Nogo(N-18)在大鼠海马及大脑皮质中分布和发育的免疫组织化学研究

目的 观察Nogo(N-18)在成年大鼠、乳鼠和胎鼠海马及大脑皮质中的分布规律，探讨其存在的意义。方法 采用抗Nogo(N-18)多克隆抗体免疫组织化学链霉卵白素-过氧化物酶SP(streptavidin peroxidase，SP)法。结果 成年大鼠海马以及大脑皮质神经元胞核Nogo(N-18)免疫反应呈强阳性，胞浆和突起的反应较弱，而乳鼠和胎鼠海马及大脑皮质神经元Nogo(N-18)免疫反应阳性产物只存在于突起和胞浆中。结论 Nogo(N-18)免疫反应阳性神经元广泛分布于成年大鼠、乳鼠和胎鼠海马及大脑皮质，其生物学意义有待探讨。     

Nogo(N-18)在成年大鼠三叉神经节、背根节及腰段脊髓中分布的免疫组织化学研究

目的：观察Nogo在成年大鼠三叉神经节、背根节及腰段脊髓中的分布，探讨其存在的意义。方法：采用抗Nogo(N-18)多克隆抗体免疫组织化学SP法。结果：成年大鼠三叉神经节、背根节感觉神经元胞浆和胞核以及腰段脊髓灰质神经元胞核内出现Nogo免疫反应。结论：Nogo免疫反应存在于大鼠三叉神经节、背根节感觉神经元胞浆和胞核以及腰段脊髓灰质神经元胞核内，应重新认识Nogo的功能。     

Localization of monocarboxylate transporter 2 in the brain of rat

目的:观察单羧酸转运体-2(MCT2)阳性细胞在大鼠脑内的分布和形态特征.方法:尼氏染色,免疫组织化学和免疫荧光等.结果:MCT2在嗅球、端脑、间脑、小脑及脑干均有表达,主要定位于神经元的胞体和突起上;在嗅球、端脑和间脑,其表达广泛、分布均匀.在脑干,除了一般内脏运动核、内脏感觉核以外的其他躯体运动核和感觉核以及蓝斑核、下橄榄核、中缝核、巨细胞网状核、中间网状核、外侧网状核等非脑神经核团中的神经元有MCT2的表达.另外,在小脑髓质的小脑外侧核、小脑间位核、小脑内侧核也可见MCT2阳性神经元.MCT2阳性神经元的形态,在不同区域间存在差异.结论:MCT2阳性神经元在大脑皮质、海马、下丘脑、网状结构及神经核团等特殊区域分布,提示在生理条件下,MCT2在维持某些基本的生命活动中具有特殊的重要的作用.     

周期素依赖性蛋白激酶5(CDK5)在大鼠脑发育过程中的表达及其分布

目的　研究周期素依赖性蛋白激酶 5 (CDK5 )的mRNA及蛋白在大鼠发育过程中脑内的表达及分布。方法　采用胚胎至老年期Wistar大鼠脑片行原位杂交组织化学和免疫细胞化学染色。　结果　 1 原位杂交结果显示 ,脑内CDK5mRNA在大鼠E14～P35 0整个发育过程中均有表达 ,成年后趋于稳定 ;脑内CDK5mRNA主要定位于神经元 ,阳性区域主要分布于大脑皮层、海马、丘脑、下丘脑、小脑及部分神经核团。 2 免疫组织化学结果显示 ,出生后脑内CDK5蛋白表达较强 ,胚胎及老年鼠表达较弱 ;阳性区域集中在室周区、海马、小脑及部分神经核团内 ;老年鼠仅在海马、小脑蒲肯野细胞层内表达。　结论　以上结果进一步证明 ,脑内CDK5的作用贯穿了整个神经发育的各个时期 ;老年大鼠海马内CDK5的表达下调可能与老年性学习记忆减退的发生密切相关     

Nogo-A在成年大鼠脑内神经元的分布

目的研究Nogo-A阳性神经元在正常成年大鼠脑内的分布. 方法免疫组织化学方法（ABC法）.结果Nogo-A在正常大鼠脑内的神经元和纤维有广泛的表达,出现在许多核团,主要在1.前脑的大脑皮质、嗅觉系统、海马、隔区、基底神经节、丘脑、下丘脑和视前区等部位;2.脑干的视听觉、体躯感觉、内脏觉核团、运动核团以及网状结构等;3.小脑Purkinje细胞和深核.阳性反应物主要见于神经元的胞浆和突起内,在脑室系统的嗅球室管膜、侧脑室和第三脑室部分室管膜细胞及其突起内也有表达.结论Nogo-A在脑内神经元的广泛存在提示其在正常状态下的脑功能中可能起重要作用.     

NEP1-40促进高苯丙氨酸损伤大鼠神经元Nogo A表达

目的 了解神经元NgR受体拮抗剂NEP1-40对高苯丙氨酸(Phe)作用下大鼠大脑皮质层神经元Nogo A蛋白表达的影响.方法 原代培养胎龄16～18 d的SD大鼠皮质神经元,体外模拟高Phe(0.9 mmol/L)环境,并用不同浓度NEP1-40干预;用免疫荧光方法检测神经元轴突生长和生长锥塌陷情况,实时荧光定量PCR和Western blot检测Nogo A mRNA和蛋白表达.结果 Nogo A可以在神经元胞体和突起表达;高Phe作用12、24和48 h神经元NogoA mRNA与α微管蛋白(α-Tub)的相对表达量明显减低(P<0.05);高Phe作用后神经元Nogo A蛋白明显降低(P<0.05);NEP1-40对正常神经元无促进作用,但对高phe作用下的神经元呈浓度依赖性地促进其Nogo A的表达.结论 NEP1-40可以促进高Phe损伤时神经元Nogo A的表达增高,从而促进神经元轴突的生长.     

糖尿病大鼠蜗神经核和上橄榄核形态变化与BAEP的关系

目的　研究糖尿病大鼠脑干听觉诱发电位 (brainstemauditoryevokedpotential,BAEP)和蜗神经核、上橄榄核形态学的变化。方法　采用腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型 ,动态观测BAEP变化 ,并结合BAEP起源 ,应用光镜对脑干蜗神经核、上橄榄核进行形态学观察。结果　成模后 4周实验性糖尿病 (ED)组BAEP的Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ波PL和Ⅰ Ⅲ、Ⅲ Ⅴ延长(P <0 0 5 ) ,成模 6周 ,ED组BAEP各波PL、IPL均出现明显延长 (P <0 0 1)。成模 8周糖尿病大鼠出现脑干蜗神经核、上橄榄核神经元胞体萎缩、胞核内结构不清等表现 ,成模 10周后糖尿病大鼠上述核团神经元变性明显 ,并伴有神经元减少。结论　BAEP在糖尿病早期出现变化且早于中枢形态学变化 ,是临床早期诊断糖尿病中枢神经病变的客观灵敏指标。     

神经元Nogo-A的表达与其髓鞘化关系的研究

目的探讨神经元表达Nogo鄄A蛋白的情况,对Nogo鄄A的功能作初步了解。方法采用免疫组织化学方法,观察神经元表达Nogo鄄A的情况,并设置对照组。结果成年大鼠脊髓内神经元和背根神经节的大﹑中﹑小细胞中都出现Nogo鄄A阳性免疫反应,在胞浆和胞核中表达。结论大鼠神经组织中神经元都可能有Nogo鄄A的表达,表明神经元表达Nogo鄄A与该神经元轴突的髓鞘化没有联系,提示神经元中的Nogo鄄A的功能可能不参与髓鞘形成。     

Nogo(N-18)在正常大鼠脊髓和坐骨神经的分布及损伤后变化的免疫组织化学研究

目的　研究Nogo蛋白在大鼠脊髓的正常分布及损伤后的变化 ,探索其在脊髓运动神经元表达的意义和作用。　方法　大鼠分脊髓夹伤组、坐骨神经夹伤组及正常对照组。损伤动物存活 1d和 3d后 ,分别进行Nogo(N 18)抗体的免疫组织化学染色。　结果　正常大鼠脊髓灰质腹角的运动神经元出现强烈的Nogo(N 18)免疫反应 ;而在脊髓白质呈阴性反应 ;寡突胶质细胞呈明显的阳性反应 ;在脊髓全段未发现Nogo染色的星形胶质细胞。在脊髓夹伤区域以外的上下部分 ,灰质和白质对Nogo(N 18)的表达与对照组的脊髓相同 ,在损伤部位的白质 ,出现明显的Nogo(N 18)免疫反应物。在正常和损伤的大鼠坐骨神经均未发现阳性反应的施万细胞。　结论　Nogo蛋白在正常大鼠脊髓运动神经元的分布和在损伤部位的积聚 ,提示人们要重新认识Nogo的功能     

神经营养素-4在成年猴脑的分布

目的 :为探讨神经营养素 4(Neurotrophin 4,NT 4)在成年灵长类动物猴脑的分布及功能提供有用的形态学依据。方法 :免疫组织化学SP法。结果 :NT 4 IR(Neurotrophin 4immunoreactive)分布于大脑皮层Ⅲ Ⅴ层的部分神经元胞体及突起以及白质内少量的神经胶质细胞 ;小脑皮质及白质内的部分神经元 ;海马CA1、CA2 、CA3区的部分神经元 ;此外豆状核、尾状核、脑桥核、前庭神经核、薄、契束核、副神经核等可见散在阳性反应细胞及交织成网的纤维。结论 :NT 4 IR广泛地分布于猴脑的多种组织和细胞 ,提示其功能可能涉及不同类型的神经元及可能的非神经元     

A developmentally regulated axonal glycoprotein (7-8D2 antigen) with a restricted distribution in mature rat brain

7-8D2 is a mouse monoclonal IgGl antibody which recognizes a neuronal cell surface antigen in rat brain. Immunohistochemical techniques reveal the antigen to be present most abundantly in the cerebellum of the adult brain, where it is expressed by the cell bodies and fibres of the granule neurons. Lower levels of staining were found in the neuropil of the hippocampus, in some fibres of the corpus callosum and in the most superficial layer of the cerebral cortex. Immunoelectron microscopy confirmed that the antigen was present on the surface of the parallel fibres in the cerebellum and showed that it was absent from glial, Purkinje or stellate cell membranes. The antigen had a more widespread distribution early in development, and the restricted adult distribution was achieved by the end of the second postnatal week. Immunoblotting of samples of adult rat brain shows that the antigen appears as a close doublet of bands at 211,000 mol. wt. This result was confirmed by immunoprecipitating the antigen from metabolically labelled glycoproteins prepared from cultured cerebellar interneurons. Immunoblotting and immunohistochemical experiments were in agreement that the cerebellum contained high levels of the antigen, and that lower but significant amounts could be found in other brain regions, notably the hippocampus and the cerebral cortex. The localization data and the changes in the distribution of the antigen may suggest some role for this molecule during early brain development.     

BDNF前体蛋白在成年恒河猴中枢神经系统中的分布

采用免疫组织化学方法探讨脑源性神经营养因子前体蛋白(proBDNF)在成年恒河猴中枢神经系统(CNS)内的定位分布。结果显示:不同染色强度的proBDNF免疫阳性反应产物广泛分布于大脑皮质、海马、丘脑、小脑、中脑、脑桥、延髓和脊髓。神经元和胶质细胞的核染色明显,胞浆淡染,突起无染色。本研究结果表明在CNS的各个部位均存在proBDNF,提示proBDNF在猴的CNS广泛发挥作用。通过与文献报道的proBDNF在大鼠CNS的分布比较,发现proBDNF在不同物种之间的表达模式和作用可能存在差异;而与BDNF在成年猴脑中的分布进行比较,发现proBDNF在猴小脑的Purkinje细胞层及动眼神经核单独表达,提示proBDNF在这些部位可能发挥重要作用。本研究结果为探讨proBDNF在成年猴的分布及作用提供了重要的形态学资料。     

抗大鼠Nogo分子单克隆抗体的制备与初步鉴定

目的：制备抗大鼠Nogo分子单克隆抗体(mAb)，为研究Nogo分子的组织分布和功能提供实验手段。方法：应用淋巴细胞杂交瘤技术制备小鼠源性抗大鼠Nogo mAb。用免疫荧光组织化学技术，对Nogo分子在大鼠中枢神经系统(CNS)的分布进行鉴定。结果：获得3株分泌抗Nogo mAb的杂交瘤细胞株。间接ELISA测定腹水效价达10^-6，两株mAb为IgG1(κ)亚类，另一株为IgG2b(κ)，在免疫荧光组织化学技术应用中获得较满意效果。结论：获得3株能特异性识别天然Nogo分子的mAb，为进一步研究Nogo分子的结构和功能奠定了基础。     

磷酸化的蛋白激酶p44／42MAPK在成年大鼠脑内的分布

目的：研究活化形式的p44／42MAPK在成年正常大鼠脑内的分布。方法：免疫组织化学方法（ABC法）。结果：磷酸化的p44／42MAPK在正常大鼠脑内有广泛的表达,出现在许多核团,特别在岛皮质、感觉运动及视、听皮质、扣带前皮质、海马尾侧的内嗅区、内侧杏仁核、皮质杏仁核和中介核、视上核、蓝斑、臂旁外侧核、小脑Purkinje细胞、A5区、旁巨细胞外侧核、吻侧（C1区）和尾侧（A1区）延髓腹外侧网状结构等,阳性结构主要见于神经元的胞浆、胞核和突起内,在部分脑膜细胞和少突胶质细胞内也有表达,结论：活化的p44／42MAPK在脑内的广泛存在提示其作为重要的信号转导分子在正常状的脑功能活性中可能起重要作用。     

NGF在成年猴脑的分布

为了解NGF在成年猴脑的分布,采用免疫组化SP法对成年猴脑多个冠状位切片进行免疫组化反应。结果证明,NGF阳性反应神经元主要分布于大脑皮质Ⅲ、V层,小脑Purkinje细胞,海马,齿状回,纹状体,脑干网状结构等处。此外,在黑质、舌下神经核、迷走神经背核、前庭神经核、三叉神经核、疑核、下橄榄核也出现NGF阳性反应。在大脑和脑干还观察到NGF阳性胶质细胞。本实验结果表明,在成年猴脑的多个脑区有NGF表达,提示NGF可能涉及猴脑某些神经元及胶质细胞的生理过程。     

Nogo受体(N-20)在大鼠视神经损伤后视网膜的表达

观察Nogo受体(NgR)在Wistar大鼠视神经(ON)损伤后视网膜各层的表达变化及分布规律,为Nogo蛋白抑制中枢神经再生的理论提供形态学依据。本实验各组动物均采用眶内眼球后2 mm ON切断术,术后动物分别存活3 d和7 d后取视网膜固定、冰冻后做水平切片,用免疫组织化学的方法观察NgR的表达情况。结果显示:NgR在正常对照组视网膜内3层有表达;在切断ON后实验各组有强烈表达;各组在损伤ON和移植神经组织后存活3 d时也有强烈表达,至7 d时表达有所下降。以上结果表明:NgR在大鼠ON损伤后视网膜的表达位于节细胞层、神经纤维层和内网层;其表达程度与移植物的种类有关,并可随存活时间的延长而下降。