态,另外,虽然JNK1和ERK2蛋白水平未发生明显改变,但JNK/SAPK的重要下游分子之一,c-Jun的蛋白表达水平及其63和73位点的丝氨酸磷酸化水平立即长高并维持在高水平状态。结论 anti-IgM刺激激活JNK/SAPK,JNK/SAPK通路可能参与了anti-IgM引起的Daudi细胞的凋亡过程。     

SAPK/JNK信号通路在脑梗死后神经元凋亡中的作用

目的: 观察脑梗死后SAPK/JNK及Bcl-2/Bax信号途径中关键蛋白质的变化,以探寻各种病理因素引发神经元凋亡的分子机制。 方法: SD大鼠36只随机分为脑梗死组和假手术组。光化学法制作大脑皮层局灶缺血梗死模型, 称作光血栓皮层损伤(PCI)。7 d后取梗死灶同侧的大脑皮层行电镜检查,以Western blotting分析p-JNK1、p-JNK2、p-c-Jun、p-ATF-2、total JNK1、total JNK2、Bcl-2和Bax等关键蛋白的水平变化。结果: 光化学法可以成功复制大脑皮层局灶缺血梗死模型。在PCI后7 d,脑梗死组可见到神经元细胞凋亡和广泛的细胞器病变,p-JNK-1、p-JNK-2以及其下游的p-c-Jun、p-ATF-2的水平较假手术组显著升高,Bcl-2/Bax的比值显著降低 (P<0.05)。结论: 脑梗死发生后在较长的一段时间内都存在着以神经元凋亡为表现形式的迟发性神经细胞死亡,而这一过程可能与缺血缺氧性损伤激活了SAPK/JNK信号通路,及调节凋亡相关蛋白(如Bcl-2/Bax)等机制有关。     

4-1BB(CD137/ILA)与免疫细胞相互关系研究进展

4 1BB(CD137 ILA)是神经生长因子受体 (NGF R) 肿瘤坏死因子受体 (TNF R)家族的成员之一 ,它介导的协同刺激信号能促进T细胞活化、增殖、分化 ,也能诱导T细胞凋亡。 4 1BB既能协同CD2 8对T细胞的共刺激作用 ,也能不依赖于CD2 8而发挥共刺激效应。 4 1BB通过胞浆末尾区的聚集 ,与肿瘤坏死因子受体相关因子 2 (TRAF2 )交联 ,依次活化ASK 1、JNK SAPK或p38MAP ,启动级联放大效应。活化B细胞表达 4 1BB配体 (4 1BBL)。 4 1BB单抗调高NK细胞杀伤肿瘤的活性。 4 1BB通过双向信号转导 ,使单核细胞活化、增殖 ,并促进单核细胞的粘附作用。     

PI3-K/Akt信号通路对阿尔茨海默病神经元凋亡的调节作用

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K/Akt)途径是细胞内重要的促细胞存活通路之一,PI3-K被细胞外信号活化后,激活下游蛋白激酶Akt。在阿尔茨海默病(AD)的发病过程中,凋亡相关基因Bad、GSK-3、转录因子家族、caspases家族等参与了神经元的凋亡,导致神经元的大量丢失。而活化的Akt通过磷酸化Bad、GSK-3、转录因子家族、IB、caspases等使促凋亡基因失活,从而起到抑制神经元凋亡及促进神经元存活的作用,进而减少AD神经元的大量丢失,改善AD的病理变化。